Normas Específicas para la Producción y Comercialización de Mudas de Cítricos (Citrus spp.)

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1 Normas Específicas para la Producción y Comercialización de Mudas de Cítricos (Citrus spp.) 1. Objetivo Esta norma tiene como objetivo fijar un sistema de certificación para plantas cítricas para asegurar la provisión de materiales de propagación de calidad y sanidad controlada; establecer las condiciones técnicas específicas para la producción, comercialización e introducción de plantas cítricas y sus partes. 2. Definiciones a) Clon: Conjunto de plantas genéticamente idénticas obtenidas por propagación asexuada a partir de un único material inicial. b) Cultivo de tejido: método de propagación vegetativa por medio de técnica de escisión, desinfección y siembra en cultivo nutritivo, en condiciones asépticas, de células y tejidos o órganos de plantas. c) Copa: Conjunto de las ramas de un árbol con su follaje o sin él. d) Estaca: Rama o parte de la planta utilizada para la multiplicación por medio de su enraizamiento. e) Injerto: La implantación o unión de una porción de la planta matriz sobre un pie o porta injerto, proporcionado a través de la conexión de los tejidos, la multiplicación de la misma. f) Lote: Conjunto de plantines de la misma especie y variedad, procedentes de idéntico origen y de igual edad. g) Material Fundación: Plantas obtenidas a partir de la Planta Madre Original. h) Planta Candidata, Básica o inicial: es la que dará inicio al clón certificado una vez que pruebe que todas sus características coinciden con las descriptas para el cultivar respectivo en el Registro Nacional de Cultivares. i) Planta Madre Original o Matríz: obtenida a partir de la Planta Candidata, en condiciones controladas, mantenida bajo cubierta, de identidad genética, calidad agronómica y sanidad controlada, usada para la obtención de semillas botánicas, estacas o yemas. j) Planta Madre de Reserva: planta madre réplica de la planta original, mantenida bajo cubierta. k) Plantas Certificadas: Plantas obtenidas a partir de Plantines certificados injertados con yemas de Plantas Yemeras. l) Plantas Yemeras: Plantas de la misma especie y variedad producidas a partir de Material de Fundación destinadas para producir e incrementar en forma rápida el número de yemas. m) Plantines Certificados: Son Plantines injertados con yemas de plantas certificadas. n) Porta Injerto o Pie: Planta proveniente de semilla botánica, estaca o micropropagado in vitro, raíz de especie, cultivar o hibrido, caracterizada y destinada a recibir el injerto.

2 o) Porta injertos certificados: Son aquellos producidos a partir de semillas certificadas de Plantas Madres de Semillas o del Material de Fundación o de semillas o estacas extraidas de plantas madre productoras de material para porta injerto las que estarán conformando las diferentes etapas de la certificación. p) Pie Franco: es la muda obtenida de semillas, estacas o raíz que no ha sido injertada. q) Semilla certificada: Es la semilla botánica que se extrae de plantas madres que conformen cualquiera de las etapas de la certificación. r) Sub Lote: Conjunto de plantines de un lote. s) Indexar o Testar: Comprobar el estado sanitario de una planta con respecto a enfermedades mediante métodos biológicos o bioquimicos. t) Vareta o varas porta yemas: Parte de la rama que contiene una o varias yemas capaces de reproducir la planta original a traves de su injerto sobre un pie. u) Vivero: establecimiento que se dedica a la producción, comercialización o introducción de plantas o sus partes destinadas a la propagación o multiplicación. v) Yema: Porción rudimentaria de un brote que transmite fielmente los caracteres de la planta original. 3. REQUISITOS PARA LA PRODUCCIÓN DE PLANTINES 3.1 Para la producción de plantines se aceptarán, solamente, las Variedades inscriptas en el Registro Nacional de Cultivares Comerciales (RNCC). 3.2 El material utilizado en la producción de plantines deberá ser proveído por las empresas inscriptas en el Registro Nacional de Productores de Semillas (RNPS) o en el Registro Nacional de Comerciantes de Semillas (RNCS) 4. CONDICIONES QUE DEBE REUNIR UN VIVERO DE CITRICOS Un vivero de cítricos debe: 4.1. Estar separado a una distancia mínima de 100 metros respecto a plantas, árboles y cercos vivos cuyas plagas y enfermedades pueden ser transmitidas a las plantas de vivero o plantas madre, en lugares con buen drenaje, nivelados, no anegables, con orientación favoreciendo los vientos predominantes, con buena disponibilidad de agua y fácilmente accesibles. 4.2 Contar con un cerco perimetral, con una sola entrada, el acceso y la salida deben contar con cerraduras y con carteles señalizadores. 4.3 La entrada al lugar del personal y para la entrada de vehículos deben contar con pediluvio y productos de desinfección. 4.4 Para desinfectar las manos en el local utilizar Alcohol, en gel o líquido, al 70 %; para desinfectar herramientas y para el pediluvio: Hipoclorito de sodio al 2 % y la ropa de trabajo debe ser exclusivo para el vivero. Lavado semanal. 4.5 Contar con cortina rompevientos del lado de los vientos predominantes. Las mismas deben ser de especies de desarrollo inicial rápido, impermeables, de hojas perennes, no hospederas de plagas y que no produzcan sombra al invernadero. 4.6 En los suelos a ser utilizados en el vivero, en macetas, etc. deberán estar esterilizados y no haber sido sembrados con especies cítricas, por lo menos, por 3 años. 4.7 Las herramientas, las macetas, el sustrato a ser utilizado en macetas, etc. debe ser desinfectado. El substrato del almácido o maceta puede ser reutilizado previa desinfección. No utilizar estircol crudo.

3 4.8 Las herramientas deberán estar perfectamente identificadas, ser exclusivas para cada unidad (tijeras de podar, cuchillos, mangueras, regaderas, etc.) y desinfectadas al ser usadas entre planta y planta. 4.9 Para ingresar al invernadero utilizar indumentaria específica de protección (botas, guardapolvos, barbijos, guantes, etc.) Los invernaderos deberán estar totalmente aislados, con malla anti áfidos, antecámara con una superficie mínima de 2 x 2 metros, con pediluvio con exicloruro de cobre, doble puerta, sistema de desinfección y sin piso de tierra en la entrada. Para las Plantas madre, Material de fundación y plantas indicadoras deberá usarse de preferencia invernaderos de estructura sólida, no obstante cuando se utilizen invernaderos de polietileno, para cualquiera de las etapas de certificación, se deberán tomar todas las medidas de rezguardo necesarios para no dejar las plantas expuestas en ningún momento cuando se realice el recambio del plástico El interior del invernadero debe contar con: trampas cromáticas y de luz contra insectos, malla antimaleza, piedras o piso de cemento y mesadas para bandejas en caso de usar tubetes o bloques de cemento debajo de las macetas Prohibida la entrada a personas no autorizadas. Todos los visitantes deberán estar acompañados por un responsable del vivero El reponsable del vivero de cítricos deberá controlar, permanentemente, la correcta conservación de las estructuras, materiales de cobertura y las medidas de protección sanitaria del invernadero, así como el manejo adecuado de la sanitación de las plantas, del vivero y de su vestimenta Las condiciones de aislamiento y el plazo de utilización Cuadro Nº 1 Condiciones de aislamiento y plazo de utilización según las etapas de certificación: Etapa Condiciones de aislamiento Plazo de utilización Plantas Madre Invernaderos a prueba de insectos, doble puerta, sistema de desinfección a la entrada y sin piso de tierra en la entrada. A 100 mt. de cualquier plantación de cítricos o de 10 años certificación. En campo: a 500 mt. para plantas productoras de yemas y semilla de cualquier plantación de cítricos que no pertenezcan al programa de certificación. Material de Invernaderos: a prueba de insectos, doble puerta, sistema Fundación de desinfección a la entrada y sin piso de tierra a la 25 años entrada. A 100 mt. de cualquier plantación de cítricos o certificación Bloque de Incremento (Plantas Yemeras) Planta Certificada Porta injertos certificados Plantas madre de semilla En campo: a 100 mt para plantas productoras de yema y semilla de cualquier plantación de cítricos o plantas de cítricos que no pertenezcan al programa de certificación. Invernaderos: a prueba de insectos, doble puerta, sistema de desinfección a la entrada y sin piso de tierra a la entrada. A 50 mt. de cualquier plantación de cítricos o certificación En campo: a 100 mt. de cualquier plantación de cítricos o certificación. Invernaderos: a prueba de insectos, doble puerta, sistema de desinfección a la entrada y sin piso de tierra a la entrada. A 50 mt. de cualquier plantación de cítricos o certificación En campo: a 50 mt. de cualquier plantación de cítricos o certificación. 3 años a campo 4 años invernadero No mas de 2 temporadas 25 años

4 Observación: La DISE/SENAVE establecerá la distancia mínima frente a la parición de un foco de tristeza. 4. Multiplicación El material vegetal multiplicado, ya sean estacas o semillas, deberá previamente ser esterilizado y deberán provenir de semillas certificadas o de estacas provenientes de las Plantas Madres de material inicial para porta injerto, sometidos a las mismas condiciones de aislamiento exigidas para las etapas que conformarán. Los almacigos de los porta injertos deberán permitir perfecta identificación Etapas de la certificación Bloque Banco de Germoplasma. Para obtener una Planta Madre Sana se introduce el material vegetativo cíctrico al cual se considera Planta Candidata a Planta Madre; cuando la planta candidata alcance un tamaño suficiente será probada su característica varietal para su inscripción en el Registro Nacional de Cultivares Comerciales y será sometida a una serie de diagnósticos para enfermedades de tristeza, psorosis, exocortis, xiliporosis o cachexia, clororsis variegada, cancrosis y huanglongbing, luego si todos los diagnósticos confirman su sanidad, la Planta Candidata pasa a ser Planta Madre Candidata. La Planta Madre Candidata mediante técnicas de microinjerto dará origen a la Planta Madre de Reserva y a la Planta Madre de Original o Matríz que deberán mantenerse en invernadero con protección contra insectos y sanidad controlada. Comprobado su identidad, estabilidad, homogeneidad y sanidad, estas plantas pasaran a conformar el Banco de Germoplasma que se mantedrá en invernaderos y será indexado. De la Planta Madre Original o Matriz se podrán extraer material (yemas) para conformar el Bloque Fundación o el Bloque de Incremento. El Bloque Fundación se mantendrá en invernadero y será indexado periódicamente. De aquí se extraerá el material vegetal para formar el Bloque de Incremento, etapa que se mantendrá en invernaderos con protección contra insectos y sanidad controlada y será indexado periódicamente. Finalmente las plantas certificadas serán producto de la injertación de yemas certificadas sobre porta injertos certificados y se mantendrán en invernaderos con protección contra insectos y sanidad controlada siendo indexada periódicamente hasta el momento de su venta. Bloque de Plantas Madres de Semilla y porta injertos certificados. El bloque de plantas madres de semilla estará destinado a la extracción de semillas para conformar el almácigo de porta injertos certificados, cumpliendo con el aislamiento e indexajes exigidos. Sin perjuicio de lo anterior, se podrán formar las distintas etapas de la certificación con plantas madres de estacas y semillas (Doble propósito) o solo semillas, para la producción de porta injertos certificados. Los porta injertos certificados deberán ser mantenidos en las mismas condiciones de aislamiento requeridos para la planta certificada prèvio a su injertación Cuadro Nº2 Etapas de producción, material vegetal producido y etapas a formar. Etapa Material vegetal producido Etapa a formar Bloque Fundación Bloque de Germoplasma Yemas Fundación Bloque Incremento Semillas Certificadas Plantas Certificadas Porta Injertos Certificados (*) Bloque Fundación Yemas Registradas Semillas Certificadas Yemas Certificadas Bloque Incremento Semillas Certificadas Bloque Plantas Madres de Semillas Certificadas Semilla (*) Deberán ser mantenidos en aislamiento. Bloque Incremento Planta Certificada Porta Injertos Certificados (*) Plantas Certificadas Porta Injertos Certificados (*) Porta Injertos Certificados

5 5. IDENTIFICACION DENTRO DEL VIVERO Las plantas deberán estar separadas por especies y/o variedades, en lotes individuales, que podrán dividirse por sub lotes y estar cada uno perfectamente individualizado con un letrero indicador de manera a facilitar la observación y revisión. 6. DEPURACION La pureza varietal debe ser mantenida durante todo el proceso de certificación, por lo tanto deberán eliminar todas las plantas fuera de tipo, deformadas o dañadas, así como aquellas que no cumplan con los requisitos fitosanitarios. 7. PRODUCCION DE PLANTINES 7.1. Solo se podrán certificar las plantas de vivero que no presenten síntomas de enfermedades o plagas, daños o defectos, problemas fisiológicos producto del mal manejo del vivero que perjudique el desarrollo futuro del árbol La altura mínima del injerto debe estar, por lo menos, a 10 cm sobre el nivel del suelo, cuando el porta injerto tenga una altura de 80 cm. Aproximadamente Los plantines con copa formadas deberán tener entre 3 a 5 ramas distribuidas en espiral en los 20 cm terminales, midiendo cada rama entre 20 a 25 cm de largo En caso de no prendimiento de yemas se permitirá una sola reinjertación con yemas de la misma variedad, clon y calidad sanitaria Después de la injertación, y un vez prendido el injerto, las plantas serán identificadas en la cabecera de los sub lotes de tal modo que se permita el fácil reconocimiento del pie, la variedad y el clon injertados Antes de sacar los plantines del invernadero se procederá a la rustificación disminuyendo el riego y la fertilización, manteniendo las plantas dentro del invernadero con mallas antiinsectos y cobertura plástica. 8. INSPECCIONES OBLIGATORIAS Para la certificación de la producción de plantines se deberán efectuar las siguientes inspecciones obligatorias: a) Inspeccion de siembra b) Inspección de pos injerto. c) Inspección de pre venta. d) El responsable técnico deberá efectuar las inspecciones obligatorias ya mencionadas y de cada una de ellas, elaborar un informe técnico que remitirá a la DISE en un plazo máximo de 15 días hábiles después de cada inspección e) Los técnicos de la DISE/SENAVE verificarán la realización de las inspecciones obligatorias; además implementar otras en cualquier momento que se juzgue necesario El programa de saneamiento será aplicado a todo material vegetal de estacas, sea material local o material introducido.

6 Cuadro Nº 3: Condiciones generales del Indexaje para las enfermedades importantes en la certificación. Enfermedad Planta Indicadora Nº de plantas a inocular Duración del testado desde la inoculación Tristeza Lima mejicana 4 6 a 12 meses 18-25ºC Psorosis Exocortis Madame Vinous 3-2 semanas a 4 Pineapple 36 meses Cidro Etrog Cidro Arizona 861-S1 5 3 semanas a 1 mes Tº Síntomas 18-25ºC 27-32ºC Vein clearing Stem pitting Blanqueamiento irregular de una parte y otra del nervio central de las hojas de brotacion de primavera y/o otoño. Sobre la brotacion de la yema del Cidro se observa un enrollamiento del limbo de las hojas y el nervio central Cachexia (Xiloporosis) Mandarino Parson special 6 7 a 12 meses 27-32ºC Reducción de los entrenudos (espinastia) Acumulación de goma y abultamiento de los tejidos al nivel del injerto. Cuadro Nº 4 Frecuencia de análisis y técnicas de diagnostico a utilizar en las enfermedades de cítricos para certificación. Fitopatogeno Frecuencia de analisis en años Invernadero Campo Citrus Tristeza Virus (CTV) 3 1 Citrus Psorosis disease (A y B) 10 6 Indexaje Citrus Exocortis viroid (CEVd) 3 3 Citrus Cachexia Viroid (CCVd) 3 3 Técnica de diagnostico Indexaje ELISA-Inmuno Ipresión** PCR** Indexaje Electroforesis** PCR** Indexaje Electroforesis** PCR** **Solo podrán ser utilizados para las etapas de Bloque Incremento, Planta certificado y Porta injerto certificado 9. MUESTREO Y PADRONES DE LABORATORIO 9.1 Muestreo La intensidad del muestreo para la evaluación de plagas y verificación de la identidad varietal para las distintas categorías es la siguiente: -Plantas Madres Originales y de Reserva y Material Fundación: 100 % (Cien por ciento) de los individuos. - Plantas yemeras: 10 % (Diez por ciento) de los individuos. - Plantas Certificadas: 0,02 % (Cero coma cero dos por ciento) de los individuos. - Plantas madres de semilla: 100 %

7 9.2 Padrones de laboratorio Cuadro Nº 5 Padrones de laboratorio para certificar plantines cítricos. Enfermedad Agente Causal Sin sintomas Tolerancia Tristeza Virus de la tristeza de los citricos Mandarina, naranjo dulce 0 Huanglongbing Bacteria Lima 0 Escoba de bruja Micoplasma Lima y posiblemente otras 0 Declinio (Blight) Sin información Sin información 0 Clorosis Variegada de los Citricos (CVC) Xylella fastidiosa Varios 0 Fruta Bolita Sin información Sin información 0 Exocortis Viroides de la exocortis Naranjo dulce, limones, de los citricos manadarinas, limas. 0 Xiloporosis Viroides de la caquexia Naranjo dulce, Toronja, Lima, de los citricos Limones. 0 Psorosis A Virus Mayoría de las especies de citricos 0 Cancrosis Bacteria 0 Cuadro Nº 6 Cronograma de Cumplimiento de Requisitos para Productores de Cítricos. Concepto Plazo de presentación Solicitud de certificación para Planta seleccionada para extracción de material local y para el Bloque 60 dias antes del indexaje. Plantas Madre de Semillas Solicitud de certificación de Plantas candidatas y de 60 dias antes de la extracción del material Bloque fundación vegetal para la formación de este Bloque. Solicitud de certificación de plantas para el Bloque de 60 dias antes de la extracción del material Incremento vegetal para la formación de este Bloque. Solicitud de certificación para Planta Certificada Una semana antes de la injertaciòn Solicitud de certificación para Planta seleccionada para extracción de material local y para el Bloque 60 dias antes del indexaje. Plantas Madre de Semillas Lista de cooperadores, georeferenciamiento y croquis de ubicación de viveros. Contrato empresa/cooperador (*) Inspección de pre-injerto (*) Inspección de pos injerto (*) Inspección de pre venta (*) Informe de la cantidad de mudas disponibles (*) Informar por nota, los formularios quedan en la empresa semillera a disposición de la DISE.

8 Anexo I: INDEXAJE Plantas Indicadoras Todas las plantas indicadoras deben ser sanas, homogéneas, estables y varietalmente puras, siendo manejada de forma adecuada para mantener un buen desarrollo y sanidad. Las plantas indicadoras inoculadas deben ser identificadas, etiquetadas indicando las plantas candidatas al Indexaje y la fecha de inicio. Se deberá llevar un Libro de Registro del proceso que estará a disposición de la DISE/SENAVE. Se deberá contar con testigos positivos y negativos para todas las enfermedades a indexar, los cuales deben ser inoculados al momento del inicio de cada Indexaje para asegurar el buen desarrollo de la técnica y la no influencia de factores externos que confundan la lectura de síntomas. Además, se deberá contar con un Termógrafo en el invernadero de Indexaje conservando los registros de temperatura. Las semillas de plantas indicadoras poliembriónicas serán cultivadas in vitro (Ídem saneamiento).para aquellas plantas indicadoras monoembriónicas como el Cidro Etrog se usaran estacas siguiendo el proceso normal de saneamiento cuando sea necesario. Las yemas del Cidro Etrog serán injertadas sobre Cidro Córcega o cualquier otra variedad de Cidro provenientes de semillas certificadas. Para el caso del Mandarino Parson Special el procedimiento es similar al del Cidro Etrog pero se usará (preferentemente) Citrus Volkameriana como portainjerto. Proceso de inoculación: El proceso de Indexaje debe seguir las indicaciones establecidas en el Cuadro Nº 4 de acuerdo a lo siguiente. 1. Tristeza y Psorosis: Cuando las plantas indicadoras estén lo suficientemente desarrolladas, de la planta candidata al Indexaje se tomarán dos inóculos constituidos por dos escudos de corteza sin yema.sobre el tallo de la planta indicadora se realizan, a unos centímetros de distancia, dos cortes en forma de T, dentro de los cuales se colocan los inóculos. Luego la planta indicadora es despuntada para favorecer los brotes laterales sobre los cuales se observaran los primeros síntomas. 2. Exocortis y Cachexia: Para la Exocortis, una vez que el portainjerto de Cidro Córcega tenga un año, se injerta el Cidro Etrog. A un lado y otro de la yema injertada se sitúan los inóculos (escudos de corteza de la planta a indexar): Para la Cachexia, una vez que le portainjerto de Citrus Volkameriana esté lo suficientemente desarrollado, se injertara una yema del Mandarino Parson special. Los dos inóculos de la planta a indexar se situan a un lado y otro de la yema del mandarino. La DISE/SENAVE podrá exigir la repetición de cualquier Indexaje cuando no se cumple con las condiciones de manejo necesarias para la detección de las enfermedades señaladas o en cualquier otro caso que estime conveniente.