Costa Rica: Grupo Bioquímica (Coordinadora: Dra. Cecilia Díaz) Natalia Ortiz Chaves

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1 Costa Rica: Grupo Bioquímica (Coordinadora: Dra. Cecilia Díaz) Natalia Ortiz Chaves Noviembre-2012

2 Grupo de trabajo 1. Cecilia Díaz Oreiro (coordinadora) 2. Natalia Ortiz Chaves 3. Ernesto Vargas Méndez Escuela de Medicina-Universidad de Costa Rica Instituto Clodomiro Picado-Universidad de Costa Rica

3 Líneas de investigación Efecto de agentes anti-tumorales naturales sobre células tumorales. Implementación de técnicas genómicas y proteómicas para la detección de alteraciones en marcadores relacionados con la formación de cáncer gástrico. Desarrollo de modelos representativos para el estudio de cáncer gástrico y evaluación de agentes con potencial antitumoral en células de cáncer gástrico primario y de metástasis gástrica en hígado

4 Estudios in vitro AGS (Estómago-Adenocarcinoma) BAEC (Células endoteliales bovinas) C2C12 ( Músculo-Mioblastos murinos) HeLa (Cérvix-Adenocarcinoma) Hep 3B (Hígado-Carcinoma hepatocelular) Hep G2 (Hígado-Carcinoma hepatocelular) HUV-VE-C (Vena Umbilical-Células endoteliales) HTB-12 (Cerebro-Astrocitoma) HTB-16 (Cerebro-Glioblastoma) J774A.1 (Macrófagos murinos-sarcoma de células reticulares) K-562 (Médula ósea-leucemia crónica mielógena) L-929 (Fibroblastos murinos-tejido conectivo subcutáneo) MCF-7 (Mama-Adenocarcinoma glándula mamaria) NCI-H460 (Pulmón-Carcinoma de células grandes) NCI-N87 (Hígado-Metástasis carcinoma gástrico) OVCAR-3 (Ovario-Adenocarcinoma) PC-3 (Hueso-Metástasis adenocarcinoma pancréatico) PC-12 (Glándula adrenal Rata-Feocromocitoma) RAW (Macrófagos murinos-leucemia Abelson murina transformada por virus) SK-MEL 2 (Piel- Melanoma maligno) SW620 (Nódulo linfático-metástasis de adenocarcinoma colorrectal) U-87 MG (Cerebro-Glioblastoma; Astrocitoma) VERO: (Riñón normal de primate)

5 Estandarización de un modelo tridimensional con células tumorales de estómago AGS (Carcinoma gástrico primario) HT29 AGS NCI-N87 NCI-N87 NCI-N87 (Hígado-Metástasis carcinoma gástrico) 0,5 mm 0,5 mm células células células células Nature Reviews Cancer 2006; 6: AGS ADN (DAPI) Actina (faloidina-fitc) NCI-N87 Critical Reviews in Oncology/Hematology 2000; 36: ADN (DAPI) Actina (faloidina-fitc)

6 Cuantificación de la muerte celular inducida por sustancias pro-apoptóticas en las líneas celulares AGS y NCI-N87 Ensayo citotoxicidad: Reducción del MTT Método de sulforodamina B Tratamientos evaluados: Retinoides de origen natural y sintético Ácido trans retinoico (ATRA) Ácido retinoico-13-cis 4-hidroxifenil Retinamida (HPR) Leucemia promielocítica aguda Linfomas, melanomas, neuroblastomas, glioblastomas y tumores en cérvix, riñón y pulmón Linfomas cutáneos, leucemias mieloides crónicas y tumores tiroideos Recurrencias de tumores de mama y desarrollo de tumores de ovario

7 Desarrollo de un modelo de carcinogénesis in vivo en ratas Wistar mediante la administración intragástrica de MNNG MNNG: N-metil-N -Nitro-N-Nitrosoguanidina Semana Modelo MNNG MNNG (15mg/ml) 150 mg/kg Vehículo del tratamiento 87,5 mg/kg 60,7 mg/kg

8 Semana Modelo MNNG Estómago 1 Estómago 2 Control MNNG MNNG Semana Modelo MNNG MNNG MNNG MNNG

9 Semana Modelo MNNG Control MNNG MNNG Control MNNG: Estómago 1 MNNG: Estómago 2 Control MNNG: Estómago 1 MNNG: Estómago 2

10 Perspectivas futuras Cultivo celular tridimensional Ensayo citotoxicidad (monocapa) Modelos de carcinogénesis in vivo Evaluar otras líneas celulares de cáncer gástrico y de otros tumores NCI-N87: Efecto citotóxico de la retinamida Mecanismo molecular de la retinamida Diferencias moleculares con relevancia terapéutica entre tumores primarios y metastásicos Evaluar sustancias con potencial acción terapéutica Estandarizar marcadores tumorales bioquímicos y moleculares

11 Evaluación in vivo de sustancias con potencial acción terapéutica en cáncer gástrico Trends in Endocrinology and Metabolism 2008; 19 (4)

12 Tratamientos evaluados Lovastatina Limoneno Aceite de salmón (ω-3) Aceite de girasol (ω-6)

13 Tratamientos evaluados Lovastatina Limoneno Aceite de girasol (ω-6) Tejido para Histología (Estómago-Intestino-Hígado) Tejido para Biología molecular (Estómago-Intestino-Hígado) Suero Plasma Intestino rata tratada con MNNG (37 semanas) Células mononucleares periféricas

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