ANA: técnicas utilizadas

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1 ANA Anti-DNA Anti-ENA Ana María Bielsa Masdeu Especialista en Inmunología y Medicina Interna Servicio de Medicina Interna Hospital de Cruces ANCA Anti-PR3 Anti-MPO Anti-MBG ANA ANA: técnicas utilizadas IFI ELISA Detecta cualquier ANA salvo anti-jo1 y anti-ro a veces. Título: a mayor título mayor probabilidad de EAS Patrón: orienta a especificidad / diagnóstico VARIABLE ADN Sm U1RNP Ro La Scl70 Jo-1 ANA: técnicas utilizadas ELISA VARIABLE ADN Sm U1RNP Ro La Scl70 Jo-1 Resultados contradictorios del mismo paciente al ser estudiado por diferentes laboratorios por utilizar técnicas diferentes de cribado de ANA ANA en laboratorio A ANA + en laboratorio B (ELISA) (IFI) 1

2 ANA: cribado adecuado IFI Todos los ANA Patrón Título Limitaciones El patrón de IFI es muy útil porque orienta a la especificidad pero no es perfecto ni debe ser obstáculo para investigar las especificidades. Los Ac anti-dna dan un patrón homogéneo Resultado con patrón inesperado. Limitaciones Si alta sospecha de presencia de anti-ro o anti-jo1 se deberán solicitar específicamente. ANA Anti-ENA Anti-DNA ANCA Anti-PR3 Anti-MPO Anti-MBG Qué significa este resultado? Extractable nuclear antigens DEFINICIÓN: Proteínas nucleares no histonas asociadas al ARN que pueden extraerse del núcleo con soluciones salinas de baja fuerza iónica. Qué significa Ac anti-ena negativo? Qué queremos pedir cuando marcamos la casilla anti-ena? 2

3 Anti-Sm Anti-U1RNP Anti-Ro Anti-La ANA IFI - + Gran variabilidad de técnicas, combinación de antígenos y casas comerciales. Gran variabilidad de procedimientos entre laboratorios. Gran variabilidad en la forma de emitir los informes de anti-ena negativos o positivos. Anti-DNA Anti-ENA (Sm, U1RNP, Ro, La) ELISA de un único antígeno CIE IB de un único antígeno IP de proteínas o RNA Tira de ELISA o IB en línea, con varios antígenos 3

4 Tira de ELISA o IB en línea, con varios antígenos Cribado: ELISA Estudio de la especificidad: Blot Ro La Sm U1RNP Scl70 Jo-1 POSITIVO Anti-ENA por ELISA de cribado Anti-ENA por IB de estudio de especificidad Estudio de los anticuerpos anti-ena SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD DE LOS TEST 4

5 MUY VARIABLES Sueros de 57 pacientes de LES estudiados por 3 casas comerciales diferentes detectan diferentes anticuerpos, pueden ser tanto falsos positivos como falsos negativos. Hay múltiples estudios comparando diferentes casas comerciales con resultados semejantes. MUY VARIABLES Un mismo laboratorio puede detectar diferentes anticuerpos en un mismo paciente por haber cambiado de kit o de casa comercial. Ambas son analíticas del mismo paciente, arriba anti-ssb y anti- SSa positivos, abajo ambos negativos. Por la diferente representación de Ag sabemos que es diferente kit. MUY VARIABLES Mismo paciente Diferentes resultados Diferentes laboratorios Diferentes casas comerciales Ac anti-sm + Especificar que antígenos incluye el test (obviar el resultado anti- ENA negativo sin más explicaciones). Advertir cuando se produzca un cambio de kit para tenerlo en cuenta en caso de resultado diferente. Ac anti-sm - 5

6 Sospecha por IFI con patrón homogéneo en HEp2 (también anti-histonas y anti-nucleosoma) Anti-DNA sc: es negativo por IFI, poco específico, se detecta por ELISA Anti-DNA dc: nefropatía lúpica Farr (variante de RIA): detecta sólo Ac de alta afinidad: predice GMN (gold estándar) IFI sobre Crithidia Luciliae: detecta Ac de alta afinidad, buena correlación con la actividad de la enfermedad, menos sensible que el Farr EliA de Phadia (ADN recombinante de E. Coli) ELISA: detecta alta y baja afinidad, menos específica, la más utilizada. Se recomienda que los sueros positivos se confirmen por Crithidia Luciliae IFI: cribado, más S c-anca p-anca a-anca ELISA 90% anti-pr3 2% anti-mpo 80-90% anti-mpo 43% anti-bpi( bacterial permeability increasing protein) (+ en algunos por IFI) ELISA rápido renopulmonar Anti-PR3 Anti-MPO Anti-MBG RESULTADOS EN 30 MINUTOS IFI (manual): 90 minutos ELISA (manual): 120 minutos Muchas gracias ambielsa@hotmail.com 6