EL LABORATORIO EN LA INFERTILIDAD MASCULINA. Bioq. Lorena K. López Bioq. Fernando Smithuis HOSPITAL Dr. CARLOS G. DURAND

Transcripción

1 EL LABORATORIO EN LA INFERTILIDAD MASCULINA Bioq. Lorena K. López Bioq. Fernando Smithuis HOSPITAL Dr. CARLOS G. DURAND

2 INFERTILIDAD Incapacidad de una pareja sexualmente activa y que no utiliza contracepción, para lograr el embarazo en el transcurso de un año.

3 10 % de las parejas en edad reproductiva son infértiles ( OMS, 1999) 30 % factor masculino 35 % factor femenino 20 % compartido 15 % sin causa aparente

4 CAUSAS DE INFERTILIDAD MASCULINA 50% desconocidas Causas conocidas: Varicocele Déficit de gonadotrofinas Alteraciones genéticas Obstrucción de conductos excretores Tóxicos del medio ambiente, alcohol, drogas, medicamentos, radiación, quimioterapia. Enfermedades sistémicas Infecciones: sistémicas y genitales. Alteraciones neurológicas Impotencia Enfermedades autoinmunes

5 EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios

6 EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Cuestionario Examen Físico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios

8 CUESTIONARIO Antecedentes personales: Edad Ocupación anterior y actual Infecciones Tóxicos Criptorquidia Traumatismos Antecedentes familiares: De esterilidad Interrogatorio de sexualidad: Frecuencia de relaciones sexuales Eyaculación, erección, libido

9 CUESTIONARIO Antecedentes personales: Edad Ocupación n anterior y actual Infecciones Tóxicos Criptorquidia Traumatismos Antecedentes familiares: De esterilidad Interrogatorio de sexualidad: Frecuencia de relaciones sexuales Eyaculación, erección, libido Calor Insecticidas Químicos Radiaciones

10 CUESTIONARIO Antecedentes personales: Edad Ocupación anterior y actual Infecciones Tóxicos Criptorquidia Traumatismos Antecedentes familiares: De esterilidad Interrogatorio de sexualidad: Frecuencia de relaciones sexuales Eyaculación, erección, libido Paperas Orquitis Epididimitis Prostatitis Venéreas

11 CUESTIONARIO Antecedentes personales: Edad Ocupación anterior y actual Infecciones Tóxicos Criptorquidia Traumatismos Antecedentes familiares: De esterilidad Interrogatorio de sexualidad: Frecuencia de relaciones sexuales Eyaculación, erección, libido Tabaco Alcohol Drogas de abuso Medicamentos Quimioterapia

12 CUESTIONARIO Antecedentes personales: Edad Ocupación anterior y actual Infecciones Tóxicos Criptorquidia Traumatismos Antecedentes familiares: De esterilidad Interrogatorio de sexualidad: Frecuencia de relaciones sexuales Eyaculación, erección, libido

15 EXAMEN FISICO Grado de virilización: Proporciones anatómicas Pene Escroto Tamaño testicular Pilosidad Presencia de ginecomastia Presencia de varicocele

16 EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Espermograma Perfil hormonal Estudios complementarios Pruebas funcionales

18 FISIOLOGIA VESICULAS SEMINALES PROSTATA GLANDULAS BULBOURETRALES CONDUCTOS DEFERENTE Y EYACULADOR Transporte de Z EPIDIDIMO Desarrollo y maduración Almacenamiento TESTICULOS Espermatogénesis Producción n de andrógenos

19 EL ESPERMATOZOIDE Pieza terminal Cola Pieza media Cabeza

20 SEMEN Espermatozoides suspendidos en las secreciones del testículo, epidídimo, próstata, vesículas seminales y glándulas bulbouretrales, que se mezclan en el momento de la eyaculación.

21 EL EYACULADO NORMAL 1ª Porción 2ª Porción 3ª Porción 5 10 % ph Alcalino Mucoproteínas % ph Acido Enzimas, Zn, Ac cítrico % ph Alcalino Espermatozoides Sust. Nutricionales

22 TOMA DE MUESTRA Abstinencia de 3 a 5 días Masturbación Recipiente adecuado Evitar perder muestra Traslado: Tiempo Temperatura

23 ESPERMOGRAMA Examen Macroscópico Examen Microscópico Bioquímica del plasma seminal

24 EXAMEN MACROSCOPICO Volumen ph Viscosidad Color Aspecto Licuefacción

25 VOLUMEN Valores de Referencia: 2 6 ml Hipospermia: < 2 ml Hiperespermia: > 6 ml Aspermia: Ausencia de Eyaculado OMS 1999

26 ph Valores de Referencia: 7,2 8,0 ph>8.0 Falla Prostática ph<7.2 Agenesia de conductos deferentes Ausencia de vesículas seminales OMS 1999

27 VISCOSIDAD Goteo libre desde pipeta Filamento < 2cm Filancia con varilla de vidrio Filamento < 5 cm Aumentada Difícil manejo de la muestra Relación n con astenospermia OMS 1999

28 COLOR / ASPECTO Blanco Opalescente Traslúcido Amarillento Turbio Piospermia OMS 1999

29 LICUEFACCION Normal Antes de los 60 minutos Incompleta Presencia de coágulos después de 60 minutos OMS 1999

31 EXAMEN MICROSCOPICO Movilidad Viabilidad Recuento de Espermatozoides Células Peroxidasa + Morfología

32 MOVILIDAD En fresco sobre platina termostatizada Grados a Movilidad lineal rápida. > 25 µm / seg. b Movilidad no lineal o lineal lenta. c Movilidad in situ. < 5 µm / seg. d Inmóviles. OMS 1999

33 Movilidad normal: Grado a > 25 % ó Grado a + b > 50 % OMS 1999

34 Astenospermia: Grado a < 25 % ó Grados a + b < 50 % OMS 1999

35 ASAC: ANALISIS SEMINAL ASISTIDO POR COMPUTADORA VCL: vel. curvilínea VSL: vel. rectilínea VAP: vel. promedio ALH: amplitud de desplazamiento LIN: linealidad WOB: oscilación STR: rectitud BCF: frecuencia de cruce MAD: desplazamiento angular

36 VIABILIDAD Test de Eosina: Colorea los espermatozoides muertos Normal Más del 50 % de espermatozoides vivos OMS 1999

37 RECUENTO DE ESPERMATOZOIDES Dilución en cámara de Neubauer 20x10 6 /ml o 40x10 6 /eyac. Polizoospermia Criptozoospermia Azoospermia Oligozoospermia OMS 1999

38 CELULAS PEROXIDASA POSITIVA Coloración n con Bencidina Cianocina H 2 O 2 Leucospermia.> C Pox + / ml Zona gris > C Pox + / ml OMS 1999

39 MORFOLOGIA Normospermia > 30 % normales Giemsa Papanicolaou OMS 1999

40 MORFOLOGIA Defectos de Cabeza OMS 1999

41 MORFOLOGIA Defectos de cuello y pieza media OMS 1999

42 MORFOLOGIA Defectos de cola OMS 1999

44 BIOQUIMICA DEL PLASMA SEMINAL Fructosa Ácido Cítrico α Glucosidasa Prostaglandinas Fosfatasa Ácida Prostática Zinc

45 BIOQUIMICA DEL PLASMA SEMINAL Fructosa Prostaglandinas OMS 1999

46 BIOQUIMICA DEL PLASMA SEMINAL Ácido Cítrico Fosfatasa Acida Prostática Zinc OMS 1999

47 BIOQUIMICA DEL PLASMA SEMINAL α Glucosidasa OMS 1999

50 PRUEBAS FUNCIONALES MAR Test/Immunobeads Swim Up Test Hiposmótico Test de Heterogeneidad Cromatínica

51 MAR TEST / IMMUNOBEADS Factor Inmunológico presente: > 50 % Espermatozoides móviles unidos a GR OMS 1999

52 MAR TEST / IMMUNOBEADS Factor Inmunológico presente: > 50 % Espermatozoides móviles unidos al Immunobead OMS 1999

53 SWIM UP Mejoramiento funcional Etapa seleccionadora Previa a una inseminación artificial OMS 1999

54 PRUEBAS FUNCIONALES Test Hiposmótico: Evalúa la integridad anátomo funcional de la membrana plasmática. Test de Heterogeneidad cromatínica: Determina el estado e integridad de la cromatina nuclear. OMS 1999

57 PERFIL HORMONAL FSH LH Testosterona Testosterona Libre SHBG To biodisponible Índice de Testosterona bio Prolactina TSH

58 EVALUACION DE INFERTILIDAD MASCULINA Examen clínico Estudios solicitados al laboratorio Estudios complementarios Microbiológico Imágenes Biopsia

62 Varón, 31 años Busca fertilidad hace 2 años HISTORIA CLINICA EXAMEN FISICO: Genitales: SP Volumen testicular: Derecho: 18 ml ( VN: 15 ml ) Izquierdo: 10 ml Cordón testicular izquierdo engrosado Mamas: SP Peso y talla: N Androgenización: N Frecuencia de relaciones sexuales: 2-3/semana Antecedentes familiares: No Cirugías: No Se solicita: ESPERMOGRAMA DOPPLER FUNICULAR BILATERAL MUJER: Ciclos regulares Sin factor tuboperitoneal Aparentemente sin trastornos reproductivos No infección Hormonas: dentro de valores de referencia

63 HISTORIA CLINICA Inicial VOLUMEN 2.2 ml E S P E R M O G R A M A PH VISCOSIDAD LICUEFACCION MOVILIDAD CONCENTRACION CPO+ MORFOLOGIA FRUCTOSA >8 Aumentada Parcial, 60 min 44% Ga:8%,Gb:30%,Gc:6% Inmóviles: 56% 18 millones/ml 0.66 millones/ml NORMALES: 11% 65 µmol/eyaculado DOPPLER FUNICULAR BILATERAL: Positivo GII en testículo izquierdo Se solicita: 1º chorro de orina y semen para investigación gérmenes comunes, Chlamydia y Ureaplasma, y PERFIL HORMONAL ACIDO CITRICO 90 µmol/eyaculado

64 HISTORIA CLINICA EXAMEN MICROBIOLOGICO: 1º CHORRO: NEGATIVO SEMEN: POSITIVO: Ureaplasma urealyticum PERFIL HORMONAL: LH: 4.0 mui/ ml FSH: 4.2 mui/ ml PRL: 10 ng/ ml To: 5.1 ng/ ml Estradiol: 48 pg/ ml Se indica tratamiento con vibramicina a la pareja, coito condomatoso y cultivo a los 30 díasd postratamiento

65 HISTORIA CLINICA Inicial 30 días VOLUMEN PH VISCOSIDAD LICUEFACCION 2.2 ml 8 Aumentada Parcial, 60 min 2.4 ml 8 NORMAL Total, 60 min MOVILIDAD CONCENTRACION CPO+ 44% Ga: 8%, Gb:30%,Gc:6% Inmóviles: 56% 18 millones/ml 0.66 millones/ml 48% Ga: 10%, Gb:32%,Gc:6% Inmóviles: 52% 17 millones/ml 0.08 millones/ml MORFOLOGIA NORMALES: 11% NORMALES: 14% FRUCTOSA ACIDO CITRICO 65 µmol/eyaculado 90 µ mol/eyaculado 60 µ mol/eyaculado 87 µ mol/eyaculado

66 HISTORIA CLINICA EXAMEN MICROBIOLOGICO: 1º CHORRO: NEGATIVO SEMEN: NEGATIVO Se sugiere cirugía por dolor repetido de testículo izquierdo, alteraciones seminales, e hipotrofia leve Repetir ESPERMOGRAMA a los 6 y 9 meses

67 Inicial 30 dias 6 meses VOLUMEN ml PH VISCOSIDAD Aumentada NORMAL NORMAL LICUEFACCION Parcial, 60 min Total, 60 min Total, 60 min 44% 48% 57% MOVILIDAD Ga:8%,Gb:30%, Gc:6% Ga: 10%, Gb:32%, Gc:6% Ga:20%,Gb:32%, Gc:5% Inmóviles:56% Inmóviles:52% Inmóviles:43% CONCENTRA CION 18 Millones/ml 17 Millones/ml 27 Millones/ml CPO Millones/ml 0.08 Millones/ml 0.04 Millones/ml MORFOLOGIA NORMALES: 11% NORMALES: 14% NORMALES: 31% FRUCTOSA 65 µ mol/eyaculado 60 µmol/eyaculado 57 µmol/eyaculado ACIDO CITRICO 90 µ mol/eyaculado 87 µmol/eyaculado 77 µmol/eyaculado

68 HISTORIA CLINICA Reporta EMBARAZO a los 8 meses post cirugía

69 CONCLUSIONES El espermograma y los tests de funcionalidad espermática contribuyen a determinar la etiología de la infertilidad masculina. El mejoramiento del semen in vitro constituye una herramienta terapéutica sumamente útil en las Técnicas de Fertilización Asistida de Baja Complejidad.

70 El único modo fidedigno de comprobar la capacidad fecundante de un varón es el embarazo.

71 Muchas Gracias por su Atención H. G. A. C. G. Durand