USP FEUM ÍFICO CIENT Límites microbianos ENCUENTRO MEMORIAS

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1 Límites microbianos

2 Origen de técnicas de cultivo en medios sólidos En 1881 dentro del Congreso Médico Internacional en Londres, Robert Koch describió un método de cultivo de microorganismos empleando medios después de agregar gelatina. En 1882, fue perfeccionado por sus colaboradores Fanny y Walther Hesse sustituyendo la gelatina por agar-agar. En esos años también Julius Richard Petri inventó las cajas del mismo nombre. Con esto y la técnica de dilución serial desarrollada por Joseph Lister, se conforma la técnica de cultivo y aislamiento con medios sólidos.

3 En los productos no estériles que carecen de especificación, aplicar el Apéndice VII Análisis microbiológico de productos farmacéuticos no estériles, con carácter obligatorio. Nuevo

4 Los métodos para evaluar la calidad microbiológica de materias primas, productos intermedios y terminados son descritos en el MGA 0571, Límites microbianos. Las técnicas de enumeración de microorganismos descritas son: Filtración por membrana Cuenta en placa - vaciado Cuenta en placa extensión Numero más probable

5 En el mismo método se incluyen técnicas de enriquecimiento selectivo para el aislamiento e identificación de los microorganismos específicos y grupos indicadores: Escherichia coli Salmonella sp Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Clostridium sporogenes Candida albicans Bacterias Gram negativas bilis tolerantes

6 Promoción de crecimiento y características selectivas e inhibitorias de los medios de cultivo Reorganización de la información de promoción en medios de cultivo líquidos y sólidos. Propiedades selectivas y diferenciales. Incubar los medios en el menor tiempo de incubación indicado. El medio de cultivo cumple si el número de microorganismos recuperados es comparable en un factor no mayor de 2 (50 a 200 %) con un lote control.

7 Evaluación de la aptitud del método Mantener a los microorganismos de referencia mediante el sistema lote semilla véase Apéndice VI, Conservación, mantenimiento y manejo de cultivos microbianos: sistema lote semilla, de manera que los microorganismos no tengan más de 5 pases a partir de la cepa original o un sistema de conservación que asegure esto. Nuevo Un periodo diferente de conservación de suspensiones de microorganismos de referencia puede establecerse siempre que se demuestre la estabilidad de las mismas. Nuevo

8 Evaluación de la aptitud del método Verifica la aptitud del método de filtración por membrana o el método de cuenta en placa, el promedio de la cuenta de los microorganismos de referencia en presencia del producto, no debe diferir por un factor mayor que 2 de los valores del control. La aptitud de las pruebas para recuperar a los microorganismos contaminantes en presencia del producto debe determinarse y confirmarse cada vez que se introduzca un cambio en el método o en el producto. Esta evaluación corresponde al control positivo de la prueba. Nuevo

9 Expresión de resultados Las técnicas de enumeración de microorganismos está basado en la cuenta de células viables, usando como unidad de expresión Unidades Formadoras de Colonias (UFC) o Numero Más Probable (NMP). La expresión de resultados para la determinación de microorganismos específicos es ausencia o presencia en determinado tamaño de muestra.

10 Los resultados generados por métodos microbiológicos deben ser interpretados por microbiólogos calificados; entendiendo la variabilidad per se de los mismos y los factores que contribuyen al resultado final.

11 Apéndice VII, Análisis microbiológico de productos farmacéuticos no estériles En éste apéndice se proporcionan lineamientos de carácter general para auxiliar al fabricante en los aspectos a considerar para el control microbiológico de productos no estériles así como en el establecimiento de sus especificaciones microbiológicas. Aquellos productos que cuenten con una monografía farmacopeica con límites establecidos para las pruebas de enumeración y(o) investigación de microorganismos específicos deben cumplir con lo requerido en la monografía. Nuevo

12 Apéndice VII, Análisis microbiológico de productos farmacéuticos no estériles En las tablas A7.1 y A.7.2, se incluye una lista de grupos indicadores y microorganismos específicos para los que se establecen criterios de aceptación. En algunos excipientes y preparados farmacéuticos puede ser necesario establecer niveles de alerta y(o) acción e investigar otros microorganismos, dependiendo de la naturaleza de las materias primas y el proceso de fabricación. Nuevo

13 Apéndice VII, Análisis microbiológico de productos farmacéuticos no estériles Producto Organismos mesofílicos aerobios (OMA) (UFC/g o ml) Hongos filamentosos y levaduras (UFC/ g o ml) Ausencia por 1g o 1 ml de producto Oral solido Escherichia coli Oral líquido Escherichia coli Rectal Bucal Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Tópica (incluye parches transdérmicos) Staphylococcus aureus (1g, 1 ml o parche) Pseudomonas aeruginosa (1g, 1 ml o parche) Nasal Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Ótico Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Vaginal Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Candida albicans Para inhalación Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Bacterias Gram (-) tolerantes a la bilis

14 Apéndice VII, Análisis microbiológico de productos farmacéuticos no estériles Elementos, no limitativos, para un análisis de riesgos y especificaciones: Disponibilidad de materiales de la calidad deseada. Proceso de fabricación Vía de administración Capacidad para soportar el crecimiento Presencia de preservativos adecuados Uso de inmunosupresores, corticosteroides. Tipo de población al que se le administra el producto, presencia de lesiones o daños en los pacientes.

15 Apéndice VII, Análisis microbiológico de productos farmacéuticos no estériles Qué diferencia existe entre un resultado de 100 o 101 UFC/g? Cómo procedemos sí aislamos un microorganismos enlistado en el apéndice VII? Y si no está en la lista?

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