Compatibilidad de Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae con Nimkol-L para el combate de Heterotermes tenuis

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1 Mnejo Integrdo de Plgs y Agroecologí (Cost Ric) No. 69 p.38-44, 23 Comptiilidd de Beuveri ssin y Metrhizium nisoplie con Nimkol-L pr el comte de Heterotermes tenuis Enrique Cstiglioni 1 José Djir Vendrmim 2 Sérgio Btist Alves 2 RESUMEN. Se evluó l comptiilidd del Nimkol-L, formulción comercil de extrcto cuoso de hojs de nim (Azdircht indic), con ls ceps 137 de Metrhizium nisoplie y 634 de Beuveri ssin, in vitro. Se relizron dos ensyos pr evlur el efecto del Nimkol-L sore el crecimiento vegettivo y l producción de conidios de los hongos entomoptógenos. En el primero, el producto fue incorpordo en medio de cultivo sólido (PDA), en plcs de Petri, en ls concentrciones de ;,74; 1,84; 3,68 y 18,4% i.. En el segundo, el producto fue plicdo en l superficie del medio PDA contenido en ls plcs, en ls concentrciones de ;,2;,; 1 y % i.. Con se en ls vriles estudids, el Nimkol-L fue crcterizdo plicndo el modelo T de clsificción de productos. Se evluó tmién el efecto del Nimkol-L sore l germinción de los conidios. El Nimkol-L fue comptile con M. nisoplie (137) hst 1% i.. y con B. ssin (634) hst 1,84% i.. Entre,2 y 1% i.., el Nimkol-L no inhiió significtivmente l germinción de los conidios. En concentrciones de % i.. o myores, el Nimkol-L fectó significtivmente tods ls vriles estudids, pr ms ceps. Plrs clve: Extrctos vegetles, nim, hongos entomoptógenos, interferenci. ABSTRACT. Comptiility etween Beuveri ssin nd Metrhizium nisoplie with Nimkol-L in the control of Heterotermes tenuis. The comptiility of Nimkol-L, coercil formul of neem leves queous extrct (Azdircht indic), with strin 137 of Metrhizium nisoplie nd strin 634 of Beuveri ssin, ws tested in vitro.two experiments were developed for testing the effect of Nimkol-L on vegettive growth nd conidi production of entomopthogenic fungi. In the first one, the product ws incorported on solid culture medi (PDA), in Petri dishes, t concentrtions of,.74, 1.84, 3.68, nd 18.4%.i. In the second experiment, the product ws pplied on the surfce of PDA medi within the dishes, t concentrtions of, 1.2,., 1 nd %.i. Bsed on the vriles studied, Nimkol-L ws chrcterized ccording to the T model for product clssifiction. The effect of Nimkol-L on the germintion of conidi ws lso mesured. Nimkol-L ws comptile with M. nisoplie (137) up to 1%.i., nd with B. Bssin (634) up to 1.84%.i. The germintion of conidi ws not significntly inhiited y Nimkol-L, etween.2 nd 1%.i.At concentrtions equl or higher thn %.i., Nimkol-L significntly ffected ll the vriles mesured in oth strins. Key words: Botnicl extrcts, neem, enthomopthogenic fungi, interference. Introducción L termit suterráne Heterotermes tenuis es un de ls plgs más importntes de l cñ de zúcr en el Estdo de São Pulo, Brsil. Pizno (199) indic que est plg se encuentr disemind en el Brsil, ocsionndo dños en quel cultivo. Ls termits tcn ls socs recién plntds, dñndo ls yems y provocndo, como consecuenci, flls en l implntción. En l plnt dult no existe un método económico y 1 Fcultd de Agronomí, E.E.M.A.C., Rut 3 km 363, CP 6., Pysndú, Uruguy. cst@fgro.edu.uy 2 Depto. Entomologi, Fitoptologi e Zoologi Agrícol - ESALQ/USP, C.P. 9 - CEP: Pircic, SP, Brsil. jdvendr@eslq.usp.r 38

2 Mnejo Integrdo de Plgs y Agroecologí (Cost Ric) No. 69, 23 eficiente de control, siendo los perjuicios, en estos csos, todví myores por l pérdid de peso y reducción drástic del rerote. Los productos más eficientes pr el control de termits suterránes permnecen ctivos en el suelo por períodos prolongdos. Sin emrgo, después de l prohiición del uso de orgnoclordos, se están investigndo nuevos productos y estrtegis (Mcedo et l. 199). Según estos utores, los nuevos productos y el empleo de trmps rtificiles están grdulmente sustituyendo los relevmientos convencionles, umentndo l eficienci y l prcticidd del control y disminuyendo los costos. El control socido de termits, con l utilizción simultáne de uno o más métodos de comte, es un lterntiv que está siendo explord en l ctulidd. Los productos fitosnitrios pueden mejorr su efecto si son utilizdos simultánemente con hongos entomoptógenos, contriuyendo incrementr l eficienci del comte (Moino Júnior 1998). L cción estresnte de ciertos compuestos puede fectr l resistenci del comportmiento oservd nturlmente en ls termits, lterndo sus háitos de limpiez. El producto puede ctur de form sinérgic, permitiendo que un myor cntidd de conidios pued germinr e inicir el proceso de l enfermedd, como fue consttdo por Moino Júnior (1998) pr imidcloprid y Beuveri ssin y Metrhizium nisoplie, en estudios con H. tenuis. En prues de lortorio, se verificó l eficci de control de Nimkol-L (extrcto cuoso comercil de hojs de nim 1%) sore H. tenuis, el cul logró un mortlidd superior l 8% los tres dís, con, 1% de ingrediente ctivo (Cstiglioni y Vendrmim 23). L cción de este producto sore H. tenuis, solo y en socición con B. ssin y M. nisoplie, fue verificd en ensyos de lortorio y en trmps de crtón en prues de cmpo (Cstiglioni et l. En preprción). L cción de los productos fitosnitrios sore los entomoptógenos puede vrir en función de l especie y l rz del ptógeno, de l nturlez químic de los productos y de ls concentrciones utilizds. Estos productos pueden ctur inhiiendo el crecimiento vegettivo, l conidiogénesis y l esporulción de los microorgnismos, sí como cusr mutciones genétics, fctores que pueden llevr l disminución de l virulenci de un plg determind (Alves et l. 1998). El uso comindo de trmps tryentes con ptógenos pr intensificr el contcto de l plg con ls toxins, y grntizr el efecto de control, es recomenddo por lgunos utores, según Mrtius (1998). L estrtegi de control de H. tenuis por medio de trmps de crtón impregnds con insecticids y hongos entomoptógenos dee considerr los posiles efectos fungitóxicos de los productos que se utilizrán (Moino Júnior 1998). Según Alves et l. (1998), fltn informciones reltivs ls intercciones entre entomoptógenos y groquímicos en condiciones de cmpo. Sin emrgo, como los estudios in vitro exponen l máximo el microorgnismo l cción del producto químico, rindn confiilidd sore los resultdos de selectividd. Así, el ojetivo de este trjo fue evlur l comptiilidd in vitro del Nimkol-L, formulción de extrcto de hojs de nim, con los hongos entomoptógenos B. ssin y M. nisoplie, pr su uso en trmps pr el control de termits. Mteriles y métodos Los experimentos fueron relizdos en el Lortorio de Ptologí de Insectos del Deprtmento de Entomologi, Fitoptologi e Zoologi Agrícol de l Escol Superior de Agricultur Luiz de Queiroz, Universidde de São Pulo, Brsil. Se utilizron ls ceps 634 de B. ssin y 137 de M. nisoplie, producids en plcs de Petri con medio de cultivo específico pr esporulción MC 3, prtir del mteril lmcendo en el nco de ptógenos del Lortorio. El producto comercil evludo fue Nimkol-L, extrcto cuoso de hojs de nim (Azdircht indic) en formulción líquid, 1% de concentrción de mteril vegetl, sin especificción de ingredientes ctivos (suministrdo por Quinr, Químic Nturl Brsileir Ltd., Brsil). L recomendción pr dosis de cmpo es un dilución de 1/1 en gu. Crecimiento de colonis y producción de conidios Se llevron co dos experimentos de comptiilidd del Nimkol-L con los entomoptógenos. En el primero, el producto fue diciondo l medio de cultivo pp-dextros-gr (PDA) todví líquido, un tempertur próxim los 4ºC. Ls concentrciones 3 Composición del medio MC: fosfto de potsio:,36 g; fosfto de sodio: 1, g; sulfto de mgnesio:,6 g; cloruro de potsio: 1, g;glucos: 1, g; nitrto de sodio: 1,8 g; extrcto de levdur:, g; gr: 2, g; gu destild: 1, ml. 39

3 Mnejo Integrdo de Plgs y Agroecologí (Cost Ric) No. 69, 23 evluds fueron ;,74; 1,84; 3,68 y 18,4% de i.., equivlentes, 74, 1 84, 3 68 y 18 4 ppm, respectivmente. Posteriormente, el medio fue vertido en plcs de Petri. Después de l solidificción del medio con el producto, los entomoptógenos fueron inoculdos con lz de pltin en tres puntos por plc, en tres plcs por trtmiento, en cámr de flujo lminr. En el segundo experimento, ls concentrciones evluds fueron ;,2;,; 1 y % de i.., equivlentes, 2,, 1 y ppm, respectivmente. Pr cd trtmiento, se vertió 1 ml del producto sore l superficie del medio de cultivo en ls plcs. Un vez sec l superficie, se procedió l inoculción de los entomoptógenos, de idéntic form que en el primer experimento. Los diferentes rngos de concentrciones empledos en el medio de cultivo de los ensyos respondieron dos hipótesis de contcto de los insectos con el producto. En l hipótesis de menor contcto, se estimó l concentrción en l superficie del sustrto. En l hipótesis de myor contcto, se estimó l myor cntidd de producto que los insectos podrín contctr, un vez clculd l sorción del mismo en el crtón de ls trmps. Después de l inoculción, ls plcs fueron mntenids 26 ±,ºC, humedd reltiv de 7 ± %, y fotofse de 12 h, por un período de cinco dís en el primer experimento, y de seis dís en el segundo. Al término de estos períodos, se midió el diámetro medio de ls colonis y se contron los conidios producidos por coloni, en cámr de Neuuer (Alves et l. 1998). Pr esto, ls colonis fueron recortds del medio de cultivo con un scocdos y colocds en tuos de vidrio de 9, cm x 3, cm, en los cules fueron hechs ls disoluciones necesris en gu destild estéril con Tween 8 (concentrción 8%,,1% v/v). Se procedió l gitción en gitdor de tuos, mrc Mrconi, modelo 162, y gitdor de ultrsonido modelo 4 (E/MC Corp. RAI Reserch Division) y se utilizó un pincel pr el desprendimiento completo y l suspensión de los conidios. Clsificción de l toxicidd del Nimkol-L pr los hongos entomoptógenos Pr clsificr l comptiilidd del producto con los entomoptógenos, se utilizó el modelo T (Alves et l. 1998), desrrolldo pr crcterizr l comptiilidd de hongos entomoptogénicos con productos insecticids en estudios in vitro, en medio de cultivo sólido. Pr ello, se clculron los vlores porcentules promedio de esporulción y crecimiento vegettivo de ls colonis de los hongos con relción l testigo (1%), plicándose enseguid, pr cd concentrción del producto, l siguiente fórmul: T = [2(CV) + 8(ESP)]/1 Donde: T = vlor corregido del crecimiento vegettivo y esporulción pr clsificción del producto; CV = porcentje de crecimiento vegettivo reltivo l testigo; ESP = porcentje de esporulción reltivo l testigo; Germinción de conidios Considerndo l importnci de l germinción de los conidios de los entomoptógenos pr l contminción eficiente de los insectos, se evluó el efecto negtivo del Nimkol-L sore este proceso, utilizndo metodologí similr l del estudio de Neves et l. (21). Pr evlur el efecto en l germinción de los conidios, se preprron disoluciones del producto en ls concentrciones de ;,2;,; 1 y % de i.., en gu destild estéril con,1% de Tween 8 (concentrción 8%). Conidios de ls ceps de B. ssin (634) y M. nisoplie (137) fueron diciondos ls disoluciones de Nimkol-L,y se procedió su gitción. Un hor después, prtes lícuots de,1 ml de cd concentrción fueron extendids en plcs de Petri con lz de Driglsky en l superficie de medio gu-gr 2%. Ls plcs fueron mntenids 26 ±,ºC, humedd reltiv de 7 ± %, y fotofse de 12 h, por 24 h. Después de ese período, se evluó el porcentje de conidios germindos, contndo l zr, cutro veces, 1 conidios por trtmiento. Los experimentos fueron dispuestos en diseño completmente l zr; posteriormente, se nlizron los resultdos por regresión polinomil, pr otener ls ecuciones de mejor juste. Resultdos y discusión Crecimiento de colonis y producción de conidios Los estudios de comptiilidd indicron que el efecto del Nimkol-L sore el crecimiento vegettivo de los hongos B. ssin y M. nisoplie fue dependiente de l concentrción. Cundo el producto fue incorpordo l medio de cultivo pr los hongos, el crecimiento de ls colonis 4

4 Mnejo Integrdo de Plgs y Agroecologí (Cost Ric) No. 69, 23 no fue significtivmente fectdo en l menor concentrción evlud (,74% i..). Con el umento de l concentrción, el crecimiento vegettivo de los entomoptógenos fue menor, hst l totl inhiición en l myor concentrción evlud (18,4% i..) (Fig. 1). L inhiición complet de los hongos indic el lto poder fungicid del Nimkol-L en es concentrción B. ssin cep 634 y = -,827x + 28,3 R 2 =,939 M. nisoplie cep y = 19,7 2-2, 97 x +,1x 2 R 2 =, M. nisoplie cep Figur % i.. NIMKOL- L B. ssin cep 634 y = 21,7-3,42x +,12 x 2 R 2 =, % i.. NIMKOL- L Diámetro () de ls colonis de B. ssin (634) y M. nisoplie (137), cinco d.p.i., en diferentes concentrciones de Nimkol-L diciondo l medio de cultivo PDA (26 ±,ºC, HR 7 ±, fotofse 12 h). 1 Figur 2. y = -,879x + 23,18 R 2 =, Diámetro () de ls colonis de B. ssin (634) y M. nisoplie (137), seis d.p.i., en diferentes concentrciones de Nimkol-L diciondo en l superficie del medio de cultivo PDA (26 ±,ºC, HR 7 ±, fotofse de 12 h). Cundo el producto fue diciondo en l superficie del medio de cultivo, ls concentrciones evluds fueron menores y, por lo tnto, el efecto negtivo sore el crecimiento vegettivo fue tmién menor (Fig. 2). Pr ls dos ceps evluds en mos métodos de contcto con el producto, huo respuest negtiv en función de l concentrción del Nimkol-L, como lo indicn ls ecuciones de regresión. El efecto inhiitorio en el crecimiento de ls colonis fue myor cundo el producto fue incorpordo l medio de cultivo, en función del contcto de los hongos con un myor cntidd de Nimkol-L. El Nimkol-L fectó negtivmente l conidiogénesis de ms ceps evluds. El efecto fue evidente cundo el producto se incorporó l medio de cultivo pr los hongos. Ls ecuciones de regresión polinomil de segundo grdo no presentron uen juste con ls curvs de inhiición encontrds, y se encontró un mejor juste con ecuciones logrítmics. L cción inhiitori del Nimkol-L fue lt en l concentrción de 3,68% de i.. y totl en l concentrción de 18,4% de i.., pr ms ceps (Fig. 3). Cundo el extrcto fue diciondo l superficie del medio de cultivo y los entomoptógenos estuvieron en contcto con un menor concentrción del producto, l cción negtiv sore l producción de conidios fue menor (Fig. 4). L ecución de regresión de segundo grdo presentó uen juste tnto pr M. nisoplie como pr B. ssin. Del nálisis gráfico de ls curvs de respuest, puede oservrse un tendenci un myor cción inhiitori del Nimkol-L sore l cep 137 de M. nisoplie que sore l cep 634 de B. ssin. En ensyos de lortorio, Agud et l. (1986) determinron reducción en l producción de conidios de M. nisoplie en contcto con ceite de nim en concentrciones de % o superiores. El ceite de nim es usdo, en plicciones de cmpo o invernáculo, en 41

5 Mnejo Integrdo de Plgs y Agroecologí (Cost Ric) No. 69, 23 7 Nº CONIDIOS x 1 Nº CONiDOS x B. ssin cep 634 lny = 3,9 -,28x +,6x 2 R 2 =, M. nisoplie cep 137 lny = 3, -,6x +,6x 2 R 2 =, Figur 3. Conidios por coloni (x1 7 ) de B. ssin (634) y M. nisoplie (137), cinco d.p.i., en diferentes concentrciones de Nimkol-L diciondo l medio de cultivo PDA (26 ±,ºC, HR 7 ±, fotofse de 12 h). concentrción de hst 1,84% de i.. (1 84 ppm). De est form, l cep 137 de M. nisoplie fue más sensile l cción tóxic del Nimkol-L. Los presentes resultdos difieren de los reltdos por Hirose et l. (21), quienes estudiron el efecto in vitro del ceite de nim, en concentrción de 2%, sore ls ceps CG 22 de B. ssin (Emrp - Cenrgen) y CB 38 de M. nisoplie (Instituto Biológico de Cmpins). Los utores consttron menor diámetro de ls colonis y menor producción de conidios de B. ssin CG 22 (-36,62% y -84,93%, respectivmente) que de M. nisoplie CB 38 (-36,87% y -4,3%, respectivmente). Con respecto l inhiición in vitro de esos entomoptógenos con seis fungicids, Tedders (1981) indicó que el zufre y el zine no inhiieron el crecimiento de ls colonis de B. ssin en tods ls concentrciones prods, e inhiieron el crecimiento de M. nisoplie en l myor concentrción. Por el contrrio, el enomil inhiió más el crecimiento de B. ssin que de M. nisoplie. Los resultdos suryn l importnci de evlur l comptiilidd de los productos en form conjunt, B. ssin cep 634 concentrciones de entre, y 2% (Schmutterer 1997). Vys et l. (1992), por otro ldo, no detectron efectos negtivos del extrcto comercil de nim Neemrk (derivdo del ceite de nim, con,4 -,% de zdirctin) sore el crecimiento de M. nisoplie vr. nisoplie y B. rowngnirtii. CONIDIOS x y = 1,2x1 9 - (2,)1 8 x +(3,2)1 7 x 2 R 2 =, Clsificción de l toxicidd de Nimkol-L pr los hongos entomoptógenos L clsificción del Nimkol-L en relción con su comptiilidd con ls ceps dependió de l concentrción del producto, de cuerdo con el modelo T (Cudro 1). Independientemente del método de incorporción del Nimkol-L l medio de cultivo, l comptiilidd del producto con ls ceps evluds disminuyó con el umento de l concentrción. Hst l concentrción de 1% de i.. (1 ppm), el producto fue comptile con ms ceps. Sin emrgo, el Nimkol-L presentó myor comptiilidd con l cep 634 de B. ssin que con l cep 137 de M. nisoplie, siendo comptile con l primer en CONIDIOS x M. nisoplie cep 137 y = 3,4x1 8 - (1,3)1 8 x +(1,7)1 7 x 2 R 2 =, Figur 4. Conidios por coloni de B. ssin (634) y M. nisoplie (137), seis d.p.i., en diferentes concentrciones de Nimkol-L diciondo en l superficie del medio de cultivo PDA (26 ±,ºC, HR 7 ±, fotofse de 12 h). 42

6 Mnejo Integrdo de Plgs y Agroecologí (Cost Ric) No. 69, 23 Cudro 1. Clsificción de l comptiilidd del Nimkol-L con B. ssin (634) y M. nisoplie (137) en ls concentrciones utilizds. Modelo T pr clsificción del Nimkol-L, incorpordo l promedio PDA M. nisoplie B. ssinn 1, - 1, -, ,8 1 C 2 71,8 C 1, ,3 T 64, C 3, ,8 MT 27,9 MT 18,4 18 4, MT, MT Modelo T pr clsificción del Nimkol-L, diciondo l promedio PDA M. nisoplie B. ssinn T 1, - 1, -,2 2 97,6 C 97,6 C, 71,2 C 72,2 C , C 77,9 C 43,6 T 44,7 T 1 Modelo T 2 C = comptile; T = tóxico; MT = muy tóxico. y que puede vrir en función de l especie y cep del entomoptógeno utilizdo, sí como del ingrediente ctivo y l formulción del plguicid. Germinción de conidios El Nimkol-L fectó l germinción de los conidios de ms ceps sólo en l máxim concentrción evlud (% i..). Los conidios germinron de form similr en contcto con gu destild y con ls concentrciones menores (,2 1% i..) del producto (Fig. ). Los resultdos de inhiición de l germinción de los conidios concuerdn con los resultdos de crecimiento de colonis y número de conidios por coloni, los cules evidenciron un inhiición del crecimiento de los entomoptógenos cundo l myor concentrción del producto fue incorpord en el medio de cultivo donde los hongos fueron inoculdos (Figs. 1 y 3). Sin emrgo, l concentrción utilizd en est situción fue superior (18,4%). El efecto inhiitorio del Nimkol-L sore l germinción de los conidios, en l concentrción de % i.., fue myor que su efecto negtivo sore el crecimiento vegettivo y l conidiogénesis cundo el producto fue diciondo en es concentrción en l superficie del medio de cultivo sólido. L cción fungicid de extrctos y derivdos de nim h sido indicd pr hongos fitoptógenos % B. ssin cep 634 y = 9,98 +2,8x -4,x 2 R 2 =, % M. nisoplie cep 137 y = 86,62 -,98x -3,2x 2 R 2 =, % i.. NIMKOL-L % i.. NIMKOL-L Figur. Germinción (%) de conidios de B. ssin (634) y M. nisoplie (137), 24 h después de un hor de contcto con diferentes concentrciones de Nimkol-L (26 ±,ºC, HR 7 ±, fotofse de 12 h). 43

7 Mnejo Integrdo de Plgs y Agroecologí (Cost Ric) No. 69, 23 (Gringe y Ahmed 1988) sí como pr hongos entomoptógenos (Agud et l. 1986). Sin emrgo, l usenci de inhiición de l germinción de los conidios por el producto en ls concentrciones menores indic l posiilidd de uso socido del Nimkol-L con ls ceps evluds, siempre que no se supere l concentrción comptile. Hirose et l. (21) determinron l cción inhiitori del ceite de nim (2%) sore l germinción de los conidios de B. ssin CG 22 (-4,72%) y de M. nisoplie CB 38 (-17,42%). Los resultdos del presente trjo son similres los otenidos por Rodríguez et l. (1997) con extrcto cuoso de semills de nim, comptile con B. ssin en concentrciones de,; 1, y 2,% pr germinción de los conidios. Sin emrgo, contrrimente lo oservdo con el crecimiento del micelio del entomoptógeno en este trjo (Figs. 1 y 3), dichos utores no detectron efecto negtivo del extrcto en concentrciones de hst un %. En conclusión, l cep 634 de B. ssin es menos sensile l Nimkol-L que l cep 137 de M. nisoplie. In vitro, el Nimkol-L es comptile con M. nisoplie (137) hst 1% i.. y con B. ssin hst 1,84% i.. En concentrciones de % i.. o myores, el Nimkol-L reduce significtivmente el crecimiento vegettivo, l conidiogénesis y l germinción de los conidios de M. nisoplie (137) y B. ssin (634). Agrdecimientos Al PEC/PG, por l Bec de Estudio del primer utor; l iólog Solnge Aprecid Vieir, técnic del Lortorio de Ptologí de Insectos (Deprtmento de Entomologi, Fitoptologi e Zoologi Agrícol, ESALQ/USP), por su contriución l plnificción e instlción de los experimentos; y l Empres Quinr, de Brsil, por el suministro de Nimkol-L. Litertur citd Agud, RM; Romch, MC; Sheprd, BM Effect of neem oil on germintion nd sporultion of the entomogenous fungus Metrhizium nisoplie. Interntionl Rice Reserch Newsletter 11(4):34-3. Alves, SB; Moino Jr., A; Almeid, JEM Produtos fitossnitários e entomoptógenos. In Alves, SB. ed. Controle microino de insetos. 2 ed. Pircic: FEALQ. p Cstiglioni, E; Vendrmim, JD. 23. Evlución de derivdos de meliáces pr el control de Heterotermes tenuis. Mnejo Integrdo de Plgs y Agroecologí 68: Gringe, M; Ahmed, S Hndook of plnts with pestcontrol properties. New York, Wiley. 47 p. Hirose, E; Neves, PMOJ; Zequi, JAC; Mrtins, LH; Perlt, CH; Moino Jr, A. 21. Effect of iofertilizers nd neem oil on the enthomoptogenic fungi Beuveri ssin (Bls.) Vuill. nd Metrhizium nisople (Metsch.) Sorok. Tecpr, Curiti, BR. Brzilin Archives of Biology nd Technology 44(4): Mcedo, N; Botelho, PSM; Cmpos, MBS Cupins: grnde prg dos cnviis, 1. Cupins em cn-de-çúcr: qundo e como controlr. Álcool & Açúcr (78): Mrtius, C Perspectivs do controle iológico de cupins (Insect, Isopter). Revist Brsileir de Entomologi 41(2/4): Moino Júnior, A Ftores que fetm eficiênci de Beuveri ssin e Metrhizium nisoplie no controle de Heterotermes tenuis (Isopter, Rhinotermitide). Thesis Ph. D. Pircic, BR. Escol Superior de Agricultur "Luiz de Queiroz", Universidde de São Pulo. 133 p. Neves, PMOJ; Hirose, N; Tchujo, PT; Moino Júnior, A. 21. Comptiility of entomopthogenic fungi with neonicotinoid insecticides. Neotropicl Entomology 3(2): Pizno, MA Controle de cupins de cn-de-çúcr. In Berti Filho, E; Fontes, LR. eds. Alguns spectos tuis d iologi e controle de cupins. Pircic, FEALQ. p Rodríguez, LDA; Lguns, TA; Riestr, DD; Rodríguez, MC; Velázquez MJ; Becerril RE; Rodríguez CS; Pcheco VE Comptiilidd de Beuveri ssin y extrctos cuosos de nim (Azdircht indic) pr el control de l roc del cfeto (Hypothenemus hmpei). Mnejo Integrdo de Plgs 44: Schmutterer, H Side-effects of neem (Azdircht indic) products on insect pthogens nd nturl enemies of spider mites nd insects. Journl of Applied Entomology 121(2): Tedders, WL In vitro inhiition of the entomopthogenic fungi Beuveri ssin nd Metrhizium nisoplie y six fungicides used in pecn culture. Environmentl Entomolgy 1: Vys, RV; Jni, JJ; Yd, DN Effect of some nturl pesticides on entomogenous muscrdine fungus. Indin Journl of Experimentl Biology 3: