Estrella Martín Mazuelos UNIDAD CLÍNICA DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y MICROBIOLOGÍA (UCEIM)

Transcripción

1 MANUAL DE TOMA DE Página 1 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 UNIDAD CLÍNICA DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y MICROBIOLOGÍA () MANUAL DE TOMA DE MUESTRAS MODIFICACIONES RESPECTO A LA EDICIÓN ANTERIOR Primera edición Próxima revisión Mayo 2012.

2 MANUAL DE TOMA DE Página 2 de 112 Fecha 30/JUNIO/ NORMAS GENERALES DE RECOGIDA DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO 1.1. IDENTIFICACIÓN INEQUÍVOCA DEL PACIENTE 1.2. IDENTIFICACIÓN BIUNÍVOCA DE MUESTRAS/PACIENTES 2. ORINA 2.1. ORINA RECOGIDA POR MICCIÓN LIMPIA 2.2. ORINA RECOGIDA MEDIANTE CATETERISMO 2.3. ORINA RECOGIDA POR PUNCIÓN SUPRAPÚBICA 2.4. ENFERMOS CON SONDA URETRAL PERMANENTE 3. MUESTRAS APARATO GENITAL FEMENINO 3.1. EXUDADO VAGINAL 3.2. EXUDADO CERVICAL 3.3. EXUDADO VAGINAL/RECTAL 4. COPROCULTIVOS 5. SECCION DE GENERALES 5.1. TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR EXUDADOS NASOFARINGEOS EPIGLOTIS OROFARINGE 5.2. TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR ESPUTO ESPONTÁNEO ESPUTO INDUCIDO 2

3 MANUAL DE TOMA DE Página 3 de 112 Fecha 30/JUNIO/ ASPIRADO BRONQUIAL LAVADO BRONCOALVEOLAR MUESTRAS INVASIVAS PUNCIÓN TRANSTRAQUEAL (ATT) CEPILLO TELESCÓPICO OCLUIDO (CTO) PUNCIÓN ASPIRADO PULMONAR (PAP) BIOPSIA PULMONAR 5.3. INFECCION ASOCIADA A CATETER 5.4. LIQUIDOS BIOLÓGICOS 5.5. MUESTRAS DE PARTES BLANDAS HERIDAS, ÚLCERAS, EXUDADOS DE PIEL EXUDADO NASAL EXUDADO UMBILICAL HERIDAS SUPERFICIALES Y ABSCESOS ABIERTOS HERIDA QUIRURGICA ABSCESOS TEJIDOS QUEMADURAS DRENAJES 5.6. MUESTRAS OCULARES EXUDADO CONJUNTIVAL RASPADOS CORNEALES LENTE DE CONTACTO 5.7. EXUDADO ÓTICO OIDO MEDIO 3

4 MANUAL DE TOMA DE Página 4 de 112 Fecha 30/JUNIO/ OIDO EXTERNO 5.8. SENOS NASALES 5.9. MUESTRAS DE ETS EXUDADO URETRAL SEMEN ENDOMETRIO EXUDADO PROSTÁTICO 6. HEMOCULTIVOS 7. LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO (LCR) 8. HONGOS 8.1. PELOS 8.2. UÑAS 8.3. PIEL LAMPIÑA 8.4. ESPACIOS INTERDIGITALES 8.5. LESIONES DE PITIRIASIS VERSICOLOR 8.6. PUS, EXUDADOS Y DRENAJES 8.7. MUESTRAS OCULARES EXUDADO CONJUNTIVAL Y EXUDADO LACRIMAL RASPADO CORNEAL FLUIDOS Y ASPIRADOS OCULARES LENTES DE CONTACTO 4

5 MANUAL DE TOMA DE Página 5 de 112 Fecha 30/JUNIO/ MUESTRAS RESPIRATORIAS 8.9. HECES LÍQUIDOS ESTÉRILES (L.C.R., PLEURALES, PERITONEALES..) ORINA BIOPSIA SANGRE OTRAS 9. MICOBACTERIAS 10. PARASITOS HECES TÉCNICA DE GRAHAM OTRAS MUESTRAS 11. SEROLOGÍA SUERO HECES ORINA NASOFARINGEO LCR 12. BIOLOGÍA MOLECULAR SUERO SANGRE TOTAL MUESTRAS PARA ESTUDIO DE CHLAMYDIA Y GONOCOCO 5

6 MANUAL DE TOMA DE Página 6 de 112 Fecha 30/JUNIO/ EXUDADO URETRAL EXUDADO CERVICAL EXUDADO RECTAL ORINA MUESTRAS PARA LA DETECCIÓN DE VIRUS HERPES SIMPLE I Y II MUESTRAS PARA ESTUDIO DE HPV (VIRUS DEL PAPILOMA HUMANO) MUESTRAS PARA ESTUDIO DE GRIPE A (H1N1) 13. RECIPIENTES PARA TOMA DE MUESTRAS DE MICROBIOLOGÍA 6

7 MANUAL DE TOMA DE Página 7 de 112 Fecha 30/JUNIO/ NORMAS GENERALES DE RECOGIDA DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO 1.- Es responsabilidad del médico asegurar una correcta recogida y envío en condiciones adecuadas de las muestras, funciones que no deben ser delegadas en personal no cualificado. 2.- El personal deberá observar las más rigurosas normas de asepsia, según el tipo de muestra (guantes estériles, mascarillas...). 3.- La muestra deberá ser representativa del proceso. 4.- Se debe recoger una cantidad suficiente para asegurar un examen adecuado. 5.- Se deberá evitar contaminar la muestra con la flora normal ya sea del propio paciente o bien del personal que manipule la muestra. 6.- Se tomará la muestra antes de instaurar tratamiento antibiótico. Si éste se ha iniciado sería aconsejable que se haga constar en la petición -Antibióticos administrados. -Tiempo de tratamiento. -Tiempo transcurrido desde la última dosis y la recogida de la muestra. 7.- Las muestras se tomarán con dispositivos estériles y se colocarán en recipientes adecuados estériles y herméticos para su transporte al laboratorio. Todos estos recipientes hay que protegerlos para que no se rompan en el camino al laboratorio 9.- El transporte debe realizarse lo antes posible. Si se ha de producir inevitablemente un retraso en el envío, la muestra deberá almacenarse en las condiciones correctas para cada caso que más adelante se concretan. 7

8 MANUAL DE TOMA DE Página 8 de 112 Fecha 30/JUNIO/ IDENTIFICACIÓN INEQUÍVOCA DE PACIENTES En el momento de la recepción del paciente y antes de la administración de atención, se aplicarán medidas para verificar la identificación inequívoca de la persona, comprobando siempre la correspondencia entre la solicitud y la muestra y/o técnica solicitada. Se solicitará al paciente y/o familiar el DNI, o en su defecto cualquier documento oficial acreditativo, carnet de conducir, Pasaporte, tarjeta Sanitaria... Si el paciente no aportase ninguno de estos documentos se emplearán al menos, dos identificadores para verificar la identidad del paciente nombre y fecha de nacimiento. Se el preguntará al paciente el nombre completo, incluidos los apellidos y la fecha de nacimiento. Se cotejará con el volante. Nunca se le afirmará el nombre escrito en el volante. En todo momento, se procederá de forma individual y personificada, nunca se realizará en público. En el supuesto caso de que los datos del paciente no correspondan a los de la solicitud analítica, se interrumpirá el proceso, informándole del error. El profesional de Enfermería, bajo ningún concepto, corregirá el nombre. En el supuesto caso de que hubiese que realizar alguna corrección, deberá realizarlo 8

9 MANUAL DE TOMA DE Página 9 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 el paciente o acompañante y siempre serán informados de la importancia de la misma Información al paciente y/o familiar Se informará de forma clara y precisa del estudio a realizar, riesgos, beneficios y alternativas con actitud facilitadora, respondiendo a sus demandas de información y expectativas. Se llevarán a cabo medidas generales de higiene de manos y uso correcto de guantes antes y después de la realización de pruebas diagnósticas y extracción de muestras Más información puede hallar en Soluciones para la seguridad del paciente. Volumen 1, solución 2. Joint Comisión Internacional. World Health Organization. Mayo IDENTIFICACIÓN BIUNÍVOCA DE MUESTRAS/PACIENTES Las muestras deben ir acompañadas obligatoriamente del volante de petición para Microbiología. El volante de petición consiste en unas hojas grafitadas con unos códigos de barras que permiten su lectura automática por un lector. En cada hoja vienen en el reverso las instrucciones para rellenarlos correctamente. Se dispone de 5 modelos de volantes de petición -Laboratorio de microbiología muestras extrahospitalarias. -Laboratorio de microbiología-hospitalaria muestras intrahospitalarias y de urgencias. 9

10 MANUAL DE TOMA DE Página 10 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 -Serología. -Serología-Hospitalaria. -Biología molecular. En el volante, deben hacerse constar los siguientes datos (pueden venir en una etiqueta identificativa) -Datos del paciente PEGATINA IDENTIFICATIVA con código de barra con los siguientes datos -Nombre y apellidos Imprescindible -Número de historia clínica -Número NUHSSA Imprescindible -Fecha de nacimiento -Sexo -Datos clínicos aconsejables -Orientación diagnóstica -Tratamiento antimicrobiano -Enfermedades de base importantes -Antecedentes de cultivos anteriores -Datos de identificación del solicitante / Localización -Clave médica(volantes extrahospitalarios). Imprescindible -Clave del solicitante (volantes hospitalarios). -Tipo de muestra Imprescindible -Prueba solicitada Imprescindible 10

11 MANUAL DE TOMA DE Página 11 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Para garantizar de forma inequívoca la identificación de la muestra de un paciente se deberá seguir alguno de los siguientes procedimientos Pegar la pegatina identificativa con los datos demográficos en el envase o bien enumerar la muestra y el volante, preferiblemente utilizando las etiquetas con código de barras. Este mismo número es el que se utilizará en el laboratorio durante todo el proceso. 2. ORINA La orina es un buen medio de cultivo, por tanto las muestras, que no se mantengan en tubos con conservante, deben ser enviadas rápidamente al laboratorio. El almacenamiento de más de 2 horas debe realizarse en el frigorífico o en hielo picado. Al laboratorio se debe enviar muestra suficiente para hacer el estudio microbiológico solicitado 1-10 ml. Para bacteriología en general 10 ml. Para TBC. 10 ml. Para hongos. Indicar en el volante si el enfermo está sometido a diuresis forzada, esta tomando antibióticos u cualquier otra información importante para la valoración del cultivo. 11

12 MANUAL DE TOMA DE Página 12 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TÉCNICA DE RECOGIDA Debido a que la uretra distal, tanto del hombre como de la mujer poseen microflora comensal, es muy importante que la orina se recoja siguiendo una serie de normas. La orina es un medio de cultivo excelente, por tanto las muestras deben ser enviadas rápidamente al laboratorio. El almacenamiento a temperatura ambiental durante más de 1 hora puede invalidar los resultados por lo que el almacenamiento debe hacerse en el frigorífico o bien utilizar un tubo con conservante. Existen varias maneras de obtener una muestra de orina Micción limpia. Punción suprapúbica. Cateterización. Sin embargo, hay ciertas muestras que no se pueden aceptar para su cultivo - Orina procedente de cuñas y bolsas de sondajes. - Orinas diluidas. - Orinas en situaciones de diuresis forzada. - Orinas centrifugadas. - Pool de orina de 24 h. Solo es aceptable para el estudio de parásitos Schistosoma haematobium, microfilarias de Onchocerca volvulos y Trichomonas vaginalis en hombres 12

13 MANUAL DE TOMA DE Página 13 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 La orina obtenida por micción limpia, es el método que se utilizará de preferencia siguiendo las pautas que a continuación se describen ORINA RECOGIDA POR MICCIÓN LIMPIA MUJER RECIPIENTE Envase estéril de boca ancha y cierre de tapón de rosca más un tubo adjunto de tapón color caqui (contiene conservante). No abrir el bote de boca ancha hasta el momento de la recogida de la muestra. El tubo, no abrirlo nunca. MOMENTO DE LA RECOGIDA Es preferible la primera orina de la mañana o la obtenida al menos 3 horas después de la última micción. TÉCNICA DE RECOGIDA Lavarse las manos Lavarse los genitales con agua corriente y jabón normal. Si utiliza bidé, no colocar el tapón, para que el lavado sea con el chorro de agua. 13

14 MANUAL DE TOMA DE Página 14 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Lavarse de delante hacia atrás, para evitar la contaminación anal. Aclarar con abundante agua. Sepárese los bordes genitales con una mano y con la otra tome el frasco de boca ancha abierto. Desechar el primer chorro en el retrete. El segundo chorro recójalo en el frasco de boca ancha, y desechar el último. Cerrar el frasco inmediatamente, sin tocar los bordes ni el interior. Quitar la etiqueta amarilla o pegatina del tapón del frasco, invertir el tubo que le acompaña en el orificio de tapón y esperar que este se llene mediante vacío. Mover el tubo varias veces para que se mezcle la orina con el producto que está en el fondo del tubo. El frasco grande se tira a la basura y el tubo se mantiene en el frigorífico de casa hasta que lo lleve a su ambulatorio o centro de salud, lo antes posible. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Si se demora el envío, siempre menor a 24 horas se conservará a 2-8ºC 14

15 MANUAL DE TOMA DE Página 15 de 112 Fecha 30/JUNIO/ HOMBRE RECIPIENTE Envase estéril de boca ancha y cierre de tapón de rosca más un tubo adjunto de tapón color caqui (contiene conservante). No abrir el bote de boca ancha hasta el momento de la recogida de muestra. El tubo, no abrirlo nunca. MOMENTO DE LA RECOGIDA Es preferible la primera orina de la mañana o la obtenida al menos 3 horas después de la última micción. TÉCNICA DE RECOGIDA Lavarse las manos. Lavarse los genitales, para ello retirar el prepucio y limpiar el glande, con agua corriente y jabón normal. Si utiliza bidé, no colocar el tapón, para que el lavado sea con el chorro de agua. Aclarar con abundante agua. Desechar el primer chorro en el retrete. El segundo chorro recójalo en el frasco de boca ancha, y desechar el último. Cerrar el frasco inmediatamente, sin tocar los bordes ni el interior. 15

16 MANUAL DE TOMA DE Página 16 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Quitar la etiqueta amarilla o pegatina del tapón del frasco, invertir el tubo que le acompaña en el orificio del tapón y esperar que este se llene mediante vacío. - Mover el tubo varias veces para que se mezcle la orina con el producto que está en el fondo del tubo. - El frasco grande se tira a la basura y el tubo se mantiene en el frigorífico de casa hasta que lo lleve a su ambulatorio o centro de salud, lo antes posible. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Si se demora el envío, siempre menor a 24 horas, se conservará a 2-8ºC NIÑO RECIPIENTE Bolsa estéril especial. TÉCNICA DE RECOGIDA 16

17 MANUAL DE TOMA DE Página 17 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Lavar los genitales con agua y gasa estéril. Secar con otra gasa estéril. Colocar la bolsa estéril, de forma que se manipule lo menos posible. Vigilar la salida de la orina. Si pasan 30 minutos sin que el niño haya orinado, se le retirará la bolsa, se le vuelve a lavar y se le pone una nueva. Este proceso hay que realizarlo tantas veces como sean necesarias hasta obtener la muestra. Introducir la bolsa en un frasco estéril de boca ancha. Mantener en el frigorífico de casa hasta que se entregue lo antes posible en su ambulatorio o centro de salud. La recogida de muestra de orina en niños requiere de una mayor manipulación por lo que es frecuente que la orina se contamine. Aconsejamos que cuando un primer cultivo se contamine traigan al niño al laboratorio de Microbiología del Hospital de Valme, para que se le realice la toma de la muestra de orina. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN Las muestras se recepcionarán inmediatamente tras su recogida ORINA RECOGIDA MEDIANTE CATETERISMO 17

18 MANUAL DE TOMA DE Página 18 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Esta técnica no debe usarse normalmente por el peligro de introducir bacterias al insertar el catéter, empleándose sólo en enfermos que no pueden orinar espontáneamente, inmovilizados y en casos de debilidad pronunciada. No se realizará nunca en embarazadas. Si se realiza, se seguirán normas que garanticen la máxima asepsia ORINA RECOGIDA POR PUNCIÓN SUPRAPÚBICA En casos especiales y pacientes en que el cateterismo está contraindicado y, a veces, en recién nacidos. y niños pequeños, éste será el método de elección para la recogida. Si se sospecha una bacteriuria por anaerobios la aspiración suprapúbica es el único camino adecuado para establecer el diagnóstico; en tales casos expulsar el aire de la jeringuilla e inyectar en el vial para anaerobios. RECIPIENTE Tubo con cierre hermético (vial para anaerobios) ENFERMOS CON SONDA URETRAL PERMANENTE - En pacientes con catéter uretral permanente la orina debe obtenerse por aspiración directa con aguja y jeringa a través de una zona desinfectada de la pared de la sonda 1- Limpiar el extremo distal del catéter con alcohol. 2- Con jeringa de 3 ml. introducir la aguja en el catéter. 18

19 MANUAL DE TOMA DE Página 19 de 112 Fecha 30/JUNIO/ Aspirar 1-2 ml. de orina. Si no pudiera obtenerse orina a partir de este punto, levantar cuidadosamente el tubo y hacer refluir una pequeña cantidad de orina desde la parte baja del mismo, pero teniendo cuidado de no forzar el retorno de la orina a la vejiga. - - No debe recogerse la orina de la bolsa de drenaje nunca se sembrarán puntas de sonda. 3. MUESTRAS APARATO GENITAL FEMENINO 3.1.EXUDADO VAGINAL RECIPIENTE Hisopo estéril con medio de transporte de Amies. TÉCNICA Es preferible que la toma sea realizada por un ginecólogo que por observación directa obtendrá muestras del fondo de saco vaginal posterior y del canal endocervical después de retirar el tapón de moco cervical. La paciente no debe tomar antibióticos, ni utilizar soluciones antisépticas vaginales, óvulos ni pomadas en los días previos a la recolección de la muestra. No debe mantener relaciones sexuales 48 horas antes de la toma de muestra. 19

20 MANUAL DE TOMA DE Página 20 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Si se demora el envío, siempre menor a 24 horas, se conservará a 2-8ºC 3.2.EXUDADO CERVICAL Cuando se sospeche la infección por Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Micoplasma hominis o Ureaplasma urealtycum, deberá enviarse muestra endocervical. cervicitis. Esta muestra se utiliza para el diagnóstico etiológico en caso de MATERIAL NECESARIO - Camilla ginecológica. - Espéculo estéril. - Torundas para limpieza. - Hisopos de con medio de transporte de Amies. 20

21 MANUAL DE TOMA DE Página 21 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TÉCNICA -Con la paciente en posición ginecológica introducir suavemente el espéculo sin lubricar (o lubricado con agua tibia). -Limpiar el exocérvix de secreciones vaginales, con una torunda seca. -Bajo visión directa comprimir cuidadosamente el cérvix con palas del espéculo y introducir un hisopo en el canal endocervidal con un suave movimiento de rotación. -Repetir la operación con el segundo hisopo. -Para investigación de Chlamydia se recogerá una torunda con medio de transporte específico (ver apartado 12.3). TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Si se demora el envío, siempre menor a 24 horas, se conservará a 2-8ºC OBSERVACIONES 21

22 MANUAL DE TOMA DE Página 22 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Debe evitarse el uso de torundas de algodón ya que contienen ácidos grasos instaurados que pueden inhibir el crecimiento de Neisseria gonorrhoeae. 3.3.EXUDADO VAGINAL/RECTAL RECIPIENTE Hisopo estéril con medio de transporte de Amies. TÉCNICA Hacer toma de exudado vaginal y hacer acto seguido con la misma torunda un exudado rectal. IMPORTANTE nunca hacerlo a la inversa. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Si se demora el envío, siempre menor a 24 horas, se conservará a 2-8ºC 22

23 MANUAL DE TOMA DE Página 23 de 112 Fecha 30/JUNIO/ COPROCULTIVO RECIPIENTE Envase estéril de plástico de boca ancha. TECNICA - Directa Recoger con espátula 2-5 gr. de heces recién defecadas, seleccionando las zonas que contengan moco, pus, sangre, restos de mucosa, etc. Si las heces son líquidas. Recoger 5-10 ml de muestra recién emitida directamente en el frasco estéril. - Mediante escobillón Este método deberá evitarse siempre que sea posible. Introducir el escobillón más allá del esfínter anal, haciéndolo girar de derecha a izquierda suave y repetidamente, retirándolo a continuación e introducir en su envase. TRANSPORTE Remitir la muestra al laboratorio, sobre todo si las heces son líquidas, a la mayor brevedad (<=2 horas) a temperatura ambiente, las muestras extrahospitalarias (<=24 horas) a 2-8ºC. 5. SECCION DE GENERALES 23

24 MANUAL DE TOMA DE Página 24 de 112 Fecha 30/JUNIO/ TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR Lo más importante es diferenciar entre flora endógena normal y los microorganismos responsables de la enfermedad. El mero aislamiento de un patógeno o posible patógeno no indica necesariamente que está implicado en el desarrollo de la enfermedad. Ej. S.pneumoniae EXUDADOS NASOFARINGEOS RECIPIENTE Escobillón especial con mango de hilo de alambre flexible e hisopo con medio de TRANSPORTE de Amies. TECNICA Humedecer 2 torundas con suero fisiológico estéril. Una para cada fosa nasal. Introducir cuidadosamente, salvando las fosas nasales externas, hasta la nasofaringe. Retirar con cuidado y colocar en su recipiente. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN 24

25 MANUAL DE TOMA DE Página 25 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC EPIGLOTIS RECIPIENTE Hisopo con medio de transporte de Amies. TÉCNICA - Deprimir la lengua con depresor o cuchara lo que permitirá la visualización directa de la zona afectada y evitará que el escobillón entre en contacto con la lengua. - Frotar y exprimir con el escobillón la zona afectada. - Colocar el escobillón en su envase y remitir al laboratorio a la mayor brevedad. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN 25

26 MANUAL DE TOMA DE Página 26 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC OROFARINGE RECIPIENTE Hisopo con medio de transporte de Amies. TÉCNICA - Deprimir la lengua con depresor o cuchara lo que permitirá la visualización directa de la zona afectada y evitará que el escobillón entre en contacto con la lengua. - Frotar y exprimir con el escobillón la zona afectada. - Colocar el escobillón en su envase y remitir al laboratorio a la mayor brevedad. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN 26

27 MANUAL DE TOMA DE Página 27 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR Pueden tomarse las muestras de distintas formas más o menos cruentas, desde el simple esputo espontáneo hasta la biopsia abierta de pulmón ESPUTO ESPONTÁNEO Suelen ser poco adecuadas para el cultivo y pueden dar resultados falsos debido a la contaminación por el paso de boca; por ello procesaremos sólo aquellos que con tinción de Gram o Azul de metileno tienen menos de 25 células epiteliales con el objetivo x10. Si el esputo es de mala calidad se informará como muestra de mala calidad, no representativa de las vías respiratorias bajas. 27

28 MANUAL DE TOMA DE Página 28 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Si se siguen las normas que a continuación se exponen, puede mejorar la calidad de las muestras recibidas, pero aún así, el porcentaje de muestras contaminadas con saliva y flora orofaríngea, y por lo tanto absolutamente inadecuadas para su procesamiento, seguirá siendo muy alto. RECIPIENTE Frascos estériles de boca ancha con tapón de rosca. TÉCNICA Debe obtenerse un esputo fresco, correspondiente a la primera expectoración de la mañana, tras haber realizado el paciente un cuidadoso enjuague de la boca y gárgaras a ser posible con suero fisiológico estéril o agua destilada estéril, y si no es posible, con agua corriente. Nunca usar para ello antisépticos. En pacientes que no expectoran con facilidad puede resultar útil colocarlos en una postura cómoda, tendidos boca abajo y con los hombros y la cabeza más bajos que el resto del cuerpo, durante 10 minutos, de modo que las secreciones se vayan acumulando hacia la laringe y puedan salir en un golpe de tos, o bien la estimulación con aerosoles irritantes (Solución salina hipertónica, no siendo válidos los vapores de glicol por ser bactericidas). con tapón. Una vez obtenida la muestra se colocará en frasco estéril de boca ancha 28

29 MANUAL DE TOMA DE Página 29 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC ESPUTO INDUCIDO Es muy útil para el diagnostico de micobacterias, visualización de Pneumocystis jiroveci y otros hongos. - Haga que el paciente se enjuague la boca con agua. - Con ayuda de un nebulizador, haga que el paciente inhale 25 ml de solución salina estéril al 3-10%. - Recoja el esputo inducido en un envase estéril ASPIRADO BRONQUIAL Es un método más aceptable para obtener muestras de secreciones traqueobronquiales, y el riesgo de contaminación es menor, si se realiza con 29

30 MANUAL DE TOMA DE Página 30 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 buenas medidas de antisepsia del instrumental y enjuague antiséptico previo de la boca y la garganta del paciente antes de la exploración. Además, cuando se practica durante una broncoscopia, permite obtener la muestra bajo visualización directa de la zona donde se localiza el proceso infeccioso. Recogida de secreciones respiratorias a través de fibrobroncoscopio, pudiendo introducirse de 3 a 5 ml de suero fisiológico previo a la aspiración. Con menor grado de contaminación que el esputo. RECIPIENTE Tubo estéril con tapón LAVADO BRONCOALVEOLAR El mayor problema con el lavado bronquial, es la inhibición de las bacterias por la solución anestésica. El lavado broncoalveolar es preferido especialmente cuando el cultivo de esputo no ha sido satisfactorio. Indicado especialmente en procesos pulmonares intersticiales. (Neumonía en pacientes en asistencia respiratoria mecánica). De escasas complicaciones, pero no obvia la contaminación orofaríngea cuyo problema puede disminuirse si se inserta un tubo endotraqueal para pasar el broncoscopio. 30

31 MANUAL DE TOMA DE Página 31 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 El análisis cuantitativo de la muestra por lavado, es clínicamente mas relevante que el análisis de la muestra de esputo. TÉCNICA Lavado de un segmento pulmonar (lóbulo medio o língual) previo anclado del broncoscopio, introduciendo de 20 a 50 ml de suero fisiológico. Los primeros 10 ml que se aspiran se deben descartar MUESTRAS INVASIVAS Se han empleado en los últimos años, sobre todo para el diagnóstico de infección pulmonar en inmunodeprimidos. Presentan un buen rendimiento para el diagnóstico de infección por micobacterias, Pneumocystis carinii y otros hongos, CMV. También son muy útiles para el diagnóstico de la mayoría de las infecciones bacterianas pulmonares como pneumonias, abscesos pulmonares...las muestras invasivas son las únicas que nos permiten estudiar las infecciones pulmonares por anaerobios. Como norma general cualquier microorganismo aislado a partir de estas muestras puede ser valorable PUNCIÓN TRANSTRAQUEAL (ATT) Es una muestra tomada por el especialista. Evita la contaminación orofaríngea, siendo por tanto una muestra apta para el estudio de anaerobios. 31

32 MANUAL DE TOMA DE Página 32 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 RECIPIENTE Medio de transporte para anaerobios. Solo excepcionalmente se admitirá la jeringuilla de la punción CEPILLO TELESCÓPICO OCLUIDO (CTO) Cepillado de la mucosa bronquial del lóbulo afectado a través de un fibrobroncoscopio mediante un cepillo protegido por un doble catéter ocluido distalmente para evitar la contaminación de vías. Al laboratorio llegará en un tubo estéril con 1 ml de solución de Ringer. La punta del cepillo será la muestra a procesar. La muestra colectada vía broncoscopio puede ser fácilmente contaminada con la flora oral. Esto puede reducirse utilizando un broncoscopio de triple lumen PUNCIÓN ASPIRADO PULMONAR (PAP) Es la muestra de elección en caso de neumonía necrotizante, abscesos pulmonares y sospecha de anaerobios. Obtención del exudado de las lesiones pulmonares a través de una punción transtorácica con aguja ultrafina con control radioscópico o ecográfico. Debe aplicarse ante infiltraciones densas (no intersticiales) y sobre todo si son periféricas. 32

33 MANUAL DE TOMA DE Página 33 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Contraindicado en pacientes con bullas, trastornos de coagulación y sospecha de hidatidosis. Posibles complicaciones, como neumotórax y hemoptisis. Es una muestra ideal para estudio en infección anaerobia grave en niños, especialmente en edades tempranas. RECIPIENTE Medio de transporte para anaerobios. Solo excepcionalmente se admitirá la jeringuilla de la punción BIOPSIA PULMONAR En caso de biopsia pulmonar en inmunodeprimidos, el procedimiento es distinto antes de que el tejido sea molido, deben realizarse improntas por toques para diagnosticar Pneumocystis carinii y otros hongos (2 a 4 portas). Para el cultivo una porción del tejido pulmonar se triturará y se emulsionará en una suspensión al 10% en tampón fosfato salino. Las tinciones que se realizaran, así como, los medios de cultivo que se usaran dependerán de la impresión diagnóstica INFECCION ASOCIADA A CATETER 33

34 MANUAL DE TOMA DE Página 34 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 El estudio de catéteres que se realiza en forma rutinaria a nivel del Laboratorio de Microbiología es la técnica semicuantitativa de Maki. Esta técnica permite valorar la contaminación extraluminal del catéter, principal mecanismo por el cual se contaminan los catéteres de corta permanencia y pueden llegar a ser el origen de una bacteriemia. MATERIAL NECESARIO - Guantes estériles. - Gasas estériles. - Pinzas y tijeras estériles. - Recipiente estéril con tapa de rosca. - Alcohol etílico o isopropílico al 70%. - Povidona yodada al 10% OBTENCIÓN DEL PRODUCTO - Desinfectar con alcohol al 70% una zona de piel de unos 10 cm correspondiente a la zona de entrada del catéter. Hacerlo en forma de círculos comenzando por el centro. - Repetir la misma operación, pero con iodóforo, dejando que se seque. - Retirar el catéter con la máxima asepsia. - Ayudándonos de las pinzas y las tijeras estériles, cortar los 5 cm dístales del catéter que corresponden a la porción intravascular. - Introducir el segmento de catéter en un recipiente estéril correctamente identificado. 34

35 MANUAL DE TOMA DE Página 35 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TRANSPORTE La muestra deberá enviarse al laboratorio en un periodo inferior a 30 minutos. Cuando esto no sea posible deberá conservarse a 4 C por 12 horas como máximo LIQUIDOS BIOLÓGICOS Se recogerán con jeringa aspirando; la piel ha de desinfectarse bien con povidona yodada antes de realizar la punción. La técnica ha de ser lo más aséptica posible. Para el transporte se considerará la posible existencia de anaerobios. Dada la pequeña cantidad de microorganismos que existen en estos líquidos, el transporte y procesamiento de los mismos ha de ser lo más rápido posible. La toma de muestra, para la obtención de estos líquidos, es un procedimiento médico que requiere de ciertos cuidados para obtener una muestra adecuada para el examen microbiológico. MATERIAL NECESARIO. - Campos estériles. - Gasas estériles. - Guantes estériles. 35

36 MANUAL DE TOMA DE Página 36 de 112 Fecha 30/JUNIO/ Jeringas y agujas estériles. No se deben utilizar jeringas heparinizadas, pues la heparina lleva conservantes que pueden interferir la viabilidad de los microorganismos. - Povidona yodada al 10%. - Recipientes estériles con tapón de rosca. - Recipientes estériles de boca ancha (ejemplo.el frasco de urocultivo). - Sistemas de transporte de líquidos para estudio de anaerobios. - Alcohol etílico o isopropílico al 70%. - Frascos de hemocultivos. OBTENCIÓN DE LA MUESTRA. Varía dependiendo del líquido corporal que se trate, pero siempre deberá seguirse una técnica rigurosamente aséptica. La muestra se obtiene por punción y se coloca en recipientes adecuados para su envío al laboratorio. Siempre que sea posible evitar el uso de hisopos. -Realizar antisepsia de piel con alcohol, haciendo círculos concéntricos desde el centro hacia la periferia en una zona de unos 10 cm de diámetro. - Repetir el paso anterior con povidona yodada al 10%, dejando secar durante un minuto. En pacientes con hipersensibilidad al yodo, realizar la desinfección con alcohol 70%, dos veces consecutivas. - La toma se hace por punción percutánea (toracocentesis, paracentesis, punción pericárdica o punción articular) de forma aséptica para evitar la contaminación por la flora cutánea o ambiental. 36

37 MANUAL DE TOMA DE Página 37 de 112 Fecha 30/JUNIO/ Una vez realizada la toma se retira la povidona yodada de la piel con un apósito impregnado en alcohol al 70%. - Más raramente se pueden realizar tomas de estas localizaciones en el transcurso de intervenciones quirúrgicas. En esta circunstancia debe desaconsejarse el uso de hisopos, siendo preferible también la aspiración; se utilizarán hisopos sólo si el contenido no puede ser aspirado. VOLUMEN MÍNIMO Para el estudio bacteriano rutinario es suficiente de 1 a 10 ml. Cuando se requiera la investigación de Mycobacterium spp. u hongos se enviará un volumen superior a 10 ml. RECIPIENTE -Vial para transportar anaerobios. -Tubo estéril con cierre hermético. -Frascos de hemocultivos. -Frascos de Hemocultivos Este es un sistema adicional a los anteriores. Está particularmente indicado cuando el envío se puede retrasar o en los líquidos que pueden coagularse. Si se sospecha anaerobios emplear uno adecuado para estas bacterias. Con su uso se ha incrementado el aislamiento bacteriano en peritonitis espontáneas o en las asociadas a diálisis peritoneal ambulatoria crónica. También se recomienda como transporte de líquidos articulares. En ningún caso se aceptaran hisopos embebidos en el líquido. 37

38 MANUAL DE TOMA DE Página 38 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TRANSPORTE Si es necesario evitar la coagulación de algunos de estos líquidos se usará heparina sin conservantes; otros anticoagulantes pueden tener acción antibacteriana. Las muestras deben ser enviadas inmediatamente al laboratorio a temperatura ambiente (tiempo máximo 24 horas). OBSERVACIONES Cuando se utilice una anestesia local, hay que cambiar de jeringa y aguja para hacer la extracción de la muestra, ya que los anestésicos pueden inhibir el crecimiento bacteriano MUESTRAS DE PARTES BLANDAS HERIDAS, ÚLCERAS Y EXUDADOS DE PIEL Siempre que sea posible se obtendrá la muestra con jeringa o aguja a partir de la base de la lesión; cuando sólo se pueda tomar la muestra con torunda se debe hacer de la parte más representativa. En heridas crónicas se obtendrá la muestra en el momento de la cura. En el transporte tener presente la existencia de posibles anaerobios. 38

39 PNT MANUAL DE TOMA DE Página 39 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 El espécimen de elección en el caso de infecciones de piel y partes blandas depende del carácter de la lesión y no de los microorganismos que se sospechen. Para las lesiones abiertas, se debe remover la flora y detritus superficiales antes de recolectar la muestra de los márgenes de avance de la lesión. En caso de lesiones secas o costrosas los cultivos no están recomendados salvo que presenten exudado. En el caso de abscesos cerrados la recolección se realizará con aguja y jeringa de la pared del mismo, previa antisepsia de piel. En el caso de abscesos abiertos se debe decontaminar primero como en el caso de heridas abiertas. Las quemaduras se cultivan luego de una extensa limpieza y debridamiento. Se recomiendan cultivos de biopsia ya que los cultivos superficiales pueden ser poco representativos de lo que sucede en la profundidad del tejido. RECIPIENTE Muestras superficiales torunda con medio de transporte de Amies. Aspirados, tejidos y biopsias tubo estéril o contenedor para anaerobios. 39

40 MANUAL DE TOMA DE Página 40 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TRANSPORTE Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC EXUDADO NASAL Esta muestra solo se utiliza para buscar portadores de S.aureus o en el diagnóstico etiológico de impétigo. No es útil para el diagnóstico etiológico en casos de rinitis, rinosinusitis ni en casos de otitis media ni cuadros respiratorios altos prolongados Recordamos que alrededor del 30% de la población es portadora de este microorganismo a nivel nasofaríngeo por lo cual su hallazgo no tiene habitualmente implicación clínica salvo en situaciones especiales. En el personal de salud sólo se realizará la búsqueda de portadores en el caso de brotes de infecciones en los que no se ha encontrado otra fuente de infección. RECIPIENTE - Hisopo de algodón con medio de transporte. 40

41 MANUAL DE TOMA DE Página 41 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TÉCNICA Tomar muestra profunda de ambas fosas nasales con el mismo hisopo con medio de transporte de Amies. TRANSPORTE Y CONSERVACION Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC EXUDADO UMBILICAL RECIPIENTE Hisopo estéril con medio de transporte de Amies HERIDAS SUPERFICIALES Y ABSCESOS ABIERTOS MATERIAL NECESARIO 41

42 MANUAL DE TOMA DE Página 42 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 -Suero fisiológico. -Jeringa y aguja estériles. -Recipientes estériles con tapa de rosca. -Hisopos con medio de transporte tipo Stuart-Amies. TECNICA - Lavar con suero fisiológico estéril cuidadosamente la superficie de la herida para retirar la flora colonizante acompañante. - Recoger el pus mediante jeringa y aguja, aspirando preferentemente de zonas profundas. - Cuando la muestra sea insuficiente, instilar suero o solución de Ringer lactato y aspirarlo nuevamente en la jeringa. - Cuando los procedimientos anteriores no sean factibles podrá efectuarse un frotis de los bordes de la herida con un hisopo. Para muestras líquidas se intentara obtener 1-10 ml. En el resto de las ocasiones se enviará la máxima cantidad posible. RECIPIENTE Tubo estéril o contenedor para anaerobios. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN. 42

43 MANUAL DE TOMA DE Página 43 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC. OBSERVACIONES Las muestras recibidas en hisopo son de escasa rentabilidad y deben obtenerse sólo en circunstancias muy excepcionales, cuando no se pueda recoger la muestra por otros métodos. muestra. Es importante especificar sitio anatómico de donde se realizó la toma de HERIDA QUIRÚRGICA La toma de muestra se realizará con técnica aséptica luego de limpieza de la zona con suero fisiológico para eliminar la contaminación superficial. Se realizará por punción y se colocará la muestra en recipiente estéril con tapa de rosca, si se sospecha presencia de anaerobios introducir la muestra en el envase de transporte de anaerobios. Sí la muestra es obtenida con hisopo realizar primero la limpieza de la zona y luego embeber en el pus el mismo. 43

44 MANUAL DE TOMA DE Página 44 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 RECIPIENTE Tubo estéril o contenedor para anaerobios. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN. Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC ABSCESOS Se tomará con jeringa y aguja por punción directa del absceso cuando sea cerrado. Cuando sea abierto se tomará con una torunda en medio de transporte para anaerobios. Es un procedimiento médico. MATERIAL NECESARIO - Gasas estériles. - Alcohol etílico o isopropílico al 70%. 44

45 MANUAL DE TOMA DE Página 45 de 112 Fecha 30/JUNIO/ Povidona yodada al 10%. - Jeringa estéril. - Aguja IM. - Medio de transporte para anaerobios. TECNICA - Realizar antisepsia de la zona a puncionar con alcohol al 70%, de forma concéntrica comenzando por el centro. Abarcar una zona de unos 10 cm. - Repetir la operación con povidona yodada. En pacientes con hipersensibilidad al yodo, se utilizará alcohol 70 % dos veces consecutivas. - Dejar secar al menos 1 minuto para que el antiséptico ejerza su acción. - Realizar una punción-aspiración del absceso con jeringa y aguja, la muestra más útil es la obtenida contra la pared del absceso y puncionando en el lado superior para evitar la fistulización espontánea. -Traspasar la muestra a un contenedor estéril. Si se requiere búsqueda de anaerobios añadir el envase correspondiente. RECIPIENTE -Vial para transporte de anaerobios. -Torunda con medio de transporte. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN. 45

46 MANUAL DE TOMA DE Página 46 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC TEJIDOS Se introducirán en un contenedor estéril de boca ancha y se transportaran lo antes posible al laboratorio; si se hace de esta forma, también es útil para el cultivo de anaerobios. Cuando la muestra es pequeña habrá que ponerla en solución salina isotónica para prevenir que se seque. Cuando la lesión es grande, se deben tomar muestras de varios puntos. En el laboratorio el tejido se machacará en un mortero estéril conteniendo un agente abrasivo estéril (Alúmina). A continuación, se realiza una suspensión al 10-20%, en caldo nutritivo. Este caldo se usará para realizar tinciones y cultivos. RECIPIENTE Tubo estéril o contenedor para anaerobios. 46

47 MANUAL DE TOMA DE Página 47 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN. Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC QUEMADURAS El tipo de toma de muestra es controvertido, pero los mejores resultados se han logrado con fragmentos de tejido de 3 o 4 mm para realizar cultivos cuantitativos. Se transportan en tubos con tapa rosca estériles. RECIPIENTE - Tubos estériles con tapón. - Hisopo estéril. - Tubo con 2 ml. de suero fisiológico y tira de papel de 2 cm. de superficie. TÉCNICA 47

48 MANUAL DE TOMA DE Página 48 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 -Obtener fragmentos de tejidos con mal aspecto o bien impregnar el papel de filtro estéril en el exudado de la quemadura. La biopsia se introduce en tubo estéril y el papel en el tubo con suero fisiológico. -La muestra puede obtenerse también con hisopo estéril. -La ventaja del papel impregnado, es la posibilidad de cuantificar la flora de colonización. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN. Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC DRENAJES RECIPIENTE -Tubo o frasco pequeño, estéril y de cierre hermético. -Vial para transporte de anaerobios. -Torunda con medio de transporte. 48

49 MANUAL DE TOMA DE Página 49 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TÉCNICA El caso de los líquidos de drenaje, la muestra se debe recolectar en forma estéril por punción del tubo de drenaje luego de la desinfección del mismo con alcohol. El volumen necesario es entre 1-5 ml dependiendo del líquido a estudiar. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN. Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC MUESTRAS OCULARES - Párpados y conjuntivas obtención mediante torunda. - Demás muestras obtención por parte del oftalmólogo y realización de frotis y cultivos por parte del técnico. Se incluirá caldo de enriquecimiento y cultivo en medios de hongos Sabouraud y Mycobiotic. 49

50 MANUAL DE TOMA DE Página 50 de 112 Fecha 30/JUNIO/ EXUDADO CONJUNTIVAL Este tipo de muestras sirve para el diagnóstico de conjuntivitis de causa bacteriana. Estas son a menudo unilaterales. De todas maneras se solicita que se haga la toma de muestra de ambos sacos conjuntivales por separado, de manera de poder valorar la flora normal. RECIPIENTE - Torundas con medio de transporte de Amies. TECNICA - Debe obtenerse la muestra antes de la instilación de los analgésicos locales, colirios o antibióticos. - Con un hisopo mojado en suero fisiológico frotar sobre la conjuntiva inferior y de afuera hacia adentro. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. 50

51 MANUAL DE TOMA DE Página 51 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC RASPADOS CORNEALES Es un procedimiento médico. La toma de muestra la realizará un Oftalmólogo, se avisará previamente al Servicio de Microbiología que desplazará al personal y/o material necesario para ello. MATERIAL NECESARIO Y RECIPIENTE - Espátula de platino flexible o asa bacteriológica estéril. - Anestésico local. - Portaobjetos limpios. -Medios de cultivos en consulta TECNICA -Instilar uno o dos gotas de anestésico. -Realizar el raspado de múltiples áreas de ulceración con la espátula de Kimura -El material obtenido se siembra en lo medios provistos por el laboratorio. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. 51

52 MANUAL DE TOMA DE Página 52 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC LENTE DE CONTACTO Se enviará al laboratorio la lente de contacto con sospecha de infección junto al líquido de conservación y limpieza (Cuando exista sospecha de infección de este). No se requiere toma de muestra por parte del médico EXUDADO ÓTICO OIDO MEDIO Se puede obtener por -Timpanocentesis (no es lo habitual) Ha de realizar la toma de muestra el facultativo correspondiente (O.R.L). Se reserva para el diagnóstico etiológico en casos de otitis media que no ha respondido al tratamiento, se presenta en pacientes inmunodeprimidos, en otitis crónica y en aquellos casos que el médico considere necesario. 52

53 MANUAL DE TOMA DE Página 53 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 -Exudado tras apertura espontánea. RECIPIENTE - Torunda con medio de transporte de Amies. - Medio de transporte para anaerobios. TÉCNICA Tras limpiar el pabellón auditivo y el conducto auditivo externo recoger el exudado con hisopo fino, a ser posible utilizando espéculo otológico. Timpanocentésis Debe obtener la muestra un especialista en O.R.L. Se limpiará el canal auditivo externo con un hisopo impregnado en povidona yodada. Se puncionará el tímpano a través de un otoscopio estéril. La muestra se enviará en un tubo estéril. Si se desea la investigación de anaerobios, se enviará el fluido en un medio de transporte específico. Las muestras en hisopo no sirven para cultivo de anaerobios. Muestras con tímpano roto Tras la limpieza del canal externo se tomará la muestra con hisopo a través de un otoscopio estéril. Estas muestras no son válidas para anaerobios, y además el fluido suele colonizarse con flora del conducto auditivo externo, con lo que la interpretación de los resultados es siempre complicada. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN. 53

54 MANUAL DE TOMA DE Página 54 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC OIDO EXTERNO Solo se utiliza para conocer la etiología en caso de otitis externa. Suele tratarse de muestras de mala calidad y en ningún caso resultan representativas de los microorganismos existentes en el oído medio. RECIPIENTE - Torunda con medio de transporte de Amies TÉCNICA Primero limpiar posibles restos de pus o secreciones del conducto auditivo externo con hisopo humedecido en suero fisiológico y descartar. Luego tomar muestra del oído indicado o de ambos por separado frotando con nuevo hisopo contra las paredes. 54

55 MANUAL DE TOMA DE Página 55 de 112 Fecha 30/JUNIO/2011 TRANSPORTE Y CONSERVACION Las muestras procedentes del área extrahospitalaria se transportarán en la nevera correspondiente de cada centro. Las muestras hospitalarias se transportarán en las primeras 2 horas a temperatura ambiente. Cuando la muestra no se introduzca en medio de transporte ha de conservarse entre 2-8ºC SENOS NASALES Es un procedimiento médico. Se realiza la punción-aspiración de los mismos, lo que requiere un especialista en O.R.L. Este tipo de muestra no se realiza de rutina en caso de sinusitis aguda, sino que en general se reserva para casos de sinusitis crónica, para aquellos casos que no responden al tratamiento instaurado y en aquellos casos que el especialista considere necesario. MATERIAL NECESARIO - Povidona yodada al 10% - Recipiente estéril - Medio de transporte para anaerobios 55