ACEITES Y GRASAS DE ORIGEN ANIMAL Y VEGETAL. DETERMINACIÓN DE ADULTERACIONES

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1 Quito - Ecuador NORMA TÉCNICA ECUATORIANA NTE INEN 0044: Primera revisión ACEITES Y GRASAS DE ORIGEN ANIMAL Y VEGETAL. DETERMINACIÓN DE ADULTERACIONES Primera edición Animal and vegetable fats and oils Determination of adulterations First edition DESCRIPTORES: PE CDU: CIIU: ICS:

2 Norma Técnica Ecuatoriana Voluntaria ACEITES Y GRASAS DE ORIGEN ANIMAL Y VEGETAL DETERMINACION DE ADULTERACIONES NTE INEN 0044: Primera revisión 1. OBJETO 1.1 Esta norma describe los métodos para determinar las adulteraciones de los aceites y grasas vegetales o animales, con otros aceites y grasas, o con colorantes. 2. ALCANCE 2.1 En esta norma se describen los siguientes métodos: a) Reacción de Halphen-Gastaldi (ver Capítulo 3). Para determinar la presencia de aceite de algodón. b) Reacción de Villavecchia (ver Capítulo 4). Para determinar la presencia de aceite de ajonjolí (o sésamo). c) Determinación de resina de colofonia (ver Capítulo 5). Para determinar la presencia de aceite de colofonia (Rosin). d) Determinación de aceite de pescado (ver Capítulo 6).Para determinar la presencia de aceite de pescado. e) Determinación de aceite de cacahuete o maní (ver Capítulo 7).Para determinar la presencia de aceite de cacahuete o maní. f) Determinación de aceite de semillas de té (Camelia sinensis) (ver Capítulo 8).Para determinar la presencia de aceite de semillas de té. g) Determinación de aceites minerales (ver Capítulo 9). Para determinar la presencia de aceites minerales o petrolatos. h) Determinación de sustancias colorantes (ver Capítulo 10). Para determinar la adulteración con colorantes vegetales sintéticos. 3.1 Fundamento 3. REACCIÓN DE HALPHEN-GASTALDI El método se basa en el color rojo que, en presencia de piridina, se forma al mezclar el aceite de algodón o un aceite o grasa que contenga aceite de algodón, con una solución de azufre en sulfuro de carbono. 3.2 Instrumental Vaso de precipitación de 50 ml Baño María Plancha eléctrica de calentamiento, capaz de operar a 250 ºC Balanza analítica.- Calibrada, con sensibilidad mínima de 0,001 g. DESCRIPTORES: -1-

3 3.3 Reactivos Piridina. Grado analítico Solución al 1% de azufre en sulfuro de carbono. Disolver 1 g de azufre en 100 ml de sulfuro de carbono. 3.4 Procedimiento Mezclar en un vaso de precipitación 10 ml de muestra y 8 ml de solución al 1 % de azufre en sulfuro de carbono; agregar dos gotas de piridina, agitar la mezcla y calentarla en baño María durante 1 2 horas La aparición de un color rojizo o anaranjado rojizo en la solución, indica la posible presencia de aceite de algodón en la muestra SÍ hay aparición de color rojizo, calentar la mezcla a 250 ºC durante no más de 10 min; la desaparición del color rojizo confirma la presencia de aceite de algodón en la muestra. 3.5 Informe de resultados Si hay formación de color rojizo y desaparición del color por calentamiento a 250 C, el resultado debe reportarse como positivo confirmado Si hay formación de color rojizo pero sin desaparición por calentamiento a 250 C, el resultado debe reportarse como positivo Si no hay formación de color rojizo, el resultado debe reportarse como negativo Deben incluirse todos los detalles necesarios para la completa identificación de la muestra. Nota: Grasa de animales alimentados con harina de semilla de algodón u otros productos de semilla de algodón puede dar reacción positiva a esta prueba. 4.1 Fundamento 4. REACCIÓN DE VILLAVECCHIA El método se basa en el color rosado que, en presencia de ácido clorhídrico, se forma al mezclar el aceite de ajonjolí o un aceite o grasa que contenga aceite de ajonjolí, con una solución de furfural en alcohol etílico. 4.2 Instrumental Vaso de precipitación de 50 ml Pipeta que permita medir aproximadamente 0.1 ml. 4.3 Reactivos Solución al 2% de furfural en alcohol etílico. Disolver 2 ml de furfural en 100 ml de alcohol etílico al 95% (v/v) Ácido clorhídrico concentrado (ρ = 1,19).

4 4.4 Procedimiento Mezclar íntimamente en un vaso de precipitación, 10 ml de muestra y 10 ml de ácido clorhídrico concentrado; agregar 0,1 ml de solución al 2% de furfural en alcohol etílico, agitar enérgicamente la mezcla durante 15 segundos y dejarla reposar durante 10 min para que las fases se separen Observar el color de la capa inferior (rojo), añadir 10 ml de agua destilada y repetir la agitación y el reposo. La desaparición del color rojo en la capa inferior, indica la ausencia de aceite de ajonjolí. 4.5 Informe de resultados Si el color rojo de la capa inferior persiste con la adición de agua (ver 4.4.2), el resultado debe reportarse como positivo; caso contrario, si el color desaparece, el resultado debe reportarse como negativo Deben incluirse todos los detalles necesarios para la completa identificación de la muestra. Nota: como la reacción del furfural con el ácido clorhídrico da una coloración violeta, es indispensable utilizar la solución tan diluida como se ha especificado en Fundamento 5. DETERMINACIÓN DE RESINA DE COLOFONIA El método se basa en la rotación óptica que presenta el aceite de colofonia o un aceite o grasa que contenga aceite de colofonia. La medición de la actividad óptica se realiza en un polarímetro. El aceite de colofonia es ópticamente activo, rota la luz polarizada en sentido de las agujas del reloj por lo que se dice que es dextrógiro (+) con valores de rotación óptica de +30 º a +40 ºS en la escala de la sacarosa (Schmidt y Haensch). La mayoría de los aceites tienen rotaciones ópticas de entre +1 º y -1. S. 5.2 Instrumental Polarímetro provisto de un tubo de vidrio de una longitud de 200 mm. 5.3 Reactivos Éter de petróleo. Grado reactivo Alcohol etílico 40%. Diluya 400 ml de alcohol etílico y afore hasta 950 ml con agua destilada. 5.4 Procedimiento Llene el tubo del polarímetro de 200 mm de longitud con aceite de colofonia puro y determine la rotación óptica. Después de la determinación, el tubo del polarímetro deberá estar completamente limpio para lo cual se puede disponer de una mezcla de etanol agua al 40% (v/v) para lavarlo Llene el tubo del polarímetro de 200 mm de longitud, totalmente limpio y seco, con la muestra de aceite a analizar y determine la rotación óptica. Después de la determinación lave el tubo como se indica en Lecturas de rotación óptica superiores a +1 indican la presencia de aceite de colofonia. -1-

5 5.5 Informe de resultados Si luego de realizar las lecturas de rotación óptica, la solución presenta valores superiores a +1 ºS el resultado debe presentarse como positivo; caso contrario, el resultado debe documentarse como negativo Deben incluirse todos los detalles necesarios para la completa identificación de la muestra. 6.1 Fundamento 6. DETERMINACIÓN DE ACEITE DE PESCADO El método se basa en la formación de bromuros insolubles, mediante la reacción de bromo con glicéridos de ácidos grasos no saturados presentes en los aceites de pescado u otros animales marinos. 6.2 Instrumental Tubo de ensayo de 20 ml Baño María Balanza analítica.- Calibrada, con sensibilidad mínima de 0,001 g. 6.3 Reactivos Mezcla (1:1, v/v) de cloroformo: ácido acético. Mezclar un volumen de cloroformo con un volumen igual de ácido acético glacial Bromo. Grado reactivo. 6.4 Procedimiento En un tubo de ensayo, disolver aproximadamente 6 g de muestra en 12 ml de la mezcla (1:1, v/v) de cloroformo: ácido acético, y agregar bromo, gota a gota, hasta conseguir un ligero exceso (puesto en evidencia por el color). La solución debe mantenerse a 20 C durante esta operación Dejar la mezcla en reposo durante un tiempo no menor de 15 min, y luego calentarla en baño María La presencia de turbidez (en caliente) indica la presencia de aceite de pescado en la muestra. 6.5 Informe de resultados Si luego del calentamiento (ver 6.4.2) la solución presenta aspecto turbio, el resultado debe reportase como positivo; caso contrario, si el aspecto es claro y transparente, el resultado debe reportarse como negativo Deben incluirse todos los detalles necesarios para la completa identificación de la muestra. 7.1 Fundamento 7. DETERMINACIÓN DE ACEITE DE CACAHUETE O MANI El método se basa en la presencia de ácido araquídico del aceite de maní. Separando los ácidos grasos insaturados y dejando libre el ácido araquídico por medio de una cristalización fraccionada con alcohol que se presenta como una turbidez en el seno del líquido, se puede identificar la presencia de aceite de maní en un aceite o grasa. -2-

6 7.2 Instrumental Matraz Erlenmeyer de 125 ml, provisto con refrigerante de reflujo Baño María Balanza analítica.- Calibrada, con sensibilidad mínima de 0,001 g Condensador de reflujo Termómetro de -10 ºC a 150 ºC. 7.3 Reactivos Solución alcohólica de hidróxido de potasio 1,5 M. Disolver 10 g de hidróxido de potasio (KOH) en 100 ml de alcohol etílico 95% Alcohol etílico al 95 % (v/v) Ácido clorhídrico (ρ = 1.16). Diluya 83 ml de ácido concentrado (ρ = 1.19) y afore hasta 100 ml con agua destilada Alcohol etílico al 70 % (v/v). Diluya 700 ml de etanol y afore hasta 950 ml con agua destilada. 7.4 Procedimiento Pese 0,92 g de la muestra a analiza en un matraz Erlenmeyer y añada 1 ml de solución alcohólica de hidróxido de potasio. Caliente por 5 minutos a baño María utilizando un condensador para evitar la pérdida de alcohol etílico por calentamiento. Agite una o dos veces durante la saponificación. Seguidamente añada 50 ml de alcohol etílico 70% (v/v) y 0,8 ml de ácido clorhídrico. Caliente hasta disolver cualquier sólido precipitado que pueda formarse Inserte el termómetro y enfríe lentamente con ayuda de agitación continua de modo que la temperatura descienda a razón de 1 ºC/min. Observar la temperatura de turbidez o punto de opacidad de la muestra, que es la temperatura a la cual aparece por primera vez un precipitado. Si la temperatura de la solución está por encima de la temperatura ambiente, el enfriamiento puede llevarse a cabo al aire o por inmersión en un baño de agua 5 ºC por debajo de la temperatura de la solución. No sumerja el matraz por debajo del nivel de su contenido. Agite continuamente para evitar la turbidez prematura del contenido por efectos del enfriamiento. Nota: Utilice una buena fuente de luz para poder determinar la temperatura de turbidez La apariencia de turbidez indica la presencia de aceite de maní en la muestra. Nota: Si la turbidez aparece antes de llegar a los 9 ºC (aceite de oliva) o 13 ºC (aceites de semilla de algodón, maíz o de soja), es evidente la presencia de aceite de maní. 7.5 Informe de resultados Si al enfriar la solución presenta un aspecto turbio, el resultado debe reportarse como positivo; caso contrario, el resultado debe reportarse como negativo Deben incluirse todos los detalles necesarios para la completa identificación de la muestra. -3-

7 8. DETERMINACIÓN DE ACEITE DE SEMILLAS DE TÉ 8.1 Fundamento El método se basa en la prueba de Fitelson (modificada por Lieberman-Burchard) en donde se desarrolla una coloración roja del anhídrido acético en presencia de ácido sulfúrico y aceite de semillas de té en cloroformo. 8.2 Instrumental Tubos de ensayo de 150 mm x 15 mm Pipeta graduada de 2 ml Gotero, calibrado de tal manera que 7 gotas de aceite representen aproximadamente 0,22 g Baño de agua a 5 ºC. 8.3 Reactivos Cloroformo, grado reactivo Ácido sulfúrico concentrado (ρ = 1,84) Anhídrido acético, grado reactivo Éter dietilico, grado reactivo. 8.4 Procedimiento Colocar exactamente 0,8 ml de anhídrido acético, 1,5 ml de cloroformo, y 0,2 ml de ácido sulfúrico en el tubo de ensayo (15 x 150 mm). Mezclar y dejar enfriar a temperatura ambiente. Añadir 7 gotas del aceite a ensayar directamente sobre los reactivos, mezclar con agitación y enfriar de nuevo hasta 5ºC Si la solución de aceite se enturbia, añadir gota a gota anhídrido acético, agitando después de cada gota hasta que la solución se aclare totalmente. Mantenga a 5 ºC por 5 min Transcurridos los 5 min, añadir 10 ml de éter dietílico y mezclar inmediatamente por inversión del tubo dos veces. Enfríe nuevamente la muestra hasta 5 ºC y observe el color. Al cabo de un minuto, si la solución ha cambiado a un color rojo intenso, indica la presencia de aceite de semillas de té. Nota: esta coloración roja se desvanece lentamente al cabo de unos pocos minutos. El aceite de oliva forma una solución verde al adicionar éter. Este color se desvanece lentamente a gris-marrón pasando por un rosa pálido. Tanto el aceite de oliva como el aceite de semilla de té con el tiempo se desvanecen hasta un color marrón claro. Las mezclas de aceite de semillas de té y aceite de oliva muestran colores característicos, de intensidad proporcional a la cantidad de aceite de semilla de té presente. 8.5 Informe de resultados Si la solución presenta color rojo intenso, el resultado debe reportarse como positivo; caso contrario, el resultado debe reportarse como negativo. Nota: una coloración rosa debe ser considerada como negativa ya que algunos aceites de oliva dan este color Deben incluirse todos los detalles necesarios para la completa identificación de la muestra. -4-

8 9. DETERMINACIÓN DE ACEITES MINERALES 9.1 Fundamento El método se basa en el aumento de la materia insaponificable que experimentan los aceites y grasas vegetales o animales, cuando son adulteradas con aceites minerales. 9.2 Instrumental Matraz Erlenmeyer de 50 ml, provisto con refrigerante de reflujo Baño María Balanza analítica.- Calibrada, con sensibilidad mínima de 0,001 g. 9.3 Reactivos Solución saturada de hidróxido de potasio. Disolver con calentamiento, 30 g de hidróxido de potasio (KOH) en 20 ml de agua destilada Alcohol etílico al 95 % (v/v). 9.4 Procedimiento Mezclar en un matraz Erlenmeyer, 1 ml de muestra, 1 ml de solución saturada de hidróxido de potasio y 25 ml de alcohol etílico al 95 % (v/v) Colocar el refrigerante de reflujo y hervir la mezcla en baño María, agitando ocasionalmente, hasta que la saponificación sea completa (aproximadamente después de 5 min) Suspender el calentamiento, agregar 25 ml de agua destilada y agitar la mezcla La apariencia de turbidez indica la presencia de aceites minerales en la muestra con una proporción mayor de 0,5%. 9.5 Informe de resultados Si luego de añadir agua destilada y agitar (ver 6.4.3) la solución presenta aspecto turbio, el resultado debe reportarse como positivo; caso contrario, si el aspecto es claro y transparente, el resultado debe reportarse como negativo Deben incluirse todos los detalles necesarios para la completa identificación de la muestra Fundamento 10. DETERMINACIÓN DE SUSTANCIAS COLORANTES El método se basa en la extracción e identificación de las sustancias colorantes que pueden estar presentes en los aceites vegetales coloreados artificialmente Instrumental Matraz Erlenmeyer de 50 ml, provisto con refrigerante de reflujo Baño María Balanza analítica.- Calibrada, con sensibilidad mínima de 0,001 g. -5-

9 10.3 Reactivos Éter dietílico. Grado analítico Éter de petróleo. Con rango de destilación comprendido entre 35 y 60 C Ácido acético glacial (ρ = 1,05) Ácido sulfúrico concentrado (ρ = 1,84) Solución al 10% (p/v) de hidróxido de sodio. Disolver 10 g de hidróxido de sodio en 100 ml de agua destilada Ácido clorhídrico concentrado (ρ = 1,19) Procedimiento Colorantes vegetales. Disolver 20 g de la muestra de aceite vegetal en 50 ml de éter dietílico, y agregar 20 ml de solución al 10% de hidróxido de sodio. Agitar la mezcla y dejar separar las capas; la presencia de color amarillo en la capa acuosa Índica adulteración de la muestra con colorantes vegetales Cúrcuma. Disolver 20 g de la muestra de aceite vegetal en 50 ml de éter de petróleo, y agregar 10 ml de ácido acético glacial y 1 ml de ácido sulfúrico concentrado. Agitar la mezcla y dejar separar las capas; la presencia de color violeta en la capa acida indica adulteración de la muestra con cúrcuma (colorante vegetal) Colorantes sintéticos. Disolver 25 g de la muestra de aceite vegetal en 50 ml de éter de petróleo, agregar 20 ml de ácido clorhídrico concentrado; la presencia de color rojizo en la capa ácida indica adulteración de la muestra con colorantes sintéticos azoicos amarillos. (El aceite de maíz puede dar color rosa en este ensayo) Informe de Resultados Si ninguno de los ensayos descritos en 10.3 indica adulteración con colorantes, el resultado debe reportase como negativo; en caso contrario, debe reportarse como positivo e indicarse el tipo de colorante que ha sido detectado Deben incluirse todos los detalles necesarios para la completa identificación de la muestra. -6-

10 APÉNDICE Z Z.1 DOCUMENTOS NORMATIVOS A CONSULTAR Esta norma no requiere de otras para su aplicación. Z.2 BASES DE ESTUDIO Método AOAC Oils and fats. Oil (peanut) in oils and fats. Association of Official Analytical Chemists, Washington, Método AOAC Oils and fats. Oil (sesame) in oils and fats. Association of Official Analytical Chemists, Washington, Método AOAC Oils and fats. Oil (cottonseed) in oils and fats. Association of Official Analytical Chemists, Washington, Método AOAC Oils and fats. Oil (rosin) in oils and fats. Association of Official Analytical Chemists, Washington, Método AOAC Oils and fats. Oil (tea seed) in olive oil. Association of Official Analytical Chemists, Washington, Método AOAC Oils and fats. Oil (peanut) in in olive, cottonseed, corn and soybean oils. Association of Official Analytical Chemists, Washington, Método AOAC Oils and fats. Synthetic Colors in Oils and Fats. Association of Official Analytical Chemists, Washington, Método AOAC Oils and fats. Oil (minerals) in Fats. Association of Official Analytical Chemists, Washington, Método AOAC Oils and fats. Determination of fish and Marine Animal oils. Association of Official Analytical Chemists, Washington, 2010.

11 Documento: NTE INEN 0044 INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA TÍTULO: ACEITES Y GRASAS DE ORIGEN ANIMAL Y VEGETAL. DETERMINACIÓN DE ADULTERACIONES Código: AL ORIGINAL: Fecha de iniciación del estudio: REVISIÓN: La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficialización con el Carácter de Voluntaria por Resolución No. publicado en el Registro Oficial No. Fecha de iniciación del estudio: Fechas de consulta pública: Subcomité Técnico de: Fecha de iniciación: Integrantes del Subcomité: NOMBRES: Fecha de aprobación: INSTITUCIÓN REPRESENTADA: Mediante compromiso presidencial N 16364, el Instituto Ecuatoriano de Normalización INEN, en vista de la necesidad urgente, resuelve actualizar el acervo normativo en base al estado del arte y con el objetivo de atender a los sectores priorizados así como a todos los sectores productivos del país. Para la revisión de esta Norma Técnica se ha considerado el nivel jerárquico de la normalización, habiendo el INEN realizado un análisis que ha determinado su conveniente aplicación en el país. La Norma en referencia ha sido sometida a consulta pública por un período de 30 días y por ser considerada EMERGENTE no ha ingresado a Subcomité Técnico. Otros trámites: Esta norma NTE INEN 0044: Aceites y grasas de origen animal y vegetal. Determinación de Adulteraciones, reemplaza a la NTE INEN 0044:1973 Grasas y aceites comestibles. Determinación de Adulteraciones. La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficializada como: Por Resolución No. Registro Oficial No. -3-

12 Instituto Ecuatoriano de Normalización, INEN - Baquerizo Moreno E8-29 y Av. 6 de Diciembre Casilla Telfs: (593 2) al Fax: (593 2) Dirección General: Área Técnica de Normalización: Área Técnica de Certificación: Área Técnica de Verificación: Área Técnica de Servicios Tecnológicos: Regional Guayas: Regional Azuay: Regional Chimborazo: URL:www.inen.gob.ec

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