GENES Y MOLECULAS DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD

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1 GENES Y MOLECULAS DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD

2 HISTORIA * TRASPLANTE EN RATONES - Base genética para el reconocimiento del injerto como tejido extraño. Genes de Histocompatibilidad. * ESTUDIOS SEROLOGICOS EN HUMANOS George Snell Jean Dausset 60. En presencia de complemento el suero del receptor lisa los linfocitos del Donante ALOSUEROS - ALOANTICUERPOS ALOANTIGENOS HLA * RESPUESTA INMUNITARIA- Baruj Benacerraf y Hugh McDevitt. 60 PREMIO NOBEL 1960 Macfarlane Burnet y Peter B Medawar Inmunidad adquirida en los trasplantes de tejidos. PREMIO NOBEL Benacerraf, Dausset y Snell. Estructuras de la superficie celular determinadas genéticamente que regulan las reacciones inmunológicas PREMIO NOBEL Doherty y Zinkernagel. Las células efectoras deben reconocer 2 señales de una célula infectada por virus, una derivada del virus y la otra de la molécula MHC normalmente presente en la célula

3 MAPA ESQUEMATICO DEL MHC HUMANO DP DQ DR C B C A REGION D MURINO K I-A I-E C D L REGION I MHC CLASE I MHC CLASE II MHC CLASE III

4 ORGANIZACIÓN GENÉTICA DEL CMH HUMANO

5 MAPA DEL MHC HUMANO

6 MAPA DEL GEN QUE CODIFICA LA CADENA α DE LAS MOLECULAS MHC CLASE I

7 Mapa del gen que codifica la cadena α de la molécula MHC clase II MHCII α1 α2 TM UT L α1 α2 TM/CYT 3 UT

8 MAPA DEL GEN QUE CODIFICA LA CADENA β DE LAS MOLECULAS MHC CLASE II

9 Tejido Células T Células B Macrófagos Otras APC (Células dendríticas) Células del epitelio tímico Neutrófilos Hepatocitos Riñón Pulmón Glóbulos Rojos Localización de las moléculas del MHC Clase I Clase II Tejido Linfoide Otras células nucleadas Células no nucleadas - - Elsevier Science, Gardland Publising 1999

10 Nomenclatura de alelos HLA Nomenclatura Indica HLA HLA-DRB1 HLA-DRB1*13 HLA-DRB1*1301 Region Locus Alelos Un alelo específico Nomenclatura de alelos H-2 Nomenclatura Indica H- 2 Region H- 2K Locus H- 2K d Un alelo específico

11 POLIMORFISMO DE GENES MHC MHC CLASE I MHC CLASE II DPβ DPα DQ β DRβ DRα A B C DQα

12 TIPIFICACION DE MOLECULAS MHC EXTRACCION DE DNA CLASE I PCR CLASE II INICIADOR INICIADOR DNAg BLANCO INICIADOR AMPLIFICACION PCR INICIADOR PRODUCTO DE PCR RESULTADOS

13 TIPIFICACION HLA CLASE I: SEROLOGIA Vs BIOLOGIA MOLECULAR HLA-A HLA-B HLA-C HLA-E HLA-G Serología Alelos Serología Alelos Serología Alelos Serología Alelos Serología Alelos A1 A*0101,0102 B7 B* Cw1 Cw*0102,0103 E*0101 G*01011 A2 A* B8 B* Cw2 Cw*02021, A3 A*0301,0302 B13 B* Cw3 Cw* A11 A* B14 B*1401,1402 Cw4 Cw* A23(9) A*2301 B15 B* Cw5 Cw*0501 A24(9) A* B18 B* Cw6 Cw*0602 A25(10) A*2501 B27 B* Cw7 Cw* A26(10) A* B35 B* Cw8 Cw* A29(19) A*2901,2902 B37 B* Cw* A30(19) A* B38(16) B* Cw*1301 A31(19) A*31012 B39(16) B* Cw*1402,1403 A32(19) A*3201 B40 B* Cw* A33(19) A* B41 B*4101,4102 Cw*1601,1602 A34(10) A*3401,3402 B42 B*4201,4202 Cw*1701,1702 A36 A*3601 B44(12) B* A43 A*4301 B45(12) B*4501 A66 A*6601,6602 B46 B*4601 A68(28) A* B47 B*4701 A69(28) A*6901 B48 B*4801,4802 A74(19) A*7401 B49(21) B*4901 A*8001 B50(21) B*5001 B51(5) B* B52(5) B*52011,52012 B53 B*5301 B54(22) B*5401 B55(22) B* B56(22) B*5601,5602 B57(17) B* B58(17) B*5801,5802 B59 B*5901 B67 B*67011,67012 B73 B*7301 B78 B*7801,7802

14 SITIOS DE VARIACIÓN ALÉLICA

15 DISTRIBUCIÓN DE ALELOS HLA-CLASE I Grupo de alelos Frecuencia (%) Caucásico Africano Asiático HLA-A HLA-A HLA-A HLA-A HLA-A

16 Moléculas del CMH Clase I No Clásicas (CMH-Ib) HLA-G, HLA-E, HLA-F Bajo nivel de polimorfismo Expresión tisular restringida Dominios citoplasmáticos más cortos que los de las moléculas Clase Ia Conservación de residuos de unión a Linfocitos T CD8 +

17 TIPIFICACION HLA CLASE II: SEROLOGIA Vs BIOLOGIA MOLECULAR HLA-DR HLA-DQ HLA-DP Serología Alelos Serología Alelos Serología Alelos Cadena α DRA* DQA1* DPA1* DQA1*0201 DPA1* DQA1* DPA1*0301 DQA1*0401 DPA1*0401 DQA1* DQA1*0601 Cadena β DR1 DRB1* DQ5(1) DQB1* DPw1 DPB1*0101 DR15(2) DRB1* DQ6(1) DQB1* DPw2 DPB1* DR16(2) DRB1* DQ2 DQB1* DPw3 DPB1*0301 DR3 DRB1* DQ3 DQB1* DPw4 DPB1* DR4 DRB1* DQ4 DQB1* DPw5 DPB1*0501 DR11(5) DRB1* DPw6 DPB1*0601 DR12(5) DRB1* DPB1* DR13(6) DRB1* DPB1* DR14(6) DRB1* DR7 DRB1*0701 DR8 DRB1* DR9 DRB1*0901 DR10 DR52 DR53 DR51 DRB1*1001 DRB3*0101 DRB3* DRB3*0301 DRB4* DRB4* N DRB5* DRB5*

18 DISTRIBUCION DE ALELOS HLA - DQ Negro Caucasico Oriental Amerindio Alelos Porcentajes DQ DQ8/9(3) DQ7/(3) DQ DQ5/6(1)

19 DISTRIBUCIÓN DE ALELOS HLA-DRB1 Negro Caucásico Oriental Amerindio Alelos Porcentajes DRB1* DRB1* DRB1* DRB1* DRB1* DRB1* DRB1* DRB1* DRB1* DRB1* DRB1* DRB1* DRB1*

20 HERENCIA

21 GENES DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD CODOMINANCIA H M

22 GENES DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD Como se heredan DP DQ DR GENES MHC A C B β α β α β α α α α β α β α β α α α α CIS TRANS B2MG β α β α β α β α α α α β α β α β α β α α α α DP DQ DR ANTIGENOS MHC B C A

23 Organización de los genes HLA dentro del Complejo MHC DR1 DRB1 DRB6 DRB6 DRA DR51 DRB1 DRB6 DRB5 DRB9 DRA DR52 DRB1 DRB2 DRB3 DRB9 DRA DR53 DRB1 DRB7 DRB8 DRB4 DRB9 DRA DR8 antígeno asociado DRB1 DRB9 DRA gen pseudo-genes genes pseudogen gen

24 GENES DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD Como se heredan los haplotipos A1 B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9 B10 A1/B1 A1/B3 DR3 (DRB1*03) DR52(DRB3*) DR11 (DRB1*11) DR12 (DRB1*12) DR13 (DRB1*13) DR14 (DRB1*14) A1/B1 A1/B4 DR4 (DRB1*04) DR7 (DRB1*07) DR53 (DRB4*) DR9 (DRB1*09) A1/B1 DR15(DRB1*15) DR16(DRB1*16) A1/B5 DR51(DRB5*)

25 ESTRUCTURA MHC CLASE I Y CLASE II

26 Molécula delcomplejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I (MHC) α α 1 α β microglobulina 25-80

27 RESIDUOS QUE CONFORMAN EL BOLSILLO DE UNION DE PEPTIDOS DE LAS MOLECULA HLA-CLASE I Bolsillo Residuos que Forman el Bolsillo Posicion de Anclaje en el Péptido A B C D E F Carboxi-terminal

28 Molécula Molécula del Complejo Mayor de Histocompatibilidad clase II (MHC clase II) β β α

29

30 RESIDUOS QUE CONFORMAN EL BOLSILLO DE UNION DE PEPTIDOS DE LA MOLECULA HLA- DRβ1*01 Posición Relativa en el Bolsillo Residuos que Forman el Bolsillo de la Cadena α Residuos que Forman el Bolsillo de la Cadena β

31 Sitio de unión del péptido de las moléculas MHC clase I y II

32 NOMENCLATURA DE LOS BOLSILLOS DE UNIÓN DE POCKETS O BOLSILLOS PEPTIDOS EN LAS MOLECULAS MHC CLASE I CLASE II

33 POCKET 1 POLIMORPHISM and PREFERENTIAL AAs W F Y I L M V W43 W43 V85 F32 V85 F32 F89 F89 F24 V86 F24 G86 T90 I 7 T90 I 7

34 POCKET 4 POLIMORPHISM and PREFERENTIAL AAs N62 N62 Q N M V L F Y I Q70 F13 E28 R71 A71 Q9 Q70 Q9 D28 A74 Y78 L26 A73 R13 Y78 A73 A74 F26 N62 Q9 D D28 R74 S13 K71 Y26 Q70 N72 Q9 ILVADE K71 Q70 D28 A74 G73 A73 Y78 H13 Y78 F26

35 POCKET 6 POLIMORPHISM and PREFERENTIAL AAs N69 TSAGP C30 W9 K71 N69 KRHQNE Y30 K71 E28 L70 V65 D66 L11 F13 V65 E9 D66 S11 E28 S13 N62 N62 Q9 E11 Q9 E11

36 POCKET 9 POLIMORPHISM and PREFERENTIAL AAs Y60 W61 MLTIV A68 E71 W61 Y60 EDSA H68 I72 L70 H9 L70 E59 P56 D57 R76 M73 K75 E9 E59 H56 S57 L7 R76 K75 N37 S77 Y37 S77

37

38 Interacciones no-covalentes péptido/moléculas clase II.

39 Interacción del péptido con HLA-DRB1*0401 Sα53 Nα62 Nα69 Rα76 Hβ81 Nβ82 Wβ61 Dβ57 Kβ71

40 INTERACCION PEPTIDO - MHC CLASE I CLASE II

41 EL POLIMORFISMO ALELICO SE CONCENTRA EN EL SITIO DE UNION DE PEPTIDOS ANTIGENICOS

42 RESUMEN 1. Los genes de MHC consisten de loci genéticos que codifican muchas de las proteínas involucradas en la presentación de antígenos a las células T. 2. La principal característica de los genes MHC es su amplio polimorfismo que garantiza la capacidad del organismo para vigilar una variedad de antígenos. 3. Al menos tres propiedades de las moléculas MHC son afectadas por el polimorfismo : El rango de péptidos unidos. La conformación del péptido unido. La interacción de la molécula MHC directamente con el TCR. Así, la naturaleza altamente polimórfica del MHC tiene consecuencias funcionales y un papel crítico en la respuesta inmune.

43 PROCESAMIENTO Y PRESENTACION DE ANTIGENOS

44 Antigen Presenting Cell Peptide RNA Protein

45 PROCESAMIENTO Y PRESENTACION EN MHC CLASE I

46 Presentación antigénica en Clase I del MHC Linfocito T CD8 + Citosol Antígeno viral Ribosomas Proteasoma rer Proteinas virales Péptidos Golgi

47 PROTEASOMA

48 CITOSOL PROCESAMIENTO EN CLASE I RETICULO ENDOPLASMICO calnexina Clase I MHC β2m calreticulina TAP Vesícula a la superficie PROTEOSOMA NUCLEO tapasina Proteinas antigènicas péptidos

49

50 PROCESAMIENTO Y PRESENTACION EN MHC CLASE II

51 Esquema general : Presentación de péptidos por parte de moléculas MHC clase II EC Péptido antigénico ER MIIC MIIC MIIC

52 Presentación antigénica en Clase II del MHC Linfocito T CD4 + Citosol Micropinocitosis Macropinocitosis Endocitosis mediada por receptor Fagocitosis Ii Antìgenos Protèicos Péptidos MIIC HLA DM-DO CLIP α RE β Catepsinas Complejo MHC Cadena α β-ii Immunological Reviews Vol 172:

53 Cadena Invariable (Ii) Ii NH 2 Transmembrane CLIP Trimerization COOH Non-cystein proteasas Iip22 Cystein proteasas Iip10 CLIP Cathepsin S Cathepsin L

54 HLA-DM Libera CLIP del MHC-II péptido CLIP Denzin LK, Cresswell P. Cell 1995 Jul 14;82(1):155-65

55 HLA-DM Estabiliza MHC-II Vacías Denzin LK, Hammond C, Cresswell P. J Exp Med 1996 Dec 1;184(6):

56 HLA-DM selecciona péptidos antigénicos para MHC-II

57 CARACTERÍSTICAS FUNCIONALES DE DM - DO HLA-DM Libera CLIP del MHC-II HLA-DM Estabiliza MHC-II Vacías HLA-DM Selecciona Péptidos Antigénicos para MHC-II HLA-DO Regula la función de DM

58 RESUMEN 1. Existen dos sistemas bien definidos en la inmunidad adaptativa para procesar y presentar antígenos: MHC clase I y clase II 2. Clásicamente péptidos presentados por moléculas MHC clase I inducen la activación de respuesta citotóxica mediante la activación de células T CD8+ 3. Las moléculas MHC clase I presentan péptidos provenientes del procesamiento de proteínas en la vía citosólica 4. La inmunidad mediada por células HLA clase I puede darse en todas las células de los vertebrados excepto en las no nucleadas como los eritrocitos.

59 CARACTERIZACION MOLECULAR DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD EN EL MODELO Aotus nancymaae

60

61 Alineamiento de las proteínas de los dominios α1 y α2 del MHC Clase I obtenida de la traducción de las secuencias de nucleótidos de las tres especies de Aotus. Suárez CF, et al. Tissue Antigens 2003:61:362

62 Diagrama en cinta de los grupos de secuencias Ao-g1 y Ao-g2 del CMH Clase I identificados en Aotus. Ao-g1 Ao-g2 Suárez CF, et al. Tissue Antigens 2003:61:362

63 Enviado a Immunogenetics

64 LEADER PEPTIDE ALPHA 1 DOMAIN ALPHA 2 DOMAIN ALPHA 3 DOMAIN TRANSMEMBRANE DOMAIN CYTOPLASMIC DOMAIN

65 CONCLUSIONES Las moléculas de CMH I de Aotus, al igual que los loci clásicos de los demás primates analizados, presentan selección positiva en la región PBR y negativa en la no PBR. Conservación de algunas propiedades químicas en posiciones críticas para la unión peptídica entre las secuencias de Aotus y las de humano CMH Ia, sugiere que pueden unir similares clases de péptidos.

66

67 Alineamiento de la secuencia de amino ácidos del exón 2 del MHC- DPB1 obtenida a partir de traducir la secuencia de nucleótidos. Díaz D, et al. Immunogenetics:2002:54:251

68 Alineamiento del exón 3 del MHC-DPB1 deducida de la secuencia de nucleótidos. Díaz D, et al. Immunogenetics:2002:54:251

69

70 Alineamiento de la proteína de Aona-DQA1 obtenida de la traducción de la secuencia de nucleótidos Díaz D, et al. Immunogenetics:2000:51:528

71 Alineamiento de la secuencia de aminoácidos de Aona- DQB1/2 obtenida de la traducción de la secuencia de nucleótidos Díaz D, et al. Immunogenetics:2000:51:528

72

73 Owl monkey MHC-DRB domain reveals high similarity whit some human HLA-DRB lineages Esperanza Trujillo*, Carlos F. Suárez *, Mónica Estupiñán*, Juan Baquero*, Carlos Parra*, Raúl Rodríguez*, and Manuel E. Patarroyo * Fundación Instituto de Inmunología (FIDIC) Submitted: Journal of Immunology

74 DRB*W13 DRβ*W-4 DRβ*W-303 DRβ*W-101 DRβ*W-301 DRβ*W-11 DRβ*W DRβ*W HLA-DRβ1*-0403 FLEQ V KHECHFFN G TERVRF L D RY FYHQ EEYVRF DSDVGEYRAV T E L GRPDAEY W N S Q KDLLEQ RRAEVDTYCR H N Y G VVESFT VQ RR Aona DRB*W N F M - D --PQ Aona DRB*W N F M - D ---Q Aona DRB*W N F IYY ---Q Aona DRB*W N G-----F M - D ---Q G Aona DRB*W S N F M - D ---Q G Aona DRB*W N L F M - D ---Q G Aona DRB*W N F GH M - D ---Q G Aona DRB*W D N F M - D ---Q G Aona DRB*W K N F M - D ---Q G Aona DRB*W N F M - D ---Q G Aona DRB*W N F M - D ---Q G Aona DRB*W S N F M - D ---Q G Aona DRB*W E N F M - D ---Q G Aona DRB*W IHN ---V L--I--D ---Q Aona DRB*W F-P N F Y L--I--D ---Q Aona DRB*W F-P N R-F M - D ---Q G Aoni DRB*W Q N ----A D ---Q --S G---- E--- Aovo DRB*W N F M - D ---Q G Aovo DRB*W Q N -G--A D ---Q --S G---- E--- HLA-DRβ1* G HLA-DRβ1*-0422 **LEQ V KHECHFFN G TERVRF L D RY FYHQ EEYVRF DSDVGEYRAV T E L GRPDAEY W N S Q KDLLEQ KRGRVDN YCR H N Y G VVESFT **** Aona DRB*W RF--L Y IH----V S----YV VQ RR Aona DRB*W RL--L Y IH----V YV VQ RR Aona DRB*W RF--L Y IH----V YV VQ RR Aona DRB*W RF--L Y TH----V YV-- ---Q F---- VQ RR Aona DRB*W RF--L Y IH----V YV-- ---Q F---- VQ RR Aona DRB*W RF--L Y IH----V YV F---- VQ RR Aona DRB*W RF--L Y - 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- D -H F-----Y E-----E -----RT YV-N ----E---RK V-D Aovo DRB*W K- V -C Q - - D -H F-----Y RT F--N K Aona-DRβ*W RFLEQ FKPECHFFN G TERVRF L D RY FYN Q EEYVRF DSDVGEYRAV T E L GRPEAEY FN SLKDFM E E TRAAVDTYCK H N Y G VVESFT VQ RR Aona DRB*W D R A ---- Aona DRB*W M D R Aona DRB*W D I R Aona DRB*W D--- L R Aona DRB*W S D R Aona DRB*W D R Aona DRB*W P R A Aona DRB*W R A Aona DRB*W M ----R A Aona DRB*W D R Aona DRB*W L Aona DRB*W Aona DRB*W F RT Aoni DRB*W D R G Aoni DRB*W D--H R Aoni DRB*W D R -D W- Aoni DRB*W D R Aoni DRB*W D R Aona DRB*W L D R Aoni DRB*W D I R Aoni DRB*W M ----R A Aoni DRB*W D--- W R Aoni DRB*W S D--- W R R-- Aovo DRB*W D R A--- Aovo DRB*W D R Aovo DRB*W F RT Aovo DRB*W F RT Aovo DRB*W F RT SF DRB7*02a *FLEQ A KSECHFFN G TERVRY L D RY FYN Q EEYVRF DSDVGELRAV TELGRPDAQ Y W N S Q KDFLED HRAAVDTYCR H N Y G VGE*** **** Aona DRB*W R Y K F RT-E R K SFT VQ RR Aoni DRB*W R Y K F RT-E R K -K-- ---SFT VQ RR SECONDARY STRUCTURE BETA 1 TURN 1 BETA 2 T2 BETA 3 TURN 3 B4 T4 ALFA 1 5 ALFA 2 RANDOM COIL T

75 Logos obtenidos a partir de las secuencias de los Aotus (Ao-DRB*W) y de las secuencias de humanos (HLA-DRB) HLA-DRB1*04 Ao-DRB*W HLA-DRB1*03 Ao-DRB*W

76 HLA-DRB1*08-14 Ao-DRB*W HLA-DRB1*01 Ao-DRB*W HLA-DRB7 Ao-DRB*W

77 Promedio y Rango de homología entre Ao-DRβ y HLA-DRβ en el dominio β y posiciones de los Pockets β domain Pockets Owl Monkey Human % mean % min % max % mean % min % max Ao-DRB*W104 vs. HLA-DRB1* Ao-DRB*W304 vs. HLA-DRB1* Ao-DRB*W302 vs. HLA-DRB Ao-DRB*W11 vs. HLA-DRB1* Ao-DRB*W303 vs. HLA-DRB Ao-DRB*W301 vs. HLA-DRB Ao-DRB*W11 vs. HLA-DRB1* Ao-DRB*W11 vs. HLA-DRB1* Ao-DRB*W701/02 vs. HLA-DRB1* Ao-DRB*W101 vs. HLA-DRB1* Ao-DRB*W11 vs. HLA-DRB1* Ao-DRB*W4 vs. HLA DRB1* Ao-DRB*W4 vs. HLA DRB

78 Distribución de los alelos DRB-*W detectados en 96 Aotus. Monkey SPECIE No. CLONES Ao-DRB*W NEW ALLELLES AOTUS DRB*W No. Allelles Monkey SPECIE No. CLONES Ao-DRB*W NEW ALLELLES AOTUS DRB*W No. Allelles A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. nigriceps A. nancymaae A. vociferans A. nancymaae A. vociferans A. nancymaae A. vociferans A. nancymaae A. vociferans A. nancymaae A. vociferans A. nancymaae A. vociferans A. nancymaae A. vociferans A. nancymaae A. vociferans A. nancymaae A. vociferans A. nancymaae A. vociferans

79 Q9 T90 HLA-DRB1*0301 vs Aona DRB1*0311 F26 HLA-DRB1*0401 vs Aona DRB1*W4706 N37Y N37Y A74Q E9F E9F A74Q V85 V85 V85 V85 V86 V86 G86 G86 T90 I7 T90 T90 I7 I7 I7 I31 I31 I31 I31 F32 F32 F32 F32 F24 F24 F24 F24 W43 W43 W43 W43 F89 F89 M Y A D P A M M N62 N62 N62 N62 Q9 Q9 Q9 Q9 S13 H13 H13 S13 V65 D28 D28 D28 D28 A73 Y78 Y78 Y78 Y78 K71 K71 K71 K71 A73 G73 G73 R74 R74 Q70 N69 Y26 F26 Q70 Q70 Q70 Y26 N69 N69 N69 V65 V65 V65 D66 D66 D66 D66 N62 N62 N62 N62 E11 E11 E11 E11 Q9 Q9 Q9 H13 H13 S13 S13 S11 S11 V11 D28 D28 D28 D28 K71 K71 K71 K71 W61 W61 W61 W61 Y60 Y60 Y60 Y60 E9 N69 N69 N69 E9 E9 E9 Y37 Y37 D57 D57 D57 D57 R76 R76 R76 R76 A58 N69 K75 A58 K75 K75 K75 E59 E59 E59 E59 A58 A58 A68 E71 E71 E71 E71 A68 A68 A68 L70 L70 L70 L70 Y30 Y30 Y30 Y30 Pocket 9 Pocket 6 Pocket 4 Pocket 1 Q9 T90 HLA-DRB1*0301 vs Aona DRB1*0311 F26 HLA-DRB1*0401 vs Aona DRB1*W4706 N37Y N37Y A74Q E9F E9F A74Q V85 V85 V85 V85 V86 V86 G86 G86 T90 I7 T90 T90 I7 I7 I7 I31 I31 I31 I31 F32 F32 F32 F32 F24 F24 F24 F24 W43 W43 W43 W43 F89 F89 M Y A D P A M M N62 N62 N62 N62 Q9 Q9 Q9 Q9 S13 H13 H13 S13 V65 D28 D28 D28 D28 A73 Y78 Y78 Y78 Y78 K71 K71 K71 K71 A73 G73 G73 R74 R74 Q70 N69 Y26 F26 Q70 Q70 Q70 Y26 N69 N69 N69 V65 V65 V65 D66 D66 D66 D66 N62 N62 N62 N62 E11 E11 E11 E11 Q9 Q9 Q9 H13 H13 S13 S13 S11 S11 V11 D28 D28 D28 D28 K71 K71 K71 K71 W61 W61 W61 W61 Y60 Y60 Y60 Y60 E9 N69 N69 N69 E9 E9 E9 Y37 Y37 D57 D57 D57 D57 R76 R76 R76 R76 A58 N69 K75 A58 K75 K75 K75 E59 E59 E59 E59 A58 A58 A68 E71 E71 E71 E71 A68 A68 A68 L70 L70 L70 L70 Y30 Y30 Y30 Y30 Pocket 9 Pocket 6 Pocket 4 Pocket 1

80 Análisis por citometría de flujo de la expresión del MHC clase II en PBLs de A. nancymaae (A) y en EBV_LCL de humano (B) Díaz D, et al.immunogenetics:2002:54:251

81 MOLECULAS CD1 Y PRESENTACION DE LIGANDOS NO PEPTIDICOS

82 MOLECULAS CD1 Y PRESENTACION DE LIGANDOS NO PEPTIDICOS 1. Generalidades 2. Características estructurales de la molécula CD1d murina. 3. Características y requerimientos estructurales de los ligandos presentados por CD1. 4. Tráfico y localización intracelular de las moléculas CD1. 5. Función de las moléculas CD1 en inmunidad microbial.

83 Dos Grupos de Moléculas CD1 Humano Conejo Ratón Rata Humano Oveja Humano Humano Humano CD1d CD1d CD1d1-d2 CD1d1 CD1c CD1b CD1b CD1a CD1e Grupo 2 CD1d Grupo 1 CD1a CD1b CD1c CD1e Park, S and Bendelac, A. Nature. 406 : (2000)

84 Distribución de las Moléculas CD1 en Tejidos CD1a C. Langerhans epidermales, Dendríticas bronquiales y derivadas de monocitos. CD1b C. dendríticas de piel, higado, riñon, pulmón y organos linfoides CD1c C. dendríticas de piel,,higado, riñon, pulmón y organos linfoides C. B (20-50 %) de sangre, amigdalas y bazo

85 ESTRUCTURA DE LA MOLECULA CD1d

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91 IDENTIFICACION Y CARACTERIZACION ESTRUCTURAL DE LA MOLECULA CD1b EN Aotus nancymaae

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93 Expresión de CD1 en A. nancymaae y en humno a patir de PBLs y monocitos derivados de células dendríticas por citometría de flujo usándo anti-cd1b Castillo F, et al. Immunogenetics:2002:54:251

94 Comparación de la secuencia de la proteína CD1b de A. nancymaae y de humano deducida a partir de la secuencia de nucleótidos Castillo F, et al. Immunogenetics:2002:54:251

95 Estructura tridimensional de la molécula CD1b de A. nancymaae Castillo F, et al.immunogenetics

96 Comparación estructural de CD1a de humano (amarillo), CD1b de humano (azul) y CD1b de A. nancymaae (negra), obtenida por minimización y las proteínas Cd1 de ratón (rosado). Castillo F, et al. Immunogenetics:2002:54:251

97 CD1 FcRn H-2K DR

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