CURSO DE POSTGRADO. Embriología Preimplantacional. Reproducción Asistida y Transgenesis. N o m b r e C u r s o

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1 UNIVERSIDAD DE CHILE FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE POSTGRADO CURSO DE POSTGRADO Embriología Preimplantacional. Reproducción Asistida y Transgenesis N o m b r e C u r s o SEMESTRE 2º AÑO 2015 PROF. ENCARGADO Juan Segura-Aguilar N o m b r e C o m p l e t o C é d u l a I d e n t i d a d Programa de Farmacología Molecular y Clínica, ICBM, FM, UCH U N I D A D A C A D É M I C A TELÉFONO jsegura@med.uchile.cl TIPO DE CURSO CLASES SEMINARIOS PRUEBAS TRABAJOS Básico ( B á s i c o, Av a n z a d o, C o m p le m e n t ar i o, S e m i n a r i o s B i b l i o g r á f i c o s, F o r m a c i ó n G e n e r a l) 7 hrs. Presenciales hrs. Presenciales hrs. presenciales hrs. presenciales Nº HORAS PRESENCIALES 22 Nº HORAS NO PRESENCIALES 32 Nº HORAS TOTALES 54 CRÉDITOS 2 ( 1 C r é d i t o E q u i v a le a 3 0 H o r a s S e m e s t r a le s ) CUPO ALUMNOS 2 10 ( N m í n i m o ) ( N m á x i m o ) PRE-REQUISITOS Formación de pregrado en ciencias biológicas INICIO 7 de 2015 TERMINO 16 de 2015 DIA POR SESION Según calendario HORARIO POR SESION 11:00-13:00 LUGAR A definir, 2º piso, Escuela de Postgrado, Pabellón F, FM, UCH E s c u e la D e P o s t g r a d o ( S a la a d e t e r m i n a r ) u o t r o lu g a r

2 METODOLOGÍA - Clases - Ensayo bibliográfico - Evaluaciones escritas - Demostraciones de cultivo y micro manipulación e micro inyección. ( C l a s e s, S e mi n ar i o s, Pr á c t i c o s ) EVALUACIÓN (INDICAR % DE CADA EVALUACIÓN) - Ensayo bibliográfico (escrito y presentacion)15% - Exposición ensayo bibliográfico 10% - Tres pruebas escritas (raportes de laboratorio) 25% (c/u) PROFESORES PARTICIPANTES (INDICAR UNIDADES ACADEMICAS) Profesor Juan Segura-Aguilar, Programa de Farmacología Molecular y Clinica, ICBM, Fac. Medicina, U. de Chile Profesor Jose Inzunza, Department of Biosciences and Nutrition. Karolinska Institutet, Novum, Suecia. El Profesor José Inzunza, defendió su tesis de doctorado en el departamento de Obstétrica y ginecología del Instituto Karolisnka, Karolisnka Hospital, Estocolmo. Anterior a esto trabajo en transgénesis y manipulación de embriones. Con mas de 10 anos de experiencia en citogenética y transgénesis fue uno de los pioneros en la obtención de animales transgénicos en Suecia. Trabajo durante su tesis de doctorado en la implementación del programa clínico de diagnostico preimplatacional de embriones con el objeto de ayudar parejas con letalidad infantil a consecuencia de malformaciones genéticas. También participo en la implantación de la investigación con células madres de origen embrionario en Suecia. Creando el primer banco de células madres de Escandinavia, hoy cuenta con mas de 30 líneas celulares consolidadas. Trabajo en reprogramación celular por medio de la transferencia de núcleo somático, clonación (SCNT). Actualmente es Docente y Profesor asociado del Departamento de Biociencia del Karolinska Instituto, y su rama de investigación se divide en dos importantes ares: células madres, tumorogenesis y estabilidad genética de las líneas de células madres y células inducidas. Cáncer de ovario y próstata usando modelos de animales transgénicos.este curso se dicto en año 2014 de forma exitosa y con muy buena evaluación por parte de los estudiantes. 2

3 DESCRIPCIÓN / OBJETIVOS El objetivo del curso es instruir a los participantes en biología reproductiva con énfasis en las tecnologías de reproducción asistida (RA) y o transgénesis (Tg). Proveer al participante de experiencia práctica y entrenamiento en embriológica y técnicas de micromanipulación. Proporcionar el entendimiento de los componentes de los sistemas de cultivo utilizados en RA, y para que el estudiante pueda evaluar, solucionar y mejorar los sistemas existentes, aspectos esenciales del embrión en cultivo, cómo mantener el entorno fisiológico, medios de cultivo y los componentes principales de medios de cultivo, cómo evaluar la función del sistema in vitro, el desarrollo del embrión desde la fecundación a la implantación, los principales puntos de control, parámetros morfológicos en la selección de embriones en diferentes etapas y signos importantes de desarrollo anormal. Los participantes recibirán un conocimiento teórico y práctico de las técnicas disponibles y utilizadas para caracterizar y evaluar el potencial de desarrollo de ovocitos, zigotos y embriones post días 0-3 así como D4-D6, y el uso de esta evaluación para la selección de embriones para la transferencia y congelación. Paralelo a esto el curso proporcionará al estudiante la comprensión de nuevas técnicas en RA y Tg, como también diagnóstico preimplantaciónal (PGD), inyección intracitoplásmica de esperma (ICSI), derivación de células madre de origen embrionarias, como también procedimiento de transferencia de núcleos o clonación terapéutica, la implicación ética y el estado actual de esta investigacion. La parte genética de este curso le proporcionará al estudiante adentrarse a nivel molecular y las implicación en el desarrollo de la maduración del embrión y de los ovocitos. Además la sesión práctica del curso ofrecerá una amplia variedad de datos para analizar. Esta práctica ofrece experiencia de material muy experimental para la manipulación de gametos y embriones en diferentes etapas, manipulación de gametos por vía de la micromanipulación (ICSI) Esto proporcionará experiencia a los estudiantes para una mejor comprensión de estas sofisticadas técnicas. Las demostraciones prácticas de laboratorio y trabajo individual contribuirán a un buen ensayo o temática en el examen final del curso y/o trabajo de proyecto individual. Al concluir este curso los estudiantes deben tener una buena comprensión de: Por qué sistemas in vitro son subóptimos en la producción de embriones humanos en relación con desarrollo en vivo Componentes principales del sistema de cultivo (medios de cultivo, técnicas de cultivo, plásticos, gases, incubadoras, estaciones de trabajo, ambiente de laboratorio, materiales etc..) Propiedades físico-químicas de sistema de cultivo (osmolaridad y ph de los medios de cultivo, temperatura, niveles de luz) y cómo estos pueden ser influenciados Constitución de fluidos tubáricos y uterinos y la evolución de medios de cultivo utilizados en los programas de RA, así como los requerimientos nutricionales de las diferentes etapas de la célula de gametos a blastocito Características funcionales de cultivo de tejidos diferentes incubadoras Características funcionales de diferentes estaciones de trabajo para la RA y Tg y sus beneficios La influencia del medio ambiente clínica y laboratorio de cultivo de embriones La influencia de la calidad de los materiales sobre los resultados en RA y Tg La morfología de los ovocitos, zigotos y embriones en las diferentes fases, scoring de mórula y blastocitos Hitos del desarrollo del ovocito fecundado Predictores de potencial de desarrollo Pruebas bioquímicas para la predicción del potencial de desarrollo El uso de ultrasonido para evaluar la calidad ovocitaria Los Estudiante debe ser consciente de los aspectos generales y la implicación de la investigación de células madre y la potencialidad que esto representa para el uso clínico Aspectos morfológicos de los blastocitos para derivación de métodos ICM y derivación Caracterización de las células madre embrionarias y la importancia de la pluripotencia de las células La diferenciación celular y análisis de células madre y lo que está en curso en este campo de investigación. La diferenciación celular y análisis de células madre y lo que está en curso en este campo de investigación. El problema inmunológico y la producción de células madre embrionarias isogonics por transferencia de núcleos de células somáticas (SCNT) Finalmente los estudiantes mejorarán su capacidad de producir explicaciones coherentes, lógicas y concisas de los datos y conceptos - tanto escritas como orales, a través de la consideración del material de este curso. Los estudiantes también desarrollarán su capacidad de criticar literatura científica relacionada con RA/tg y reproducción de manera constructiva e informada 3

4 CONTENIDO/ TEMAS 1. Espermatogénesis y ovogénesis (gametogénesis) 2. Cultivo y obtención de gametos en el laboratorio 3. Medios de cultivo y re-agentes 4. La fertilización in vitro y el estudio del desarrollo del embrión (que hay en la investigación de infertilidad) 5. Diagnostico pre-inplantacional, PGD ( aspectos genéticos y éticos sobre este técnicas) 6. Inyección intra-citoplasmática del espermatozoide (ICSI) aspectos clínicos 7. El blastocito y la diferenciación celular, Mecanismos y vías de desarrollo 8. Cryo-preservación de gametos y embriones (técnicas y investigación) 9. Técnicas de micro-manipulación embrionaria 10. Transgénesis y modelos transgénicos (técnicas y desarrollo) 11. Derivación de células madres de origen embrionario (caracterización, diferenciación e investigación) 12.Reprogramacion celular (investigación) Transferencia de núcleo celular (SCNT) BIBLIOGRAFÍA Bibliografía Básica Embriología humana, William J. Larsen, tercera edición, Churchill Livinstone, 2001 Infertilidad; Julius Hreinsson, Lars Hamberger, Thorir Tennis, Studentlitteratur, 2005 Manipulación de los embriones de ratón Tercera edición del "Manual de laboratorio" Andras Nagy, Marina Gertsenstein, Kristina Vintersten, Richard Behringer, 2003 Bibliografía Recomendada Laboratorio de fecundación in vitro " Aspectos de laboratorio de fertilización in-vitro"editor: M. Bras, J.W. lente, M. H. Piederiet, h Rijinders, M. Verveld, G.H. Zeilmaker, 1996 Handouts de las presentaciones que se realizaran durante el desarrollo del curso. 4

5 CALENDARIO DE ACTIVIDADES (A continuación señalar: Descripción de la actividad, fechas, horas presenciales y no presenciales y Profesores a cargo) FECHA HORAS PRESEN -CIALES HORAS NO PRESEN- CIALES DESCRIPCION ACTIVIDAD PROFESOR 7 Introducción. Entrega de trabajos de literatura (individual) Espermatogénesis y ovogénesis (Individual) Desarrollo del Zigoto (D0 D6) (teoría) Fertilización in vitro y cultivo (laboratorio) (cultivo in vitro y obtención de lo mismos) análisis y valoración (laboratorio) Teoría sobre las técnicas de micro manipulación de embriones y gametos 11 Técnicas de micromanipulación Microscopio Setup (Lab demo) 12 Cultivo de embriones (Lab. demo) Células madre de origen embrionario (derivación, consolidación, caracterización y transferencia de núcleo (SCNT). Aspectos éticos y aplicación clínica Sobre el trabajo de literatura (preparación) Seguimiento de embriones en cultivo (Lab) 16 Entrega del reporte de laboratorio Presentación del trabajo de literatura (examen) Evaluación del curso 5