Manual Toma de Muestras Microbiología

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1 Elaborado por: Revisado por: Aprobado por: TM. Mra. Elena Díaz F. TM. Roxana Cornejo M. Dra. Sonia Correa F. Jefe Depto. Calidad e IAAS HRR. BQ. Rodrigo González A. Encargado Calidad Laboratorio Clínico HRR Dr. Adriana Pinto T. Jefe Laboratorio Clínico HRR Firmas Firma Firma Manual Toma de Muestras Microbiología

2 Página 1 de 70 INDICE INTRODUCCIÓN... 4 OBJETIVO... 4 ALCANCE... 4 RESPONSABLES... 5 DEFINICIONES... 5 DESARROLLO... 6 Requisitos para una buena toma de muestra Uso correcto de las órdenes de exámenes NORMA DE TOMA DE CULTIVOS CRITERIOS DE RECHAZO DE SOLICITUDES Y/O MUESTRAS TOMA DE MUESTRAS CULTIVO DE ANAEROBIOS CULTIVO AET CULTIVO CVC COPROCULTIVO EXPECTORACIÓN CULTIVO FARINGEO HEMOCULTIVO Manual Toma de Muestras Microbiología Página 1

3 Página 2 de 70 Relación sangre / caldo y tipos de frascos: HEMOCULTIVOS CUANTITATIVOS BACTEREMIA ASOCIADA A CVC ÚLCERAS Y NÓDULOS SENOS PARANASALES: INFECCIONES DE HERIDAS MORDEDURAS LAVADO BRONCO-ALVEOLAR LEUCOCITOS FECALES LIQUIDO ASCÍTICO LIQUIDO ARTICULAR O SINOVIAL CULTIVO LCR LÍQUIDO PERITONEAL LÍQUIDO PLEURAL CULTIVO NASAL MYCOPLASMA HOMINIS Y UREAPLASMA UREALYTICUM CULTIVO OCULAR CULTIVO OTICO ROTAVIRUS Y ADENOVIRUS (Por Enzimoinmunoensayo) en deposiciones: CULTIVO SENOS PARANASALES CULTIVO TEJIDOS, BIOPSIAS y ABSCESOS MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL MASCULINO Manual Toma de Muestras Microbiología Página 2

4 Página 3 de 70 UROCULTIVO VIRUS RESPIRATORIOS POR IFI BORDETELLA POR IFD TOXINA CLOSTRIDIUM DIFFICILE TOMA DE MUESTRAS PARA DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DE TUBERCULOSIS MUESTRAS DE LOCALIZACION PULMONAR LOCALIZACION RENAL LOCALIZACION MENINGEA OTROS LIQUIDOS ESTERILES TEJIDO OSEO: BIOPSIA PUS INDICADORES: BIBLIOGRAFIA Manual Toma de Muestras Microbiología Página 3

5 Página 4 de 70 INTRODUCCIÓN El diagnóstico de las enfermedades infecciosas, se basa en el estudio de los síntomas y signos clínicos, así como en la demostración de la presencia del agente, de sus productos o de la huella que este ha dejado en su contacto con el sistema inmune del individuo. El diagnóstico clínico es, en muchos casos, orientador luego de evaluar los datos que ofrecen la historia clínica y la exploración, pero, la confirmación de un diagnóstico clínico, requiere, en enfermedades infecciosas, del diagnóstico etiológico que confiere el laboratorio de Microbiología Clínica. La información diagnóstica que el laboratorio de Microbiología puede proporcionar, depende de la calidad de la muestra recibida. Una muestra mal tomada, en escasa cantidad o mal transportada, determinara un posible fallo en la recuperación de o los agentes patógenos, induciendo errores en el diagnóstico, como también en un tratamiento inadecuado del enfermo. OBJETIVO Normar el proceso de toma de muestras a pacientes hospitalizados y ambulatorios del HRR, y su traslado a Laboratorio, para optimizar el proceso diagnóstico de patologías infecciosas en estos pacientes y contribuir en el éxito de su tratamiento. ALCANCE Todas las muestras de sangre, orina y secreciones obtenidas de pacientes hospitalizados y ambulatorios del HRR que son procesadas en el Laboratorio del HRR, o deben ser trasladadas a Centros de Derivación. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 4

6 Página 5 de 70 RESPONSABLES MÉDICO: Llenar la orden de examen microbiológico en forma completa, con letra clara y legible. En caso que sea necesario recolectar la muestra (Ej: LCR). El cumplimiento de lo descrito en este manual. ENFERMERA: Recolección de la muestra y envío de esta al Laboratorio Clínico en las condiciones y tiempos establecidos en el manual. El cumplimiento de lo descrito en este manual. TENS: Recolección de la muestra y transporte de la muestra. RECEPCIÓN DEL LABORATORIO (OFA/TENS/TÉCNICO DE LABORATORIO): Recibir las muestras y verificar el cumplimiento de los métodos de transporte, rotulación y envase de las muestras, en caso de encontrar algún problema comunicárselo al profesional encargado del examen. Ingreso de las muestras al LIS. PROFESIONAL: Encargado de procesar la muestra, validar e imprimir los resultados de los exámenes. Velar por el cumplimiento de este manual. DEFINICIONES HRR: Hospital Regional Rancagua AET: Aspirado endotraqueal AETC: Aspirado endotraqueal cuantitativo CVC: Catéter venoso central PBE. Peritonitis bacteriana espontánea LES: Lupus eritematoso sistémico VIH: Virus de inmunodeficiencia humana SNC: Sistema nervioso central LCR: Líquido cefalorraquídeo Manual Toma de Muestras Microbiología Página 5

7 Página 6 de 70 DESARROLLO Requisitos para una buena toma de muestra. 1. Personal idóneo en la toma de muestra. 2. Indicaciones claras al paciente respecto del examen se le va a realizar. 3. Preparación adecuada del paciente, como aseo previo, uso de antisépticos, uso de tapón vaginal, cuando corresponda. 4. Muestra representativa del proceso infeccioso. 5. Muestra tomada antes del tratamiento antimicrobiano. De lo contrario especificar en la orden. 6. Muestra tomada con la cantidad adecuada. 7. Uso correcto de los medios de transporte. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 6

8 Página 7 de 70 MUESTRA MEDIO DE TRANSPORTE TIEMPO DE ESTABILIDAD DE LA MUESTRA Aspirado nasofaríngeo para virus respiratorios. Aspirado nasofaríngeo para Bordetella. Coprocultivo. Secreciones en tórula. Hemocultivos Urocultivos Anaerobios Buffer ph 7.2. Suero fisiológico. Cary Blair. Stuart. Frascos comerciales con caldo de cultivo, para método automatizado Tubo o frasco estéril sin medio de transporte Medio de transporte comercial para anaerobios 8 HRS. (4-8ºC) 8 HRS. (4-8ºC) 4 HRS (Tº Ambiente 20-25ºc) 24 HRS (Tº Ambiente 20-25ºc) 8-10 HRS (Tº Ambiente 20-25ºc) 2-4 HRS (Tº Ambiente 20-25ºc) 2 HRS. (4-8ºC) 24 HRS (Tº Ambiente 20-25ºc) 12 HRS (Tº Ambiente 20-25ºc) 8. Número de muestras adecuada. 9. Rotulación de la muestra: deben venir identificadas con letra clara y legible 10. El rótulo del contenedor de muestra debe indicar lo siguiente: Nombre del paciente RUT del paciente Servicio Fecha. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 7

9 Página 8 de Las muestras recolectadas en tubos estériles sin medio de transporte, deben enviarse al laboratorio a la brevedad. Conservación de las muestras en los servicios: lugar fresco y seco. 12. Como normativa de bioseguridad, las muestras deben transportarse al laboratorio, dentro de unidades térmicas, sin hielo o unidad refrigerante, a excepción de los aspirados nasofaríngeos para pesquisa de virus respiratorios. Las muestras deben ser trasladadas en gradillas que permitan mantener los contenedores en forma vertical para evitar derrames. 13. Llenar la orden de examen microbiológico en forma completa, con letra clara y legible. Nombre del paciente. Edad del paciente. Fecha de Nacimiento. RUT. Sexo (específicamente pacientes de Neonatología). Servicio, sala, cama Fecha de la toma de la muestra Diagnóstico clínico. Especificar tipo de muestra, Ej. Orina Secreción herida pie derecho Bilis L.C.R. AETC (aspirado endotraqueal cuantitativo). 14. Especificar examen solicitado, bacteria o grupo de microorganismo que se desea pesquisar, Ej. Anaeróbios. Hongos, Levaduras. Difteria. Gonococo. Vírus Respiratório. Enterococo de deposición. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 8

10 Página 9 de Frente a cualquier duda o consulta referente a determinada muestra, resultado de examen, toma de muestra que no aparezca en este manual, etc., contactarse con el laboratorio de Microbiología, en horario de hrs. de lunes a viernes o con el tecnólogo médico de turno fuera de este horario. 16. Es importante que la solicitud de examen, especifique la edad del paciente, ya sea porque algunos hallazgos bacteriológicos se deben enviar al Instituto de Salud Pública con todos los datos o porque algunos procedimientos de uso de algún determinado medio de cultivo, depende exclusivamente de la edad del paciente: flujos vaginales se les agrega Agar Mac Conkey en menores de 14 años; la vigilancia de Vibrio cholerae difiere en aquellos pacientes mayores de 18 años, de los que tienen menos de ésta edad. Uso correcto de las órdenes de exámenes. EXAMEN ORDEN VIRUS RESPIRATORIO (inmunofluorescencia) Orden normal de Bacteriología adicionada de IRA grave estudio de virus influenza AH1N1. en caso de BORDETELLA PERTUSSIS (inmunofluorescencia): Orden normal de bacteriología PARALISIS FLACCIDA: SARAMPION: HANTA VIRUS: Formulario especial del ISP Formulario especial del ISP Formulario especial del ISP Manual Toma de Muestras Microbiología Página 9

11 Página 10 de 70 NORMA DE TOMA DE CULTIVOS. En relación a la solicitud de cultivos microbiológicos, se recomienda lo siguiente: La solicitud de toma de cultivo debe corresponder a una hipótesis diagnóstica de infección, que requiere su confirmación por laboratorio junto a la identificación del agente causal y el antibiograma para realizar tratamiento específico. No está indicado realizar cultivos rutinarios de vigilancia, como escaras y úlceras de decúbito, TET, CUP, Catéter Venoso Central o al trasladar pacientes desde un servicio a otro, sin una clara sospecha clínica de infección, ya que es sabido que el paciente en menos de 48 hrs. desde su ingreso al establecimiento, es colonizado por microorganismos intrahospitalarios y sus resultados (+) pueden producir confusión y estimular el uso inadecuado de antimicrobianos con el consiguiente aumento de los costos de atención. Se debe consignar la toma de muestras en la ficha clínica y hoja de enfermería en el caso de traslado de paciente desde un servicio a otro, evitando repetir la toma de muestra. En el caso de múltiples heridas o escaras con signo de infección, se recomienda la toma de solo una muestra del sitio más representativo (mayor presencia de secreción purulenta), previo aseo con suero fisiológico. Se debe considerar además, que al solicitar un cultivo se debe esperar su resultado final (hasta 72 hrs.) antes de solicitar nueva muestra, ya que las muestras seriadas en 24 hrs. no han demostrado mejor rendimiento diagnóstico (excepto hemocultivos). No está indicado tomar muestras de loquios, objetos inanimados, manos y nariz del personal (excepto en estudios de portación en casos de brotes) y de antisépticos y desinfectantes (estudios en casos y condiciones especiales). Manual Toma de Muestras Microbiología Página 10

12 Página 11 de 70 CRITERIOS DE RECHAZO DE SOLICITUDES Y/O MUESTRAS Si las solicitudes y/o las muestras no cumplen los requisitos mínimos indispensables para su correcto procesamiento el laboratorio deberá aclarar las discrepancias con el servicio que las envío, previo a su realización y en algunos casos será imposible su procesamiento hasta tanto se envíe la muestra correcta. Los siguientes son algunos ejemplos de ello: A. Discrepancia entre la identificación del paciente que figura en la solicitud del examen y la que figura en el rotulo de la muestra. Acción: Rechazo de la muestra, hasta que se envíe correctamente, por parte del Servicio Clínico. B. No se indica en la solicitud de examen, el tipo de muestra a analizar y/o procedencia anatómica del mismo. Acción: Llamar al servicio que lo envió. No se procesará hasta tanto se conozcan esos datos, imprescindibles para la realización del estudio. C. Muestra enviada en frasco no estéril o con conservantes (formol). Acción: Rechazo de la muestra, hasta que se envíe correctamente, por parte del Servicio Clínico. D. Muestra enviada en envase o tubo con pérdida o derrame Acción: No procesar. Esterilizar la muestra y solicitar una nueva. E. Muestra inadecuada para realizar el estudio solicitado. Acción: No procesar. Informar al servicio que la muestra es inadecuada e indicar cual muestra deberá enviar. F. Cultivo anaerobio solicitado en exudado faríngeo, expectoración, orina, secreciones vaginales, úlceras o fístulas entre otras. Acción: No procesar. Comunicarse con el servicio y explicar las razones. G. Muestra en cantidad insuficiente para realizar los exámenes solicitados: Acción: Solicitar muestra adicional, si no es posible establecer prioridades de procesamiento en acuerdo con el médico tratante. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 11

13 Página 12 de 70 H. Muestras repetidas por más de una vez en el mismo día, excepto hemocultivos. Acción: Procesar una sola muestra por día y comunicarse al servicio para que justifique el procesamiento de las muestras restantes. I. Muestra evidentemente contaminada. Acción: Descartar la muestra y solicitar otra. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 12

14 Página 13 de 70 TOMA DE MUESTRAS CULTIVO DE ANAEROBIOS INDICACIONES: Debe ser realizada por profesional idóneo y SU ENVIO DEBE SER AVISADO PREVIAMENTE AL LABORATORIO, para preparación de la técnica a realizar. SITIO ANATÓMICO MUESTRA METODO LCR Abscesos Punción Lumbar Biopsias de tejidos Aspiraciones con aguja Autopsias o material y jeringa quirúrgico SNC ÁREA DENTAL (Oído-Nasal-Garganta Senos paranasales) ÁREA PULMONAR ÁREA ABDOMINAL TRACTO GENITAL FEMENINO Abscesos Material de Biopsias Sinusal en Sinusitis crónica. Quirúrgica. Transtraqueal Pulmón Broncoscopía Líquido de paracentesis Abscesos profundos Cirugía Laparoscopía quirúrgica Cavidad endometrial Líquido amniótico Placenta Aspiraciones con jeringa Aspiración con jeringa Punción percutánea Catéter con protector de doble envoltura. Aspiración con jeringa libre de contaminación intestinal. Aspiración con jeringa. TRACTO URINARIO Orina Aspiración supra púbica HUESOS Y ARTICULACIONES Artritis supurativa Material de drenaje después de cirugía: Ej.: Osteomielitis. Aspiración de Articulaciones. Aspiración profunda. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 13

15 Página 14 de 70 TEJIDOS BLANDOS: Heridas. Biopsias Senos paranasales Abscesos profundos Celulitis anaerobia. Gangrena vascular infectada. Mionecrosis gangrenosa Muestras quirúrgicas. Biopsias. Superficies ulcerosas. Pus. Abrir y hacer aspiración profunda del margen orilla o lesión ósea subyacente. Del fondo de la herida después de limpieza por arrastre con suero fisiológico. Aspiración con jeringa y pequeño catéter plástico después de asepsia de piel con alcohol 70% Aspiración con jeringa. Aspiración con jeringa. CANTIDAD DE MUESTRA: En lo posible 1-5 ml TRANSPORTE DE MUESTRA: Se utiliza un medio de transporte comercial para anaerobios: Portagem de Biomerieux, diseñado para muestras líquidas. Una vez colocada la muestra dentro del frasco de transporte, mantener a temperatura ambiente. Enviar a laboratorio. ENTREGA DE RESULTADOS: Informe preliminar a las horas. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 14

16 Página 15 de 70 CULTIVO AET INDICACIONES: A todo paciente con sospecha de neumonía asociada a ventilación mecánica, por más de 48 horas y presencia de criterios clínicos radiológicos, en el cual no se hayan efectuado cambios de tratamiento antimicrobiano durante las últimas 72 horas. TOMA DE MUESTRA: Debe ser tomada en forma estéril utilizando un catéter de aspiración introducido en el tubo endotraqueal y conectado el otro extremo del catéter, a un colector o trampa estéril apropiada. El procedimiento debe ser realizado por un profesional entrenado con ayudante. El catéter debe ser introducido hasta encontrar resistencia y no se debe diluir la muestra con el fin de facilitar su recolección. Si las secreciones son espesas, se deben aplicar aspiraciones intermitentes hasta conseguir la muestra. La muestra debe ser enviada rápidamente al laboratorio, especificando que se requiere cultivo de aspirado endotraqueal cuantitativo (AETC). TRANSPORTE: Se transporta en trampa de aspiración, cerrada a temperatura ambiente. HORARIO DE RECEPCIÓN: De Lunes a Viernes hasta las 12 AM. No enviar fuera de este horario ni en días festivos (sin excepción). ENTREGA DE RESULTADOS: A las horas. Se informará cada microorganismo aislado con su recuento de colonias y estudio de sensibilidad correspondiente. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 15

17 Página 16 de 70 CULTIVO LÍQUIDO BILIAR. INDICACIONES: Colangitis Estudio de portación de Salmonella typhi. TOMA DE MUESTRA: La bilis se puede recolectar: Por punción directa de la vía biliar durante la cirugía. A través de endoscopia digestiva alta, desde la ampolla de vater. Recolectar en un tubo estéril sin medio de transporte. CANTIDAD DE MUESTRA: 4 a 5 ml. es suficiente. Recolectar en tubo de polietileno estéril, tapa rosca. TRANSPORTE: Transportar al laboratorio lo más pronto posible, dentro de unidad de transporte térmico ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 hrs. mínimo. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 16

18 Página 17 de 70 CULTIVO CVC INDICACIONES: El estudio de catéteres que se realiza en forma rutinaria a nivel del Laboratorio de Microbiología es la técnica semi- cuantitativa de Maki. Esta técnica permite valorar la contaminación extraluminal del catéter, principal mecanismo por el cual se contaminan los catéteres de corta permanencia y pueden llegar a ser el origen de una bacteriemia. Paciente con catéter venoso central que presente fiebre sobre 38 grados C. aumento de volumen, enrojecimiento, aumento de temperatura local en sitio de inserción del catéter, o que presente fiebre > 38º, sin foco detectado, que se sospeche bacteremia asociada a CVC, y que se retire el catéter. TOMA DE MUESTRA: Desinfectar con alcohol al 70% una zona de piel de unos 10cm correspondientes a la zona de entrada del catéter. Hacerlo en forma de círculos comenzando por el centro. Retirar el catéter con la máxima asepsia. Ayudándonos de las pinzas y las tijeras estériles, cortar los 3 cm dístales del catéter que corresponden a la porción intravascular. Introducir el segmento de catéter en un tubo de polietileno, tapa rosca, estéril, correctamente identificado, o tubo de vidrio sin medio de transporte. TAMAÑO DE LA MUESTRA: 3cm de la porción más distal. Porciones mayores dificultan el procesamiento en el laboratorio. Debe acompañarse de 2 hemocultivos periféricos. TRANSPORTE: La muestra deberá enviarse al laboratorio en un periodo inferior a 30 minutos. Cuando esto no sea posible deberá conservarse a 4 C por 12 horas como máximo. Llevar a laboratorio. ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 hrs. mínimo. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 17

19 Página 18 de 70 COPROCULTIVO. TOMA DE MUESTRA: La muestra para el cultivo microbiológico puede obtenerse de 2 formas, dependiendo del estado del paciente: TORULA RECTAL O SONDA RECTAL: Estas técnicas se utilizan especialmente en el niño menor. Con tórula: con tórula de algodón, humedecer en el medio de transporte Cary y Blair en introducir por el recto aproximadamente 2 cm., haciéndole girar suavemente. Volver la tórula al tubo con medio de transporte. Sonda rectal: Se debe emplear una sonda de NELATON fina y se aspira con jeringa. Agregar sobre el medio de transporte Cary y Blair sin la tórula, 1-2 ml. del aspirado. Volver a colocar la tórula. RECOLECCIÓN DE DEPOSICIÓN EMITIDA: El paciente debe emitir la deposición en un recipiente muy limpio, desde el cual se recolecta, con la tórula de algodón, la fracción de deposición que muestra mayor alteración (sangre, pus, mucosidad). Colocar la tórula en el medio de transporte. NUMERO DE MUESTRAS: Se deben tomar 2 a 3 muestras de deposición en tiempos diferentes. Enviar juntas al laboratorio. Para estudio de portadores, se deben tomar 3 a 4 muestras seriadas (en días diferentes) Manual Toma de Muestras Microbiología Página 18

20 Página 19 de 70 TRANSPORTE: Las muestras se mantienen y se transportan a temperatura ambiente, en medio de transporte Cary y Blair. ENTREGA DE RESULTADOS: A las 72 horas. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 19

21 Manual Toma de Muestras Microbiología Página 20 de 70 EXPECTORACIÓN INDICACIONES: Paciente con neumonía Enfermedad bronquial crónica reagudizada. TOMA DE MUESTRA: 1. Paciente debe lavarse los dientes y realizar enjuagues con agua corriente, para limpiar la cavidad oral. 2. Obtener el esputo tras una expectoración profunda, luego de un esfuerzo de tos, preferentemente matinal. 3. El kinesiólogo o enfermera debe asistir al paciente durante la obtención de ésta. La muestra debe provenir del sector bajo del tracto respiratorio. 4. La saliva no sirve para realizar este estudio. 5. De no producirse expectoración espontánea, puede inducirse el esputo con nebulizaciones con suero fisiológico. 6. Obtener muestra previo inicio de la terapia antimicrobiana. 7. Depositar muestra en placa Petri estéril, diseñada para este propósito, o en frasco de boca ancha tapa rosca estéril. VOLUMEN: De 2 a 10 ml. si es posible. TRANSPORTE: La muestra debe enviarse de inmediato al Laboratorio. No debe demorar más de dos horas en llegar al laboratorio. Transportar placa dentro de una unidad de transporte térmico. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 20

22 Página 21 de 70 NOTA: Una muestra representativa debe presentar al Gram las siguientes características, en cuyo caso contrario el examen se debe repetir: 25 Polimorfonucleares por campo. 10 Células epiteliales por campo. HORARIO DE RECEPCION: De 8.00 a horas, de Lunes a Viernes. ENTREGA DE RESULTADOS: A LAS hrs. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 21

23 Página 22 de 70 CULTIVO FARINGEO. INDICACIONES: El agente principal de faringitis es Streptococcus pyogenes. El estudio de Neisseria meningitidis se realiza con propósitos epidemiológicos. El estudio de faringitis gonocócica debe ser solicitada en forma específica por el médico. El estudio de Corynebacterium difhtheriae se realiza sólo cuando se solicita expresamente. TOMA DE MUESTRA: 1. SECRECION FARINGEA. Buena iluminación y exposición de la faringe del paciente. Deprimir la lengua con baja lengua. Frotar la tórula con la pared posterior de la faringe y las amígdalas tocando cualquier exudado. Evitar tocar la lengua, úvula y pared de la boca. 2. ESTUDIO PARA CORYNEBACTERIUM DIPTHERIAE: Tomar 2 muestras con tórula, utilizando baja lengua, pasándola por el reborde de la pseudomembrana. 3. ESTUDIO PARA NEISSERIA MENINGITIDIS: Muestra nasofaríngea. Tomar la muestra con tórula, por detrás de la úvula en la porción nasal de la faringe. 4. ESTUDIO PARA N. GONORRHOEAE: Tomar la muestra con tórula como en cultivo faríngeo. TRANSPORTE: Enviar la tórula en medio de transporte Stuart, a temperatura ambiente, dentro de una unidad de transporte térmica. ENTREGA DE RESULTADOS: A las hrs Manual Toma de Muestras Microbiología Página 22

24 Manual Toma de Muestras Microbiología Página 23 de 70 HEMOCULTIVO. INDICACION: Compromiso del estado general asociado a: Fiebre > 38 C. Hipotermia < 36 C. Leucocitosis > Granulocitopenia < polimorfonucleares x ml. O una combinación de ellos. En pacientes que por su condición debilitada no responden con fiebre, guiarse por los síntomas y signos clínicos de sepsis: taquicardia, palidez, hipotensión, sudoración. Paciente con antimicrobianos, en que se sospecha falla de tratamiento, previo al cambio de terapia. MOMENTO DE LA OBTENCION: Lo antes posible después de constatada el alza febril (38 ) INTERVALO DE TIEMPO: Tomar en forma simultánea, el set de hemocultivos pero de sitios de punción diferentes. (brazo izquierdo, brazo derecho). VOLUMEN DE SANGRE POR FRASCO Y N DE MUESTRAS: En adultos tomar 10 ml. de sangre por frasco, completando set de 2 muestras. Endocarditis infecciosa : 3 frascos en 24 hrs. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 23

25 Manual Toma de Muestras Microbiología Página 24 de 70 Esperar hasta 24 hrs. antes de repetir un nuevo set de 3 frascos adicionales; si los 3 frascos primeros están negativos hasta ese momento. 1. RECIEN NACIDOS: 1 ml. de sangre por frasco completando un set de 2 frascos. 2. LACTANTES 1 MES- 1 AÑO: 1,5 ml. de sangre por frasco, completando un set de 2 frascos. 3. MAYORES DE 2 AÑOS: 2,5 ml. de sangre por frasco, completando un set de 2 frascos. 4. ADOLESCENTES: 5 10 ml. de sangre por frasco, completando un set de 2 frascos. Relación sangre / caldo y tipos de frascos: Se debe mantener una relación 1/5 a 1/10 respecto de la dilución sangre / caldo de cultivo. Se utilizan frascos comerciales BACT ALERT. Frascos verdes, con 40 ml. de medio de cultivo, para pacientes adultos: agregar 10 ml. sangre por frasco. Frascos amarillos, con 20 ml. de medio de cultivo, para pacientes pediátricos, máximo de 4 ml. de sangre por frasco. Contienen partículas de carbón para inactivar antibióticos. Ambos tipos de frascos permiten el crecimiento de bacterias aerobias, anaerobios facultativos, hongos. Para anaerobios se necesitan frascos especiales. TOMA DE MUESTRA: 1. Muestra tomada por personal adiestrado (enfermera), con guantes de procedimiento. 2. Seleccionar la vena periférica de más fácil acceso. 3. Lavar la extremidad elegida con agua y jabón. 4. Aplicar con tórula de algodón, alcohol 70 %, en forma concéntrica, partiendo desde el lugar donde se va a puncionar, hacia la periferia. 5. Puncionar la vena y aspirar sangre. 6. Desinfectar la tapa frasco donde se va a inocular la sangre, con alcohol 70% 7. Pinchar la tapa de goma e inocular la sangre que se mezcla con el medio de cultivo. No cambiar de aguja para hacer este proceso. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 24

26 Página 25 de 70 TRANSPORTE: A temperatura ambiente, como máximo 6 horas antes de incubarse en el laboratorio. HORARIO DE RECEPCION: Las 24 hrs. del día. ENTREGA DE RESULTADOS: Los hemocultivos se mantienen por 5 días antes de darlos por negativos. La excepción se da ante la sospecha de algún microorganismo fastidioso, de hongo o ante un diagnóstico de Endocarditis bacteriana, en el cual se incuban hasta 10 días. En caso de estar positivos. Se da un informe preliminar. HEMOCULTIVOS CONTAMINADOS : En general el laboratorio considera un hemocultivo contaminado si solo 1 de 2 botellas es positiva para: Staphylococcus coagulasa negativo Bacillus spp Corynebacterium spp Propionibacterium spp Otros agentes que podrían ser considerados contaminates: Streptococcus grupo viridans No fermentadores ambientales Manual Toma de Muestras Microbiología Página 25

27 Manual Toma de Muestras Microbiología Página 26 de 70 HEMOCULTIVOS CUANTITATIVOS PROPÓSITO: Detectar en forma oportuna las infecciones asociadas a catéter venoso central, con el fin de indicar con justificación el retiro del catéter. Se basa en el recuento diferencial de bacterias presentes en la circulación sistémica periférica y en el catéter venoso central. No se requiere infección en el sitio de inserción del catéter para indicar bacteriemia asociada a CVC. INDICACIONES: Sensibilidad: > 80% Especificidad: % A todo paciente con catéter venoso central, de más de 24 horas, con fiebre mayor o igual a 38 C, sin otro foco infeccioso documentado. ORDEN MÉDICA: Se debe especificar en la orden médica, cultivo de hemocultivos cuantitativos, central y periférico. MUESTRAS: Rotular 2 jeringas CENTRAL Y PERIFÉRICA. 1. Preparación de la piel para punción periférica, del mismo modo que para toma de hemocultivos. 2. Extraer 1.0 ml. de sangre por vena periférica con jeringa heparinizada. 3. Taponar jeringa.(tapones estériles) 4. Destapar catéter central. 5. Con técnica aséptica, retirar suero del catéter con una jeringa. 6. Extraer con jeringa heparinizada 1.0 ml. de sangre por el catéter central. 7. Taponar jeringa (tapones estériles) 8. Colocar 5 ml. de suero fisiológico estéril por el catéter y cerrar el circuito 9. Colocar apósitos y tela. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 26

28 Página 27 de 70 TRANSPORTE: Enviar inmediatamente al laboratorio, el par de jeringas taponadas, rotuladas, a temperatura ambiente. La orden debe indicar hemocultivos cuantitativos. Se debe acompañar de 2 hemocultivos tradicionales. HORARIO DE RECEPCIÓN: De lunes a viernes hasta las 12 hrs. AM. No enviar fuera de este horario ni en días Sábado y festivos. ENTREGA DE RESULTADOS: horas. BACTEREMIA ASOCIADA A CVC. Los hemocultivos automatizados permiten agregar un método adicional de diagnóstico de bacteriemia asociada a catéter central. Se toma una muestra de sangre, del CVC y otra muestra de sangre periférica, según procedimiento indicado previamente. ROTULAR: frasco 1: CVC y frasco 2: periférico. VOLUMEN: 5-10 ml. en pacientes adultos. Hasta 4 ml. en pacientes pediátricos. IMPORTANTE: Igual volumen en ambos frascos. ORDEN MÉDICA: Indicar Hemocultivos CVC y periférico. TRANSPORTE: Enviar inmediatamente al Laboratorio, a temperatura ambiente. HORARIO RECEPCIÓN: Las 24 hrs. del día. Se incuban en forma habitual en equipo automatizado, y si la muestra central es positiva con más de 2 horas de diferencia con respecto a la muestra periférica, es diagnóstico de bacteriemia asociada a CVC. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 27

29 Página 28 de 70 INFECCIONES DE LA PIEL Y TEJIDO SUBCUTÁNEO LESIONES SUPERFICIALES ERITEMATOSAS ENFERMEDADES Y SINTOMAS MICROORGANISMOS QUE COMUNMENTE LA CAUSAN ERISEPELA Streptococos grupo A. (piógenes) CELULITIS IMPÉTIGO: Streptococcus grupo A. Staphylococcus aureus. Anaerobios. Streptococcus grupo A. Staphylococcus aureus. FOLICULITIS: PARONIQUIA PANADIZO Staphylococcus aureus. Pseudomonas aeruginosa. Staphylococcus aureus. Candida spp. Staphylococcus aureus. Virus herpes simplex. ERSIPELOTHRIX Ersipelothrix insidiosa Manual Toma de Muestras Microbiología Página 28

30 Página 29 de 70 TOMA DE MUESTRA Y TRANSPORTE EXUDATIVAS: Previa limpieza, con una tórula tomar la muestra desde el borde de la lesión. COSTRAS: Remover la costra con suero fisiológico estéril y frotar la tórula. INFECCIONES PURULENTA: Aspirar en la zona de inflamación más aparente (bordes) con aguja y jeringa con 0.2 ml. de suero fisiológico estéril. TRANSPORTE AEROBIO: Tórulas en medio de Transporte Stuart. Las secreciones purulentas en medio de transporte Stuart sin tórula, enviar dentro de unidad de transporte térmico. TRANSPORTE ANAEROBIO: En medio de transporte comercial para anaerobios dentro de unidad de transporte térmica. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 29

31 Página 30 de 70 ÚLCERAS Y NÓDULOS ENFERMEDADES Y SINTOMAS MICROORGANISMOS QUE COMUNMENTE LA CAUSAN TOMA DE MUESTRA Y TRANSPORTE DIFTERIA CUTANEA. Corynebacterium Diphteriae. Toma de exudados con tórula. ANTHRAX. Bacillus anthracis. Toma de exudados y heridas con torula. Tejidos o material contaminado con B. anthracis. Sangre. TRANSPORTE: Tórulas en medio de transporte Stuart. Tejidos en tubo estéril. Frascos de hemocultivo en caso de sangre. Enviar dentro de unidad de transporte térmico. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 30

32 Página 31 de 70 SENOS PARANASALES: ENFERMEDADES Y SINTOMAS MICROORGANISMOS QUE COMUNMENTE LA CAUSAN TOMA DE MUESTRA Y TRANSPORTE ACTINOMICOSIS Actinomyces spp. Proopribacterium propiónica. Desinfectar la piel con alcohol 70. Aspirar con aguja y jeringa desde abscesos. Material desde biopsias. TRANSPORTE: En medio de transporte comercial para anaerobios dentro de unidad de transporte térmico. Diversos focos de infecciones profundas o crónicas. Staphylocccus aureus. Enterobacterias. Pseudomonas spp. Aspiración con aguja y jeringa desde abscesos. TRANSPORTE: En tubo estéril o en medio de transporte Stuart sin la tórula; dentro de unidad de transporte térmico. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 31

33 Página 32 de 70 INFECCIONES DE HERIDAS ENFERMEDAD Y SINTOMAS MICROORGANISMOS QUE COMUNMENTE LA CAUSAN TOMA DE MUESTRA Y TRANSPORTE INFECCIONES DE HERIDAS POST OPERATORIA Staphylococcus aureus Streptococcus Grupo A Enterococcus Enterobacterias Bacteroides Clostridium -Limpieza por arrastre con suero fisiológico, luego aplicar de la lesión. -Pus por aspiración con aguja y jeringa. -Tejidos desde biopsias. TRANSPORTE: AEROBIO: Medio de transporte Stuart Tubo estéril. ANAEROBIO: Medio de transporte comercial para anaerobios. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 32

34 Página 33 de 70 MORDEDURAS ENFERMEDAD Y SINTOMAS MICROORGANISMOS QUE COMUNMENTE LA CAUSAN TOMA DE MUESTRA Y TRANSPORTE MORDEDURAS ANIMALES Pasteurella multocida. Streptobacillus moniliformes. Spirillum minus. -Limpieza por arrastre con suero fisiológico, luego aplicar tòrula en el fondo de la lesión. -Pus, por aspiración con aguja y jeringa. TRANSPORTE: AEROBIO: Tórula en medio de transporte Stuart. ANAEROBIOS: En medio de transporte comercial para anaerobios. ENTREGA DE RESULTADOS: AEROBIO: Hrs. Mínimo. ANAEROBIO: Informe preliminar a las hrs. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 33

35 Página 34 de 70 LAVADO BRONCO-ALVEOLAR INDICACIONES: Paciente con neumonía de difícil diagnóstico Pacientes inmunodeprimidos con neumonía. TOMA DE MUESTRA: Debe ser tomada por un médico especialista. TRANSPORTE: En el mismo set de toma de muestra, de inmediato al laboratorio, sin refrigerar. ENTREGA DE RESULTADOS: A las hrs. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 34

36 Página 35 de 70 LEUCOCITOS FECALES TOMA DE MUESTRA: 1.- Deposición por emisión espontánea. 2.- Deposición obtenida por sonda rectal. En ambos casos de deposición se deposita en una frasco de polietileno entregar a laboratorio. limpio, LIMITACIONES: FALSOS NEGATIVOS: Deficiente toma de muestra. FALSOS POSITIVOS: Dermatitis del pañal. COLITIS ULCEROSA: Leucocitos abundantes. ENTREGA DE RESULTADOS: Durante el día. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 35

37 Página 36 de 70 LIQUIDO ASCÍTICO GENERALIDADES: Liquido peritoneal: líquido ubicado entre el peritoneo parietal y visceral (cavidad abdominal, peritoneal) Ascitis: acúmulo anormal de líquido en la cavidad abdominal. Peritonitis: inflamación del peritoneo. Peritonitis primaria: peritonitis bacteriana sin evidencia de ruptura de víscera. PBE: peritonitis bacteriana espontáneas (cirrosis). TOMA DE MUESTRA: Por punción y aspiración de líquido de cavidad abdominal. -Personal entrenado -Técnica aséptica NUMERO DE MUESTRAS: 1. Tubo con Heparina (tapa verde): Para análisis bioquímico (glicemia, proteínas, otros). 2. Tubo con EDTA (tapa lila): Para recuento celular y diferencial. 3.-Tubo estéril para microbiología ó tubo sin anticoagulante estéril (tapa roja):3-5ml para gram y cultivo. 4. Inoculación directa en frasco de hemocultivo pediátrico (amarillo), con 1-3 ml de líquido. TRANSPORTE: Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente. HORARIO RECEPCIÓN: Durante las 24 horas. ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 horas, mínimo. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 36

38 Página 37 de 70 LIQUIDO ARTICULAR O SINOVIAL INDICACIONES: Fundamentalmente para evaluar las alteraciones del líquido sinovial en las artritis. La inflamación de estas articulaciones se puede producir por: Agente físico o mecánico (traumatismos, gota) Agentes químicos (hemofilia) Artritis supuradas o sépticas Artritis por reacciones inmunológicas o autoinmunes Artritis reumatoide y fiebre TOMA DE MUESTRA: Se realiza por punción articular: Personal entrenado Técnica aséptica Anestesia local Procesar antes de 4 horas de obtenido NUMERO DE MUESTRAS: 1. Tubo con Heparina (tapa verde): Para análisis bioquímico (glicemia, proteínas, otros). 2. Tubo con EDTA (tapa lila): Para recuento celular y diferencial. 3.-Tubo estéril para microbiología ó tubo sin anticoagulante estéril (tapa roja):3-5ml para gram y cultivo. 4. Inoculación directa en frasco de hemocultivo pediátrico (amarillo), con 1-3 ml de líquido. TRANSPORTE: Piedra angular del diagnóstico etiológico: Antes de iniciar antibióticos Transporte y procesamiento rápido Sensibilidad de Gram y Cultivo: 60-90%. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 37

39 Página 38 de 70 Transportar las muestras tomadas, lo más rápido posible al laboratorio, a temperatura ambiente. HORARIO RECEPCIÓN: Durante las 24 horas. ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 horas, mínimo. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 38

40 Página 39 de 70 CULTIVO LCR INDICACIONES: -Meningitis infecciosa -Poliomielitis -Hemorragias meníngeas -LES -Encefalitis -Sarcoidosis -Neuropatías -Vasculitis -Hipertensión intracraneal benigna -Sífilis nerviosa -Epilepsia -Hidrocefalia normo-tensa -Demencia de origen metabólico -Síndrome Guillain Barre -Esclerosis múltiple y sus variantes -Personas VIH + -Linfoma, leucemia y otro tipo de tumores que involucran al SNC. TOMA DE MUESTRA: Muestra obtenida por un médico entrenado en la técnica de punción lumbar. Técnica aséptica. PROCEDIMIENTO: Limpieza por arrastre de la región lumbar del paciente con agua y jabón. Limpiar la piel con tórula de algodón impregnada con alcohol 70% mediante movimientos concéntricos que van desde el lugar donde se realizará la punción, hacia afuera. Proceder a la punción lumbar con técnica aséptica (campo estéril y equipo de profesionales con vestimenta de protección estéril. Recolectar el LCR en frascos estériles plásticos con tapa rosca (citoquímico, bacteriológico y TBC cuando se sospeche). 1.-Tubo con Heparina, tapa verde: para análisis bioquímico. (Glucosa, y proteínas) 2.- Tubo con EDTA, tapa lila: para recuento celular y diferencial. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 39

41 Manual Toma de Muestras Microbiología Página 40 de Tubo estéril para microbiología,o tubo tapa roja estéril sin anticoagulante, 1-2 ml.: para gram y cultivo. 4.- Tubo estéril sin anticoagulante para ADA (TBC). 5.- Tubo estéril para cultivo Koch sin anticoagulante. Inocular además, 1 frasco de hemocultivo pediátrico (amarillo), con 1 ml. de LCR. si es posible. Lo adecuado para el estudio bacteriológico es de 2 ml. de LCR. En aquellos casos en que se obtiene escasa cantidad de muestra, el clínico debe indicar orden, cuál de los estudios que se realizan con el LCR reviste mayor importancia. Otra forma de tomar muestra de líquido cefalorraquídeo es por drenaje ventricular y por punción de fontanela. TRANSPORTE: Se debe enviar a la mayor brevedad posible al laboratorio, en un tubo estéril plástico tapa rosca, a temperatura ambiente (no refrigerar), junto con el frasco de hemocultivo. Transportar dentro de una unidad de transporte térmico. ENTREGA RESULTADOS: A las 48 hrs. mínimo. NOTA: Si se envía frasco de hemocultivo con LCR,no deje de enviar además LCR en tubo sin anticoagulante estéril (tapa roja) para gram directo y siembra de la muestra. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 40

42 Página 41 de 70 LÍQUIDO PERITONEAL En el caso de: Peritonitis bacteriana 2ª: perforación víscera (apendicitis, trauma). Peritonitis 3ª: complicación de peritonitis secundaria. TOMA DE MUESTRA: Se realiza durante el intra-operatorio con jeringa estéril. Personal entrenado Técnica aséptica Recolectar muestra, en tubo de polietileno, tapa rosca estéril o tubo tapa roja, sin anticoagulante, para estudio microbiológico, de 3 a 5 ml es suficiente para realizar el estudio de gram y cultivo. No se recomienda inocular frasco de hemocultivo, ya que este tipo de muestras viene con una carga bacteriana alta. TRANSPORTE: Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente, dentro de una unidad de transporte térmico. HORARIO RECEPCIÓN: Durante las 24 horas. ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 horas, mínimo. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 41

43 Página 42 de 70 LÍQUIDO PLEURAL INDICACIONES: Todo paciente que presente signos clínicos y/o radiológicos de derrame pleural de etiología no precisada. TOMA DE MUESTRA: Debe ser realizada por un médico entrenado en la técnica de toracentesis, la punción aspirativa debe realizarse bajo rigurosa técnica aséptica. Se debe recolectar: 1. Tubo con Heparina, tapa verde: para análisis bioquímico (glicemia, proteínas, otros) 2. Tubo con EDTA, tapa lila: para recuento celular y diferencial. 3. Tubo estéril para microbiología, o tubo tapa roja estéril, sin anticoagulante: 3-5ml, para gram y cultivo. 4. Inoculación directa en frasco de hemocultivo pediátrico (amarillo), con 1-3 ml de líquido. 5. Tubo para ADA (TBC) con citrato. 6. Tubo estéril para cultivo de Koch.(TBC) TRANSPORTE: Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente, dentro de una unidad de transporte térmico. HORARIO RECEPCION: Durante las 24 horas. ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 hrs. mínimo. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 42

44 Página 43 de 70 CULTIVO NASAL Portación nasal de Staphylococcus aureus está presente en % de individuos sanos en la comunidad y con frecuencia en el ambiente hospitalario aumenta, de modo que solo se tomarán muestras del personal del hospital en caso de un brote intrahospitalario bien documentado, que permita establecer que se trata de la misma cepa, indicado por comité IAAS. MUESTRA: Secreción nasal. TOMA DE MUESTRA: Introducir tórula humedecida en solución salina y rotar en el vestíbulo de ambas fosas nasales (tabique y cara interna de aletas nasales) TRANSPORTE: Tórula en medio de transporte Stuart, a temperatura ambiente. ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 hrs. mínimo. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 43

45 Página 44 de 70 MYCOPLASMA HOMINIS Y UREAPLASMA UREALYTICUM Se envía información para el cultivo, identificación y estudio de sensibilidad de micoplasma urogenitales. Para el diagnóstico de micoplasma urogenitales se realiza: Cultivo Identificación Recuento Test de sensibilidad TOMA DE MUESTRA: Para muestras vaginales, friccionar bien la mucosa para recoger la mayor cantidad de células posibles. Efectuar la toma de muestra antes de cualquier antibioterapia. Se debe aplicar técnica para evitar las contaminaciones por otras bacterias. Después de tomar la muestra, colocar inmediatamente la tórula de DRALON en el frasco R 1 (cortar con tijeras) Enviar el frasco R 1 al laboratorio. Identifica: Micoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum. ANTIBIOTICOS A ESTUDIAR: Doxicilina Ofloxacina Claritromicina Azitromicina Eritromicina Tetraciclina Ciprofloxacino TRANSPORTE: -Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente, dentro de una unidad de transporte térmico. Informe de resultados: A las 48 horas. Muestras diarias máximas a enviar al laboratorio: 2 muestras hasta las 14 horas, de lunes a jueves (excepto festivos). Manual Toma de Muestras Microbiología Página 44

46 Página 45 de 70 CULTIVO OCULAR GENERALIDADES: 1. Muestra precoz, tomada en la forma más aséptica posible y antes de la aplicación de antimicrobianos. 2. La actividad antimicrobiana de los anestésicos tópicos usados pueden interferir con el cultivo. MUESTRA: SECRECION OCULAR RASPADO CONJUNTIVAL TOMA DE MUESTRA: Tomar la muestra para cultivo antes de la aplicación de anestésico típico. Tomar la muestra con extremo cuidado, con la ayuda de otra persona que inmovilice la cabeza del paciente. Obtener la secreción con tórula estéril del fondo de saco inferior en el ángulo interno del ojo del extremo interior del párpado, previo aseo ocular con suero fisiológico. Rotar la tórula suavemente para que toda la superficie del algodón se empape en la secreción. TRANSPORTE: Introducir la tórula en el medio transporte Stuart y mantener a temperatura ambiente. ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 hrs. mínimo. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 45

47 Página 46 de 70 CULTIVO OTICO Fluido del oído medio obtenido por Timpanocéntesis ( no es un procedimiento de rutina) Secreción del conducto auditivo externo. TOMA DE MUESTRA: 1. TIMPANOCENTESIS: La muestra debe ser tomada por un Otorrinolaringólogo. 2. SECRECION CONDUCTO AUDITIVO EXTERNO: Aseo cuidadoso de la piel con suero fisiológico para disminuir posibilidades de arrastrar bacterias presentes normalmente en esta zona. Tomar con una tórula fina llegando hasta las cercanías del tímpano. Dirigir la tórula en sentido oblicuo de atrás hacia adelante y de abajo hacia arriba. TRANSPORTE: Cultivo aerobio: Transportar a temperatura ambiente en medio Stuart. Cultivo anaerobio: Transportar en medio anaerobio comercial, a temperatura ambiente. ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 horas mínimo. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 46

48 Página 47 de 70 ROTAVIRUS Y ADENOVIRUS (Por Enzimoinmunoensayo) en deposiciones: Rotavirus es el virus que más frecuentemente produce diarrea en los niños y se trasmite por contacto con alimentos, manos u objetos contaminados por deposiciones de personas infectadas. Se presenta en forma más grave en menores de 2 años y se cree que a los 3 años todos los niños ya han tenido contacto con el virus. Adenovirus, corresponden a un grupo de virus que causan diferentes tipos de enfermedades en el hombre. La mayoría de ellos producen infecciones respiratorias, y otros, menos frecuentemente, infecciones gastrointestinales. Pueden afectar a personas de cualquier edad aunque es más frecuente en los niños. Se presentan durante todo el año con un discreto ascenso a fines del invierno, primavera y principios del verano. TOMA DE MUESTRA: 1. Deposición por emisión espontánea 2. Deposición obtenida por sonda rectal. 3. Depositar en caja o frasco plástico limpio entregada por laboratorio. 4. La muestra para leucocitos fecales sirve además para pesquisa de rotavirus., si la cantidad es de aproximadamente de 2 ml. de deposición líquida o una porción de 1 2 gramos de deposición sólida. TRANSPORTE: Llevar al Laboratorio, en caja o frasco plástico a temperatura ambiente. ENTREGA DE RESULTADOS: Durante el día. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 47

49 Página 48 de 70 CULTIVO SENOS PARANASALES MUESTRA: Aspirado obtenido por punción de los senos paranasales. TOMA DE MUESTRA: La muestra debe ser obtenida por otorrinolaringólogo. Limpiar la mucosa nasal en el punto de la aspiración para eliminar microorganismos contaminantes. Obtener el aspirado por punción aséptica con jeringa. CULTIVO AEROBIO: Depositar la muestra en medio de transporte Stuart y enviar a temperatura ambiente., ENTREGA DE RESULTADOS: 48 horas mínimo. CULTIVO ANAEROBIO: Enviar en medio de transporte comercial para anaerobios, a temperatura ambiente., ENTREGA DE RESULTADOS: Informe preliminar a las Horas. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 48

50 Página 49 de 70 CULTIVO TEJIDOS, BIOPSIAS y ABSCESOS. El examen microbiológico de tejidos obtenidos por cirugía o muestras de biopsias se consideran importantes, porque este tipo de muestras pueden representar al proceso patológico entero. Las muestras quirúrgicas van a depender del sitio anatómico, del tipo de enfermedad, como también del cuidado del cuidado ejercitado durante el corte quirúrgico y dela información médica, lo que ayudará a buscar el agente etiológico. TOMA DE MUESTRA: Debe ser realizada por profesional idóneo. Cuando la lesión es grande o numerosa deben tomarse varias muestras desde diferentes sitios. En casos de escaras, deben ser removidas antes de realizarse la biopsia y recolectar al menos 1 gr. de tejido. 1. TEJIDOS BLANDOS: Extraer la muestra con aguja y jeringa cuando la lesión permita la incisión y drenaje, o un trozo de tejido obtenido con técnica aséptica. 2. MUESTRAS DE TEJIDOS POSTMORTEM: limitado para órganos específicos en el cual se sospecha la infección. 3. MUESTRAS DE AUTOPSIA: obtener una porción grande de tejido con al menos, una superficie serosa o capsular intacta. 4. ABSCESOS: debe incluir una muestra del contenido líquido interno como también una porción de las paredes. Extraer con aguja y jeringa. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 49

51 Página 50 de 70 TRANSPORTE AEROBIO: Las muestras de biopsias y / o tejidos se colocan dentro de un frasco estéril de boca ancha. Si la muestra es pequeña o escasa, colocar suero fisiológico. En casos de abscesos colocar en tubo estéril o en medio de transporte Stuart sin la tórula.. TRANSPORTE ANAEROBIO: Enviar en medio de transporte comercial para anaerobios, a temperatura ambiente. ENTREGA DE RESULTADOS: 48 hrs. mínimo Manual Toma de Muestras Microbiología Página 50

52 Página 51 de 70 MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO. SITIO ANATOMICO MICROORGANISMOS MUESTRA RECOLECCION DE MUESTRA VULVA Haemophilus ducreyi. Aspirado ó tórula TRANSPORTE 1.- irrigar con 0,5 ml. de suero fisiológico y aspirar. 2.-Tomar muestra desde la lesión con tórula humedecida con suero fisiológico. GLANDULA DE BARTHOLINO Neisseria gonorrhoeae C. trachomatis. Bacterias aerobias y anaerobias. U.urealyticum. Aspirado de la glándula. Aspirar el absceso con aguja y jeringa, previo aseo genital. CULTIVO AEROBIO: Enviar en medio de transporte Stuart. CULTIVO ANAEROBIO: En medio de transporte comercial. VAGINA Trichomonas vaginalis. Candida albicans. Gardnerella vaginalis. Streptococcus Grupo B. Secreción vaginal. 1.-Realizar aseo genital según normativa. 2.-Colocar espéculo sin lubricante. 3.-Introducir una sonda a través de la vagina, conectada a una jeringa que contenga 2 ml. De suero fisiológico. 4.-Hacer lavado vaginal con el suero fisiológico. 5.-Colocar el producto del lavado en tubo estéril. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 51

53 Página 52 de Realizar aseo genital según normativa. VAGINA Listeria monocytogenes. Tórula vaginal 2.-Tomar la muestra con tórula de la mucosa vaginal. 3.-Enviar en medio de transporte Stuart. CERVIX Neisseria gonorrhoeae Tórula en medio de transporte Stuart. 1.Realizar aseo genital según normativa. 2.Limpiar cérvix de secreción vaginal y mucus. 3.Usar espéculo sin lubricante. 4.Tomar muestra de exudado endocervical haciendo rodar la tórula. ENDOMETRIO Bacterias aerobias y anaerobias. C.trachomatis. Aspirado tórula Aspirado transcervical a través de cateter. Tórula en cirugía en medio de transporte Stuart. TROMPAS DE FALOPIO Neisseria gonorrhoeae. C. trachomatis. bacterias aerobias y anaerobias. Aspirado tórula La toma de muestra se hace en la cirugía. LIQUIDO AMNIOTICO Bacterias aerobias y anaerobias. Líquido amniótico Amniocéntesis. Catéter intrauterino. Tórula desde cesárea en medio de transporte Stuart. Manual Toma de Muestras Microbiología Página 52