Carga viral y subpoblaciones linfocitarias en la infección con VIH- 1. Comparación entre sus determinaciones basales

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1 Revista Mexicana de Patología Clínica 1998; Volumen 45(3): Carga viral y subpoblaciones linfocitarias en la infección con VIH- 1. Comparación entre sus determinaciones basales NOHEMI PATRICIA CASTILLO TORRES GUSTAVO BARRIGA ANGULO CARLOS ARUMIR ESCORZA MARGARITA SOLIS TREJO Hospital de Infectología. Centro Médico Nacional «La Raza», Instituto Mexicano del Seguro Social (IMSS). Laboratorio Clínico. RESUMEN Se determinaron simultáneamente los niveles plasmáticos de ARN del VIH-1 y las cuentas de células T CD4 (+) en 64 pacientes infectados con VIH-1, en diferentes estadios de la infección. Los niveles basales de ARN VIH-1 plasmático (NASBA VIH-1 RNA QT, OT) MR fueron los mejores índices de predicción de la evolución clínica. Las cuentas de células T CD4 (+) consideradas aisladamente, mostraron una gran variabilidad, un limitado rango dinámico y no fueron el mejor método con el cual estratificar a los pacientes. PALABRAS CLAVE: VIH, SIDA, carga viral, linfocitos. ABSTRACT

2 We determined simultaneously in 64 AIDS patients with different stages of disease the basal HIV-1 RNA plasmatic levels and the CD4 (+) T cells subset. HIV-1 RNA basal levels (NASBA HIV-1 RNA QT OT). TM was the best predictor of clinical outcome, CD4 (+) T cells count subset alone substantial variability, exhibit a limited dynamic range and was not the best tool by which stratify patients. KEY WORDS: HIV, AIDS, viral load, lymphocytes. Introducción El pronóstico de los individuos infectados con VIH-1 es variable; en adultos el promedio de tiempo entre la infección y el desarrollo de SIDA es de 10 a 11 años, aunque una proporción importante de individuos (20%) progresa más rápidamente (5 años) y 12% permanece libre de SIDA por más de 15 años. 1 Se han utilizado numerosos parámetros clínicos y de laboratorio para estimar el pronóstico de la infección con VIH-1; la medición de los niveles de células T CD4 (+) han sido utilizados para decidir el inicio de la profilaxis a varias infecciones oportunistas, como un criterio de clasificación de la infección con el VIH-1 y para la definición de caso de SIDA en adultos y en adolescentes. 2 Sin embargo, estudios recientes ha mostrado que la sola determinación de linfocitos CD4 (+) no es buen parámetro en predecir la respuesta clínica a la terapia antiviral, 3 a diferencia de lo que sucede con la determinación de los niveles plasmáticos de ARN que son el índice más adecuado en la predicción de la evolución clínica y en la respuesta al tratamiento antiviral. 4 En este estudio se presenta un análisis comparativo entre los niveles basales de CD4 (+) y los de ARN VIH-1 plasmático en 64 pacientes con diversos estadios de la infección con VIH-1. Material y métodos Se estudiaron un total de 64 pacientes infectados con VIH-1, de diferentes edades, sexos y estadios clínicos (cuadros I y II). En todos se realizaron determinaciones

3 simultáneas de células T CD4 (+) por citometría de flujo (Coulter electronics) MR y de niveles de ARN VIH-1 plasmático (NASBA VIH-1 QT). MR Esta última consiste en la amplificación isotérmica de ácido nucleico de ARN del VIH-1 utilizando tres enzimas: transcriptasa inversa del virus de la mieloblastosis, la T7 ARN polimerasa y la H ARNasa, la cuantificación de ARN del VIH-1 se obtiene por coamplificación competitiva con tres ARN generados in vitro. Los productos obtenidos se detectan separadamente en forma semiautomática utilizando electroquimioluminescencia (figura 1). Cuadro I. Pacientes estudiados, por edad y sexo. Edad (años) Masculino Femenino Total < Total

4 Cuadro II. Estado clínico. 8 Pacientes estudiados. Estado Clínico Número % C A A B C B Total Figura 1. Diagrama de flujo de la prueba cuantitativa NASBA VIH-I O.T (9).

5 Resultados Cincuenta y cinco de los pacientes estudiados (81%) tuvieron cuentas de células CD4 (+) por microlitro por debajo de 500 células y 10,000 copias o más de ARN del VIH-1, nueve pacientes (13.2%) tenían menos de 10,000 copias de ARN-VIH-1 y cuentas de células T CD4 (+) por debajo de 500; y cuatro pacientes mostraban más de 500 células CD4 T (+) y más de 10,000 copias de ARN-VIH-1. La concordancia entre las cuentas de células T CD4 (+) y los niveles de ARN VIH-1 plasmático en todos los pacientes fue tan solo de 81% (Figuras 2 y 3). Figura 2. Correlación CD4(+)/Carga viral VIH-I.

6 Figura 3. Correlación CD4 (+)/carga viral VIH-1.

7 Comentarios El desarrollo de nuevas técnicas de biología molecular diseñadas para detectar el ARN del VIH-1 han permitido estudiar en detalle la dinámica viral y la patogénesis del VIH-1. Ahora sabemos que se producen hasta 10 billones de nuevas partículas virales cada día y el ciclo de vida media en plasma del virus es de 2.6 días; este extraordinario nivel de replicación viral, destrucción celular y reemplazo celular, han llevado a un nuevo concepto en el manejo clínico de los pacientes y en particular de la terapia antiviral. Los niveles de ARN del VIH-1 plasmáticos son relativamente estables aun cuando no se ha iniciado la terapia antirretroviral (variabilidad biológica: 0.3 de logaritmo) por ello sólo cambios sostenidos mayores de 0.5 de logaritmo reflejan cambios biológicos relevantes en el nivel de replicación viral; una terapia antirretroviral efectiva disminuye significativamente los niveles del ARN VIH-1 en plasma una semana después de iniciar el tratamiento. 5

8 Las cuentas de linfocitos CD4 (+) se han considerado como uno de los mejores métodos para predecir la evolución, sin embargo se ha demostrado que esta sola determinación es inadecuada por sí sola para evaluar el pronóstico y la respuesta a la terapia antirretroviral; las cuentas de CD4 están sujetas a enorme variabilidad biológica y muestran un limitado rango dinámico. 6,7 Por todo lo anterior, es recomendable evaluar a los pacientes infectados por VIH-1 con ambas determinaciones simultáneamente, con objeto de lograr mejores posibilidades de éxito terapéutico y pronóstico. BIBLIOGRAFIA 1. Schellekens P, Koot M, Ross M, Farsinette M, Miedema F. Immunologic and virologic markers determining progression to AIDS. Jour Acquired Immunodeficiency Syndrome Human Retrovirology 1995; 10 (Supplement 2) Centers for disease control Revised Guidelines for deforming CD4 + T cell determinations in persons infected with human immunodeficiency virus. MMWR 1997; 46 (RR-2): Rabaud JM, Haley L, Montaner JSG, Murphy C, Januszewska M, Schechter M. Quatification of the variation due to laboratory and phisiologic jources in CD4 lymphocyte counts of clinically stable HIV-infected individuals. Jour Acq Immun Deficie Syndro Human Retrov 1995; 10 (Suppl 2): Mellor JW, Rinaldo CHR, Gupta P, White RM, Tood JA, Kingsley L. Prognosis in HIV- 1 infection predicte by the quantity of virus in plasma. Science 1996; 272: Ho DD. Viral count in HIV infection. Science 1996; 272: Calindo AM. Methods, interpretation and applications of HIV-1 viral load measurements. Clin Microbiol News 1997; Geman B, Kievits T, Nara P, Huisman HG, Jurrions S, Goudsmit J, Lens P. Qualitative and quantitative detection on HIV-1 RNA by nucleic acid sequence based amplification. AIDS 1993; 7 (Suppl 2): S107-S Centers for Disease Control Revised classification system for HIV infection for

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