Pruebas para el diagnóstico microbiológico de las infecciones del Sistema Nervioso

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1 Pruebas para el diagnóstico microbiológico de las infecciones del Sistema Nervioso Dr. Juan Carlos Rodríguez Díaz S. Microbiología Hospital General Universitario de Elche

2 Etiología La etiología es muy variada por lo que es muy importante: Priorizar las pruebas a realizar en función de lós datos clínicos y/o epidemiológicos Enviar la mayor cantidad posible de LCR para aumentar la sensibilidad de las técnicas Enviar una muestra de suero para hacer estudios serológicos complementarios

3 Transporte y conservación Todas las muestras deben estar perfectamente identificadas, tanto el tubo como el volante de solicitud Las muestras deben enviarse lo más rápidamente posible para su procesamiento correcto e inmediato Si no fuera posible y se solicita cultivo bacteriano, deben conservarse a 37ºC Para el diagnóstico de las infecciones virales, conservar a 4ºC

4 Volumen necesario SEIMC ASM Bacterias 0,5 ml 0,5 ml Virus 0,5 ml 0,5 ml Hongos 1 ml 2 ml Micobacterias 1 ml 5 ml El envío de la muestra a un centro de referencia exige 0,5 ml adicionales de muestra

5 Estudios serológicos en LCR La aparición de los métodos de biología molecular ha relegado este tipo de estudios a pocos patógenos: Sífilis: VDRL Brucella: Producción intratecal de Ac Cryptococco: Detección de antígeno Es muy útil procesar una muestra de suero para descartar la presencia de procesos infecciosos: si no hay anticuerpos en suero, el paciente no está infectado por ese patógeno

6 Estudios serológicos en LCR Interpretación de resultados: Si no hay anticuerpos en suero, el paciente no está infectado por ese patógeno Si el paciente tiene anticuerpos en suero y en LCR hay que demostrar la producción intratecal de anticuerpos Descartar la presencia de Ac por difusión pasiva desde el suero: LCR hemáticos Demostrar la integridad de la barrera hematoencefálica

7 Estudios serológicos en LCR Integridad de la BHE: Comparación de la concentración de albúmina en suero y en LCR El parámetro más utilizado es el índice albúmina LCR/suero Punto de corte = 0,0075 Valores iguales o menores aseguran la integridad de la BHE La presencia de Ac en LCR se asocia a producción intratecal de los mismo

8 Estudios de PCR en LCR Detectan el genoma de los microorganismos en la muestra No está disponible para todos los patógenos Son técnicas muy específicas Su sensibilidad depende de: Cantidad de muestra procesada Evolución clínica de la enfermedad Es muy importante que las muestras para detectar virus RNA se procesen de forma urgente para enviar su desnaturalización

9 Tuberculosis Métodos diagnósticos de la infección tuberculosa o tuberculosis latente: Mantoux (prueba de la tuberculina) IGRA Quantiferon Un resultado negativo de ambas pruebas, tiene un alto VPN en descartar enfermedad tuberculosa aunque es necesario confirmarlo por tinción y cultivo Métodos diagnósticos de la enfermedad tuberculosa Tinción de Ziehl Neelsen Cultivo en medio sólido y líquido PCR

10 Sífilis Pruebas no treponémicas RPR (Suero) VDRL En LCR Pruebas treponémicas TPHA (positivos títulos 1/160): Confirmación FTA: Confirmación ELISA IgM (infecciones recientes) Todo resultado positivo de prueba no treponémica debe ser confirmado En caso de sospecha de sífilis primaria o terciaria, hay que hacer pruebas treponémicas y no preponémicas conjuntamente

11 Estudios serológicos más utiles Detección de anticuerpos: Brucelosis: Rosa de Bengala, aglutinación y Cooms Sífilis: RPR, VRDL, TPHA, FTA, IgM ELISA HIV: ELISA y Western Blot Sarampión, varicella y parotiditis: IgG e IgM Detección de antígenos Cryptococus

12 Estudios de PCR más útiles Detección de bacterias Mycobacterium tuberculosis Detección de virus Herpes 1 Herpes 2 Enterovirus Varicella Citomegalovirus

13 AGENTE TECNICA EMPLEADA PRECIOS Alphavirus PCR 86,3 Bunyavirus grupo Encefalitis de California PCR 87,04 Entero-Herpesvirus neurotropos RT-PCR a tiempo real 60,18 Phlebovirus PCR 87,33 Prion proteína WB 154,65 Prion gen PRPN PCR-secuenciación 221,85 Taenia saginata/t. solium PCR 24,87 Virus Coriomeningitis Linfocitaria PCR 77,31 Virus Encefalitis transmitida por garrapatas IgG ELISA 28,62 Virus Exantematicos PCR-multiplex 21,65 Virus JC y BK PCR-tiempo real multiplex 42,83 Virus Parotiditis PCR 31,55 Virus Toscana PCR-tiempo real 77,45 Virus West Nile PCR-tiempo real 77,33

14 AGENTE TECNICA EMPLEDA PRECIOS Bartonella PCR-hibridación 45,37 Borrelia PCR-hibridación 44,64 Brucella sp. PCR-hibridación 43,94 Meningitis bacteriana PCR-multiplex 71,8 Paracoccidiodes brasiliensis PCR 140,84 Rickettsia sp. PCR-hibridación 46,94 Taenia saginata/t. solium PCR 24,87 Toxoplasma gondii PCR-nested 36,6 Treponema pallidum PCR-hibridación 50,33 Trypanosoma brucei PCR-tiempo real 43,38

15 Conclusiones Es muy importante priorizar los estudios a realizar en función de los datos clínicos, valorando el coste de los mismos La cantidad de LCR procesado se relaciona directamente con la sensibilidad de la técnica ES VITAL LA COMUNICACIÓN ENTRE LOS CLÍNICOS Y LOS MICROBIÓLOGOS

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