RIDASCREEN. Spec. IgE. Art. No.: A0041 RIDASCREEN Spec. IgE Reagents Art. No.: A0040 RIDASCREEN Spec. IgE Reagents
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- Yolanda Ferreyra Olivera
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1 RIDASCREEN Spec. IgE Art. No.: A0041 RIDASCREEN Spec. IgE Reagents Art. No.: A0040 RIDASCREEN Spec. IgE Reagents Also applies to: Art. No.: A0049 RIDASCREEN Allergen Disc Art. No.: A0249 RIDASCREEN Spec. IgE Allergen Disc Art. No.: A RIDASCREEN Spec. IgE Set of Standards and Controls Art. No.: A0250 RIDASCREEN Spec. IgE Allergy Panel, Customized Art. No.: A0251 RIDASCREEN Spec. IgE Allergy Panel 1, Atopy Art. No.: A0252 RIDASCREEN Spec. IgE Allergy Panel 2, Inhalative Art. No.: A0253 RIDASCREEN Spec. IgE Allergy Panel 3, Food Art. No.: A0254 RIDASCREEN Spec. IgE Allergy Panel 4, Pediatric R-Biopharm AG, An der neuen Bergstraße 17, D Darmstadt, Alemania; tel.: +49 (0) / fax: +49 (0)
2 1. Ámbito de aplicación Para el diagnóstico in vitro. El test RIDASCREEN Spec. IgE es un ensayo inmunoenzimático (EIA - Enzymimmunoassay) para la determinación cuantitativa de anticuerpos IgE específicos en suero humano. El test debería utilizarse a efectos de confirmación en caso de sospecha justificada de una alergia de acuerdo con la anamnesis y el diagnóstico in-vivo. Con este test también pueden detectarse anticuerpos IgE específicos contra posibles alérgenos, como medida de esclarecimiento si los resultados del diagnóstico in-vivo no coinciden con la anamnesis. 2. Resumen y explicación del test El sistema inmunológico tiene una función de defensa contra bacterias, virus y otros microorganismos patógenos. La respuesta de defensa sirve como protección del organismo en el primer contacto con los agentes patógenos, pero también como inmunización en contactos repetidos. Todas las reacciones alérgicas tipo I también van precedidas de un primer contacto asintomático en el que se han formado ya anticuerpos específicos de la clase E (anticuerpos IgE). Si se repite el contacto con el alérgeno desencadenante, estos anticuerpos IgE reaccionan con el alérgeno y provocan la liberación de mediadores (a partir de mastocitos), como histamina, leucotrienos, prostaglandinas etc., los cuales activan por su parte la sintomatología de la alergia. Con la detección de estos anticuerpos IgE específicos en el suero es posible identificar los alérgenos desencadenantes si existen reacciones alérgicas, pero también pueden detectarse sensibilizaciones sin síntomas. Se trata de un test enzimático-alergo-sorbente (EAST) basado en discos de celulosa. Todos los reactivos especificados en el punto 4 (A0041 y A0040) han sido validados con los discos de alérgenos de la empresa R-Biopharm (A0049). Si estos reactivos se utilizan en combinación con discos de otros fabricantes, el usuario será responsable de la validación del test. 3. Principio del test Los alérgenos están unidos a discos de celulosa. Para la realización del test, los discos de alérgenos se colocan en las cavidades de una placa de microtítulo o se ocupan previamente por solicitud del médico. 2 RIDASCREEN Spec. IgE
3 En los tests de alergia (nº de art.: A0250 A0254), los discos de alérgenos también se han colocado ya en las tiras de microtítulos (16). En un marco pueden combinarse 5 tiras de microtítulos (16) de diferentes kits para obtener una placa completa, teniendo en cuenta que las dos primeras columnas (A y B) han de estar ocupadas siempre con estándardes y controles. Los sueros de pacientes, los sueros estándar así como los controles negativos y positivos se pipetean en los discos de alérgenos correspondientes y se incuban a 37 C. En este proceso, los anticuerpos IgE específicos de alérgenos se unen a los mismos. El material no unido se elimina mediante lavado. Seguidamente se añade un anticuerpo IgE antihumano conjugado con fosfatasa alcalina. El conjugado no unido se elimina mediante lavado. Después se añade sustrato, el cual es desfosforilado por la enzima conjugada y se convierte en un producto amarillento. La intensidad de la coloración amarilla es proporcional a la cantidad de anticuerpos específicos de alérgenos existentes en el suero. La medición se realiza de forma fotométrica a 405 nm y longitud de onda de referencia de 620 nm. Algunos alérgenos se acoplan al disco de celulosa a través del HSA (Humanserumalbumin - albúmina de suero humano), para los cuales se requiere el uso adicional de un disco HSA por paciente, a fin de detectar la unión no específica de alérgenos. Los alérgenos correspondientes se identifican en las listas de códigos de R-Biopharm AG con la indicación - HSA. 4. Contenido del envase Tabla 1: Contenido RIDASCREEN Spec. IgE Reagents (n de art A0041) Plate 1-96 det. 1 placa de microtítulo DiscS 10 Discos estándar DiscC 2 Discos de control DiscA AllergyWB 60 ml Standard µl Discos de alérgenos, cantidad que desee el cliente (no forma parte del kit de reactivos A 0041) Tampón de lavado, concentración: 16 veces; NaN 3 al 0,9%, color de la tapa: transparente Suero estándar 1; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 0,35; en solución estabilizada de proteínas 3 RIDASCREEN Spec. IgE
4 Standard µl Standard µl Standard µl Standard µl Control µl Control 500 µl Conjugate 6 ml AllergySub 12 ml AllergyStop 12 ml Suero estándar 2; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 0,70; en solución estabilizada de proteínas Suero estándar 3; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 3,50; en solución estabilizada de proteínas Suero estándar 4; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 17,50; en solución estabilizada de proteínas Suero estándar 5; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 50,00; en solución estabilizada de proteínas Control positivo de IgE; suero humano diluido, listo para el uso, concentración: véase el certificado; en solución estabilizada de proteínas, color y tamaño de la tapa: rojo, pequeño Control negativo de IgE; suero humano diluido, listo para el uso, concentración: véase el certificado; en solución estabilizada de proteínas, color y tamaño de la tapa: azul, pequeño Conjugado IgE antihumano, (monoclonal); listo para el uso; anticuerpos conjugados con fosfatasa alcalina en solución estabilizada de proteínas, color de la tapa: azul Solución de sustrato, solución pnpp, lista para el uso, color de la tapa: negro Solución de parada, EDTA al 7,4%, lista para el uso, color de la tapa: verde Tabla 2: Contenido RIDASCREEN Spec. IgE Reagents (n de art A0040) Plate det. 2 placas de microtítulo DiscS 20 Discos estándar DiscC 4 Discos de control DiscA AllergyWB 2 x 60 ml Standard µl Discos de alérgenos, cantidad que desee el cliente (no forma parte del kit de reactivos A 0040) Tampón de lavado, concentración: 16 veces; NaN 3 al 0,9%, color de la tapa: transparente Suero estándar 1; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 0,35; en solución estabilizada de proteínas 4 RIDASCREEN Spec. IgE
5 Standard µl Standard µl Standard µl Standard µl Control µl Control 500 µl Conjugate 12 ml AllergySub 2 x 12 ml AllergyStop 12 ml Suero estándar 2; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 0,70; en solución estabilizada de proteínas Suero estándar 3; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 3,50; en solución estabilizada de proteínas Suero estándar 4; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 17,50; en solución estabilizada de proteínas Suero estándar 5; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 50,00; en solución estabilizada de proteínas Control positivo de IgE; suero humano diluido, listo para el uso, concentración: véase el certificado; en solución estabilizada de proteínas, color y tamaño de la tapa: rojo, pequeño Control negativo de IgE; suero humano diluido, listo para el uso, concentración: véase el certificado; en solución estabilizada de proteínas, color y tamaño de la tapa: azul, pequeño Conjugado IgE antihumano, (monoclonal); listo para el uso; anticuerpos conjugados con fosfatasa alcalina en solución estabilizada de proteínas, color de la tapa: azul Solución de sustrato, solución de pnpp, lista para el uso, color de la tapa: negro Solución de parada, EDTA al 7,4%, lista para el uso, color de la tapa: verde Tabla 3: Contenido RIDASCREEN (n de art A0041) Spec. IgE Set of Standards and Controls DiscS 40 Discos de estándar DiscC 8 Discos de control Standard µl Standard µl Standard µl Standard µl Suero estándar 1; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 0,35; en solución estabilizada de proteínas Suero estándar 2; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 0,70; en solución estabilizada de proteínas Suero estándar 3; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 3,50; en solución estabilizada de proteínas Suero estándar 4; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 17,50; en solución estabilizada de proteínas 5 RIDASCREEN Spec. IgE
6 Standard µl Control µl Control 500 µl Suero estándar 5; suero humano diluido; concentración (en IU IgE/ml): 50.00; en solución estabilizada de proteínas Control positivo de IgE; suero humano diluido, listo para el uso, concentración: véase el certificado; en solución estabilizada de proteínas, color y tamaño de la tapa: rojo, pequeño Control negativo de IgE; suero humano diluido, listo para el uso, concentración: véase el certificado; en solución estabilizada de proteínas, color y tamaño de la tapa: azul, pequeño 5. Reactivos y almacenamiento de los mismos El kit de prueba ha de almacenarse a una temperatura de 2-8 C y puede utilizarse hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta. El tampón de lavado diluido puede conservarse 4 semanas como máximo a una temperatura de almacenamiento de 2-8 C. Se tiene que evitar la contaminación microbiana. Tras la fecha de caducidad no puede asumirse ninguna garantía de calidad. Se ha de evitar necesariamente una contaminación de la solución de sustrato con el conjugado, pues ello origina una coloración del sustrato. También ha de evitarse la incidencia de luz directa sobre el sustrato, para prevenir su descomposición o coloración por hidrólisis. Si se produce una coloración, el sustrato no debe seguir utilizándose. Véase también el punto 10. Control de calidad Indicio de reactivos caducados. 6. Reactivos adicionales necesarios accesorios requeridos 6.1. Reactivos Agua destilada o desionizada 6.2. Accesorios Fotómetro para placas de microtítulo (con filtro de 405 y 620 nm), rango de medición: 0-3,5 DO Máquina automática de lavado para placas de microtítulo o sistema de lavado manual (peine, bomba, recipientes para almacenamiento tampón y residuos). Incubadora para 37 C Micropipeta de µl 6 RIDASCREEN Spec. IgE
7 Pipeta de 8 canales o de paso múltiple Probeta graduada (1000 ml) 7. Medidas de precaución Sólo para el diagnóstico in vitro. Este test sólo debe realizarse por personal de laboratorio formado. Se han de respetar las directivas para el trabajo en laboratorios médicos. Se tienen que cumplir estrictamente las instrucciones de uso para la ejecución del test. Las muestras o reactivos no deben pipetearse con la boca; se ha de evitar el contacto con la piel lesionada o la mucosa. Durante el trabajo con las muestras han de utilizarse guantes desechables, y al finalizar el test deben lavarse las manos. Donde se trabaje con las muestras o los reactivos de prueba no está permitido fumar, comer o beber. Los sueros de control existentes en el kit (sueros estándar, controles altos y bajos) fueron verificados y no contienen HIV y HCV-Ak ni tampoco HbsAg y sífilis CFR No obstante, los mismos deben considerarse potencialmente infecciosos, al igual que los sueros de pacientes y todos los materiales que entren en contacto con los mismos, y manejarse de acuerdo con las correspondientes disposiciones nacionales de seguridad. El concentrado de tampón de lavado contiene azida sódica como agente de conservación. Se ha de evitar el contacto con la piel o la mucosa. Si se produce un contacto con tubos de plomo o cobre pueden formarse azidas metálicas explosivas. Tras el uso, todos los componentes del kit tienen que eliminarse de forma adecuada y bajo responsabilidad propia. Todos los reactivos y materiales que entren en contacto con muestras potencialmente infecciosas tienen que tratarse con agentes desinfectantes adecuados o autoclavarse durante al menos una hora a 121 C. 8. Recolección y almacenamiento de las muestras El test se ha desarrollado para el examen de suero humano. Después de la extracción de sangre, para evitar una hemólisis, el suero debería separarse de los coágulos lo antes posible. Las muestras han de guardarse frías o congeladas hasta la realización del test. Se ha de evitar necesariamente la congelación y descongelación repetida del suero, así como su contaminación microbiana. La 7 RIDASCREEN Spec. IgE
8 utilización de sueros inactivados por el calor, o lipémicos, hemolíticos, ictéricos o turbios puede originar resultados falsos. Tabla 2: Almacenamiento de muestras Suero sin diluir 2-8 C -20 C 1 semana > 1 semana 9. Realización del test 9.1. Generalidades Todos los reactivos, sueros de pacientes y la placa de microtítulo han de acondicionarse a la temperatura ambiente (20-25 C) antes del uso. Los reactivos deben mezclarse bien justo antes de su utilización. Tras su uso, el kit debe volver a guardarse inmediatamente a 2-8 C. Los discos estándar, discos de control, y discos de alérgenos no pueden utilizarse varias veces. Los reactivos y discos no deben utilizarse si el envase está dañado o los recipientes tienen fugas. Los discos de alérgenos no deben estar secos. Excepción: los antibióticos β-lactámicos (C1, C2, C49, C50, C54, C55, C56, C64, C67) en tiras rompibles (A0049). Se prohíbe el cambio o la combinación de componentes de kits de diferentes lotes. La variación de los tiempos y las temperaturas de incubación preestablecidos origina un desplazamiento de la curva estándar en comparación con el certificado. La variación notable de los valores de la curva estándar provoca resultados de test no válidos. Durante la realización del test ha de evitarse la radiación solar directa. Se recomienda tapar la placa de microtítulo. Para incubaciones de la placa de microtítulo no debe utilizarse ninguna cámara húmeda! 9.2. Elaboración del tampón de lavado Cada botella de concentrado de tampón de lavado AllergyWB se llena con 1000 ml de agua destilada. Los cristales eventualmente existentes en el concentrado han de separarse previamente mediante calentamiento (baño de agua a 37 C) Ocupación de la placa de microtítulo con los discos de alérgenos. Al suministrar la placa de microtítulo Plate, todos los discos DiscS, DiscC, y DiscA están ya colocados según el protocolo del cliente. Para cada suero de paciente que 8 RIDASCREEN Spec. IgE
9 se examine en cuanto a alérgenos HSA se ha colocado un disco HSA adicional a los alérgenos. Al suministrar discos de alérgenos en tiras rompibles (A0049), de acuerdo con el protocolo de elaboración, las cavidades con dichos discos DiscA han de colocarse en el marco de soporte del kit de reactivos mediante la rotura de las tiras. En el marco de soporte del kit de reactivos, los discos estándar DiscS y discos de control DiscC se encuentran ya en la posición correcta. Para cada paciente que deba examinarse en cuanto a alérgenos HSA ha de colocarse una cavidad con un disco HSA adicional a los alérgenos. En los tests de paneles (A0250-A0254), en el marco ya existen paneles con 16 alérgenos. Es posible elaborar distintos paneles entre sí en el mismo marco. Para ello han de extraerse paneles de la placa suministrada y cambiarlos por los paneles deseados. Tenga en cuenta que sólo deberían elaborarse placas completas, pues la cantidad de reactivos está adaptada a ello Primera incubación Quite la lámina de la placa. A este respecto, evite que algún disco de alérgeno se adhiera a la lámina y se quite con la misma. El tampón existente en las cavidades tiene que ser retirado totalmente por aspiración. En las cavidades correspondientes se pipetean 50 µl de los sueros estándar Standard 1, Standard 2, Standard 3, Standard 4 y Standard 5, de los controles positivos Control + y negativos Control - y de los sueros de pacientes de acuerdo con el protocolo. A continuación, la placa Plate se tapa y se incuba durante 60 min a 37 C Lavar Las cavidades se lavan llenándolas 6 veces con tampón de lavado y aspirándolas posteriormente. La última aspiración debería ser lo más cuantitativa posible, teniendo en cuenta que los discos permanecen en las cavidades. Si se usa una máquina automática de lavado (recomendado), el lavado se efectúa con 700 µl de tampón de lavado diluido, realizando una aspiración simultánea (ajuste adecuado de rebose). Previamente debe garantizarse el ajuste correcto del aparato a las dimensiones del tipo de placa utilizada. Si se usa un sistema de lavado manual, en cada paso de lavado se trabaja con el máximo volumen de llenado. No utilice pipetas para el lavado! 9 RIDASCREEN Spec. IgE
10 Tanto en el lavado automático como manual, el chorro de líquido debería orientarse al borde del disco, de forma que los discos giren sobre su propio eje durante la adición de tampón de lavado, con lo cual se logra un mejor lavado. No debe reducirse el número de secuencias de lavado ni el volumen del tampón de lavado Segunda incubación Adición de 50 µl de conjugado Conjugate en las cavidades ocupadas. A continuación, la placa Plate se tapa y se incuba durante 60 min a 37 C Lavar Lavar de acuerdo con el punto Tercera incubación y medición Se han de pipetear rápidamente 100 µl de la solución de sustrato AllergySub en todas las cavidades. A continuación, la placa tiene que incubarse tapada durante 15 min a 37 C. La reacción finaliza añadiendo 50 µl de solución de parada AllergyStop en cada cavidad. La medición de la extinción se efectúa a 405 nm frente a la longitud de onda de referencia a 620 nm. La placa puede medirse de nuevo al cabo de 24 horas si se ha guardado fría y tapada. 10. Control de calidad Indicios de reactivos caducados En cada ejecución del test, en cada placa también deben incluirse los estándares 1-5 en determinación doble (recomendado), y realizarse un control positivo y negativo para el control de calidad. El test habrá transcurrido correctamente si el valor DO 405/620 del estándar 5 es > 1,0 y las clases EAST determinadas de los controles se encuentran en el rango de valores que se indica en el certificado adjunto. Una variación de los valores exigidos así como una turbidez de los reactivos o coloración amarilla del sustrato antes de añadirse a las cavidades puede ser un indicio de caducidad de los reactivos. Si no se cumplieran los valores preestablecidos, antes de repetir el test ha de verificarse lo siguiente: Durabilidad de los reactivos utilizados Capacidad de funcionamiento de los aparatos empleados (por ej. calibración) Ejecución correcta del test Control visual de los componentes del kit en cuanto a contaminación o fugas; una solución de sustrato amarillenta no se debe volver a utilizarse. 10 RIDASCREEN Spec. IgE
11 Si siguen sin cumplirse las condiciones al repetir el test, contacte con el fabricante. Se recomienda incluir siempre sueros propios provistos de resultados previos para utilizarse como controles, y registrar las clases EAST determinadas. 11. Evaluación e interpretación Resultados de análisis de sueros Bases de cálculo Para la evaluación del test es necesario elaborar la curva de referencia. Para ello, los estándares también se incluyen en cada placa en determinación doble. Para elaborar la curva de referencia, los valores medios de las extinciones de las determinaciones dobles de los estándares se aplican de forma semilogarítmica (diagrama y-lin/x-log) como función de las concentraciones correspondientes (IU/ml) en una representación punto por punto. Las concentraciones de los anticuerpos IgE específicos pueden determinarse con los valores DO medidos a través de la curva estándar y después tienen que convertirse en clases EAST (véase la tabla 5). La evaluación también puede realizarse con un software adecuado. La calibración de la curva estándar del test RIDASCREEN Spec. IgE se efectúa en la preparación de referencia internacional 2nd WHO IRP 75/502 for human IgE Concentraciones, clases EAST, evaluaciones Tab. 5: Relación entre el valor IU/ml determinado, las clases EAST y el título IgE específico de alérgeno del suero del paciente IU/ml Clase EAST Contenido IgE específico de alérgeno 0,00 0,34 0 (0,0 0,9) no detectable o apenas existente 0,35 0,69 1 (1,0 1,9) bajo 0,70 3,49 2 (2,0 2,9) elevado 3,50 17,49 3 (3,0 3,9) claramente elevado 17,50 49,99 4 (4,0 4,9) alto 50,00 99,99 5 (5,0 5,9) muy alto 11 RIDASCREEN Spec. IgE
12 100,00 * 6 ( 6,0) * extremadamente alto * se determina por extrapolación lineal, pues en el test sólo se utilizan 5 estándares Interpretación de los resultados en alérgenos con discos HSA Determinados alérgenos, p. ej., sustancias químicas y la mayoría de los medicamentos, así como algunos aditivos de alimentos, no se acoplan directamente al disco de celulosa, sino a través de albúminas de suero humano (HSA). Para eliminar la unión no específica o excluir una alergia contra HSA, el suero del paciente se comprueba en cuanto al alérgeno HSA examinado y al HSA individual. Si el valor DO del disco HSA puro es menor que el valor DO de la norma 1, el resultado para el disco ASH es negativo y el alérgeno ASH puede evaluarse cuantitativamente por medio de la curva estándar. El resultado se indica en clases RAST. Si el valor DO del disco HSA puro fuera mayor o igual que el valor DO de la norma 1, en el suero del paciente existen posiblemente anticuerpos IgE contra la albúmina del suero humano. En ese caso no pueden evaluarse alérgenos HSA para dicho paciente. Si el valor DO del disco HSA puro sólo fuera ligeramente positivo (hasta el valor OD de la norma 2 como máximo), se recomienda repetir el test, para descartar que durante la medición se haya producido un resultado positivo falso debido a errores de pipeteado o burbujas de aire debajo del disco alérgeno Interpretación de los resultados en discos de alérgenos múltiples Tabla 6: Relación entre el valor IU/ml determinado, clases EAST y evaluación del suero del paciente en discos de alérgenos múltiples IU / ml Clase EAST Evaluación 0 0,34 0 negativa 0,35 1 positiva Si el resultado es positivo, el suero correspondiente debería examinarse en cuanto a reacciones específicas sobre los diferentes alérgenos individuales. 12 RIDASCREEN Spec. IgE
13 12. Limitaciones del método Las concentraciones de IgE determinadas con este sistema de prueba permiten sacar conclusiones sobre el grado de sensibilización del paciente con relación a los alérgenos individuales verificados o a las mezclas de alérgenos. El método no permite establecer una relación entre el valor de una concentración IgE determinada y la aparición o gravedad de síntomas clínicos. Los resultados obtenidos han de interpretarse siempre en combinación con el cuadro clínico completo. Por la ausencia de estándares nacionales e internacionales y debido a la posible variabilidad de las soluciones Pricktest y de los extractos de alergénos que se utilizan en los test in vitro, es posible que existan resultados discrepantes entre los test in vivo y diferentes test in vitro. También pueden medirse títulos IgE con valores negativos falsos o valores demasiado bajos justo después de producirse reacciones anafilactoides. Si existen resultados discrepantes entre el diagnóstico in vivo e in vitro, el test debería repetirse al cabo de 3-4 semanas. Si siguieran existiendo discrepancias, las mismas deberían examinarse por un alergólogo con tests in-vivo adicionales y con tests de provocación. Los test de provocación pueden desencadenar un choque anafiláctico. Los tests con resultado positivo también pueden estar condicionados por reactividad cruzada del alérgeno examinado con otros alérgenos. Tampoco puede excluirse la posibilidad de que al fabricarse los discos de alérgenos falten los epitopos desencadenantes de alergias, lo cual podría deparar resultados negativos falsos. 13 RIDASCREEN Spec. IgE
14 13. Características de rendimiento Tabla 7: Varianza interensayos; los cálculos se basaron en las clases EAST con 1 decimal. Interensayo Clase EAST 1-2 Clase EAST 3-4 Clase EAST 5-6 Alérgenos comprobados G6, T3, W6, D2, E1, M6, G6, T3, W6, D2, E1, I3, M6, F37, F4, F17, F49, F85, SX1, K82 G6, T3, W6, D2, I3, F27, F4, F85, K82 Número de ensayos / alérgeno Valor medio de controles de dilución 8 con 4 repl. / 8 con 4 8 con 4 alérgeno repl. / alérgeno repl. / alérgeno 11,7 % 3,44 % 3,65 % Tabla 8: Varianza intraensayos; los cálculos se basaron en las clases EAST con 1 decimal. Intraensayos Clase EAST 1-2 Clase EAST 3-4 Clase EAST 5-6 Alérgenos comprobados Número de repl. / alérgeno Valor medio de controles de dilución Sensibilidad G6, T3, W6, D2, E1, G6, T3, W6, D2, E1, I3, G6, T3, W6, D2, I3, F27, M6, F2, F37, F4, F17, M6, F37, F4, F17, F49, F4, F85, K82 K82 F85, SX1, K ,69 3,86 3,88% La sensibilidad analítica del kit del test - con relación a la comprobación del material estándar calibrado en la norma WHO - fue determinada por medio de diluciones sucesivas del suero estándar; dicha sensibilidad se encuentra por debajo de 0,24 IU/ml. Criterio: El valor de medición promedio (DO ) del nivel de dilución con un contenido de IgE de 0,229 IU/ml se diferencia del valor de medición promedio (valor en vacío) en más del doble de la variación estándar (intervalo de confianza del 95 %). La sensibilidad del diagnóstico se encuentra por debajo de 0,35 IU/ml 14 RIDASCREEN Spec. IgE
15 13.2. Especificidad Una variedad de alérgenos representativos de 11 grupos se comprobó con diferentes sueros, comparándolos con los de otro proveedor de sistemas de diagnóstico de alergia in-vitro. El resultado fue una especificidad del 91,2 % 15 RIDASCREEN Spec. IgE
16 Bibliografía 1. Kersten, W., von Wahl, P.G., Lange, C.E., Wenning, J.: Empfehlungen zur invitro Diagnostik allergischer Erkrankungen [Recommendations for the in-vitro diagnostics of allergies]. Allergologie, Jg. 23, No. 6, (2000) 2. Kjellman, N.I.M.: Prediction and prevention of atopic allergy, Allergy 37, (1982) 3. Debelic, M.: Die klinische Bedeutung der Bestimmung von Serum-Gesamt IgE und spezifischem IgE für die Diagnostik und Verlaufsbeobachtung allergischer Krankheitsbilder [The clinical significance of the determination of serum-total IgE and specific IgE for the diagnostics and observation of the progress of the clinical pictures of allergies]. Therapiewoche 29, (1979) 4. Urbanek, R,: Papier-Radio-Immuno-Sorbent-Test (PRIST) - IgE-Spiegel bei nicht allergischen und allergischen Kindern [Paper-radio immuno sorbent test (PRIST) IgE level for children with and without allergies], Monatsschrift Kinderheilkunde 125, (1977) 5. Kjellman, N.I.M., et al.: Serum IgE levels in healthy children quantified by a Sandwich technique (PRIST), Clin. Allergy 6, (1976) 6. Turner, K.J.: IgE globulins and immunity. Medical Journal of Australia 2, 846 (1974) 7. Johannson, S.G.O.: Raised levels of a new immunoglobulin class (IgND) in asthma. Lancet II, (1967) 8. Ishizaka, K., Ishizaka, T., Hornbook, M.M.: Physico-chemical properties of human reaginic antibody. IV. Presence of a unique immunoglobulin as a carrier of reaginic activity. Journal of Immunology 97, 75 (1966) 9. Bennich, H.H., et al.: Immunoglobulin E, a new class of human immunoglobulin. Bulletin World Health Organisation 38, 151 (1964) 16 RIDASCREEN Spec. IgE
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