CURSO DE BIOLOGIA y BIOTECNOLOGIA DE LA REPRODUCCIÓN (2008) Fecha 28 de julio a 8 de agosto (a confirmar)

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Luis Miguel Peralta Álvarez
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1 Finalidad CURSO DE BIOLOGIA y BIOTECNOLOGIA DE LA REPRODUCCIÓN (2008) Fecha 28 de julio a 8 de agosto (a confirmar) La formación de estudiantes de postgrado, profesionales y científicos en las bases biológicas, moleculares y tecnológicas de los procedimientos y técnicas actuales de la biotecnología de la reproducción en la especie humana y las principales de interés zootécnico. El curso aportará además información indispensable de los fundamentos de biología molecular, técnicas y métodos para la adecuada aplicación de la trascriptómica y proteómica en biotecnlogía de la reproducción. DESARROLLO TEÓRICO: El curso estará conformado por 3 módulos 1. BIOLOGÍA DE LA REPRODUCCIÓN 2. BIOTECNOLOGÍA DE LA REPRODUCCIÓN 3. BIOLOGÍA MOLECULAR 1. BIOLOGIA DE LA REPRODUCCION 1.1. Biología de la reproducción animal Control neuroendócriono de la función sexual en el modelo bovino Feromonas. Lugar de síntesis, funciones, efectos y aplicaciones en producción animal Etología del apareamiento. Libido, su importancia en la reproducción Nutrición y función reproductiva Señales neuropeptídicas de interacción Desarrollo folicular temprano. Su rol en la biotecnología de la reproducción Desarrollo del folículo primario Factores reguladores autócrinos y parácrinos Desarrollo de los ovocitos en el interior del folículo Cultivo in vitro de folículos Interacción funcional entre los espermatozoides y el tracto reproductor femenino Rol de las secreciones del tracto reproductor femenino en la función espermática Propiedades y composición química de las secreciones del tracto reproductor Mecanismos moleculares de las funciones oviductales Quimiotaxis Termotaxis Capacitación espermática Transporte y migración de los espermatozoides Sitios de deposición, contracciones y secreciones Selección reduccional de los espermatozoides Reservorios, función Fecundación y desarrollo temprano 2. BIOTECNOLOGÍA DE LA REPRODUCCIÓN 2.1. Biotecnología de la reproducción animal. Su impacto en la ciencia, la sociedad y la economía 2.2. Tecnología de semen. Protocolo de evaluación.

El curso aportará además información indispensable de los fundamentos de biología molecular, técnicas y métodos para la adecuada aplicación de la trascriptómica y proteómica en biotecnlogía de la

2 Aplicaciones de la inseminación artificial Inseminación artificial y conservación de semen en la especie bovina Inseminación artificial con semen sexado. Aplicaciones, resultados, eficiencia económica Inseminación artificial y conservación de semen en la especie bovina Inseminación intrauterina profunda en las especies bovinas y porcinas. Aplicaciones y resultados Producción in vivo de embriones Aplicaciones de la superovulación y transferencia de embriones Materiales necesarios Programa de transferencia de embriones Manejo de receptoras bovinas en un programa de transferencia de embriones Sincronización de celo y ovulación de hembras bovinas Superovualción de la hembra bovina Recolección, evaluación de la calidad y transferencia de los embriones Códigos sanitarios de recolección de embriones Métodos invasivos y no invasivos de evaluación de embriones. Criterios Resultados esperados. Tratamientos hormonales para incrementar las tasas de gestación Bases biológicas y moleculares de la comunicación embriomaterna 2.4. Producción in vitro de embriones Aplicaciones. Producción de embriones en gran escala e individual Materiales necesarios Recolección de ovarios y ovocitos Protocolos Biología y biotecnología de la maduración del ovocito Complejos ovocito células del cumulus. Morfología y Selección Maduración de los ovocitos. Uso de proteínas. Medios definidos Fecundación in vitro Preparación de los espermatozoides para la inseminación Método de swium up. Modificaciones, mini swim up, ventajas, desventajas Centrifugación en gradiente de densidad, ventajas y desventajas Lana de vidrio Evaluación dela motilidad y morfología espermática. Criterios Determinación de la concentración espermática. Co-Cultivo de espermatozoides con ovocitos. Concentración de ovocitos, tamaño de la gota. Procedimiento simplificado, cálculo Cultivo in vitro de los embriones en el laboratorio y durante el transporte Composición de los medios de cultivo. Uso de proteínas Estrés oxidativo en el cultivo in vitro de embriones Antioxidantes Medios químicamente definidos. Factores de crecimiento Factores que afectan los resultados de la producción in vitro de embriones Espermatozoides, efecto macho Ovocitos. Ovocitos de hembras impúberes Interacción embrionaria, tamaño de la gota de cultivo Resultados. Tasas de preñez y desarrollo fetal. Sindrome LOS (large calf syndrome)

Aplicaciones y resultados. 2.3. Producción in vivo de embriones 2.3.1. Aplicaciones de la superovulación y transferencia de embriones 2.3.2. Materiales necesarios 2.3.2. Programa de transferencia de embriones 2.

3 2.5. Criopreservación de embriones y ovocitos Aplicaciones, ventajas y desventajas Técnica de criopreservación. Métodos estándar, one step, de transferencia directa. Vitrificación Protocolos y soluciones Resultados 2.6. Determinación del sexo de embriones y espermatozoides Aplicación Métodos para la determinación del sexo de los embriones Métodos para la separación de los espermatozoides. Diferencia en el contenido de ADN Resultados, eficiencia, uso actual 2.7. Multiplicación de gametas y embriones Aplicaciones, Gametas artificiales Producción de gametas artificiales por medio de transferencia nuclear y partenogénesis Producción de mellizos idénticos. Separación de blastómeros y división microquirúrigica Material necesario 2.8. Transferencia nuclear con células somáticas Aplicaciones Materiales necesarios Métodos Convencional Simplificado o hand made Tasas de preñez. Resultados, eficiencia, problemas asociados con la transferencia nuclear con células somáticas Consideraciones éticas de la transferencia nuclear destinada a la producción de células madre embrionarias 2.9. Diseño y calidad de un laboratorio de biotecnología de la producción con fines comerciales Recursos humanos Diseño del laboratorio. Aire y ambiente Equipamiento Material de vidrio y descartable Agua y medios de cultivo. Agua, osmolaridad y composición iónica Identificación de placas y tubos Control de calidad. Protocolos. Normas ISO Biotecnología de la reproducción humana 3. BIOLOGÍA MOLECULAR Transcriptómica y proteómica

Métodos para la separación de los espermatozoides. Diferencia en el contenido de ADN 2.6.3.1 Resultados, eficiencia, uso actual 2.7. Multiplicación de gametas y embriones 2.7.1. Aplicaciones, 2.7.2. Gametas artificiales 2.

4 3.1. Bases moleculares de la genética animal Organización y estructura del genoma eucariota Control de la expresión génica en eucariotas 3.2. Genómica animal Genómica estructural: identificación de genes; secuenciación de genomas Genómica funcional: técnicas generales en los estudios de la función génica; microarrays; análisis del proteoma; técnicas independientes de la mutación; base molecular de la resistencia a enfermedades; transgenia animal y modificaciones del genoma 4. Bioética y biotecnología de la reproducción ACTIVIDADES PRÁCTICAS. Prácticas de técnicas reproductivas con ovocitos y semen bovino y porcino, y con huevos de peces Preparación de ovarios para la recolección de ovocitos bovinos Recolección de ovocitos bovinos por medio de aspiración con jeringa Selección, morfológica y formación de grupos de cultivo. Maniobras de cambio de gota Preparación de medios. Uso de balanza analítica, determinación de ph y presión osmótica Preparación de los espermatozoides para la fecundación in vitro. Descongelación Preparación de Swim-up y mini Swim-up Uso de micropipetas para el cambio de tubos, centrifugación Determinación de la concentración espermática Determinación de la motilidad espermática después de la descongelación y de la preparación Análisis de muestras de semen porcino Determinación de estado fisiológico de espermatozoides porcinos Preparación de células somáticas para transferencia nuclear Cultivo de células de la granulosa, cultivo de células del oviducto, cultivo de fibroblastos Duración: Dirección: Docentes: Dias y horarios: 75 horas 15 días Dra. Patricia E. Marini (marini@ibr.gov.ar) Dra. Silvia Arranz - Dr. Marcelo O. Cabada - Dra. Nora Calcaterra - Dr. Gustavo Palma - Bioq. Isabel Albertalli Med Vet Dora Dapino Lic Ema O Brien Lic Genética Juan Manuel Teijeiro Lunes a viernes de 9 a 12 y de 13:30 a 18 hs Carácter del Curso: Teórico y práctico Antecedentes: El Área Biología dicta desde hace siete años el curso de Biología de la Reproducción. El presente curso representa una ampliación del mismo.

enfermedades; transgenia animal y modificaciones del genoma 4. Bioética y biotecnología de la reproducción ACTIVIDADES PRÁCTICAS.

5 Condiciones de admisión: Egresados de Carreras Biológicas, Biotecnológicas, Médicas y Veterinarias, o alumnos del último año de las mismas. Alumnos de las Carreras de Doctorado. Evaluación y condiciones de aprobación: asistencia al menos del 85%; seminario y exámen final Lugar de desarrollo: Área Biología General Arancel por alumno: $650.- (pesos argentinos) Informes e inscripciones: Dra. Patricia Marini IBR, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, UNR Suipacha 531, S2002LRK Rosario TE: / / int. 122 Fax: E mail: marini@ibr.gov.ar, pmarini@fbioyf.unr.edu.ar

Evaluación y condiciones de aprobación: asistencia al menos del 85%; seminario y exámen final Lugar de desarrollo: Área Biología General Arancel por

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