M7 Presencia especie no humana

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1 XIX Jornadas del GHEP-ISFG 9-12 Septiembre 2014, Quito (Ecuador) M7 Presencia especie no humana Bos taurus

2 M7 Presencia especie no humana 52 laboratorios analizan M7 27 SIexistencia contribución animal 3 NOexistencia contribución animal 3907-Preliminares dudosos y secuencia cyt B humana 3715-RSID inconcluyente, Homo sapiens 3953-no preliminares, no análisis genéticos identificación sp 22 no analizan existencia contribución animal

3 10/27 SIexistencia contribución animal (análisis preliminares) Peroxidasa positivo (Adler,Kastle Meyer, Thevelon Roland, Piramidon, Fenoftaleína) + Inmunocromatografía negativo (Hexagon_Obti, RSID blood,rapid Signal Occult blood, Hem-Check) Cristalografía positivo (Cristales de Teichman) 3707,3709,3710,3751,3770,3777,3916,3924, : Adler + /inmunodifusión en gel -

4 15/27 SIexistencia contribución animal (identificación de especie) 3 laboratorios no realizan preliminares 12 laboratorios sí realizan preliminares Análisis genético Peroxidasa positivo (Adler, Kastle Meyer, Peroxtesmo) Cristalografía positivo (Cristales de Teichman, Gabriel Bertrand) Inmunocromatografía negativo (Hexagon_Obti, RSID blood,rapid Signal Occult blood, Seratec) Otros positivo (Combur test)

5 METODOLOGÍA I (identificación de especie) Secuenciación Cytb BLAST 3743: fragmento 472pb con primersuniversales para vertebrados 3798: fragmento 120 pb 3921: seq(14816/15173) mezcla humano/bos, posteriormente(15501/15648) con primers específicos de bóvidos

6 METODOLOGÍA II (identificación de especie) Amplificación SPINDels Análisis mediante software SPIndel_V3 Pereira F, Carneiro J, Matthiesen R, van Asch B, Pinto N, Gusmão L, Amorim, A. Identification of species by multiplex analysis of variable-length sequences. Nucleic Acids Research (22): e203 9 laboratorios: 3716,3717,3718,3719,3752,3759,3776,3797,3946

7 METODOLOGÍA III (identificación de especie) 3803 identificación de sp y determinación del sexo P. Gokulakrishnan, R. R. Kumar, B. D. Sharma, S. K. Mendiratta, D. Sharma, O. P. Malav Sex determination of cattle meat by polymerase chain reaction amplification of the amelogenin (AMELX/AMELY) gene.vet. World, Vol.5 (9):

8 METODOLOGÍA IV (identificación de especie) 3722: ADN mitocondrial-----strs bovino

9 METODOLOGÍA V (identificación de especie) 3931:detección de una proteína compatible con la subunidad alfa de Hb bovina mediante LC-MS

10 Detección de un pico en ID+ 3793: sólo STRs autosómicos canis 3764: realizan cyt b pero, no identifican la sp. Detectan 1 pico en ID+

11 RESUMEN 52 laboratorios analizan el ítem M7 de los cuales: 22 laboratorios no estudian la posible presencia de una especie de origen no humano en M7. Aunque 4 podrían haberla deducido por los resultados de los análisis preliminares que obtuvieron: peroxidasa +/inmunocromatografía - 3 laboratorios establecen que no existe una especie de origen no humano en M7

12 RESUMEN 27 laboratorios informan la presencia de una especie de origen no humano en M7 10 labs informan de la presencia mediante análisis preliminares 15 labs realizan análisis genéticos e identifican Bos taurus: Cyt b (4), SPINDels (9), STRs específicos (1), LC-MS (1) 1 lab realiza cyt b pero no identifica la especie 1 lab no realiza análisis genéticos específicos pero informa de un pico inespecífico en ID+. Identifica como canis

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