Cortisol Saliva Luminescence Immunoassay

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1 Instrucciones de Uso Cortisol Saliva Luminescence Immunoassay Ensayo de Luminiscencia de diagnóstico in vitro para la determinación cuantitativa de cortisol en saliva humana. RE62111 / RE / C I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H Flughafenstrasse 52a Phone: +49 (0) IBL@IBL-International.com D Hamburg, Germany Fax: +49 (0)

2 1. USO PROPUESTO El Inmunoensayo de Luminiscencia de IBL International de diagnóstico in-vitro está diseñado para la determinación cuantitativa de cortisol en saliva humana para ser usado en el estudio del síndrome de trastornos suprarrenales. El dispositivo no está diseñado para los ajustes point-of-care. 2. IMPLICACIONES CLÍNICAS El cortisol (hidrocortisona, compuesto F) es el glucocorticoide más importante en humanos y se produce en la zona fasciculata de la corteza adrenal. El 90 % del cortisol circulante está unido a la globulina fijadora de corticoide (CBG, Transcortina), aproximadamente el 7 % está unido a albúmina sólo del 1 3 % está libre. Esta última parte es la única que representa la forma activa del cortisol El cortisol aislado (libre) se libera en la saliva y se excreta vía riñón como una pequeña parte de los metabolitos del cortisol. El nivel de cortisol libre en sangre regula fundamentalmente su secreción en la corteza adrenal con un mecanismo de retroalimentación negativa vía CRH (hormona liberadora de corticotropina) en la región hipotalámica y la ACTH en la glándula pituitaria, pero también se afecta por numerosos factores y sobre todo por el stress. En humanos existe una fluctuación fisiológica del cortisol que alcanza el valor más elevado por las mañanas y el más bajo durante la medianoche. Esta fluctuación del nivel de cortisol en plasma se refleja en la saliva normalmente con un pico a los 90 minutos después de despertarse. La medición del cortisol se indica en los trastornos suprarrenales. Debido a las fluctuaciones diurnas de cortisol la colección de muestra de saliva es un método fácil que no produce el stress de pinchazos repetides en la vena. 3. PRINCIPIO DEL ENSAYO El inmunoensayo de luminiscencia está basado en el principio de competencia. Una cantidad desconocida de antígeno y una cantidad fija de antígeno marcado enzimáticamente compiten por los sitios de unión de los anticuerpos que recubren los pocillos. Luego de la incubación y para detener la reacción de competencia los pocillos son lavados. Después de adicionar la solución del sustrato de luminiscencia, la intensidad de luminiscencia medida es inversamente proporcional a la cantidad de antígeno de la muestra. Los resultados se pueden determinar directamente usando una curva estándar. 4. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES 1. Sólo para uso en diagnóstico in-vitro. Utilice únicamente por personas bien educadas. 2. Antes de comenzar el ensayo lea las instrucciones completa y cuidadosamente. Use la versión válida del prospecto que se ofrece con el juego de reactivos. Asegúrese de entenderlo todo. 3. En caso de daño severo del estuche del juego de reactivos, contacte por favor a IBL o a su suministrador en forma escrita antes de transcurrida una semana de la recepción. No utilice los componentes dañados en los ensayos pero guárdelos en forma segura para la reclamación. 4. El vidrio roto puede causar lesiones. Maneje los recipientes de cristal con precaución. 5. Tome en cuenta el número de lote y la fecha de caducidad. No mezcle reactivos de diferentes lotes. No use reactivos vencidos. 6. Cumpla con las buenas prácticas de laboratorio y las pautas de seguridad. Use bata de laboratorio, guantes de látex desechables y gafas de protección cuando sea necesario. 7. Los reactivos de este juego que contienen materiales peligrosos pueden causar irritación ocular y cutánea. Vea MATERIAL SUMINISTRADO y las etiquetas para los detalles. Las Hojas de Datos de Seguridad de los materiales para este producto están disponibles en la página de internet de IBL o mediante solicitud directa a IBL. 8. Los reactivos químicos y los reactivos preparados o usados deben ser tratados como desechos peligrosos de acuerdo con las regulaciones nacionales sobre bioseguridad y pautas de seguridad. 9. El personal de limpieza debe ser capacitado por profesionales para el manejo de residuos peligrosos. 5. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD El juego de reactivos es enviado a temperatura ambiente y debe ser almacenado a 2-8 C. Manteniéndose alejado del calor o de la luz solar directa. El almacenamiento y estabilidad de muestras y reactivos preparados se detalla en los capítulos correspondientes. La placa de microtitulación es estable hasta la fecha de caducidad del juego de reactivos aún cuando la bolsa haya sido abierta, siempre que se vuelva a cerrar herméticamente y se almacene a 2-8 C. Version / 7

3 6. TOMA Y ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS Saliva El paciente no debe comer, beber, mascar goma o lavarse los dientes 30 min antes de la toma de muestra. De lo contrario se debe enjuagar la boca con agua fría 5 min antes de la toma de muestra. No colecte muestra en cuando se presenten enfermedades orales, inflamaciones o lesiones (contaminación con sangre). La saliva puede ser colectada en un Sarstedt Cortisol Salivette o cualquier dispositivo aprobado para la recogida de saliva con el fin de determinar cortisol.se debe recoger un mínimo de 0.5 ml de líquido. La producción de saliva puede ser estimulada mascando un pedazo de film de Parafilm. Se recomienda congelar las muestras a 20 C antes del ensayo de laboratorio. Después de descongelar, mezcle y centrifuge por 10 min a x g para remover el material particulado. Observe que las muestras de saliva estén visualmente bien. (Color rojizo que indique contaminación sanguínea.) Almacenamiento: 37 C C 2-8 C -20 C (Alícuotas) Estabilidad: 2 semanas 4 semanas 4 semanas 12 meses 7. MATERIALES SUMINISTRADOS RE62111 RE62119 Símbolo Componente 1 x 12 x 8 10 x 12 x 8 MTP 1 x 13 ml 1 x 120 ml ENZCONJ 1 x 3.5 ml 1 x 20 ml 1 x 6 x 1.0 ml 1 x 6 x 3.5 ml CAL A-G 2 x 1.0 ml 2 x 3.5 ml CONTROL x 4.5 ml 2 x 45 ml LUMINREAG x 100 ml 5 x 100 ml WASHBUF CONC 3 x 12 x FOIL Folio Adhesivo Placa de Microtitulación Blanca. revestido con anticuerpos anti-cortisol (conejo). Conjugado Enzimático Coloreado en Amarillo. Listo para usar. Contenido: Cortisol (purificado por cromatografía), conjugado con HRP, estabilizadores. Estándar A-G 0; 0.015; 0.03; 0.10; 0.40; 1.00; 3.20 µg/dl 0; 0.15; 0.3; 1.0; 4.0; 10; 32 ng/ml 0; 0.41; 0.83; 2.8; 11; 28; 88 nmol/l Listo para usar. Contenido: Cortisol, Solución buffer, 0.1 % BSA, 0.1 % ProClin. Control 1+2 Listo para usar. Contenido: Cortisol, alto y bajo, Solución buffer, 0.1 % BSA, 0.1 % ProClin. Por concentraciones / rangos de aceptancia vea las etiquetas. Reactivo de Quimioluminiscencia 1+2 Listo para usar. Reactivo 1: Contenido: reforzador de luminol. Reactivo 2: Contenido: Solución de peróxido, estabilizadores. Solución Buffer de Lavado Concentrado (10x) Contenido: Solución buffer fosfatada, Tween, estabilizadores. 8. MATERIALES REQUIRIDOS PERO NO SUMINISTRADOS 1. Micropipetas (Multipette Eppendorf o dispositivos similares, < 3 % CV). Volúmenes: 20; 50; 100; 1000 µl 2. Centrífuga 3. Vortex 4. Micropipeta multicanal de 8 canales con reservorio de reactivo 5. Frasco lavador, sistema automatizado o semi-automatizado de lavado de placas de microtitración 6. Fotómetro para inmunoensayo de luminisciencia 7. Agua bidestilada o desionizada 8. Toallas de papel, puntas para las micropipetas y cronómetro 9. INDICACIONES PARA EL PROCEDIMIENTO 1. Cualquier manipulación inadecuada de las muestras o modificación del procedimiento de ensayo puede alterar los resultados. Los volúmenes a pipetear, los tiempos de incubación, las temperaturas y etapas de pretratamientos tienen que ser efectuados estrictamente siguiendo las instrucciones. Use sólo pipetas u otros dispositivos calibrados. 2. Una vez comenzado el ensayo, se deben completar todas las etapas sin interrupción. Asegúrese de que los reactivos, materiales y dispositivos necesarios estén listos en el momento adecuado. Permita que Version / 7

4 todos los reactivos y muestras alcancen la temperatura ambiente (18-25 C) y agite suavemente por rotación cada vial de reactivo líquido o muestra antes del uso. Evite la formación de espuma. 3. Evite la contaminación de los reactivos, pipetas pocillos y/o tubos. Emplee una punta desechable nueva para cada reactivo, estándar o muestra. No intercambie las tapas. Tape siempre los viales que no estén en uso. No reutilice los pocillos, tubos o reactivos. 4. Se recomienda ensayar las muestras por duplicado para poder identificar errores potenciales de pipeteo. 5. Use un esquema de pipeteo apropiado según las dimensiones de la placa. 6. El tiempo de incubación afecta los resultados. Todos los pocillos deben ser manipulados en el mismo orden y secuencia de tiempo. Para el pipeteo de soluciones en los pocillos se recomienda una pipeta de 8 canales. 7. El lavado de la placa de microtitulación es un paso importante. Los pocillos insuficientemente lavados conllevan a resultados erróneos. Se recomienda emplear una pipeta multicanal o un sistema automático de lavado. No deje secar los pocillos entre incubaciones. Cuide de no dañar el recubrimiento de las placas durante el enjuague y/o la aspiración. Enjuague y agregue los reactivos cuidadosamente. Al enjuagar cerciórese que todos los pocillos estén completamente llenos con la Solución Buffer de Lavado y que no haya residuos en ellos. 8. La humedad afecta los pocillos y tubos recubiertos. No abra la bolsa hasta que alcance la temperatura ambiente. Los pocillos o tubos que no se empleen deben guardarse inmediatamente en la bolsa resellada con desecante. 10. INSTRUCCIONES PARA LA PREPARACIÓN DEL ENSAYO Preparación de componentes concentrados Diluya / disuelva Componente Diluyente Relación Notas Almacenamiento Estabilidad 10 ml WASHBUF agregue 100 ml agua bidest. 1: Preparación de la solución Mezcla de Solucíon de Substrato Diluya / disuelva Mezcle vigorosamente. 2-8 C 4 semanas Componente con Componente Relación Notas Almacenamiento Estabilidad 1 ml LUMINREAG 1 1 ml LUMINREAG Mezcle vigorosamente C 8 h Dilución de Muestras Las muestras que se sospeche que contienen concentraciones mayores que 3.13 µg/dl tienen que ser diluidas con Estándar A. En caso de muestras diluídas los valores deberán multiplicarse por el factor de dilución correspondiente. 11. PROCEDIMIENTO DE ENSAYO 1. Pipetee 20 µl de cada Estándar, Control y muestra dentro de los respectivos pocillos en la placa de microtitulación. 2. Pipetee 100 µl de Conjugado Enzimático preparada al momento en cada pocillo. Cubra la placa con un folio adhesivo. Sacuda cuidadosamente la placa. 3. Incube 3 h a TA (18-25 C). 4. Remueva el folio adhesivo. Descargue la solución de incubación. Lave la placa 4 x con 250 µl de Buffer de Lavado diluido. Remueva el exceso de solución golpeando cuidadosamente la placa invertida sobre una toalla de papel. 5. Pipetee 50 µl de la Mezcla de Solución de Substrato cada pocillo en los mismos intervalos de tiempo que necesitará el luminometro para medir posteriormente (Luminometro Berthold tarda, por ejemplo, 2 segundo por pocillo). 6. Mida las unidades de luminiscencia relativa con un luminometro después de los 10 minutos. Version / 7

5 12. CONTROL DE CALIDAD Los resultados son válidos solamente si el ensayo ha sido realizado de acuerdo a las intrucciones. Además el usuario debe atenerse a las Prácticas de Buen Laboratorio (GLP) u otras normas o leyes comparables. Para la determinación del diagnóstico, el usuario y/o el laboratorio deben de tener un sistema validado de acuerdo con las Buenas Prácticas de Laboratorio (GLP). Los valores de los controles del ensayo deben encontrarse dentro de los rangos de aceptación indicados en las etiquetas y el Certificado QC. Si este criterio no se cumple, el ensayo no es válido y debe repetirse. Cada laboratorio debe emplear muestras conocidas como controles adicionales. Se recomienda participar en los programas de aseguramiento de la calidad adecuados. En caso de detectarse alguna desviación, se debe verificar lo siguiente: Fecha de vencimiento de los reactivos, condiciones de almacenamiento, pipetas, dispositivos, condiciones de incubación y método de lavado. 13. CÁLCULO DE RESULTADOS El RLU de los estándares (eje-y, lineal) se plotean contra su concentración (eje-x, logarítmico) ya sea en papel semi-logarítmico o empleando un método automático. Se logra un buen ajuste con cubic spline, 4 Parameter Logisitcs or Logit-Log. Para el cálculo de la curva estándar, utilice todos los valores obtenidos de los estándares (los valores que se encuentran fuera de rango en forma obvia pueden ser omitidos). La concentración de las muestras se puede leer directamente de la curva estándar. Las muestras que presenten una señal mayor a la del estándar mayor tienen que ser diluidas según se describe en INSTRUCCIONES PARA LA PREPARACIÓN DEL ENSAYO y analizadas nuevamente. En caso de muestras diluídas los valores deberán multiplicarse por el factor de dilución correspondiente. En las muestras de saliva con valores marcadamente elevados deben revisarse la posibilidad de contaminación sanguínea. Conversión: Cortisol (ng/ml) x 2.76 = nmol/l Cortisol x 27.6 = nmol/l Rango de Medición Saliva: µg/dl Cortisol Curva de Calibración Típica (Ejemplo. No usar para el cálculo!) Estándar Cortisol Medio Luminescence (RLU) RLU/RLU max (%) A B C D E F G VALORES ESPERADOS Los intervalos de referencia se establecieron utilizando prospectivamente 326 muestras recolectadas de 76 hombres y 76 mujeres aparentemente sanos en dos puntos de tiempo independientes en un lugar de los Estados Unidos. La saliva se recolectó utilizando el Cortisol Salivette de SARSTEDT Int. (Nº de listado del FDA: D053653). Los criterios de inclusión para la población adulta sana fueron adultos entre 21 y 70 años de edad, género y raza con niveles normales de TSH y TPO, que no estaban actualmente en tratamiento médico ni en terapia con drogas y que estaban libres en enfermedad en el día de la recolección de saliva. Los criterios de exclusión incluyeron pacientes que recibían terapia de cortisol, terapia hormonal o que tomaban contraceptivos orales, pacientes con dispositivos contraceptivos implantados, una historia clínica Version / 7

6 de enfermedad de la tiroides o autoinmune, historia clínica de síndrome de Cushing o enfermedad de Addison, y mujeres embarazadas o lactantes. La siguientes tablas indican el resumen de los resultados: Partición n Límite de referencia 2.5% percentil 97.5% percentil 90% Intervalo de confianza límite límite inferior superior Límite de referencia 90% Intervalo de confianza límite límite inferior superior mañana (antes 10 mañana) tarde (entre 2 y 4 horas) Además la literatura (13) ha sugerido los siguientes rangos para las concentraciones de cortisol durante el día: Grupo n mañana Rango tarde Rango Adultos hombres, edades ND Adultos mujeres, edades ND Adultos hombres, edades ND Adultos mujeres, edades ND Adultos hombres, edades ND Adultos mujeres, edades Todos los adultos ND Los resultados por si solos no deben ser la única razón para un tratamiento terapéutico, sino que deben correlacionarse con observaciones clínicas y ensayos de diagnóstico. Los usuarios y / o laboratorios deben contar con un sistema validado para obtener un diagnóstico de acuerdo con GLP. 15. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Rangos de valores normales para niños no han sido todavia evaluados con este ensayo. La toma de la muestra y almcenamiento tiene un efecto importante en los resultados. Vea TOMA DE MUESTRA Y ALMACENAMIENTO para mayores detalles. Para reactividad cruzada, vea PRUEBAS FUNCIONALES. Nota: Muestras de saliva que contengan timerosal, azida de sodio y sangre no deben ser usadas en el ensayo. Los siguientes substancias no tienen un efecto significativo en los resultados hasta las concentraciones declaradas: Sustancia potencialmente interferente Rango de sustancia potencialmente interferente Concentración ensayada más alta con influencia aceptable de sustancia potencialmente interferente Rango de Recuperción observada con influencia aceptable Sangre 0 10 % (v/v) 0.1 % (v/v) % Etanol 0-1% (v/v) 1 % (v/v) % Alimentos 0-1% (w/v) 1 % (w/v) % Goma de mascar 0 1 % (w/v) 1 % (w/v) % Nicotina 0 10 mg/ml 10 mg/ml % Cafeína µg/ml 1000 µg/ml % Version / 7

7 16. PRUEBAS FUNCIONALES Especificidad Analítica (Reactividad Cruzada) Substancia Reactividad Cruzada (%) Prednisolona Deoxycortisol 4.1 Cortisona 1.8 6β-Hydroxycortisol 1.7 Prednisone 0.8 Reactividad cruzada de otras substancias testeadas: < 1.0 % Androstenedione, Estrone, Estriol, Medroxyprogesterone 17-acetate, 17α-Hydroxyprogesterone, Dehydroisoandrosterone, Pregnenolone, Medroxyprogesterone, 4,5α-Dihydrotestosterone, Progesterone, Corticosterone, Dexamethason, Testosterone, Androsterone, Dihydrotestosterone, Methyltestosterone, 19-Norethindrone, Ethynylestradiol, Epiestriol, ß-Estradiol Sensibilidad Analítica (Límite del Blanco LdB) Sensibilidad Funcional (Límite de Detección LdD, Límite de Cuantificación LdC) Recuperación (Dilución de Muestras) Linearidad µg/dl Señal media (Estándar-Cero) - 2SD µg/dl Conc.Media < 20 % CV Conc. sin diluir Dilución en Serie hasta Rec. Intervalo (%) Rec. Medio (%) : la concentración de cortisol determinada = x (Conc. Esperada de Cortisol ), r 2 = 0.99 Rango linear del ensayo es hasta µg/dl Recuperación Comparación de Métodos (Deming Regression) Precisión y reproducibilidad Conc. Intervalo Conc. Agregado Rec. Intervalo (%) Rec. Medio (%) IBL-Assay = x otro ELISA r Pearson = n = 173 IBL-Assay = x LCMS Data r Pearson = n = 85 nivel entre la marcha - intraserie entre el día Conc.Media dentro de un día DS CV DS CV DS CV (%) (%) (%) en el mismo desviación estándar de la Conc.Media nivel laboratorio Precisión media diaria DS CV (%) DS CV (%) Version / 7

8 Inter-Lote entre operador nivel nivel Medio DS CV (%) Medio DS CV (%) REFERENCIAS SOBRE EL PRODUCTO 1. Clow, A.; Hucklebridge, F.; Stalder, T.; Evans, P.; Thorn, L. (2010): The cortisol awakening response: more than a measure of HPA axis function. In Neurosci Biobehav Rev 35 (1), pp Kalman, B.A; Grahn, R.E (2004): Measuring salivary cortisol in the behavioral neuroscience laboratory. In J Undergrad Neurosci Edu 2, pp. A41-A Kirschbaum, C.; Kudielka, B. M.; Gaab, J.; Schommer, N. C.; Hellhammer, D. H. (1999): Impact of gender, menstrual cycle phase, and oral contraceptives on the activity of the hypothalamus-pituitaryadrenal axis. In Psychosom Med 61 (2), pp Kirschbaum, C. (2010): Trier Social Stress Test. In Encyclopedia of Psychopharmacology, pp Laudat, M. H.; Cerdas, S.; Fournier, C.; Guiban, D.; Guilhaume, B.; Luton, J. P. (1988): Salivary cortisol measurement: a practical approach to assess pituitary-adrenal function. In J Clin Endocrinol Metab 66 (2), pp Lewis, J. G. (2006): Steroid analysis in saliva: an overview. In Clin Biochem Rev 27 (3), pp Liening, S. H.; Stanton, S. J.; Saini, E. K.; Schultheiss, O. C. (2010): Salivary testosterone, cortisol, and progesterone: two-week stability, interhormone correlations, and effects of time of day, menstrual cycle, and oral contraceptive use on steroid hormone levels. In Physiol Behav 99 (1), pp Nicolson, N.A (2008): Measurement of cortisol. In Handbook of physiological research methods in health psychology, pp Piazza, JR; Almeida, D. M.; Dmitrieva, N. O.; Klein, L. C. (2010): Frontiers in the use of biomarkers of health in research on stress and aging. In J Gerontol B Psychol Sci Soc Sci 65 (5), pp Raff, H.; Raff, J. L.; Findling, J. W. (1998): Late-night salivary cortisol as a screening test for Cushing's syndrome. In J Clin Endocrinol Metab 83 (8), pp Shimada, M.; Takahashi, K.; Ohkawa, T.; Segawa, M.; Higurashi, M. (1995): Determination of salivary cortisol by ELISA and its application to the assessment of the circadian rhythm in children. In Horm Res 44 (5), pp Tunn, S.; Mollmann, H.; Barth, J.; Derendorf, H.; Krieg, M. (1992): Simultaneous measurement of cortisol in serum and saliva after different forms of cortisol administration. In Clin Chem 38 (8 Pt 1), pp Aardal, E., Holm, A. (1995): Cortisol in Saliva Reference Ranges and Relation to Cortisol in Serum. Eur J Clin Chem Clin Biochem, 33(12), Version / 7

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12 Symbols / Symbole / Symbôles / Símbolos / Símbolos / Σύµβολα REF LOT Cat.-No.: / Kat.-Nr.: / No.- Cat.: / Cat.-No.: / N.º Cat.: / N. Cat.: / Αριθµός-Κατ.: Lot-No.: / Chargen-Bez.: / No. Lot: / Lot-No.: / Lote N.º: / Lotto n.: / Αριθµός -Παραγωγή: Use by: / Verwendbar bis: / Utiliser à: / Usado por: / Usar até: / Da utilizzare entro: / Χρησιµοποιείται από: No. of Tests: / Kitgröße: / Nb. de Tests: / No. de Determ.: / N.º de Testes: / Quantità dei tests: / Αριθµός εξετάσεων: CONC Concentrate / Konzentrat / Concentré / Concentrar / Concentrado / Concentrato / Συµπύκνωµα LYO IVD Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilisé / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato / Λυοφιλιασµένο In Vitro Diagnostic Medical Device. / In-vitro-Diagnostikum. / Appareil Médical pour Diagnostics In Vitro. / Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro. / Equipamento Médico de Diagnóstico In Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / Ιατρική συσκευή για In-Vitro ιάγνωση. Evaluation kit. / Nur für Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour évaluation. / Juego de Reactivos para Evaluació. / Kit de avaliação. / Kit di evaluazione. / Κιτ Αξιολόγησης. Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. / Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instruções antes de usar. / Leggere le istruzioni prima dell uso. / ιαβάστε τις οδηγίες πριν την χρήση. Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. / Garder à l abri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Manténgase alejado del calor o la luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / Να φυλάσσεται µακριά από θερµότητα και άµεση επαφή µε το φως του ηλίου. Store at: / Lagern bei: / Stocker à: / Almacene a: / Armazenar a: / Conservare a: / Αποθήκευση στους: Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / Παραγωγός: Caution! / Vorsicht! / Attention! / Precaución! / Cuidado! / Attenzione! / Προσοχή! Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED. Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben. Voir MATERIEL FOURNI pour les symbôles des composants du kit. Símbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS. Para símbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS. Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT. Για τα σύµβολα των συστατικών του κιτ συµβουλευτείτε το ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΥΛΙΚΑ. IBL AFFILIATES WORLDWIDE IBL International GmbH Flughafenstr. 52A, Hamburg, Germany IBL International Corp. 194 Wildcat Road, Toronto, Ontario M3J 2N5, Canada Tel.: + 49 (0) Fax: IBL@IBL-International.com WEB: Tel.: +1 (416) Fax: Sales@IBL-International.com WEB: LIABILITY: Complaints will be accepted in each mode written or vocal. Preferred is that the complaint is accompanied with the test performance and results. Any modification of the test procedure or exchange or mixing of components of different lots could negatively affect the results. These cases invalidate any claim for replacement. Regardless, in the event of any claim, the manufacturer s liability is not to exceed the value of the test kit. Any damage caused to the kit during transportation is not subject to the liability of the manufacturer Symbols Version 3.5 /