SCR LABORATORIO CLINICO

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1 TOMA DE MUESTRA ARICA, DICIEMBRE 2011

2 I N D I C E Página Introducción 3 Procedimiento toma muestra 4 Información general 6 Transporte muestra 7 Instructivo toma muestra 8 Muestra orina: Urocultivo 9 Muestra Hemocultivos 11 Muestra deposición: Coprocultivo 13 Secreción rectal 14 Muestra Tracto Respiratorio Superior 15 Muestra Tracto Respiratorio Inferior 17 Muestra Tracto Genital Femenino 20 Secreción Uretral 22 Muestra Directa Flujo Vaginal y Uretral 23 Muestra Herida y Ulceras 24 Muestra Líquidos Cavidades Cerradas 26 Muestra Secreción Ótica 27 Muestra Secreción Ocular 28 Toma muestras Virales 29 Muestra Anaerobias 29 Anexos 31 Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 2 of 46

3 INTRODUCCION Dada la importancia vital y clave que juega el Laboratorio Clínico en el diagnóstico de la medicina moderna y enmarcado en la gestión de calidad que adopte dicha UNIDAD, EL Jefe de Laboratorio abajo firmante y el equipo de Tecnólogos Médicos de la sección Bacteriología, se complacen en proporcionar la presente actualización del Manual de Toma Muestras Bacteriológicas. Dentro de la Calidad de un resultado bacteriológico, es muy importante considerar la etapa pre-analítica de él, por lo tanto este Manual tiene como objetivo principal minimizar al máximo el error en la toma de la muestra, ya que es imposible conseguir un buen resultado desde una muestra deficiente TM. LIC. RICARDO ZEPEDA BARRIOS JEFE LABORATORIO CLINICO ARICA, DICIEMBRE 2011 Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 3 of 46

4 PROCEDIMIENTO 1. OBJETIVO: Obtener muestras de buena calidad con el propósito de contribuir en la eficiencia diagnóstica para apoyar y orientar al médico clínico en el tratamiento del paciente. 2. CAMPO DE APLICACIÓN:A todas las muestras para diagnóstico bacteriológico. 3. FUNDAMENTO: No aplica. 4. REFERENCIA: Nch 2547 of 2003 Requisitos particulares para la calidad y competencia de Laboratorios Clínicos (etapa Pre-analítica. Cap. 5.4). 5. TERMINOLOGIA: Estudio Microbiológico: Comprende examen directo, cultivo y en aquellos agentes etiológicos que se justifica el antibiograma Cultivo: Es el crecimiento in Vitro de bacterias en medios de cultivos líquidos y sólidos, lo que permite el aislamiento del agente etiológico y su identificación posterior Cary Blair: Medio de transporte para deposición (tubo tapa roja) Stuart: Medio de transporte para estudio de bacterias aerobias en todo tipo de muestras (tubo tapa azul) Thayer Martin: Medio de cultivo selectivo para Neisserias patógenas UFC : unidad formadora de colonias. 6. DESARROLLO: El Centro de Responsabilidad (CR) de Laboratorio Clínico entregará a todos los CR Clínicos, de Especialidades, Servicio de Atención Primaria (Sermus) y Gendarmería: Medios de transporte Stuart Medios de transporte Cary Blair Medios de transporte para anaerobios Portagerm Tubos cónicos individuales tapa rosca estériles Frascos estériles de 60 ml. Frascos de hemocultivos adultos, pediátricos y neonatales. Todas las muestras que lleguen al Servicio de Laboratorio Clínico deben ser tomadas según Instructivos del Manual de toma muestra. Las muestras deben venir debidamente rotulada y su orden de solicitud de examen con todos los datos que el Servicio de Laboratorio solicite: nombre completo, servicio. Edad, fecha de nacimiento, carné de identidad, diagnóstico, tipo de muestra, fecha de obtención de la muestra Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 4 of 46

5 Las muestras deben entregarse en recepción de 8.00 hrs. AM a 9,30 hrs. AM 7. REGISTROS: Formulario solicitud de examen Registro de persona responsable de la toma de muestra paciente e indicaciones al Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 5 of 46

6 INFORMACION GENERAL UBICACIÓN DEL LABORATORIO Hospital Regional de Arica Dr. Juan Noé Crevani Sección Bacteriología 18 Septiembre 1000 Primer piso Teléfonos (19) (19) HORARIO DE RECEPCION DE MUESTRAS Y ENTREGA DE RESULTADOS 1.- Servicios Clínicos Lunes a Viernes 8:00 a 16:00 hrs. Sábado, Domingo 9:00 a 12:00 hrs y Festivo Fuera de estos horarios, las muestras que no sean tomadas en medios de transporte se recibirán en el Laboratorio de Urgencia y las muestras que sean tomadas en medio de transporte quedarán en el Servicio que lo solicita y se traerá al día siguiente al Servicio Laboratorio Clínico (lunes a domingo) 2.-CONSULTORIOS DE ESPECIALIDADES, SERMUS, INSTITUCIONES Lunes a Jueves 8:00 a 10:00 hrs. 13:30 a 14:30 hrs. Servicio UNACESS. PLAZO ENTREGA DE RESULTADO EXAMENES Urocultivos Cultivos en general: Hemocultivos: Coprocultivos: Anaerobios: 24 horas si es negativo y 48 a 72 horas si es positivo 48 a 72 horas Información positivo: en el momento que aparezca la positividad. Información final a los 5 días de incubación 48 a 72 horas 7 días Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 6 of 46

7 TRANSPORTE DE MUESTRAS OBJETIVO: Proteger la muestra, a la persona que la transporta, a la que la recibe y al medio ambiente MATERIALES: Contenedor plástico Refrigerantes DESARROLLO: Tomada la muestra debe ser enviada de inmediato, ya que 1 a 2 horas de retraso en la siembra favorece la pérdida de viabilidad de los patógenos más fastidiosos. Las muestras de orinas debe mantenerse REFRIGERADA a 4 C hasta su traslado, si su traslado no es posible de inmediato. Las muestras con medio de transporte deben permanecer a temperatura ambiente. Hasta su traslado al laboratorio. Plazo máximo 24 horas. Las muestras bacteriológicas deben venir en contenedor plástico o metálico que sea de tamaño apropiado para colocar los tubos de las muestras especialmente si éstas son líquidas. Esta gradilla o contenedor se colocará dentro de una caja plástica de tapa hermética. Llevar al Laboratorio con su respectiva orden. Las muestras de orinas asépticas, se transportarán en contenedor plástico con refrigerantes Muestras de orinas tomadas en la Sección Toma de muestra del CAE:(sólo niños(as) menores de 10 años) Condiciones del lugar Debe contar con baño, insumos para higienización de manos, ducha teléfono para lavado genital en niños, camilla pediátrica. La Técnico Paramédico encargada de la toma de muestra de orinas a menores de 10 años, debe colocar la muestra en un contenedor plástico que tenga refrigerantes. Tomará las muestras a todos los menores citados en el día. Debe efectuarse higienización de manos entre cada paciente Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 7 of 46

8 Cuando estén tomadas todas las muestras, debe llamar a la Técnico Paramédico de la Sección Bacteriología para trasladar las muestras al Servicio de Laboratorio Clínico con su orden respectiva. OBJETIVO: INSTRUCTIVO S Obtener una muestra no contaminada, para aislar agentes etiológicos de una probable infección, a fin de apoyar al médico clínico en la confirmación diagnóstica y orientar el uso racional de antimicrobiano cuando se decide indicar terapia RESPONSABILIDADES: Responsable de la indicación: Médico tratante, de turno o residente. Matronas pueden solicitar urocultivos, cultivo endocervical y cultivos de flujo vaginal. Baciloscopías pueden ser solicitadas por cualquier miembro del equipo de salud Responsable de ejecutar el procedimiento de la toma muestra: Enfermera, Matrona, Técnico paramédico de los CR, de CAE y Extra sistema, según la presente normativa Responsabilidad del encargado Tecnólogo Médico de la Sección Bacteriología: revisar calidad de la muestra, y efectuar todo el proceso para llegar a diagnóstico bacteriológico y efectuar las modificaciones a este manual cuando corresponda. Responsable del monitoreo y evaluación Tecnólogo Médico encargado de Calidades responsable de efectuar monitoreo de los indicadores. Oficina de Calidad es responsable de supervisar el cumplimiento del monitoreo. PROTECCIÓN DEL PERSONAL El personal que transporta muestras microbiológicas debe manipularlas siempre con guantes de procedimiento y transportarlas en envase hermético, según lo indicado en puntos anteriores Debe evitar el contacto de las muestras con el medio ambiente mientras realiza el traslado. Los envases se esterilizan y se desechan en laboratorio. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 8 of 46

9 MUESTRA DE ORINA: UROCULTIVOS Responsable de tomar la muestra: Enfermera, Matrona. En CAE, TPM Tipo de técnica: limpia MATERIALES: Tórulas de algodón para aseo y jabón. Toalla de papel. Guantes de procedimiento. Bolsa de polietileno para desecho. Envase plástico estéril con tapa rosca. Una chata. Frascos estériles Recolector pediátrico de orina. DESARROLLO: Explicar lo que se le va a hacer al paciente. Acostar al paciente decúbito dorsal y piernas flectadas y separadas. Lavarse las manos. Colocarse los guantes de procedimiento. Realizar aseo perineal prolijo, separando los labios con técnica de arrastre desde arriba hacia abajo en los pacientes mujeres y retrayendo el prepucio hacia atrás en los hombres. Se usa una tórula cada vez. Repetir esta técnica las veces que sea necesario. Elimine las tórulas en las bolsas de polietileno. Enjuague con agua corriente. Hacer orinar al paciente en la chata, eliminar el primer chorro y en la mitad de la micción recibir la orina en el envase plástico estéril, mínimo 10 ml. Cerrar el envase evitando contacto con los dedos, genitales externos o ropas. Rotular la muestra con nombre completo, servicio, tipo muestra y su orden correspondiente. Lavarse las manos Enviar al laboratorio. Con el objeto de no alterar el recuento bacteriano la muestra debe ser sembrada dentro de las primeras dos horas de tomada. Por lo tanto si no es enviada de inmediato al Laboratorio, ésta debe mantenerse refrigerada a 4º C y ser trasladada a esta Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 9 of 46

10 temperatura (con cadena de frío). En estas condiciones puede mantenerse hasta 24 horas. Toma de muestra orina a lactantes: Realice aseo prolijo como se describió anteriormente Seque con tórulas estériles la zona pubiana. Coloque recolector de orina pediátrico. Si el paciente en media hora NO ha orinado, cambiar el recolector. Recolecte la orina, sellar, rotular con nombre completo, servicio, tipo muestra, hora de la toma de muestra y orden correspondiente. Envíe al laboratorio. Catéter urinario permanente: En lo posible el catéter debe estar recientemente instalado previo a la toma de muestra, ya que estos se colonizan a las 48 horas siendo los microorganismos aislados no necesariamente el agente causal de la infección. Se debe registrar en la orden de examen que la muestra fue tomada a través del catéter. Desinfecte el sitio de punción en tercio proximal del catéter urinario permanente, puncionar en un ángulo de 30º, aspirar muestra con Técnica Aséptica Vaciar3 a 5 ml en un tubo o frasco estéril y transportarla en la misma forma que la muestra miccional. No se debe obtener la muestra de la bolsa recolectora ni cultivar los catéteres urinarios. Muestra por punción suprapúbica: Este procedimiento lo realiza el médico pediatra, procedimiento con técnica aséptica. Es el método de referencia en el diagnóstico de infección urinaria, dado que evita la contaminación con flora uretral.es un método invasor, por lo que se utiliza sólo en casos en que las técnicas de rutina han fracasado. Desinfectar la piel en el sitio de punción, aspirar con Técnica Aséptica entre 3 a 5 ml de orina y ponerlos en frasco estéril. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 10 of 46

11 MUESTRA PARA HEMOCULTIVOS RECOMENDACIONES GENERALES: El momento de la toma de muestra dependerá del cuadro clínico que se quiera confirmar. Se recomienda tomar las muestras antes de iniciar el tratamiento antibiótico. La técnica debe ser practicada por personal entrenado, previo lavado clínico de manos y antisepsia de la piel con alcohol 70%. FACTORES CRÍTICOS EN EL RENDIMIENTO: 1. Volumen de sangre 2. Método de desinfección de la piel 3. Número de muestras 4. Momento de la toma de la muestra MOMENTO DE LA TOMA DE MUESTRA: En bacteremias permanentes Bacteremia intermitente o sepsis origen extravascular Si el paciente está con antibiótico de En cualquier momento *Antes o durante los escalofríos. * Rama ascendente de la curva febril Tomar la muestra lo más alejada de la última dosis de tratamiento antibiótico. Bacteremias asociadas al uso de catéteres: tomar muestra en vena periférica Si se toma a través del catéter o se envía a cultivo la punta del catéter, siempre deben ir pareadas con otra muestra de vena periférica, por la colonización de los catéteres presente a las 48 h de instalado. MATERIALES: Frascos de hemocultivo de 30 ml.= adultos. 20 ml = pediátrico y neonatal. Antisépticos. Tórulas de algodón. Jeringas. Agujas estériles. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 11 of 46

12 Jabón antiséptico. Guantes de procedimiento. Alcohol 70%. Ligadura de goma. Volumen de la muestra: Adultos : 5 a 10 ml de sangre (30ml de caldo). Pediátrico y neonatal: 1 a 3 ml de sangre (20ml de caldo). Cantidad de muestras a tomar: 2 muestras de sangre tomadas en intervalos de 1/2 hora.de diferentes sitio anatómico En endocarditis infecciosa tomar 6 muestras de sangre de diferentes sitios de punción Con relación a los intervalos no existe consenso, sin embargo se recomienda 30 minutos entre cada extracción y en lo posible extraer de diferentes sitios anatómicos. Se recomienda mantener una proporción sangre/caldo de cultivo de 1/10, que permite neutralizar las propiedades bactericidas de la sangre y de los agentes antimicrobianos que puedan estar presentes en la muestra. DESARROLLO: PREPARACIÓN DE LA PIEL: Técnico Paramédico: Lavado clínico de manos. Uso de guantes de procedimiento El Técnico paramédico prepara la piel del paciente Lava el área de punción elegida con agua y jabón Enjuaga con agua estéril y seca con apósito estéril. Frota la zona en forma concéntrica comenzando por el centro, con alcohol al 70% durante 30 seg. Repetir la operación con Clorhexidina y dejar actuar hasta que se seque Desinfecta la tapa del frasco de hemocultivo con alcohol Enfermera Clínica: Higienización de manos con clorhexidina alcohólica. Si no cuenta con ella: lavado con jabón antiséptico Ponerse guantes estériles. Seleccionar la vena periférica de más fácil acceso al paciente. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 12 of 46

13 Punciona la vena Aspira el volumen indicado. Retira la jeringa y presiona con tórula estéril y coloca un sello estéril. Retira con pinza la aguja de la jeringa y coloca una aguja nueva. Inocula directamente a través de la tapa de goma del frasco de hemocultivo. Mezcla con movimientos rotatorios suaves el frasco de hemocultivo. Rotula con nombre completo, servicio, hora, tipo muestra y orden correspondiente en la etiqueta del frasco. Cuidar de no tapar el código de barra. Envía al laboratorio en forma inmediata. Estos exámenes se reciben en forma continua en el laboratorio. NO REFRIGERAR. MUESTRA DE DEPOSICION: COPROCULTIVO Técnica limpia MATERIALES: Tubo estéril con medio de transporte Carry Blair. Guantes de procedimiento. DESARROLLO: Explique lo que se le va a hacer al paciente. Acueste al paciente en posición SIMS. Lávese las manos. Colóquese los guantes de procedimiento. Abra los glúteos del paciente e introduzca la tórula estéril en el canal anal unos 3 cm. Rote la tórula suavemente. Repita con una segunda tórula. Cuando la deposición es líquida, debe obtenerse mediante sonda rectal, empleando una sonda nelatón fina con jeringa. Tomar de 1 a 5 ml. de deposición. Introduzca cuidadosamente la muestra en Cary Blair Retírese los guantes y lávese las manos Rotule la muestra con el nombre completo, servicio, tipo de muestra. Envíe al laboratorio con la orden correspondiente. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 13 of 46

14 Técnica limpia SECRECION RECTAL MATERIALES: Guantes procedimiento Tórula estéril Tubo con medio de cultivo Stuart DESARROLLO: Explique lo que se le va a hacer al paciente. Acueste al paciente en posición SIMS. Lávese las manos. Colóquese los guantes de procedimiento. Abra los glúteos del paciente e introduzca la tórula estéril en el canal anal unos 3 cm. Rote la tórula dejándola unos segundos para mejor absorción de los microorganismos Retire la tórula, girándola por las paredes del canal anal. Introduzca cuidadosamente la muestra Cary Blair Retírese los guantes y lávese las manos Rotule la muestra con el nombre completo, servicio, hora, tipo de muestra y su orden. Envíe al laboratorio. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 14 of 46

15 MUESTRA TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR MATERIALES: Tubo estéril con medio de transporte con tórula individual incluida en el envase estéril Toalla de papel Baja lengua Fuente de luz artificial DESARROLLO SECRECION FARINGEA Y AMIGDALAS Técnica limpia Lávese las manos. Explique al paciente lo que se le va hacer. Coloque toalla de papel en los hombros del paciente. Lávese las manos póngase guantes de procedimiento, mascarilla y protección ocular. Pídale al paciente que abra la boca para visualizar faringe. Si fuese necesario utilice luz artificial. Presione la lengua con el baja lengua, evitando estimular el reflejo de nauseas del paciente. Abra el envase del medio de transporte y retirar la tórula. Frote la tórula por la amígdalas, pilares anteriores y pared posterior de la faringe tocando cualquier exudado visible (movimiento circular envolvente) Evite tocar la lengua, úvula o las paredes interna de la boca. Introduzca la tórula cuidadosamente en el tubo con transporte Stuart (tapa azul) Deseche baja lengua. Retírese los guantes y lávese las manos. Retire toalla de papel del paciente. Retírese y deseche la mascarilla, retire la protección ocular y deseche o envíe a limpieza según corresponda. Rotule la muestra con el nombre completo del paciente, servicio, tipo de muestra y orden solicitud examen. Envíe la muestra al Laboratorio Central. Lávese las manos una vez finalizada la toma de la muestra. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 15 of 46

16 Para investigar Corynebacteriundifterieae, tomar dos muestras con tórula estéril, utilizando baja lengua,pasando la tórula por el borde de la pseudo membrana SECRECION NASAL: Técnica limpia Lávese las manos. Coloque toalla de papel en los hombros del paciente. Explique al paciente lo que se le va hacer. Lávese las manos y póngase guantes de procedimiento Incline levemente la cabeza del paciente hacia atrás Levante la punta de la nariz. Introduzca la tórula humedecida con suero fisiológico a la fosa nasal Rote la tórula estéril humedecida con solución salina Introduzca cuidadosamente la tórula en el tubo con medio de transporte Stuart (tapa azul) Retirarse guantes y lavarse las manos Retire la toalla de papel del paciente Rotule la muestra con el nombre completo del paciente, servicio, tipo de Muestra y orden solicitud de examen Envíe la muestra al Laboratorio Central Lávese las manos una vez finalizada la toma de muestra La secreción nasal no es representativa de una infección sinusal, para ello debe tomarse muestra de los senos paranasales Senos paranasales: La muestra debe ser obtenida por médico especialista. Se punciona en forma aséptica con jeringa a nivel de la cavidad paranasal Enviar muestra al Laboratorio en la misma jeringa, ya que es importante el estudio anaerobio. SECRECION NASOFARINGEA El estudio portación nasofaringe, sólo se justifica en casos de 1. Brotes epidemiológicos de IIH cuando se sospecha que el reservorio del agente causal del brote se encuentra en esta localización. 2. Estudio viral DESARROLLO Deprima la lengua con baja lengua Con tórula estéril humedecida con solución salina, tomar la muestra por detrás de la úvula, en la porción nasal de la faringe Introduzca cuidadosamente la muestra en el tubo con medio de transporte Stuart (tapa azul) Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 16 of 46

17 Deseche baja lengua. Retire toalla de papel del paciente Rotule la muestra con el nombre completo del paciente, servicio, tipo de muestra y orden solicitud de examen Envíe muestra al Laboratorio Central Lávese las manos una vez finalizada la toma de la muestra MUESTRA TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR MATERIALES: Equipo de aseo para cavidad bucal Toalla de papel Mascarilla Guantes de procedimiento. Tubo estéril sin medio de transporte Frasco estéril boca ancha y tapa rosca (frasco de urocultivo) Equipo estéril de punción DESARROLLO: EXPECTORACIÓN La muestra de expectoración debe ser tomada antes de iniciar tratamiento de antibióticos Se debe tomar en ayunas o en horas alejadas de las comidas La toma de muestra debe ser supervisada por profesional responsable. La muestra salival no sirve. Es recomendable facilitar la expectoración con kinesioterapia y drenaje postural. Una muestra adecuada se caracteriza por contener un mínimo de células epiteliales ( < de 10 x campo) y un número significativo de polimorfonucleares ( > de 25 x campo) La muestra podrá ser tomada entre los 8.00 y 16 horas y debe enviarse de inmediato. Plazo máximo 1 hora. En el Laboratorio debe verificarse la buena calidad de la muestra mediante la observación al fresco de la porción más purulenta. Se considerará apropiado si están presentes más de 25 PMN por campo Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 17 of 46

18 El profesional o Técnico Paramédico encargado de la toma de muestra: Explica al paciente lo que se le va hacer Se lava las manos y se pone mascarilla y guantes de procedimiento Sienta al paciente Retira prótesis dentaria si hubiese Le pide al paciente que se lave los dientes, lengua y paladar Que realiza colutorios con agua, para limpiar bien la cavidad oral Le pide al paciente que tosa y elimine una muestra de expectoración en el envase estéril conservando la asepsia Rotula la muestra con nombre completo, servicio, hora, tipo de muestra y su orden. Envía al Laboratorio Se lava las manos una vez finalizada la toma de muestra SECRECION BRONQUIAL El profesional encargado de la toma de muestra es la Enfermera clínica responsable del paciente. La muestra debe ser recibida en el tubo que viene en el equipo de aspiración bronquial(tapa blanca) Rotula la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su orden Envía al Laboratorio Se lava las manos una vez finalizada la toma de muestra ASPIRADO ENDOTRAQUEAL Es una técnica de muy baja especificidad ( 0 30 %) y de alta sensibilidad ( 60-90%), por lo cual, los resultados negativos en pacientes que no han recibido antimicrobianos previos, permiten descartar la posibilidad de NAVM El encargado de la toma de muestra es la enfermera La muestra debe ser recibida en el tubo que viene en el equipo de aspiración (tapa blanca) Se rotula la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su orden. Se envía al Laboratorio Se lava las manos una vez finalizada la toma de muestra Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 18 of 46

19 ASPIRADO ENDOTRAQUEAL CUANTITATIVO (A.E.T.): se indica esta técnica a todo paciente con sospecha de Neumonía asociada a ventilación mecánica (conexión mayor a 48 hrs y presencia de criterios clínicos radiológicos) y en el cual no se hayan efectuado cambios de tratamiento antimicrobiano en las últimas 72 hrs. TÉCNICA Se utiliza un catéter de aspiración introducido por el tubo endotraqueal y se conecta el otro extremo del catéter a un colector o trampa estéril apropiada.el procedimiento debe ser realizado con técnica aséptica y por un profesional entrenado. El catéter debe ser introducido hasta encontrar resistencia. No se debe diluir la muestra con el fin de facilitar su recolección.si las secreciones son espesas se debe aspirar en forma intermitente. INTERPRETACIÓN La aplicación de un recuento > a 106 ufc./ml, permite una sensibilidad razonable y una especificidad significativa. Valores iguales o superiores a este recuento se asocian a NAVM en aproximadamente el 80% de los casos. MUESTRAS INVASIVAS Son las más específicas en el diagnóstico etiológico de las NEUMONIAS NOSOCOMIALES. Tienen la desventaja de requerir médico especialista para la realización del procedimiento. LAVADO BRONCOALVEOLAR (LBA) POR BRONCOSCOPÍA: método que permite obtener un lavado del compartimiento alveolar. Se debe instilar entre ml de solución salina. La sensibilidad en promedio es de 69% y la especificidad 88 %. El nivel de corte considerado positivo es de 10 4 ufc/ml.realizar el procedimiento a través de broncoscopía y con técnica aséptica, recuperar entre 15 a 50 ml del lavado en un tubo o frasco estéril. Transportarlas de inmediato al laboratorio para su estudio. BIOPSIA PULMONAR: El estudio histopatológico del pulmón es considerado el patrón de referencia para el diagnóstico de NAVM.Por su dificultad técnica no es considerada para el diagnóstico de NAVM en el inmunocompetente. Se envía un trocito de tejido en tubo estéril o en medio de transporte con caldo específico, solicitado previamente al laboratorio, obtenido mediante procedimiento quirúrgico. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 19 of 46

20 Trasladar la muestra de inmediato.no refrigerar, ni colocar en líquidos preservantes o fijadores. Las muestras para estudio de Tuberculosis y otras micobacterias, deben enviarse al Instituto Nacional del Tórax y las virales (refrigeradas), al ISP. PUNCIÓN PLEURAL Son de resolución médica La enfermera y Técnico Paramédico deben: Preparar en forma física y psíquica al paciente Tener colaboración activa en la toma de muestra junto al Médico Obtener 5-10 ml de muestra por toracocentésis en tubo estéril medio de transporte (tubo cónico tapa rosca),ó tubo del equipo de aspiración ó en frasco de urocultivo Debe enviar la muestra en tubo estéril sin medio de transporte. Deben rotular la muestra con nombre completo, servicio,hora, tipo de muestra y su orden MUESTRAS SECRECIÓN TRACTO GENITAL FEMENINO MATERIALES: Guantes de procedimiento Espéculo estéril Tubo con medio de transporte Stuart Sabanilla desechable Mascarilla Tórulas estériles individuales Pinzas basseman Receptáculos para desechos Fuente de luz artificial Frascos de penicilina con suero fisiológico Jeringas Sondas estériles DESARROLLO: Explique lo que se le va hacer al paciente. Reúna el material. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 20 of 46

21 Acueste a la paciente en mesa ginecológica con sabanilla desechable Haga aseo genital El operador debe colocarse pechera desechable, lavarse las manos y colocarse guantes Introduzca especulo sin lubricar en la vagina de la paciente LOQUIOS: Visualice cuello uterino, límpielo con tórula estériles. Introduzca la tórula estéril por el cuello del útero hasta llegar a la cavidad uterina sin tocar pared vaginal. Hacer girar la tórula. Retire la tórula e introdúzcala en el tubo con medio de transporte Stuart. SECRECION VAGINAL: Tome la muestra con tórula estéril de la mucosa vaginal si se desea investigar Listeria. Para buscar hongos, tricomonas y Gadnerella, introduzca una sonda a través de la vagina, conectada a una jeringa que contenga 2 ml suero fisiológico. Haga lavado vaginal, aspire y coloque el producto del lavado en tubo estéril SECRECION CERVIX: Ubique cerviz, limpie secreción vaginal y mucus con gasa esteril. Tome muestra de exudado endocervical, haciendo girar la tórula. Introduzca la tórula en tubo con medio de cultivo Stuart. Para Chlamydia (Inmunofluorescencia Directa) ver Anexo 2. SECRECION VULVAR: Tome muestra de la lesión con tórulas estériles. Si hubiese nódulo, irrigar con 0,5 ml. suero fisiológico y aspire con jeringa estéril.introduzca muestra en tubo estéril Retire especulo. Pídale al paciente que se baje de la mesa ginecológica y se vista. Retire sabanilla desechable Rotule la muestra con nombre completo, servicio,tipo de muestra y su orden Lávese las manos una vez finalizada la toma de muestra Envíe muestra al Laboratorio FONDO DE SACO DE DOUGLAS: Aspire por punción del fondo de saco vaginal previa desinfección. Envíe en la misma jeringa taponada como para estudio de anaerobios. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 21 of 46

22 CULTIVO ANAEROBIO: Si existe la sospecha de infección anaerobia, sólo se realiza el estudio en las siguientes muestras: placenta obtenida por cesárea, endometrio obtenido por cirugía o por aspiración cervical con catéter protegido, aspirado por punción de fondo de saco de Douglas, tejidos anexiales y aspirado de glándula de Bartolino LIQUIDO AMNIOTIVO Técnica que debe ser realizada por Médico gineco-obtetra: Por amniocentesis Aspiración trans cutánea. Una vez tomada la muestra se introduce en un tubo estéril. Levar al Laboratorio con orden correspondiente y debidamente rotulada. ABSCESOS OVARICOS Y TROMPAS DE FALOPIO: Técnica debe ser realizada por Médico gineco-obtetra.una vez tomada la muestra se debe introducir en un tubo estéril. Lleve al Laboratorio con orden correspondiente y debidamente rotulada. MUESTRA DE SECRECIÓN URETRAL MATERIALES: Guantes de procedimiento Tubo con medio de transporte Stuart Vidrio porta-objeto Placa con medio de cultivo Tayer Martin Frascos de penicilina con suero fisiológico Tórula estéril. DESARROLLO: Explicar lo que se le va hacer al paciente Lavarse las manos Colocarse guantes de procedimiento Visualizar glande Previo aseo genital, exprimir uretra y recibir la secreción en tórula estéril, colocar en medio de transporte Stuart. La muestra debe tomarse a primera hora de la mañana o después de una hora de orinar. Si la secreción es abundante, tomar la muestra con la tórula estéril Si la secreción es escasa, introducir una tórula de arginato en la uretra unos dos centímetros. Al retirar la tórula, girarla en ambos sentidos. Si no hay secreción se puede tomar orina de primer chorro Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 22 of 46

23 Introducir cuidadosamente la muestra en medio de transporte Stuart Rotular la muestra con nombre completo, servicio, hora, tipo de muestra y su orden Enviar la muestra al Laboratorio Retirarse los guantes Lavarse las manos una vez finalizada la toma de muestra Para Inmunofluorescencia Directa para Chlamydia ver Anexo 2 En Secreción prostática: Se procede de igual forma que en el caso de muestra para secreción uretral, previo masaje prostático Las muestras obtenidas por masaje prostático son responsabilidad del médico urólogo. Los pacientes de ETS, la matrona debe tomar la muestra según corresponda y sembrar la muestra directamente en una placa con medio de cultivo TM. En forma de Z y poner la (las) placa en un contenedor metálico con vela. Enviar al Laboratorio MUESTRA DIRECTA DE FLUJO VAGINAL Y URETRAL OBJETIVO: Mantener viabilidad de tricomonas principalmente para obtener un resultado confiable. MATERIALES: Tórulas estériles Frascos con suero fisiológico Espéculo Mesa ginecológica DESARROLLO: El responsable de la toma muestra es la matrona Explicar al paciente lo que se le va hacer Acostar a la paciente en posición ginecológica Introducir espéculo sin lubricar Tomar muestra con tórula estéril del fondo de vagina La tórula con muestra, emulsionarla en el frasco de suero fisiológico. Eliminar la tórula Rotular la muestra con nombre completo, servicio, hora, tipo de muestra y su orden Enviar la muestra inmediatamente al Laboratorio Sacarse los guantes y lavarse las manos una vez finalizada la toma de muestra Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 23 of 46

24 MUESTRA DE HERIDAS Y ULCERAS El diagnóstico de infección es clínico y se basa en la presencia de signos y síntomas en el sitio de la lesión. El cultivo se solicita solo 1. En la duda del diagnóstico de infección 2. Si se requiere confirmar etiología con fines epidemiológico, especialmente en pacientes hospitalizados, para definir precauciones o medidas de aislamiento 3. Si el clínico decide que el estado del paciente amerita un tratamiento antibiótico sistémico MATERIALES Suero fisiológico, Ringer o agua destilada Tubos con medio de transporte Stuart Frascos con medio de transporte Portagerm para bacterias anaeróbicas DESARROLLO: Existen dos tipos de cultivos de heridas, dependiendo del microorganismo a aislar: Cultivo aerobio Cultivo anaerobio TOMA DE MUESTRAS Cultivo aerobio superficial: Se limpia cuidadosamente la herida por arrastre mecánico con suero fisiológico Ringer o agua destilada Tome la muestra con tórula estéril, frotando el centro y los bordes internos en zigzag (tocar 10 puntos de referencia a la superficie) Rote la tórula al avanzar en zigzag. Introduzca cuidadosamente la muestra al tubo de medio de transporte Stuart Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y orden correspondiente. Envíe al Laboratorio. Cultivo aerobio profundo: Limpie cuidadosamente la superficie dañada con suero fisiológico estéril Tome muestra con tórula estéril, de la parte mas profunda de la herida Introduzca cuidadosamente la muestra en un tubo de medio de transporte Stuart Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y orden correspondiente. Envíe al Laboratorio. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 24 of 46

25 Cultivo anaerobio: Limpie cuidadosamente la superficie dañada con suero fisiológico estéril. Aspire alrededor de 0,5 ml de secreción de la zona más profunda de la herida, con jeringa estéril. Retire jeringa, eliminando las burbujas de aire. Introduzca cuidadosamente la muestra en el frasco portagerm. Cambie la aguja de la jeringa, pinchando la goma que cubre el frasco con medio de cultivo. Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y orden correspondiente. Si no es posible aspirar muestra, introducir la tórula de cultivo en lo más profundo de la herida y colocarla en un tubo de thioglicolato solicitado al Laboratorio en el momento de su uso. De mayor rendimiento es tomar un trocito de tejido (6mm) con pinza estéril en forma aséptica y dejarlo caer en tubo de thioglicolato. Envíe muestra al Laboratorio. Abscesos cerrados: Limpie sitio de punción con antiséptico Aspire secreción con jeringa, en lo posible 10 ml. Vacié a tubo con medio de transporte Stuart para cultivo aerobio y portagerm para cultivo anaerobio Comentario: El ph ácido del pus destruye rápidamente los microorganismos, por lo que las muestras purulentas deben ser enviadas de inmediato al laboratorio para su siembra. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 25 of 46

26 MUESTRA DE LIQUIDOS DE CAVIDADES CERRADAS Liquido cefalorraquídeo, liquido pleural, liquido ascítico, liquido sinovial y liquido pericardio MATERIALES: Equipo de punción. Alcohol 70%. Algodón. Jeringa y aguja estéril. Tubos estériles tapa rosca. DESARROLLO. Estas muestras deben ser tomada por Médico por punción con técnica aséptica Las muestras deben introducirse en tubos cónicos estériles Los líquidos pleural, ascítico, sinovial, Pericardio y peritoneal: deben introducirse en tubo cónico estéril y la otra mitad en frasco de hemocultivo Rotule con nombre completo, servicio, hora, tipo muestra y orden correspondiente Envíe al Laboratorio. LCR : Es importante la edad del paciente dado que la etiología de la meningitis depende del grupo etario Con técnica aséptica, se obtiene la muestra por punción lumbar Se recolecta el LCR en dos tubos estériles tapa rosca Si se ha tomado un solo tubo con muestra, el laboratorio de microbiología debe procesarlo primero Una vez obtenida la muestra ésta debe ser enviada al laboratorio en forma rápida para su procesamiento LCR de drenaje ventriculares: En sospecha de Ventriculitis (DVE) aspire, en formaaséptica2 a 3 ml y enviar en la misma jeringa o en tubo estéril de inmediato al laboratorio. No refrigerar. Absceso y biopsia cerebral: Estas muestras se deben obtener por aspiración y se deben enviar en la misma jeringa o en tubo estéril, en horas de funcionamiento del laboratorio. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 26 of 46

27 MUESTRA DE SECRECIÓN ÓTICA MATERIALES: Tubo con medio de transporte Stuart (tubo tapa azul) Ampolla de agua destilada o suero fisiológico. OTITIS MEDIA: La muestra óptima es el aspirado timpánico por punción. No se recomienda obtener la muestra con tórula, ya que la flora del conducto auditivo externo contamina la muestra y oculta el patógeno causal. Sólo puede usarse este sistema cuando existe perforación timpánica y fluye pus en forma espontánea OTITIS EXTERNA: Explique al paciente lo que se le va hacer. Lávese las manos el operador. Tome el lóbulo de la oreja del paciente, tirándola suavemente hacia fuera, dejando a la vista el conducto auditivo externo y lávelo con suero fisiológico Humedezca la tórula con agua destilada o suero fisiológico estéril Introduzca la tórula humedecida, por el conducto auditivo externo llegando hasta la cercanía del tímpano Dirija la tórula en sentido oblicuo, de atrás hacia delante y de abajo hacia arriba Introduzca cuidadosamente la muestra al tubo de transporte Stuart(tapa azul) Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su 0rden. Envíe al Laboratorio Lávese las manos una vez finalizada la toma de muestra Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 27 of 46

28 MUESTRA SECRECIÓN OCULAR MATERIALES Ampolla de agua destilada estéril o suero fisiológico estéril Tubo con medio de transporte Stuart DESARROLLO La muestra debe ser tomada antes de la aplicación de ungüento tópico. Debe ser tomada por Profesional y ayudante para inmovilizar la cabeza del paciente (niño) Lávese las manos el operador Explique al paciente o al familiar del paciente lo que se le va hacer Afirme la cabeza del paciente Limpie superficie externa del ojo comprometido con suero estéril Con los dedos pulgar e índice, abrir párpados del paciente Frote con tórula humedecida con suero fisiológico el borde interno de la conjuntiva y el extremo interno del párpado superior Rote la tórula suavemente para que toda la superficie del algodón de la tórula quede con secreción purulenta. Introduzca cuidadosamente la muestra al tubo de medio de transporte Stuart (tapa azul). Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su orden Envíe al Laboratorio. Lávese las manos una vez finalizada la toma de muestra. ULCERAS CORNEALES: La muestra óptima es el raspado corneal y no la secreción superficial. Debe ser tomada y sembrada por oftalmólogo, en la clínica o sala de atención del paciente. Limpie superficie externa del ojo comprometido con suero estéril, frotar con tórula humedecida el borde interno de la conjuntiva y colocarla en el tubo con medio de transporte Stuar Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 28 of 46

29 1. Adenovirus. 2. Virus respiratorio sinsicial. 3. Virus parainfluenza. 4. Virus influenza A y B. TOMA DE MUESTRA VIRALES. (I F I) Este procedimiento está normado por el ISP, donde deben enviarse las muestras IFI (+) y por el Servicio de Salud de Antofagasta, donde se envían las muestras IFI (-), según documento adjunto (Anexo 1). MUESTRA PARA ANAEROBIO MATERIALES: Equipo de toma muestra estéril Jeringas estériles Tubo cónico estéril Frasco con medio de transporte para anaerobio Portagerm. Guantes estériles DESARROLLO: Muestras que no se deben cultivar en anaerobiosis Secreciones tracto respiratorio superior Deposición, excepto para el Cl. Difficile Secreción tracto genital Secreciones de la piel Muestras que deben sembrarse en anaerobiosis Material aspirado: pus de absceso, punción transtraqueal, suprapúbica Tejidos: biopsias, muestras quirúrgicas y autopsias Líquidos de cavidades cerradas Las técnicas más usadas para la recolección de material clínico son: Aspiración, Punciones, Biopsias o incisión quirúrgica La muestra debe ser realizado por Médicos si fuese quirúrgico Una vez que elija la técnica, debe tomar la muestra con técnica aséptica Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 29 of 46

30 Elimine aire si hubiese en la jeringa Introduzca la muestra en tubo de transporte Portagerm ( ver IT) Lleve al Laboratorio con orden correspondiente y debidamente rotulada DISTRIBUCIÓN. Dirección SDAC y sus CR Clínicos dependientes SDAA y sus respectivos CR dependientes Sección Bacteriología del Laboratorio Clínico Asesoría Jurídica Of. Calidad y Seguridad del paciente. MODIFICACIONES Párrafo que se modifica Página Fecha Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 30 of 46

31 ANEXOS Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 31 of 46

32 ANEXO 1 Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 32 of 46

33 Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 33 of 46

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44 Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 44 of 46

45 ANEXO 2 TOMA DE MUESTRA PARA INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA (ID) PARA CHLAMYDIA SECRECION CERVIX MATERIALES: Guantes de procedimiento Espéculo estéril Sabanilla desechable Mascarilla Pinzas basseman Receptáculos para desechos Fuente de luz artificial Jeringas Gasa estéril Kit toma de muestra para Chlamydias DESARROLLO: El responsable de la toma de muestra es la matrona. Dado que C. trachomatis infecta específicamente a la células columnares y la infección es intracelular, las muestras deben ser obtenidas raspando el sitio apropiado para obtener tantas células como sea posible, luego de haber retirado cuidadosamente las secreciones mucupurulentas que cubren la mucosa. Explicar lo que se le va hacer al paciente Lavarse las manos Colocarse guantes de procedimiento Utilizar espéculo sin lubricante. Ubique el cervix. Limpie la mucosidad presente en el ectocérvix y orificio cervical con gasa estéril. Introducir una tórula de algodón o alginato en el canal endocervical, la distancia suficiente como para que no se observe la punta de algodón. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 45 of 46

46 Rotar la tórula por unos segundos y luego retirar cuidando de no contaminar con secreción vaginal. Una vez tomada la muestra hacer rodar la tórula, aplicando una ligera presión, dentro del área del pocillo de 6 mm presente en el portaobjeto que viene en el kit de toma de muestra. Dejar secar la muestra al aire a temperatura ambiente (15 30 C) y luego fijar con acetona fresca durante 10 minutos. Secar al aire. Rotular el contenedor del porta-objeto con nombre completo, servicio y tipo de muestra y enviar de inmediato al Laboratorio junto a su orden correspondiente SECRECION URETRAL MATERIALES: Guantes de procedimiento Kit toma de muestra para Chlamydia DESARROLLO: Explicar lo que se le va hacer al paciente Lavarse las manos Colocarse guantes de procedimiento Introducir una tórula de arginato en la uretra unos dos centímetros. Al retirar la tórula, girarla en ambos sentidos. Una vez tomada la muestra hacer rodar la tórula, aplicando una ligera presión, dentro del área del pocillo de 6 mm presente en el portaobjeto que viene en el kit de toma de muestra. Dejar secar la muestra al aire a temperatura ambiente (15 30 C) y luego fijar con acetona fresca durante 10 minutos. Secar al aire. Rotular el contenedor del porta-objeto con nombre completo, servicio y tipo de muestra y enviar de inmediato al Laboratorio junto a su orden correspondiente Retirarse los guantes Lavarse las manos una vez finalizada la toma de muestra. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. Pág. 46 of 46

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