Dra. Verónica Ramos GRANADA

Transcripción

1 People Marie Curie Actions International Incomming Fellowship Dra. Verónica Ramos Banco Andaluz de Células Madre GRANADA

2 Marie Curie International Incomming Fellowship McMaster University CANADA Banco Andaluz de Células Madre GRANADA ESPAÑA

3 Marie Curie International Incomming Fellowship Objetivo: Atraer a investigadores excelentes de terceros países para que desarrollen su actividad investigadora en Europa (EU27) durante 1 o 2 años. Requisitos del investigador: - Estar en posesión del título de Doctor o tener experiencia mínima de 4 años(a tiempo completo) contabilizables a partir de la obtención del título que les habilita para incorporarse al programa de doctorado. -Tener nacionalidad de un tercer país. - No haber residido o desarrollado su actividad investigadora durante más de 3 años, en los 4 años anteriores al año de solicitud de la beca, en un país Miembro de la UE o País Asociado. - No haber residido durante más de 12 meses durante los últimos tres años previos a la solicitud en el país de destino.

4 Generation of hematopoietic repopulating cells fromm human embryonic cell lines by overexpressing HOXA9 alone or in co-culture with cord blood derived d mesenchymal stem cells 2007 Candidato: Verónica Ramos Mejía Investigador Principal: Pablo Menéndez Host Institution: BACM

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6 Leukaemogenesis Developmental Impact of MLL-AF4 Fusion Gene Linked to Infant Acute Lymphoblastic Leukaemia on Human Stem Cell Fate 2008

7 Leucemias Infantiles The Two-Hit Model : Prof. Mel.Greaves A B FASE DE PRE-LEUCEMIA FASE DE LEUCEMIA Nacimiento 3-5 años A: Primer evento oncogénico iniciador. Origen prenatal LLA Pre B: TEL-AML1 ; t(12;21) LLA Pro B: MLL-AF4 ; t(4;11) LMA: AML1-ETO ; t(8:21) B: Segundo evento oncogénico y desencadenante. Origen postnatal

8 Las células madre embrionarias como nuevos modelos de estudio en patologías humanas Células madre y progenitoras ONTOGENIA Embrionarias: Derivadas de la Masa Celulas Interna del Blastocisto (hasta dia 14) Fetales: Obtenidas a lo largo del periodo de gestacion (despues del dia 14-16) Neonatales: Obtenidas de la sangre del cordon umbilical Adultas: Obtenidas de diferentes tejidos adultos: Medula Osea Cerebro Piel Glandula mamaria Colon Grasa JERARQUIA C. Madre: capaz de proliferar simetricamente y diferenciarse en multiples tejidos C. Progenitora: capaz de proliferar asimetricamente y diferenciacion reducida C. Diferenciada: Celula madura y funcional.

9 Las células madre embrionarias como nuevos modelos de estudio en patologías humanas Células madre embrionarias humanas extraer MCI Células de soporte blastocisto Establecimiento de lineas celulares

10 Las células madre embrionarias como nuevos modelos de estudio en patologías humanas Células madre embrionarias humanas

11 Las células madre embrionarias como nuevos modelos de estudio en patologías humanas Células madre embrionarias humanas APLICACIONES POTENCIALES Medicina Regenerativa Biología del Desarrollo Biología de enfermedades humanas Testar fármacos y estudios de toxicidad

12 Las CMHE como modelo del Las células madre embrionarias como nuevos modelos de estudio en patologías humanas desarrollo embriorario humano Ovulo Embrión MCI espermatozoide Morula Blastocisto CMEH Ectodermo Endodermo Mesodermo Cuerpos embrionarios teratomas

13 Las CMEH como modelo del Las células madre embrionarias como nuevos modelos de estudio en patologías humanas desarrollo embriorario humano Células madre indiferenciadas (pluripotentes) Diferenciación Precursores específicos de línea Células maduras diferenciadas Estudios de expresión génica Identificación de factores de transcripción Estudios de ganancia/pérdida de función para validar la funcion de los genes importantes en la diferenciacióni ió Menendez y cols. Cytotherapy 2006; Stem Cell Reviews 2006

14 Las CMEH como modelo para el estudio Las células madre embrionarias como nuevos modelos de estudio en patologías humanas de enfermedades humanas Tratamiento químico Manipulación genética Fertilización in vitro Morula CMEH con genotipo característico de una enfermedad genética

15 Las CMEH como modelo para el estudio Las células madre embrionarias como nuevos modelos de estudio en patologías humanas de enfermedades humanas Tratamiento quimico Manipulación genética Que es lo que pasa? CMEH con genotipo característico de una enfermedad genética Se puede arreglar? Puede ser tratado con algún farmaco? CMEH derivada de un de una enfermedad genética

16 Diferenciación hematopoiética de las CMEH CD45 neg PFV 10 4 R1 R2 4.1% Undifferentiated hesc Embryoid Bodies PECAM-1 + Flk1 + VE-Cad CD45 neg PFV CD45 APC 10 4 CFU CFU-G CFU-M BFU-E CD34 FITC HEMATOPOIESIS CD45 + CD34 + CFU capacity ENDOTHELIUM PECAM-1 + Flk1 + VE-Cad + enos + vwf + LDL Uptake Network Structure DEFINITIVE HEMATOPOIESIS In vivo hematopoietic reconstitution

17 Las CMHE como modelo para el estudio de leucemias infantiles MLL-AF4 CMEH Transgénicas Diferenciación de cuerpos embrionarios Precursores Hemogénicos Progenitor Hematopoiético Células Maduras Analizar el efecto del gen de fusion en la diferenciacion hematopoietica de células embrionarias Cual es el segundo evento oncogénico, desencadenante de la leucemia?

18 CMEH transgénicas MLLAF4 Phase-constrast morphology of MLLAF4-transgenic hescs MLL-AF4 mrna Expresion MLL-AF4 protein Expresion

19 CMEH transgénicas MLLAF SSC (X1000) % of cells CD45 neg PFV AAD D4 D7 D11 D15 D22 CD45 + Cells CD45 neg PFV CD45 + CD34 + Cells % of cells CD34 4-FITC CD45 + Cells D4 D7 D11 D15 D22 CD45 + CD34 + Cells CD45-APC % of cells D4 D7 D11 D15 D22

20 Las células pluripotentes inducidas como modelo para el estudio de leucemias infantiles

21 Las células pluripotentes inducidas como modelo para el estudio de leucemias infantiles Induced Pluripotent stem cells (ips cells) Zaehres and Scholar, Cell 2007 Zaehres and Scholar, Cell 2007

22 Las células pluripotentes inducidas como modelo para el estudio de leucemias infantiles Oct4 Sox2 Klf4 Myc Diferenciación hematopoietica CD34+ Oct4 Sox2 Lin28 Nanog ips cell

23 Las células pluripotentes inducidas como modelo para el estudio de leucemias infantiles Oct4 Sox2 Klf4 Myc Diferenciación hematopoietica CD34+ Oct4 Sox2 Lin28 Nanog ips cell Analizar el efecto en la diferenciacion hematopoietica Diferenciación hematopoietica Blastos MLL-AF4 MLL-AF9 ips cell

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25 19 diciembre 2008 Ethical review

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27 People Marie Curie Actions International Incomming Fellowship 1 septiembre 2009 BACM, Granada

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