Aptitud en Microbiología de Alimentos

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1 Aptitud en Microbiología de Alimentos ControlLab Desde 1977, ControlLab desarrolla servicios dedicados a la calidad técnica de laboratorios en América Latina, con capacidad técnica y ética profesional reconocidas en el mercado. Fundada por Marcio Biasoli, con base en la extensa experiencia de laboratorio y proyectos pilotos de control de calidad, ControlLab mantiene, a lo largo de los años, una gestión transparente y de intenso intercambio con los clientes. Sus servicios están dedicados a todos los laboratorios que se empeñan en la conquista de la calidad, buscando confiabilidad técnica y herramientas eficaces de control. El perfeccionamiento continuo, basado en la calidad y la confiabilidad, proporcionan a ControlLab ser el primer Proveedor de Ensayo de Aptitud del Brasil habilitado por ANVISA/REBLAS Agência Nacional de Vigilância Sanitária en agosto/2001 y a conquistar el sello ISO9001, con el sello BVQI/Inmetro y BVQI/UKAS, en junio/2003. Para conocer mejor a ControlLab acceda a: El programa El programa de microbiología de alimentos está desarrollado y ejecutado por Controllab, con el patrocinio de MAPA, ANVISA, IPT, FINEP y SPCOC, en el ámbito del proyecto, convenio llamada pública MCT FINEP Ação transversal TIB 06/ , sin costo para los participantes invitados. Está compuesto por cuatro envíos, con fecha para marzo, junio, septiembre y diciembre del 2007, con materiales para identificación y conteo de 5 microorganismos específicos, en el método adoptado para la rutina de su laboratorio y en el método cromogénico. Las muestras pueden ser carne cruda, ahumada, presunto, chorizo, leche, queso, pollo y/o agua. Los microrganismos pesquisados son: Enterobacter sakazakii, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa y Salmonella sp. En cada corrida son enviados los materiales para análisis con instrucciones detalladas de uso y plazo de ejecución de los ensayos. El laboratorio debe realizar las determinaciones, de la misma manera que se realiza en las determinaciones de rutina y reportar sus resultados utilizando el Sistema online utilizando el sitio en el plazo determinado. Al recibir los resultados ControlLab procederá al análisis y liberará una evaluación formal en Internet. Un avisará a los participantes que la evaluación ya está disponible para consultarse online. Sus datos individuales y sus evaluaciones son mantenidas en sigilo por el equipo ControlLab. Solamente tiene acceso el participante, que es el responsable de su divulgación. Seguridad y manipulación de las muestras de ensayo» Los ítens de ensayo deben ser considerados potencialmente infectantes y patógenos, capaces de trasmitir enfermedades. CheckList En el sistema online, en "Material da Rodada", están disponibles formularios para la trascripción de resultados durante la ejecución de los ensayos, denominados de checklist. Cada módulo posee su checklist, en el cual aparecen los ensayos a realizarse en cada material, la unidad y el formato de los resultados (n de casillas decimales). Estos datos también constan en el formulario de repuesta. Agua para pesquisa de Escherichia coli» Item de Ensayo: La muestra liofilizada para análisis de agua.» Procedimiento de uso: El material debe ser procesado y ensayado de acuerdo a la rutina del laboratorio, siguiendo las normas de Bioseguridad. (1)Retirar el sello de aluminio y promover la desinfección con alcohol a 70% en la tapa de goma y los bordes del frasco; (2) Para la reconstitución, remover la tapa de goma y adicionar 25 ml de solución salina peptonada o agua peptonada estéril; (3) Dejar en reposo por 30 minutos; (4) Homogeneizar por 10 minutos o hasta la disolución completa; (5) Realizar el ensayo de acuerdo a la rutina y la dilución, solicitada en el documento datos de envío ; (6) Realizar el ensayo en el medio Cromogénico que fue enviado.» Reporte del resultado: Reportar los resultados cualitativos y cuantitativos, cuando sea aplicable por el método tradicional y por el cromogénico. março

2 Agua para la pesquisa de Pseudomonas aeruginosa» Item de Ensayo: La muestra liofilizada para análisis de agua.» Procedimiento de uso: El material debe ser procesado y ensayado de acuerdo a la rutina del laboratorio, siguiendo las normas de Bioseguridad. (1) Retirar el sello de aluminio y promover la desinfección con alcohol a 70% en la tapa de goma y los bordes del frasco; (2) Para la reconstitución, remover la tapa de goma y adicionar 25 ml de solución salina peptonada o agua peptonada estéril; (3) Dejar en reposo por 30 minutos; (4) Homogeneizar por 10 minutos o hasta la disolución completa; (5) Realizar el ensayo de acuerdo a la rutina y la dilución, solicitada en el documento datos de envío ; (6) Realizar el ensayo en el medio Cromogénico que fue enviado.» Reporte del resultado: Reportar los resultados cualitativos y cuantitativos, cuando sea aplicable por el método tradicional y por el cromogénico. Pollo para pesquisa de Salmonella sp» Item de Ensayo: Muestra de pollo liofilizada.» Procedimiento de uso: El material debe ser procesado y ensayado de acuerdo a la rutina del laboratorio, siguiendo las normas de Bioseguridad.(1) Retirar el sello de aluminio y promover la desinfección con alcohol al 70% en la tapa de goma y los bordes del frasco; (2) Para la reconstitución, remover la tapa de goma y adicionar 25 ml de solución salina peptonada o agua peptonada estéril; (3) Dejar en reposo por 30 minutos; (4) Homogeneizar por 10 minutos o hasta la disolución completa; (5) Realizar el ensayo de acuerdo a la rutina y la dilución, solicitada en el documento datos de envío ; (6) Realizar el ensayo en el medio Cromogénico que fue enviado.» Reporte del resultado: Reportar los resultados cualitativos por el método tradicional o por el cromogénico. Leche para la pesquisa de Enterobacter sakazakii» Item de Ensayo: Muestra de leche liofilizada.» Procedimiento de uso: El material debe ser procesado y ensayado de acuerdo a la rutina del laboratorio, siguiendo las normas de Bioseguridad. (1) Retirar el sello de aluminio y promover la desinfección con alcohol al 70% en la tapa de goma y los bordes del frasco; (2) Para la reconstitución, remover la tapa de goma y adicionar 25 ml de solución salina peptonada o agua peptonada estéril; (3) Dejar en reposo por 30 minutos; (4) Homogeneizar por 10 minutos o hasta la disolución completa; (5) Realizar el ensayo de acuerdo a la rutina y la dilución, solicitada en el documento datos de envío ; (6) Realizar el ensayo en el medio Cromogénico que fue enviado.» Reporte del resultado: Reportar los resultados cualitativos por el método tradicional o por el cromogénico. Queso para pesquisa de Lisrteria monocytógenes» Item de Ensayo: Muestra de queso liofilizada.» Procedimiento de uso: El material debe ser procesado y ensayado de acuerdo a la rutina del laboratorio, siguiendo las normas de Bioseguridad. (1) Retirar el sello de aluminio y promover la desinfección con alcohol al 70% en la tapa de goma y los bordes del frasco; (2) Para la reconstitución, remover la tapa de goma y adicionar 25 ml de solución salina peptonada o agua peptonada estéril; (3) Dejar en reposo por 30 minutos; (4) Homogeneizar por 10 minutos o hasta la disolución completa; (5) Realizar el ensayo de acuerdo a la rutina y la dilución, solicitada en el documento datos de envío ; (6) Realizar el ensayo en el medio Cromogénico que fue enviado.» Reporte del resultado: Reportar los resultados cualitativos por el método tradicional o por el cromogénico. Diluición Diluir 10-1 = 25mL de la muestra y adicionar 225ml de solución salina peptonada o agua peptonada, realizar las próximas diluciones a partir de ésta. Diluir 10-2 = 25mL de la muestra de la dilución 10-1 y adicionar 225 ml de solución salina peptonada o agua peptonada. Transcripción de Datos y Resultados El correcto llenado de los formularios y la veracidad de los datos, así como su envío, son de total responsabilidad del participante. Se debe tener atención al seleccionar el método y llenar los resultados.» Nuevas opciones del método: Siempre que una opción no exista, es necesario utilizar la opción outro, não listado, especificar por escrito el método, para que sea generada esta opción.» Memoria /Default: La primera vez que el ensayo es realizado, los espacios relativos al aparecen en blanco y el participante debe registrarlo. A partir del envío siguiente, el metodo ya registrado es transcripto, siendo necesario que el participante lo mantenga actualizado.» Rectificaciones de resultados y evaluaciones: El participante puede solicitar rectificación de los datos enviados hasta la emisión de la evaluación. Después del cierre de la evaluación, son permitidas rectificaciones solo de errores de dígitos y/o evaluación. março

3 Habilitada ANVISA/REBLAS Provedor Alternativo CAP Certificada ISO 9001 Dados da Rodada Microbiología en Alimentos Rodada: Mar/2007 En este envío usted está recibiendo dos ítems de ensayo diferentes para cada uno de los microorganismos Enterobacter sakazakii, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Listeria monocytogenes y Salmonella sp, de acuerdo con el que optó en la ficha de inscripción. Verifique el material lo más rápido posible, de manera que si existe algún daño o falta, nos contacte de inmediato. Siga las instrucciones descritas debajo y manténgase atento al plazo de retorno de los resultados. Manipulación y almacenaje Los ítems deben ser manipulados y ensayadas de la misma forma que las muestras rutinarias del laboratorio, salvo instrucciones a seguir. El almacenaje debe realizarse de acuerdo con la etiqueta del producto. Envio de los resultados El plazo de retorno de los resultados será el 27/04/2007. Primeramente es preciso acceder al sitio de ControlLab, para recibir su contraseña de acceso al sistema Online, de acuerdo a las instrucciones del instructivo del anexo. Para conteo, utilice los siguientes datos: Enterobacter sakazakii ALES01 Dilución: 10-2, reportar resultado x10 3 ALES02 Dilución: 10-1, reportar resultado x10 2 Escherichia coli ALEC01 Dilución: 10-1 ALEC02 Dilución: 10-1 Pseudomonas aeruginosa ALPA01 Dilución: 10-1 ALPA02 Dilución: 10-5 Para la Listeria monocytogenes y Salmonella sp no será necesario hacer dilución pues será reportado solamente la identificación. En caso de dudas, estamos a su disposición por el atendimento@control-lab.com.br, por el teléfono (21) y el fax (21)

4 CROMOCEN CC Finalidad del Producto: pigmentos, esporulación, identificación bioquímica entre otros. El medio Cromocen CC es recomendado para la detección y conteo de E. coli y coliformes en alimentos, agua, muestras clínicas y farmacéuticas basado en su capacidad enzimática de hidrolizar compuestos cromogénicos y fluorogénicos. Su formulación contiene fuentes de carbono y nitrógeno de acuerdo con los padrones recomendados por la APHA 1 y por la AOAC 2 El producto listo contiene, en 1L de medio: Agar, 13g; mezcla cromogénica y fluorogénica, 1,4g; bases nutritivas, 11g; sodio cloruro, 5g em ph 7,1±0,2. Instrucciones del uso: 2. realizar diluciones seriadas en solución salina 0,85%; 3. inocular 0,1mL de las diluciones en la superficie de las placas y difundir la muestra con ayuda de una alza de Drigalsk ó homogeneizando la placa para que el contenido de la muestra si difunda por la superficie del medio ó por agotamiento del inóculo. 4. aguardar que la muestra si seque totalmente y incubar las placas invertidas en estufa de 35º C por 18 a 24 horas suspensión bacteriana en la concentración equivalente a 0,5 de la escala Mac Farland diluida asta de 10-5 y 10-6 y incubadas a 35º±0,2 por 24 horas. Si el teste es dirigido a las bacterias termotolerantes, incubar las placas a 44,5 ºC por 24 horas. CROMOCEN CC Finalidad del Producto: pigmentos, esporulación, identificación bioquímica entre otros. El medio Cromocen CC es recomendado para la detección y conteo de E. coli y coliformes en alimentos, agua, muestras clínicas y farmacéuticas basado en su capacidad enzimática de hidrolizar compuestos cromogénicos y fluorogénicos. Su formulación contiene fuentes de carbono y nitrógeno de acuerdo con los padrones recomendados por la APHA 1 y por la AOAC 2 3. American Public Health Association 4. Association of Official Analytical Chemists El producto listo contiene, en 1L de medio: Agar, 13g; mezcla cromogénica y fluorogénica, 1,4g; bases nutritivas, 11g; sodio cloruro, 5g em ph 7,1±0,2. Instrucciones del uso: 5. colectar el material en recipiente estéril y en cantidad suficiente para la realización de los testes; 6. realizar diluciones seriadas en solución salina 0,85%; 7. inocular 0,1mL de las diluciones en la superficie de las placas y difundir la muestra con ayuda de una alza de Drigalsk ó homogeneizando la placa para que el contenido de la muestra si difunda por la superficie del medio ó por agotamiento del inóculo. 8. aguardar que la muestra si seque totalmente y incubar las placas invertidas en estufa de 35º C por 18 a 24 horas 8. materiales contaminados deben ser manipulados apenas por el personal calificado ó bajo su supervisión; 9. material contaminado debe ser manipulado en cabinas de seguridad (flujo laminar). Caso el laboratorio no disponga de un flujo laminar 10. uso de guantes, espejuelos, máscaras 11. higienización correta das mãos após a remoção das luvas ou por contaminação acidental; 12. uso de pipeteadores automáticos 13. uso de solución bactericida para la limpieza local en caso de que haya derramamientos, utilizando alcohol etílico a 70%, cuaternario de 14. esterilizar en autoclave a 121ºC por 30 minutos los materiales contaminados. suspensión bacteriana en la concentración equivalente a 0,5 de la escala Mac Farland diluida asta de 10-5 y 10-6 y incubadas a 35º±0,2 por 24 horas. Si el teste es dirigido a las bacterias termotolerantes, incubar las placas a 44,5 ºC por 24 horas.

5 Interpretación de los resultados: Micro organismo Color y morfología de las colonias Fluorescencia a 365nm E. coli (exceto E. coli O157:H7) Centro verde azulado, bordes blancas + (azul) Bacterias coliformes Centro verde azulado - Otras bacterias Gram negativas incolores - OBS: cepas de E. coli O157:H7 no fluorescen, tienen coloración verde azulada, y son contadas como coliformes totales. El medio Cromocen CC debe ser almacenado en temperaturas de 4 a 18º C, al abrigo de la luz y las recomendaciones aquí hechas, respetadas. Registro MS Nº Farm. Resp: Betina Wolf CRF-SP Interpretación de los resultados: Micro organismo Color y morfología de las colonias Fluorescencia a 365nm E. coli (exceto E. coli O157:H7) Centro verde azulado, bordes blancas + (azul) Bacterias coliformes Centro verde azulado - Otras bacterias Gram negativas incolores - OBS: cepas de E. coli O157:H7 no fluorescen, tienen coloración verde azulada, y son contadas como coliformes totales. El medio Cromocen CC debe ser almacenado en temperaturas de 4 a 18º C, al abrigo de la luz y las recomendaciones aquí hechas, respetadas. Registro MS Nº Farm. Resp: Betina Wolf CRF-SP 26340

6 CROMOCEN Listeria base ALOA Finalidad del Producto pigmentos, esporulación, identificación bioquímica entre otros. El medio Cromocen Listeria base ALOA es recomendado para la detección y conteo de Listeria monocytogenes en agua, alimentos y muestras clínicas, basado en su capacidad enzimática de hidrolizar compuestos cromogénicos, tolerancia a antibióticos. Su formulación contiene fuentes de carbono y nitrógeno de acuerdo con los padrones recomendados por la APHA 1 y por la AOAC 2 El producto listo contiene, en 1L de medio: Agar, 13,5g; peptona de carne,18g; triptona, 6g; extracto de levadura, 10g; piruvato de sodio, 2g; glicose,2g; glicerofosfato de magnesio, 1g; sulfato de magnesio, 0,5g; sodio cloruro, 5g; cloreto de litio, 10g; disódio fosfato hidrógeno anidro, 2,5g; 5-bromo-4-cloro-3-indolil-ß-D-glucopiranosídeo, 0,05g; em ph 7,2±0,2. Instrucciones del Uso: 2. realizar diluciones seriadas en solución salina 0,85%; 3. inocular 0,1mL de las diluciones en la superficie de las placas y difundir la muestra con ayuda de una alza de Drigalsk ó homogeneizando la placa para que el contenido de la muestra si difunda por la superficie del medio ó por agotamiento del inóculo. 4. aguardar que la muestra si seque totalmente y incubar las placas invertidas en estufa de 35º C por 18 a 24 horas suspensión bacteriana en la concentración equivalente a 0,5 de la escala Mac Farland diluida asta de 10-5 y 10-6 y incubadas a 35º±0,2 por horas. CROMOCEN Listeria base ALOA Finalidad del Producto pigmentos, esporulación, identificación bioquímica entre otros. El medio Cromocen Listeria base ALOA es recomendado para la detección y conteo de Listeria monocytogenes en agua, alimentos y muestras clínicas, basado en su capacidad enzimática de hidrolizar compuestos cromogénicos, tolerancia a antibióticos. Su formulación contiene fuentes de carbono y nitrógeno de acuerdo con los padrones recomendados por la APHA 1 y por la AOAC 2 El producto listo contiene, en 1L de medio: Agar, 13,5g; peptona de carne,18g; triptona, 6g; extracto de levadura, 10g; piruvato de sodio, 2g; glicose,2g; glicerofosfato de magnesio, 1g; sulfato de magnesio, 0,5g; sodio cloruro, 5g; cloreto de litio, 10g; disódio fosfato hidrógeno anidro, 2,5g; 5-bromo-4-cloro-3-indolil-ß-D-glucopiranosídeo, 0,05g; em ph 7,2±0,2. Instrucciones del Uso: 2. realizar diluciones seriadas en solución salina 0,85%; 3. inocular 0,1mL de las diluciones en la superficie de las placas y difundir la muestra con ayuda de una alza de Drigalsk ó homogeneizando la placa para que el contenido de la muestra si difunda por la superficie del medio ó por agotamiento del inóculo. 4. aguardar que la muestra si seque totalmente y incubar las placas invertidas en estufa de 35º C por 18 a 24 horas suspensión bacteriana en la concentración equivalente a 0,5 de la escala Mac Farland diluida asta de 10-5 y 10-6 y incubadas a 35º±0,2 por horas.

7 Interpretación de los resultados: Micro organismo Listeria monocytogenes ATCC Listeria innocua ATCC33090 Escherichia coli ATCC Color y morfología de las colonias verde azulado, halo transparente verde azulado inibido El medio Cromocen Listeria base ALOA debe ser almacenado en temperaturas de 2 a 8ºC, al abrigo de la luz y las recomendaciones aquí hechas, respetadas. Mantenidas las recomendaciones, el producto tiene validad de 2 meses. Farm Resp: Betina Wolf CRF-SP Interpretación de los resultados: Micro organismo Listeria monocytogenes ATCC Listeria innocua ATCC33090 Escherichia coli ATCC Color y morfología de las colonias verde azulado, halo transparente verde azulado inibido El medio Cromocen Listeria base ALOA debe ser almacenado en temperaturas de 2 a 8ºC, al abrigo de la luz y las recomendaciones aquí hechas, respetadas. Mantenidas las recomendaciones, el producto tiene validad de 2 meses. Farm Resp: Betina Wolf CRF-SP 26340

8 CROMOCEN m-agn Finalidad del Producto pigmentos, esporulación, identificación bioquímica entre otros. El medio Cromocen m-agn es recomendado para la detección rápida de Pseudomonas aeruginosa y Aeromonas hydrophila en agua por el sistema de filtración por membrana. Esa detección es basada en su capacidad enzimática de hidrolizar compuestos cromogénicos y sus propiedades bioquímicas. Su formulación contiene fuentes de carbono y nitrógeno de acuerdo con los padrones recomendados por la APHA 1 y por la AOAC 2 El producto listo contiene, en 1L de meio: Agar, 15g; mezcla cromogénica, 13,2g; bases nutritivas, 13g; conservantes,10g em ph 7,0±0,2. Instruções de Uso: 2. esterilizar el sistema de filtración antes del uso; 3. con o ayuda de una pinza estéril, colocar la membrana filtrante sobre la base del filtro; 4. realizar la filtración de la muestra en sistemas de filtración por membrana y lavar el filtro con agua estéril 5. colocar la membrana filtrante conteniendo la muestra sobre la superficie seca del medio. 6. incubar las placas sin invertir-las en estufa de 35ºC por 18 a 24 horas suspensión bacteriana en la concentración equivalente a 0,5 de la escala Mac Farland diluida asta de 10-5 y 10-6 y incubadas a 35º±0,2 por 24 horas. Si el teste es dirigido a las bacterias termotolerantes, incubar las placas a 44,5 ºC por 24 horas CROMOCEN m-agn Finalidad del Producto pigmentos, esporulación, identificación bioquímica entre otros. El medio Cromocen m-agn es recomendado para la detección rápida de Pseudomonas aeruginosa y Aeromonas hydrophila en agua por el sistema de filtración por membrana. Esa detección es basada en su capacidad enzimática de hidrolizar compuestos cromogénicos y sus propiedades bioquímicas. Su formulación contiene fuentes de carbono y nitrógeno de acuerdo con los padrones recomendados por la APHA 1 y por la AOAC 2 El producto listo contiene, en 1L de meio: Agar, 15g; mezcla cromogénica, 13,2g; bases nutritivas, 13g; conservantes,10g em ph 7,0±0,2. Instruções de Uso: 2. esterilizar el sistema de filtración antes del uso; 3. con o ayuda de una pinza estéril, colocar la membrana filtrante sobre la base del filtro; 4. realizar la filtración de la muestra en sistemas de filtración por membrana y lavar el filtro con agua estéril 5. colocar la membrana filtrante conteniendo la muestra sobre la superficie seca del medio. 6. incubar las placas sin invertir-las en estufa de 35ºC por 18 a 24 horas suspensión bacteriana en la concentración equivalente a 0,5 de la escala Mac Farland diluida asta de 10-5 y 10-6 y incubadas a 35º±0,2 por 24 horas. Si el teste es dirigido a las bacterias termotolerantes, incubar las placas a 44,5 ºC por 24 horas

9 Interpretación de los resultados: Micro organismo Color y morfología de las colonias Fluorescencia a 365nm Aeromonas sp Verde claro - Pseudomonas aeruginosa Naranja + (verdoso) Salmonella (exceto S. Typhi, S. Typhimurium, S.cholerae-suis) Rojas - E. coli O157:H7 Violeta - Bacterias coliformes violeta - Otras bacterias Gram negativas incolores - El medio Cromocen m-agn debe ser almacenado en temperaturas de 4 a 18º C, al abrigo de la luz y las recomendaciones aquí hechas, respetadas. Farm Resp: Betina Wolf CRF-SP Interpretación de los resultados: Micro organismo Color y morfología de las colonias Fluorescencia a 365nm Aeromonas sp Verde claro - Pseudomonas aeruginosa Naranja + (verdoso) Salmonella (exceto S. Typhi, S. Typhimurium, S.cholerae-suis) Rojas - E. coli O157:H7 Violeta - Bacterias coliformes violeta - Otras bacterias Gram negativas incolores - El medio Cromocen m-agn debe ser almacenado en temperaturas de 4 a 18º C, al abrigo de la luz y las recomendaciones aquí hechas, respetadas. Farm Resp: Betina Wolf CRF-SP 26340

10 CROMOCEN m-cc Finalidad del Producto pigmentos, esporulación, identificación bioquímica entre otros. El medio Cromocen m-cc es recomendado para la detección y conteo de E. coli y coliformes en agua por el sistema de filtración por membrana. La detección es basada en su capacidad de hidrolizar compuestos cromogénicos y fluorogénicos. Su formulación contiene fuentes de carbono e nitrógenio de acuerdo con los patrones recomendados por la APHA 1 y por la AOAC 2 El producto listo contiene, en 1L de medio: Agar, 13g; mezcla cromogénica y fluorogénica, 1,4g; bases nutritivas, 11g; sodio cloruro, 5g em ph 7,1±0,2. Instruções de Uso: 2. esterilizar el sistema de filtración antes del uso; 3. con o ayuda de una pinza estéril, colocar la membrana filtrante sobre la base del filtro; 4. realizar la filtración de la muestra en sistemas de filtración por membrana y lavar el filtro con agua estéril 5. colocar la membrana filtrante conteniendo la muestra sobre la superficie seca del medio. 6. incubar las placas sin invertir-las en estufa de 35ºC por 18 a 24 horas suspensión bacteriana en la concentración equivalente a 0,5 de la escala Mac Farland diluida asta de 10-5 y 10-6 y incubadas a 35º±0,2 por 24 horas. Si el teste es dirigido a las bacterias termotolerantes, incubar las placas a 44,5 ºC por 24 horas. CROMOCEN m-cc Finalidad del Producto pigmentos, esporulación, identificación bioquímica entre otros. El medio Cromocen m-cc es recomendado para la detección y conteo de E. coli y coliformes en agua por el sistema de filtración por membrana. La detección es basada en su capacidad de hidrolizar compuestos cromogénicos y fluorogénicos. Su formulación contiene fuentes de carbono e nitrógenio de acuerdo con los patrones recomendados por la APHA 1 y por la AOAC 2 El producto listo contiene, en 1L de medio: Agar, 13g; mezcla cromogénica y fluorogénica, 1,4g; bases nutritivas, 11g; sodio cloruro, 5g em ph 7,1±0,2. Instruções de Uso: 2. esterilizar el sistema de filtración antes del uso; 3. con o ayuda de una pinza estéril, colocar la membrana filtrante sobre la base del filtro; 4. realizar la filtración de la muestra en sistemas de filtración por membrana y lavar el filtro con agua estéril 5. colocar la membrana filtrante conteniendo la muestra sobre la superficie seca del medio. 6. incubar las placas sin invertir-las en estufa de 35ºC por 18 a 24 horas suspensión bacteriana en la concentración equivalente a 0,5 de la escala Mac Farland diluida asta de 10-5 y 10-6 y incubadas a 35º±0,2 por 24 horas. Si el teste es dirigido a las bacterias termotolerantes, incubar las placas a 44,5 ºC por 24 horas.

11 Interpretación de los resultados: Micro organismo Color y morfología de las colonias Fluorescéncia a 365nm E. coli (exceto E. coli O157:H7) Centro verde azulado, bordes blancos + (azul) Bacterias coliformes Centro verde azulado - Otras bacterias Gram negativas incolores - OBS: cepas de E. coli O157:H7 no fluorescem, tienen coloración verde azulada, y son contadas como coliformes totales. El medio Cromocen CC debe ser almacenado en temperaturas de 4 a 18º C, al abrigo de la luz y las recomendaciones aquí hechas, respetadas. Farm Resp: Betina Wolf CRF-SP Interpretación de los resultados: Micro organismo Color y morfología de las colonias Fluorescéncia a 365nm E. coli (exceto E. coli O157:H7) Centro verde azulado, bordes blancos + (azul) Bacterias coliformes Centro verde azulado - Otras bacterias Gram negativas incolores - OBS: cepas de E. coli O157:H7 no fluorescem, tienen coloración verde azulada, y son contadas como coliformes totales. El medio Cromocen CC debe ser almacenado en temperaturas de 4 a 18º C, al abrigo de la luz y las recomendaciones aquí hechas, respetadas. Farm Resp: Betina Wolf CRF-SP 26340

12 CROMOCEN SC Finalidad del Producto: pigmentos, esporulación, identificación bioquímica entre otros. El medio Cromocen SC es recomendado para la detección y conteo de Salmonella (excepto S. typhi) y coliformes en alimentos, agua, muestras clínicas y farmacéuticas, basado en su capacidad enzimática de hidrolizar compuestos cromogénicos y sus propiedades bioquímicas. Su formulación contiene fuentes de carbono e nitrógeno de acuerdo con los patrones recomendados por la APHA 1 y por la AOAC 2 El producto listo contiene, en 1L de medio: Agar, 15g; mezcla cromogénica, 5,4g; bases nutritivas, 11g; em ph 7,0±0,2. Instrucciones del Uso: 2. realizar diluciones seriadas en solución salina 0,85%; 3. inocular 0,1mL de las diluciones en la superficie de las placas y difundir la muestra con ayuda de una alza de Drigalsk ó homogeneizando la placa para que el contenido de la muestra si difunda por la superficie del medio ó por agotamiento del inóculo. 4. aguardar que la muestra si seque totalmente y incubar las placas invertidas en estufa de 35º C por 18 a 24 horas suspensión bacteriana en la concentración equivalente a 0,5 de la escala Mac Farland diluida asta 10-5 y 10-6 y, incubadas a 35º±0,2 por 24 horas. Si el teste es dirigido a las bacterias termotolerantes, incubar las placas a 44,5 ºC por 24 horas. CROMOCEN SC Finalidad del Producto: pigmentos, esporulación, identificación bioquímica entre otros. El medio Cromocen SC es recomendado para la detección y conteo de Salmonella (excepto S. typhi) y coliformes en alimentos, agua, muestras clínicas y farmacéuticas, basado en su capacidad enzimática de hidrolizar compuestos cromogénicos y sus propiedades bioquímicas. Su formulación contiene fuentes de carbono e nitrógeno de acuerdo con los patrones recomendados por la APHA 1 y por la AOAC 2 3. American Public Health Association 4. Association of Official Analytical Chemists El producto listo contiene, en 1L de medio: Agar, 15g; mezcla cromogénica, 5,4g; bases nutritivas, 11g; em ph 7,0±0,2. Instrucciones del Uso: 5. colectar el material en recipiente estéril y en cantidad suficiente para la realización de los testes; 6. realizar diluciones seriadas en solución salina 0,85%; 7. inocular 0,1mL de las diluciones en la superficie de las placas y difundir la muestra con ayuda de una alza de Drigalsk ó homogeneizando la placa para que el contenido de la muestra si difunda por la superficie del medio ó por agotamiento del inóculo. 8. aguardar que la muestra si seque totalmente y incubar las placas invertidas en estufa de 35º C por 18 a 24 horas 8. materiales contaminados deben ser manipulados apenas por el personal calificado ó bajo su supervisión; 9. material contaminado debe ser manipulado en cabinas de seguridad (flujo laminar). Caso el laboratorio no disponga de un flujo laminar 10. uso de guantes, espejuelos, máscaras 11. higienización correta das mãos após a remoção das luvas ou por contaminação acidental; 12. uso de pipeteadores automáticos 13. uso de solución bactericida para la limpieza local en caso de que haya derramamientos, utilizando alcohol etílico a 70%, cuaternario de 14. esterilizar en autoclave a 121ºC por 30 minutos los materiales contaminados. suspensión bacteriana en la concentración equivalente a 0,5 de la escala Mac Farland diluida asta 10-5 y 10-6 y, incubadas a 35º±0,2 por 24 horas. Si el teste es dirigido a las bacterias termotolerantes, incubar las placas a 44,5 ºC por 24 horas.

13 Interpretación de los resultados: Micro organismo Salmonella (excepto S. typhi, S. typhimurium, S. cholerae-suis) Bacterias coliformes (excepto Klebsiella sp e Citrobacter sp) Klebsiella e Citrobacter Otras bactérias Gram negativas Color y morfología de las colonias Centro rojo, bordes claras Centro verde azulado violeta incolores El medio Cromocen SC debe ser almacenado en temperaturas de 4 a 18ºC, al abrigo de la luz y las recomendaciones aquí hechas, respetadas. Registro MS Nº Farm. Resp: Betina Wolf CRF-SP Interpretación de los resultados: Micro organismo Salmonella (excepto S. typhi, S. typhimurium, S. cholerae-suis) Bacterias coliformes (excepto Klebsiella sp e Citrobacter sp) Klebsiella e Citrobacter Otras bactérias Gram negativas Color y morfología de las colonias Centro rojo, bordes claras Centro verde azulado violeta incolores El medio Cromocen SC debe ser almacenado en temperaturas de 4 a 18ºC, al abrigo de la luz y las recomendaciones aquí hechas, respetadas. Registro MS Nº Farm. Resp: Betina Wolf CRF-SP 26340