NORMATIVA DE LA UNIDAD DE RECURSOS BIOLOGICOS
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- José Ignacio Tebar Vidal
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1 NORMATIVA DE LA UNIDAD DE RECURSOS BIOLOGICOS 1. INTRODUCCIÓN La Unidad de Recursos Biológicos (URB) de CABIMER forma parte de las Unidades Técnicas de Apoyo a la Investigación y su objetivo principal consiste en proporcionar a los investigadores instalaciones y equipamiento necesario para el desarrollo de proyectos de investigación que precisen el uso de animales de experimentación. Dentro de la URB se ubica una Unidad de Transgénesis que pretende facilitar a los investigadores la generación de ratones modificados genéticamente y la rederivación de líneas. Para más información ver cartera de servicios URB La URB consta de dos instalaciones independientes: una limpia (zona de barrera y cuarentena 1) y otra sucia (cuarentena 2). 2. ACCESO DE USUARIOS A LA INSTALACIÓN Podrá ser usuario de la unidad todo el personal investigador y técnico del centro que así lo solicite previa autorización del director de esta instalación. Para ello es imprescindible que los usuarios que pretendan realizar procedimientos en ratones tengan la competencia y acreditación necesaria y por otro lado que los procedimientos estén aprobados por el Comité Ético de Experimentación Animal del centro. Todos los usuarios que entren por primera vez al animalario serán acompañados por personal del animalario, previa cita, que explicará los protocolos de entrada y salida en la instalación, uso de las celdas donde se estabulan los roedores y de los laboratorios de experimentación. Todas estas normas estarán recogidas en procedimientos normalizados de trabajo (PNTs) a disposición de los usuarios. Los usuarios que accedan a la zona limpia podrían acceder posteriormente, el mismo día, a la zona sucia pero nunca al contrario. Los usuarios no podrán entrar en la instalación, si visitan otro animalario, hasta transcurridas como mínimo 24 horas de la visita.
2 3. ACCESO DE ANIMALES En cumplimiento del RD 1201/2005 sólo se aceptarán animales procedentes de centros de cría y/o mantenimiento oficialmente autorizados. La entrada de animales en la instalación la realizará siempre el personal del animalario, según PNTs, una vez que ha sido autorizada por el director del animalario. Es de vital importancia que los animales se encuentren en buen estado de salud, libres de enfermedad. Infecciones producidas por bacterias, hongos virus y parásitos podrían fácilmente contaminar los animales de otros investigadores e incidir muy negativamente en el desarrollo de sus proyectos de investigación. Por ello, el criterio de entrada de animales en el animalario de CABIMER se basará estrictamente en certificados sanitarios favorables según lo descrito en el anexo 1, y en otros controles que el veterinario considerara necesarios realizar en el periodo de cuarentena, y que serán costeados por cada investigador. En concreto, previo a la llegada de animales, se exigirán certificados sanitarios que muestren que los ratones están libres de los microorganismos incluidos en el anexo 1. Los certificados sanitarios de los centros de origen serán evaluados, con antelación a la llegada de los animales, por el veterinario asesor en salud y bienestar animal que informará al director de la URB y al investigador principal implicado sobre la aceptación de los animales en nuestras instalaciones. Los resultados de los informes sanitarios son añadidos al Libro de Registro según marca la legislación vigente. Se prevén dos posibles orígenes de animales: a) centros de cría de reconocido prestigio como Jackson, Charles River, Harlan: si presentan un certificado sanitario favorable, según anexo 1, accederán directamente a la zona limpia después del periodo de observación/aclimatación en cuarentena. Los pedidos son realizados por cada grupo de investigación teniendo en cuenta que tras la realización del pedido hay que enviar un a la cuenta Animalario_pedidos indicando proveedor, numero y sexo de animales y fecha de llegada. Sin este previo, el personal de la unidad no se hace responsable de la recepción de los animales. El transporte de animales desde los centros de origen se efectuará en embalajes especiales que preserven el estatus sanitario. El personal de la URB sólo recepcionará animales en días laborables de 8:00 16:00 b) animalarios de centros de investigación públicos o privados, nacionales o internacionales. Si presentan un certificado sanitario favorable, según anexo 1, accederán a cuarentena 1 y posteriormente a la zona de barrera. En casos dudosos el veterinario del centro realizará los controles que estime necesarios antes de permitir el acceso a la zona limpia. El coste de las
3 analíticas correrá a cargo del investigador principal. El personal de la URB sólo recepcionará animales en días laborables de 8:00 16:00 Aquellos ratones con certificado sanitario desfavorable podrán ser alojados en cuarentena sucia (2) para su posterior rederivación siempre que esto conlleve el visto bueno del veterinario y director de la instalación, dando por supuesto que no comprometerán la salud de los usuarios ni el estatus sanitario de otros ratones ya estabulados en esa zona. 4. MANEJO DE ANIMALES El manejo de los animales de laboratorio se realizará evitando el sufrimiento innecesario de los animales, evitando riesgos del manipulador y fomentando la aplicación de la regla de las 3R Reducción, Refinamiento y Reemplazo). La manipulación de los animales de laboratorio se llevará a cabo siempre dentro de las normativas legales vigentes, por personal competente y autorizado legalmente de acuerdo al RD 1201/ INTRODUCCIÓN DE MATERIAL BIOLÓGICO EN EL ANIMALARIO. La introducción de material biológico en la zona de barrera es quizás la principal fuente de contaminación y debe ser comunicada previamente por al director de la URB. El investigador principal será responsable de los posibles perjuicios ocasionados a otros grupos por el incumplimiento de esta norma. Idealmente, se exige al investigador aportar documentación donde se certifique que cualquier línea celular, tejido o fluido de origen animal que se pretenda introducir en el animalario está libre de agente infeccioso. Ver anexo 2. Esto no siempre es compatible con la naturaleza de los experimentos y en CABIMER no hay una decisión firme al respecto lo que implica, sin lugar a dudas, que todos los grupos asumen un riesgo mayor. 6. INTRODUCCIÓN DE EQUIPAMIENTO Y FUNGIBLE. Antes de su introducción en barrera, el equipamiento y fungible se descontamina en SAS biológico mediante peróxido de hidrógeno. Contacta con el personal de la unidad al menos 24 horas antes.
4 Anexo 1- Perfil Sanitario: Los animales de nuestras instalaciones se someten a controles sanitarios siguiendo las recomendaciones de FELASA (Federation of European Laboratory Animal Science Associations): Recomendations for the health monitoring of rodent and rabbit colonies in breeding and experimental units (Laboratory Animals (2002), 36, Los certificados sanitarios de origen indicarán la presencia/ausencia de, al menos, los siguientes microorganismos. Se indicará el método y número de animales testados. Se adjuntará un histórico de los últimos 18 meses y el último informe no debe de superar tres meses de antigüedad. Microorganismo Periodicidad Virus Mouse Hepatitis Virus (MHV) Mouse Rotavirus (EDIM) Murine Norovirus Minute Virus of mice Mouse Parvovirus Pneumonía Virus of mice Sendai Virus Theiler s murine Encephalomyelitis virus Reovirus type 3 Ectromelia Virus Lymphocytic Choriomeningitis Virus Mouse Adenovirus type 1 Mouse Adenovirus type 2 Mouse Cytomegalovirus K virus Polyoma virus Hantaan virus Bacterias, micoplasmas y hongos Citrobacter rodentium Clostridium piliforme (Tyzzer) Corynebacterium kutscheri Mycoplasma spp Pasteurellaceae Pseudomona aeruginosa Salmonella spp Streptococci B-haemolytic (not group D) Streptococcus pneumoniae Helicobacter spp Streptobacillus moniliformis Parásitos Ectoparásitos Endoparásitos Lesiones patológicas observadas Annual Annual
5 Anexo 2 Testing cell lines and tissues for rodents infectious agents Many infectious agents of rodents can be carried in cell lines and tissues which, when implanted into naïve host animals, may serve as a source of infection. To minimize the likelihood of inadvertent infection of specific pathogen free rodents with these agents, and prevent spread of these agents into the animal house, tumors, tissues, cell lines and ascites fluid should be evaluated for contamination prior to experimental use in vivo. Two methods are currently available for testing of biological substances to be implanted in rodents, namely the Mouse Antibody Production (MAP) test or through PCR based testing. The MAP test is a procedure used to test for the presence of murine viruses and bacteria in transplantable samples. In this procedure, disease free mice are inoculated with a sample of the material being tested and housed in isolation for 4 6 weeks. At the end of this time, serum is collected from the mice and assayed for the presence of specific antibodies to a panel of bacteria and viruses of murine origin. PCR based testing is a faster alternative to MAP testing and it has been demonstrated comparable or improved sensitivity of virus detection. Commercial firms such as Charles River Laboratories, offers both services.
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