Mesotelina. Donostia, 4 de Septiembre, 2012 Dra. María Caballero Ruiz Jefe C. Laboratorio Clínico

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1 Mesotelina Donostia, 4 de Septiembre, 2012 Dra. María Caballero Ruiz Jefe C. Laboratorio Clínico

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3 PATOLOGÍA CAUSADA POR ASBESTO Inhalación de fibras de amianto Pleuro-Pulmonar Benignas: Placas pleurales Asbestosis Fibrosis pleural Derrame pleural benigno Malignas: Mesotelioma pleural Mesotelioma de peritoneo Cáncer de pulmón

4 DIAGNÓSTICO Mesotelioma Maligno (MM) Se basa en tres factores: El conocimiento de la exposición La manifestación en el paciente de un cuadro clínico compatible La exclusión de otra enfermedad que lo justifique

5 Diagnóstico del MPM Complejo años

6 DOLOR persistente y progresivo / DISNEA DERRAME pleural Alarma (pacientes riesgo) por historia laboral Crecimiento en el grosor o aspecto festoneado de las placas pleurales Dolor en pacientes con placas asintomáticas previas

7 Diagnostico Diferencial en biopsia pleural MPM E.Pleural Benigna especialmente complejo el Metástasis pleurales adenocarcinoma Iº Histoquímica

8 PLACAS ASBESTÓSICAS SOSPECHOSAS : MESOTELIOMA?

9 LAS MUCHAS CARAS DEL MESOTELIOMA TALCO + QUIMOTERAPIA: >2 años SUPERVIVENCIA AFECTACIÓN PERICÁRDICA: 7 meses SUPERVIVENCIA AFECTACIÓN PERICÁRDICA: 10 meses SUPERVIVENCIA

10 MESOTELIOMA: TRATAMIENTO? CIRUGÍA: -Pleurectomía -Pleuroneumonectomía (resección en bloque) CONSERVADOR: - Pleurodesis - Quimiotrapia TERAPIA MULTIMODAL: Cirugía+Quimio+Radioterapia Otras terapias?

11 Necesidad MULTISECTORIAL

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13 Mejora en Diagnóstico y Ttº Tendencia a la cronicidad

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18 Historia Natural de Cáncer Cáncer sin Ttº es mortal Diagnosticados y tratados oportunamente existe un alto grado de curación: Melanoma, útero, mama, leucemias 33% de los muertes por Cáncer podría evitarse Objetivos en Oncología Diagnóstico temprano Nuevos tratamientos

19 Marcadores Tumorales? Sustancia producida o inducida por la Célula Tumoral cuya detección es de interés para: Diagnóstico Precoz Diagnóstico del Tumor Pronóstico Diagnóstico Precoz de recidiva Valorar Respuesta Ttº

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25 Mesotelioma: Retos Expuestos con P. benigna Expuestos sin patología Mesiotelioma IDEAL TEST

26 Marcadores del mesotelioma Mesotelina Osteopontina Factor potenciador de megacariocitos (MPF) producido por escisión de la proteína precursora Ac hialurónico

27 MESOTELINA: PRECURSOR DE 71 KDA: N-terminal 31 kda (MPF): SUERO C-terminal 40 kda: unido a la membrana celular: mesotelina FUNCIÓN?? Adhesión Reconocimiento Señalización celular Chang K, Pastan I.Molecular cloning of mesothelin, a differentiation antigen present on mesothelium, mesotheliomas, and ovarian cancers. Proc Natl Acad Sci US A1996;93:136^40.).

28 UBICACIÓN Normal. Superficie de células mesoteliales: Pleura Peritoneo Pericardio Túnica vaginalis testicular [ ] Tumores: Mesotelioma, Ovario, páncreas y pulmón (Liping Yu, Mingqian Feng, Heungnam Kim, Yen Phung, David E. Kleiner, Gregory J. Gores, Min Qian, Xin Wei Wang, Mitchell Ho. Mesothelin as a Potential Therapeutic Target in Human Cholangiocarcinoma. J Cancer 2010; 1: Argani P, Iacobuzio-Donahue C, Ryu B, Rosty C, Goggins M, Wilentz RE, Murugesan SR, Leach SD, Jaffee E, Yeo CJ, Cameron JL, Kern SE, Hruban RH: Mesothelin is overexpressed in the vast majority of ductal adenocarcinomas of the pancreas: identification of a new pancreatic cancer marker by serial analysis of gene expression (SAGE). Clin Cancer Res 2001, 7:

29 SMRP HIPÓTESIS:??? ADHESIÓN. Ensamble anormal Incapaz de permanecer unida a la superficie celular. Otras hipótesis. VENTAJA Péptidos solubles los podemos medir en la sangre

30 MESOTELINA AUTORES REFERENTES

31 Robinson Robinson (2003).1ªpublicación.. Secreción aumentada de mesotelina y mesotelioma pleural maligno (MPM) Robinson et al.(2005). Retrospectivo. 84% MPM.. Monitorizar [SMRP]s en la población de riesgo. A mayor concentración de Mesotelina mayor tamaño tumoral y extensión de la enfermedad. Robinson BWS, Creaney J, Lake R, Nowak A, Musk AW, Klerk ND, Winzell P, Hellstrom KE, Hellstrom I. Mesothelin-family proteins and diagnosis of mesothelioma. Lancet 2003;362: ). Robinson BW, Creaney J, Lake R, Nowak A, Musk AW, de Klerk N, Winzell P, Hellstrom KE, Hellstrom I. Soluble mesothelin-related protein--a blood test for mesothelioma. Lung Cancer Jul;49 Suppl 1:S

32 Hassan 2006 Utilidad de la mesotelina Diagnóstica Seguimiento la respuesta al tratamiento Hassan R, Remaley AT, Sampson ML, Zhang J, Cox DD, Pingpank J, et al. Detection and quantitation of serum mesothelin, a tumor marker for patients with mesothelioma and ovarian cancer. Clin Cancer Res 2006 ; 12 :

33 Creany 2008 Estudio comparativo: Mesotelina-MPF-Osteopontina Sensibilidad para detectar mesotelioma : Mesotelina: 73% MPF: 34% Osteopontina: 47% Especificidad del 95% Combinación de todos: no > sensibilidad. Creaney J, Yeoman D, Demelker Y, et al. Comparison of osteopontin, megakaryocyte potentiating factor, and mesothelin proteins as markers in the serum of patients with malignant mesothlelioma. J Thorac Oncol 2008; 3:

34 Grigoriu ACIDO HIALURÓNICO Mesotelina sérica > SENSIBILIDAD Ac. Hialurónico y Mesotelina. No > sensibilidad Grigoriu et al ( Grigoriu B, Chahine B, Zerimech F, Grégoire M, Balduyck M, Copin MC, Devos P, Lassalle P, Scherpereel A. Serum mesothelin has a higher diagnostic utility than hyaluronic acid in malignant mesothelioma. Clin Biochem Jul;42(10-11): Epub 2009 Mar 18.)

35 V. Heuvel Panel: CYFRA 21-1 CEA SMRP ROC: discriminar MM y sujetos sanos Mejoran ligeramente el rendimiento en comparación con los biomarcadores sólos Van den Heuvel, M.M.; Korse, C.M.; Bonfrer, J.M.; Baas, P. Non-invasive diagnosis of pleural malignancies: the role of tumour markers. Lung Cancer 2008, 59,

36 Rodríguez Portal JA 2009 Mesotelina. Más elevada en los mesoteliomas Diferencia significativa no expuestos / expuestos con o sin patología Sensibilidad y Especificidad (72% de ambas) Rodríguez Portal JA, Rodríguez Becerra E, Rodríguez Rodríguez D, Alfageme Michavila I, Quero Martínez A, Diego Roza C, León Jiménez A, Isidro Montes I, Cebollero Rivas P. Serum levels of soluble mesothelin-related peptides in malignant and nonmalignant asbestos-related pleural disease: relation with past asbestos exposure. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev Feb;18(2):646-50

37 Rodriguez-Portal JA et al Valor Pronóstico: Supervivencia independientemente del tipo histológico SMRP Diferencia de (SMRP) Diagnóstico Mesotelioma Sujetos expuestos sin patología pleural Rodríguez-Portal JA, Asensio Cruz M, Arellano Orden E,Díaz Baquero A, León Jiménez A,Isidro Montes I, Cebollero Rivas P, Diego Roza C, Rodríguez Panadero F, Rodríguez Becerra E. Niveles séricos de mesotelina. Valor pronóstico en mesotelioma pleural maligno. Rev Esp Patol Torac 2010; 22 (4):

38 Food and Drug Administration (FDA) Enero del 2007 en Estados Unidos MesomarkTM de Fujirebio Diagnostics (Malvern, USA) Marcador de seguimiento en los pacientes que presentan mesotelioma

39 Proyecto 2011 No expuestos: Control: 71 muestras de sujetos no expuestos < 40 años: Cohorte poblacional Riesgo Exposición Amianto Residentes CCAA Valores de Referencia Expuestos: La población expuesta fue reclutada a través de Servicios Médicos de empresas colaboradoras en las que se manipuló amianto. Se reclutaron 99 trabajadores expuestos y sin MPM.

40 Cómo se mide la Mesotelina? ELISA: Inmunoanálisis Mesomark, de Fujirebio Diagnostic Inc. (FDI), Dilución 1:101 Cuantificación de mesotelina soluble (SMRP): Suero / Orina/ L. Pleural Anticuerpos monoclonales distintos (4H3 y OV569): uno para capturar SMRP / otro para su detección

41 RESULTADOS Mesotelina (nmol/l) Exposición N Media DS IC 95% Significación No Sí P<0.05 Tabla 1: Resultados de la concentración de mesotelina en nuestra muestra control y expuestos t de Student-Fisher : Niveles de Mesotelina superiores en sujetos que han estado expuestos al amianto.

42 RESULTADOS Mesotelina (nm/l) Exposición N Media DS IC 95% Significación No < 12 meses P<0.01 >= 12 meses Tabla 2: Resultados de la concentración de mesotelina en nuestra muestra control / expuestos por debajo 12 meses y por encima de 12 meses Test LEVENE

43 RESULTADOS 1,10 1,05 Media de Mesotelina 1,00 0,95 0,90 0,85 0,80 No expuestos < 12 meses Grupos > 12 meses Los niveles de mesotelina se incrementan en relación con el tiempo de exposición.

44 Concentración/Tiempo Exposición Tiempo exposición (meses) 2,40 2,10 1,80 1,50 1,20 0,90 0,60 Media Mesotelina 1,167 1,467 2,50 1,50 0,92 0,90 1,10 1,133 1,167 0,70 0,90 0,778 1,20 0,90 1,20 0,75 0,657 0,777 0,75

45 CONCLUSIONES 1.- Monitorización del tratamiento 2.- Indicador pronóstico 3.-Confirmación de la sospecha diagnóstica ante la sospecha clínica 4.-Seguimiento población expuesta? 5.- Potencial utilización en futuros tratamientos 6.- Es necesario seguir estudiando

46 LIMITACIONES Mesotelina Estudios de carácter retrospectivos Factores de confusión: Filtrado glomerular Edad del sujeto Índice de masa corporal Variación biológica Homogeneidad de la exposición

47 Población Expuesta: VIGILANCIA

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49 Metaanálisis Revisión Sistemática de artículos científicos siguiendo un método explícito para resumir/evaluar la información sobre un determinado tema.

50 Metaanálisis Punto de partida: Preguntas estructuradas y protocolo definido previamente.

51 Búsqueda de la evidencia se realiza de manera sistemática con una declaración de los criterios de selección: ingles, casos, controls (X tipos), Mesomark. Evaluación crítica de los artículos primarios calidad metodológica de los estudios.

52 Arbritariamente : Cutt-off 2 nm/l Resultados individuales aportados por cada autor Heterogeneidad de los resultados: Calidad metodológica OK Diferencias entre el numero de participantes Edad, tipo de control, estadío, histología. Metodología

53 ROC Habilidad/capacidad de una prueba para distinguir entre dos estados de salud Existen diferencias estadísticas Caso/Control: Estadío / Carga Tumoral, Epitelioide Joven (control)

54 DIAGNÓSTICO TEMPRANO No expuestos Stadio I y II, epitelioide Sintomáticos /alto riesgo

55 AUC Sobrediagnóstico: FP 1.- TEST POS especificidad: 95% FN Cutt-off S= 32% 2.- TEST NEG sensibilidad: 95% FP Exclusión diagnóstico Cutt-off E= 22%

56 Screening 1º test Sensible (laxo) FP 2ª Test especifico FN Prevalencia Baja::: TEST ESPECIFICOS

57 ENFOQUES 1.- Monitorización 2.-Edad, filtrado glomerular, masa coprpral, 3.- Gold :mesomark: mejorar 4.-Añadir biomarcadores: CYFRA; CEA, 8 OH dg, FPEV

58 Valores de referencia : CUESTIONES Diferencias entre los grupos Teorías de V.R. del cambio (autocontrol) Variación biológica: inter / intraindividual Estabilidad de la proteína Categorización de los trabajadores expuestos de forma homogénea: Tipo de tarea Tipo de Fibra Duración / Intensidad de la exposición

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60 Nuevos Marcadores

61 Biomarcador 8OHdG Marcador de iniciación de daño oxidativo del ADN Factor de promoción de la carcinogénesis Marcador de exposición no de diagnóstico

62 Procesos epigenéticos Metilación del ADN: adición de un grupo metilo a la citosina relacionada con la silenciación de genes. micro RNA (no codificantes) relacionados con la regulación de la expresión génica alteración de los mirna puede inducir fenotipos cancerosos. niveles más bajos de mirnas: MM/Sanos (e) Expuestos / sanos mirnas podría ser un marcador diagnóstico precoz exposición al amianto

63 FUTURAS TERAPIAS Ensayos Ac monoclonales : Diana específica en el tratamiento del cáncer.

64 Nano-Medicine and Cancer (Cont.) NANOSHELLS (dielectric core (silica) surrounded by thin metal shell (gold): - Properties similar to Quantum dots, but the heavy metal associate toxicity - Larger than ( nm) Qdots, which means less cellular internalization - PEG coating improves their bio-availability - Good for in vivo and in vitro imaging - Useful for phototermsdfdjsfjhjksdfhsf

65 Nano-Medicine and Cancer - LIPID-BASED VEHICLES (liposomes, micelles, polymersomes: - Unspecific (and fast) uptake by the reticuloendothelial system (RES). Can be improved by poly(ethilene glycol) (PEG) coating. - Can contain air bubles (to enhance contrast b y ultrasound) or drugs, that can be delivered upon ultrasound frequency stimulation. QUANTUM DOTS (inorganic elemental core (Cd, Hg) + metal shell): - Fluorescence with wide spectrum, including NIR ( nm) - Resistant to photobleaching (unlike organic nanoparticles) - TOXICITY concerns, associated to heavy metals.

66 LABORATORIO CONOCIMIENTO SEGURA CERTERA INNOVADORA Diagnóstico Seguimiento Tratamiento CLÍNICOS

67 Gracias por su atención

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