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1 REF G - es /07 VIDAS HIV DUO Ultra (HIV5) VIDAS HIV DUO Ultra es una prueba de cribado de la infección por VIH automatizado en los sistemas de la familia VIDAS, que permite la detección combinada de inmunoglobulinas totales anti-vih-1 (grupo M y O) y anti-vih-2 y del antígeno p24 de VIH-1, en suero o plasma humano (heparina de litio o EDTA) por técnica ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay). INTRODUCCION Y OBJETO DE LA PRUEBA Los virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) son retrovirus ARN transmitidos principalmente por vías sexual, parenteral, perinatal y transplacentaria. Después del aislamiento del VIH-1 en 1983 y del VIH-2 en 1985, en pacientes afectados de SIDA (síndrome de inmunodeficiencia adquirida), han sido caracterizadas numerosas variantes genéticas. Estas mutaciones parecían no tener consecuencias en el diagnóstico serológico hasta el aislamiento de las variantes VIH-1 del grupo O (Outlier) que no presentan más del 50 de homología a nivel del gen env con los grupos M (Majeur). (1, 2, 3, 4, 5). Durante 2007, 2.5 millones de personas fueron infectadas por VIH. Según estimaciones, 33.2 millones [ millones] viven con VIH en 2007 (6). El diagnóstico de una infección por VIH se basa en la práctica corriente en la detección de anticuerpos séricos anti-vih por técnica ELISA. Sin embargo, existe un periodo de 3 semanas de media entre la contaminación y la aparición de los primeros anticuerpos (7). Los estudios han demostrado que durante este periodo, el antígeno p24 del VIH-1 estaba presente en la mayoría de los pacientes infectados por el VIH-1(8). La detección combinada de la antigenemia p24 y de los anticuerpos anti-vih-1 y anti-vih-2 permite reducir el plazo existente entre la contaminación y el diagnóstico de la infección (9, 10). VIDAS HIV DUO Ultra es una prueba automatizada basada en la detección combinada del antígeno p24 de VIH-1 y de las inmunoglobulinas totales anti-vih-1 y anti- VIH-2 lo cual permite reducir el periodo de ventana serológica. Nota : La utilización de VIDAS HIV DUO Ultra no excluye la obligación de realizar una segunda técnica en los países donde la legislación impone que se realicen dos pruebas diferentes. PRINCIPIO El principio de determinación asocia dos reacciones inmunoenzimáticas con una detección final por fluorescencia (ELFA). El cono (SPR ) de un solo uso sirve a la vez de fase sólida y de sistema de pipeteo. El resto de los reactivos están listos al empleo y previamente distribuidos en el cartucho. Todas las etapas de la prueba se realizan automáticamente por el sistema. Están constituidas por una sucesión de ciclos de aspiración/expulsión del medio de reacción. La parte superior del cono permite la detección del Ag p24, gracias a una sensibilización por anticuerpos monoclonales anti-p24. La parte inferior del cono permite la detección de los anticuerpos anti-vih-1 y anti-vih-2 : está sensibilizada por una proteína gp160 de VIH-1 y por péptidos de síntesis específicos del VIH-1 grupo O y del VIH-2. Durante una primera incubación, la muestra, los anticuerpos de conejo anti-p24 biotinilados presentes en el cartucho son aspirados y expulsado del cono. Durante esta incubación, el virus es lisado y los antígenos p24 liberados se unen con los anticuerpos monoclonales antip24 fijados en el cono y son reconocidos por los anticuerpos anti-p24 biotinilados. Al mismo tiempo, los anticuerpos anti-vih-1 y/o anti-vih-2 se unen a la gp160 y/o a los péptidos presentes en la parte inferior del cono. Las etapas de lavado eliminan los compuestos no unidos. Una segunda incubación con los antígenos biotinalados presentes en el cartucho (los mismos a los utilizados para la sensibilización) se realizada solo en la parte inferior del cono. Estos antígenos biotinilados se unen a los anticuerpos anti-vih eventualmente presentes en la parte inferior del cono. El reactivo en exceso se elimina por las etapas de lavado. Una tercera incubación se efectúa con la estreptavidina marcada con la fosfatasa alcalina. En esta etapa, la estreptavidina se fija a los anticuerpos anti-p24 biotinilados si están presentes en la parte superior del cono y a los antígenos biotinilados si están presentes en la parte inferior del cono. El reactivo en exceso es eliminado por las etapas de lavado. El substrato (4-Metil-umbeliferil fosfato) es en un primer momento incubado en la parte inferior del cono y se hace una primera medida de la fluorescencia a 450 nm. La intensidad de la fluorescencia es proporcional a la presencia de anticuerpos anti-vih. A continuación, el substrato se incuba en la totalidad del cono y se efectúa una segunda medida de fluorescencia. El instrumento calcula la intensidad de la fluorescencia ligada a la parte superior del cono. Esta intensidad es proporcional a la concentración de antígeno p24 del VIH- 1 presente en la muestra. Al finalizar la prueba, los resultados se calculan automáticamente por el sistema respecto a los estándares, después se imprimen. biomérieux SA Español - 1

2 COMPOSICION Y RECONSTITUCION DE LOS REACTIVOS DEL EQUIPO (60 DETERMINACIONES) : 60 cartuchos HIV5 STR Listos al empleo. 60 conos HIV5 2 x 30 Control positivo de anticuerpos HIV5 Control negativo HIV5 1 x 1,3 ml (líquido) Control positivo de antígeno HIV5 Estándar anticuerpos HIV5 Estándar antígeno p24 HIV5 SPR C1 C2 C3 S1 S2 Listos al empleo. Conos sensibilizados (proteína gp160 (VIH-1), péptidos de síntesis específicos del VIH-1 grupo O y del VIH-2, y anticuerpo monoclonal anti-p24). Suero humano* con anticuerpos anti-vih-1 + TRIS (0,1 mol/l, ph 7,4) + estabilizantes proteicos y químicos + conservantes. El intervalo de confianza de la respuesta de anticuerpos está indicado en la tarjeta MLE con la indicación : Control C1 (+) Test Value Range. Listo al empleo. Suero humano**+ TRIS (0,1 mol/l, ph 7,4) + estabilizantes proteicos y químicos + conservantes. Suero humano** con lisado viral VIH-1 inactivado + TRIS (0,1 mol/l, ph 7,4) + estabilizantes proteicos y químicos + conservantes. El intervalo de confianza de la respuesta antigénica está indicado en la tarjeta MLE con la indicación : Control C3 (+) Test Value Range. Suero humano* con anticuerpos anti-vih-1 + TRIS (0,1 mol/l, ph 7,4) + estabilizantes proteicos y químicos + conservantes. El intervalo de confianza en "Valor de Fluorescencia Relativa" se indica en la tarjeta MLE con la indicación : "Standard (S1) RFV Range". Suero humano** + TRIS (0,1 mol/l, ph 7,4) + estabilizantes proteicos y químicos + lisado viral VIH-1 inactivado + conservantes. El intervalo de confianza en "Valor de Fluorescencia Relativa" está indicado en la tarjeta MLE con la indicación : "Standard (S2) RFV Range". 1 Tarjeta MLE ( Master Lot Entry) Especificaciones de los datos de fabricación necesarios para la calibración de la prueba: leer los datos MLE, consultar el Manual de Usuario. Barrita de cierre 1 Ficha técnica * Se ha verificado la ausencia del antígeno HBs y anticuerpos anti-vhc. Este producto ha sido inactivado por calor (30 minutos a 56 C). Sin embargo, ningún método puede aportar una garantía absoluta, este producto debe ser manipulado con las precauciones de uso relacionadas con los productos potencialmente infecciosos. ** Se ha verificado la ausencia de antígeno HBs, anticuerpos anti-vih1, anti-vih2 y anticuerpos anti-vhc. Sin embargo, ninguna prueba puede aportar una garantía absoluta, este producto debe ser manipulado con las precauciones de uso relativas a los productos potencialmente infecciosos. El cono : El cono sensibilizado durante la fabricación por una proteína gp160 y por péptidos de síntesis específicos del VIH-1 y del VIH-2 en su parte inferior, y con anticuerpos monoclonales anti-p24 en su parte superior. Los antígenos permiten la captura de los anticuerpos anti- VIH1 y/o anti-vih2, los anticuerpos monoclonales permiten la captura del antígeno p24 del VIH-1. Cada cono está identificado por el código HIV5. Utilizar únicamente el número de conos necesarios y dejar correctamente los conos no utilizados en su bolsa. Utilizar obligatoriamente la barrita de cierre suministrada con el equipo. El cartucho : El cartucho está compuesto por 10 pocillos recubiertos con una hoja de aluminio sellada y etiquetada. La etiqueta tiene un código de barras que contiene principalmente el código de la prueba, el número de lote y la fecha de caducidad del equipo. El primer pocillo tiene una parte precortada para facilitar la introducción de la muestra. El último pocillo es una cubeta que permite la lectura por fluorescencia. Los diferentes reactivos de la prueba están contenidos en los pocillos intermedios. biomérieux SA Español - 2

3 Descripción del cartucho VIDAS HIV DUO Ultra : Pocillos Reactivos 1 Pocillo de muestra. 2 Tampón HEPES + anticuerpo (conejo) anti-p24 marcado con biotina + tritón X100 + suero de cabra + estabilizantes proteicos y químicos + sulfato de gentamicina 0,2 g/l + azida sódica 0,9 g/l (300 µl) Tampón de lavado : TRIS + estabilizantes proteicos y químicos + azida sódica 0,9 g/l (600 µl). 4 Tampón HEPES + proteína gp160 y péptidos de síntesis marcados con biotina + leche descremada + estabilizantes proteicos y químicos + sulfato de gentamicina 0,2 g/l + azida sódica 0,9 g/l (300 µl). 7 Trazador : estreptavidina marcada con fosfatasa alcalina + TRIS + leche descremada + albúmina bovina 2,5 g/l + tritón X100 + estabilizantes proteicos y químicos + sulfato de gentamicina 0,2 g/l + azida sódica 0,9 g/l (400 µl). 10 Cubeta de lectura con substrato : 4-Metil-umbeliferil fosfato (0,6 mmol/l) + dietanolamina (DEA*) (0,62 mol/l es decir 6,6 ) ph 9,2 + azida sódica 1 g/l (300 µl). * Reactivo IRRITANTE : - R 36 : irritante para los ojos. - S 26 : en caso de contacto con los ojos, lavar inmediata y abundantemente con agua y consultar con un especialista. Para más información, consultar la ficha de seguridad disponible bajo pedido. MATERIALES Y DESECHABLES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS - Pipeta de punta desechable de 2 ml y 200 µl. - Guantes sin talco de un solo uso. - Para otros materiales y desechables específicos, consultar el Manual de Usuario. - Instrumento de la familia VIDAS PRECAUCIONES DE UTILIZACION Para diagnóstico in vitro únicamente. Para uso profesional únicamente. Este equipo contiene componentes de origen humano. Ningún método de análisis actualmente conocido puede garantizar de forma absoluta que estos productos no contienen ningún agente patógeno transmisible. Se recomienda manipularlo con las precauciones de uso relacionadas con los productos potencialmene infecciosos (consultar el Manual de bioseguridad en el laboratorio OMS - Ginebra - última edición). Este equipo contiene componentes de origen animal. El certificado de origen y/o el estado sanitario de los animales no pueden garantizar de forma absoluta que estos productos no contienen ningún agente patógeno transmisible, se recomienda manipularlos con las precauciones de uso relacionadas con los productos potencialmente infecciosos (no ingerir; no inhalar). No utilizar los conos cuya bolsa esté perforada. No utilizar cartuchos visiblemente alterados (hoja de aluminio o plástico dañados). No utilizar los reactivos después de la fecha de caducidad indicada sobre la etiqueta del envase. No mezclar los reactivos (o consumibles) de lotes diferentes. No utilizar guantes con talco, el talco puede originar falsos resultados con ciertas determinaciones inmunoenzimáticas. Los reactivos del equipo contienen un conservante (azida sódica), susceptible de reaccionar con las tuberías de plomo o cobre y formar azidas metálicas explosivas. Se recomienda enjuagar con agua todo residuo para evitar su acumulación. El substrato (pocillo 10 del cartucho) contiene un agente irritante (dietanolamina 6,6). Tener en cuenta la frase de riesgo R y los consejos de prudencia S citados anteriormente. Las proyecciones deben ser tratadas con un líquido detergente o una solución de lejía con al menos 0,5 de hipoclorito sódico. Consultar el Manual de Utilización para eliminar las proyecciones sobre o en el interior del sistema. No autoclavar productos con lejía. El instrumento debe limpiarse y descontaminarse regularmente (consultar el Manual de Usuario). CONDICIONES DE CONSERVACION Conservar el equipo VIDAS HIV DUO Ultra a 2-8 C. No congelar los reactivos. Dejar a 2-8 C los reactivos no utilizados. Cuando se abra el equipo, verificar la integridad y el correcto cierre de (de las) bolsa(s) de los conos. En caso contrario, no utilizar los conos. Después de cada utilización, cerrar bien la bolsa con su deshidratante para mantener la estabilidad de los conos, utilizando la barrita de cierre suministrada con este objetivo. Colocar la totalidad del equipo a 2-8 C. Todos los componentes son estables hasta la fecha de caducidad indicada sobre la etiqueta del equipo, si se conserva en las condiciones recomendadas. Consultar la tabla de composición del equipo para condiciones particulares de conservación. biomérieux SA Español - 3

4 MUESTRAS Naturaleza y recogida de muestras : Suero o plasma humano (recogidos con heparina de litio o EDTA). La utilización de plasmas recalcificados está prohibida. Se recomienda a cada laboratorio validar el tipo de tubo de recogida de muestra utilizado. Las muestras no deben ser descomplementadas. No se ha observado para esta determinación una influencia significativa de : - la hemólisis (después de sobrecargar las muestras hasta 300 µmol/l de hemoglobina ( monómero)). - después de sobrecargar las muestras con lípidos hasta 30 mg/ml de equivalentes en triglicéridos - bilirrubinemia después de sobrecargar las muestras con bilirrubina hasta 200 mg/l de bilirrubina. Sin embargo, se aconseja no utilizar muestras visiblemente hemolizadas, lipémicas o ictéricas y efectuar si es posible, una nueva extracción. Estabilidad de las muestras Las muestras pueden ser conservadas 2 días en tubos con tapón a 2-8 C como máximo. En su defecto congelar los sueros o plasmas a -25 ± 6 C. Evitar las congelaciones y descongelaciones sucesivas. Un estudio realizado en muestras congeladas durante dos meses, no ha mostrado ninguna influencia en la calidad de los resultados. TECNICA Para instrucciones completas, consultar el Manual de Usuario. Introducción de los datos MLE Cuando se abra un nuevo lote, las especificaciones (o datos de fabricación) deben ser introducidos en el sistema con la ayuda de la tarjeta MLE. Si esta operación no se efectúa antes de comenzar las pruebas, el sistema no podría editar los resultados. Estas especificaciones se introducen solo una vez para cada lote. Es posible introducir los datos MLE manualmente o de forma automática según el instrumento (consultar el Manual de Usuario Para que el sistema pueda verificar los valores de los controles, deben identificarse el control positivo de anticuerpos por C1, el control negativo por C2, el control positivo de antígeno por C3, el estándar de anticuerpos por S1 y el estándar de antígeno p24 por S2. Calibración La calibración, con la ayuda de los estándares S1 y S2 suministrados en el equipo, debe efectuarse con cada nuevo lote que se abra después de introducir las especificaciones del lote, y después cada 14 días. Esta operación permite ajustar la calibración a cada instrumento y a la eventual evolución del reactivo en el tiempo. Los estándares, identificados por S1 y S2, serán analizados en doble (ver Manual de Usuario). El valor del calibrador debe estar comprendido en los límites de RFV ("Relative Fluorescence Value") fijados. Si no es así, la media no será memorizada : repetir una calibración. Realización de la prueba 1. Sacar únicamente los reactivos necesarios, dejarles 30 minutos a temperatura ambiente antes de su utilización. 2. Utilizar un cartucho " HIV5 " y un cono " HIV5 " para cada muestra, control o estándar a analizar. Verificar que la bolsa de conos ha sido correctamente cerrada después de cada utilización. 3. La prueba se identifica con el código " HIV5 " en el sistema. El estándar identificado por "S1" y "S2" obligatoriamente deben ser utilizados en doble. Si deben analizarse los controles positivos, se identificarán por "C1" y "C3". Si debe analizarse el control negativo, se identificará por C2. 4. Si es necesario, clarificar las muestras por centrifugación. 5. Homogeneizar con la ayuda de un agitador tipo vortex, los estándares, los controles y las muestras (para suero separado de pellet) para una mejor reproducibilidad de los resultados. 6. Para esta prueba, el volumen de de estándar, muestra o control es exactamente 200 µl. Este volumen debe pipetearse en el pocillo de la muestra que en el caso de la prueba sirve de cubeta de reacción. 7. Colocar en el sistema los conos " HIV5 " y los cartuchos " HIV5 ". Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores y letras) entre el cono y el cartucho. 8. Iniciar el análisis (ver Manual de Utilización). Todas las etapas son creadas automáticamente por el sistema. 9. Volver a cerrar los viales y retornarlos a 2-8ºC después de pipetear 10. Los resultados se obtienen en aproximadamente 2 horas. Al finalizar el análisis, retirar los conos y los cartuchos del sistema. 11. Eliminar los conos y los cartuchos utilizados en un recipiente apropiado. RESULTADOS E INTERPRETACION Una vez finalizada la prueba, los resultados se analizan automáticamente por el sistema informático. El sistema efectúa varias medidas de fluorescencia en la cubeta de lectura para cada una de las pruebas. La primera lectura tiene en cuenta el ruido de fondo debido a la cubeta y el substrato antes de ponerse en contacto el substrato con el cono. La segunda lectura se efectúa para la detección de los anticuerpos anti-vih después de incubar el substrato con el enzima presente en la parte inferior del cono. La tercera lectura se efectúa para la detección del antígeno p24 de VIH-1 después de incubar el substrato con el enzima presente con la totalidad del cono. Los RFV aparecen en la hoja de resultados. Los valores de la prueba se calculan para cada respuesta de anticuerpos (AB en la hoja de resultados) y antígeno (AG en la hoja de resultados) por el sistema VIDAS de la siguiente forma : Valor del test = RFV paciente de la respuesta específica/rfv estándar específico biomérieux SA Español - 4

5 La interpretación para cada muestra (HIV5 en la hoja de resultados) se calcula en función del valor de la prueba antígeno y anticuerpos como se indica a continuación : Valor de la prueba Interpretación < 0,25 (para la detección Negativo antígeno y anticuerpos) > 0,25 (para la detección antígeno o anticuerpos) La obtención de RFV elevados para la detección de anticuerpos puede enmascarar la respuesta del antígeno y vice-versa. Para la respuesta enmascarada, el valor de la prueba no se visualiza, aparece el mensaje N.D. "No Determinable" en su lugar. En este caso, la interpretación permanece válida. Para algunas muestras negativas, el valor de la prueba de anticuerpo se puede asociar con un valor de antígeno que es ND No Determinable debido a un resultado de antígeno que no se puede calcular por el programa VIDAS pero que es sin embargo inferior al valor umbral. Consultar la interpretación como resultado negativo La aparición de mensaje "Inválido" a nivel de la interpretación de la muestra invalida todo resultado para esta muestra. En este caso, esta muestra debe ser repetida. Las muestras para las cuales la interpretación es negativa se consideran negativas en el límite de las prestaciones del reactivo. En el caso de sospecha de una primoinfección, los valores próximos a 0,25 deben ser interpretados con prudencia. Las muestras para los cuales la interpretación es positiva deben ser repetidas en doble : - Las muestras positivas iniciales no repetibles (dos reacciones negativas de tres pruebas) deben ser consideradas como negativas en el límite de las prestaciones del reactivo. - Las muestras positivas repetibles (al menos dos reacciones positivas de tres pruebas) deben ser confirmadas por métodos complementarios. La positividad para una de las dos respuestas es una ayuda para la elección de los métodos complementarios : - Si el valor de la prueba para la detección de anticuerpos es > 0,25, la prueba complementaria puede ser el análisis por Western-Blot y/o la utilización de una segunda técnica de cribado de los anticuerpos anti-vih. Si estas pruebas complementarias son negativas, se aconseja el análisis en una segunda muestra efectuada algunos días después sobretodo en presencia de signos clínicos y/o factores de riesgo. - Si el valor de la prueba para la detección del antígeno es > 0,25, la prueba complementaria debe estar basada en la detección del antígeno p24 y/o en la determinación de la carga viral. Advertencia : las exigencias nacionales en materia de diagnóstico VIH deben ser tenidos en cuenta cuando existan. La interpretación de los resultados de la prueba debe hacerse teniendo en cuenta el contexto clínico y eventualmente los resultados de otras pruebas. CONTROL DE CALIDAD Se incluyen un control positivo de anticuerpo, un control positivo de antígeno, y un control negativo en cada equipo VIDAS HIV DUO Ultra. Estos controles deben ser utilizados cuando se abra un nuevo equipo con el fin de verificar la ausencia de alteración de los reactivos. Cada calibración debe ser igualmente verificada con la ayuda de estos controles. Para que el instrumento pueda verificar el valor de los controles, deben ser identificados por C1, C2 y C3. Para el control positivo antígenol C3, cualquiera que sea el valor de la respuesta en anticuerpos,únicamente la respuesta Ag valida este control. Si el valor de uno de los controles se desvía de los valores esperados, los resultados no pueden ser validados. Advertencia Es responsabilidad del usuario garantizar que el control de calidad se realiza conforme a la legislación local en vigor. LIMITES DE LA PRUEBA VIDAS HIV DUO Ultra es una prueba de cribado de la infección por VIH y no debe ser utilizado como prueba específica de antígeno p24 del VIH-1. VIDAS HIV DUO Ultra no debe ser utilizado como una prueba complementaria VIDAS HIV DUO Quick. - Esta prueba ha sido validada en suero y plasma. La utilización de otros líquidos biológicos tales como, el LCR o la orina no ha sido validado. - La utilización de plasmas recalcificados pueden dar resultados falsos positivos, se prohibe el uso de este tipo de muestra. - En casos excepcionales donde la concentración de antígeno P24 es muy elevada, la respuesta frente al antígeno puede salir N.D (No Determinable) y la señal de la respuesta frente a los anticuerpos puede sobrevalorarse. La interpretación final de la prueba es positiva. Se prohibe la utilización de mezclas de muestras. Puede encontrarse una interferencia con algunos sueros con anticuerpos dirigidos contra los componentes del reactivo, por esto los resultados de esta prueba deben ser interpretados teniendo en cuenta la historia clínica y eventualmente los resultados de otras pruebas. biomérieux SA Español - 5

6 PRESTACIONES TECNICAS Los estudios realizados con VIDAS HIV DUO Ultra han dado los resultados siguientes : 1. Especificidad en una población de donantes de sangre : Se han analizado 5008 muestras de donantes de sangre procedentes de 3 centros de transfusión sanguínea. Interpretación final VIDAS HIV DUO Ultra Negativo 0 6 Negativo Especificidad del reactivo VIDAS HIV DUO Ultra en esta población : 99,88 (intervalo de confianza del 95 : 99,73-99,95.) 2. Especificidad en pacientes hospitalizados : En 200 muestras analizadas, ninguna muestra dio falso positivo. Especificidad del reactivo VIDAS HIV DUO Ultra en esta población : 100,00. (intervalo de confianza del 95 : 98,04-100,00 ) 3. Especificidad en pacientes con un comportamiento de riesgo : En 100 muestras analizadas, ninguna muestra dió un resultado falsamente positivo. Especificidad del reactivo VIDAS HIV DUO Ultra en esta población : 100,00. (intervalo de confianza del 95 : 96,38-100,00 ). 4. Sensibilidad diagnóstica : Se ha realizado un estudio en 440 muestras positivas para VIH-1 y 122 para VIH-2. Todas estas muestras fueron positivas. Sensibilidad del reactivo VIDAS HIV DUO Ultra en esta población : 100,00 (intervalo de confianza del 95 : 99,29-100,00 ). Con el fin de verificar la sensibilidad de VIDAS HIV DUO Ultra en los sub-tipos no B se analizaron 40 muestras del grupo M (4A, 14B, 3C, 3D, 3F, 3G, 3H, 3CRF01-AE y 4 CRF02-AG) y 10 muestras del grupo O. Todas estas muestras fueron positivas. Se analizaron 31 muestras recién extraidas positivas (toma de muestra < 24 horas) y fueron positivas con VIDAS HIV DUO Ultra. Se analizaron 31 muestras recientes negativas (muestras < 24 horas) y fueron negativas con VIDAS HIV DUO Ultra. Con el fin de verificar la sensibilidad de VIDAS HIV DUO Ultra para el antígeno p24, se analizaron como mínimo 50 sobrenadantes de cultivo que comprendían diferentes sub-tipos VIH-1 y VIH-2 y al menos 50 muestras positivas para el antígeno p24. Todas las muestras fueron positivas 5. Sensibilidad en los paneles de seroconversión Durante los diferentes estudios realizados, se analizaron 45 paneles de seroconversión, demostrando la precocidad de la detección de VIDAS HIV DUO Ultra. Las diluciones de las 3 muestras VIH-1 y las 2 VIH-2 del panel EFS 96 fueron positivas. La sensibilidad de VIDAS HIV DUO Ultra, determinada en el panel Ag HIV SFTS (sub-tipo B), se estimó en 11,5 pg/ml de antígeno VIH-1. La sensibilidad de VIDAS HIV DUO Ultra, determinada con el estándar internacional NIBSC 90/636 se estimó en 0,5 UI/ml de antígeno VIH-1. Se analizaron al menos 40 muestras de seroconversión precoz de VIH. Los resultados están conformes con las prestaciones requeridas. 6. Precisión La repetibilidad y la reproducibilidad, determinadas en dos centros, fueron calculadas según las recomendaciones del documento NCCLS EP5-T2, volumen Centro 1 Muestra antígeno anticuerpo Centro 2 Muestra antígeno anticuerpo n Indice medio Repetibilidad Reproducibilidad 40 3,19 2,28 2, ,54 4,13 5,71 n Análisis global Muestra antígeno anticuerpo Indice medio Repetibilidad Reproducibilidad 40 3,08 2,95 4, ,18 6,97 8,33 n Indice medio Reproducibilidad 80 3,13 4, ,37 9,03 En este análisis, la reproducibilidad integra la variabilidad intra-serie, la dispersión entre las series y la dispersión entre los centros. biomérieux SA Español - 6

7 7. Reacciones cruzadas Se estudiaron 134 muestras, VIH negativas, de pacientes cuyo estado fisiológico es susceptible de interferir con VIDAS HIV DUO Ultra. Los resultados obtenidos son los siguientes : VIDAS HIV DUO Ultra positivos Anticuerpos anti-hav + 0/10 Anticuerpos anti-hcv + 0/10 Anticuerpos anti-hbv + 0/10 Anticuerpos anti-gag + 1/13 Anticuerpos anti-ebv + 0/10 Anticuerpos anti-hsv + 0/10 Anticuerpos anti-cmv + 0/10 Anticuerpos anti-nucleares + 0/10 Anticuerpos anti-toxoplasma 0/6 gondii + Anticuerpos anti-treponema pallidum + 0/5 Vacunados contra la gripe 0/10 Vacunados contra la hepatitis B 0/10 Factor reumatoide + 0/10 Niños menores de 15 años 0/10 La sobrecarga de las muestras, HIV positivo y HIV negativo, con concentraciones crecientes de biotina (0 a 2 mg/l) no ha mostrado ninguna influencia en los resultados dados por VIDAS HIV DUO Ultra. ELIMINACION DE RESIDUOS Eliminar los reactivos utilizados o no utilizados así como los materiales de un solo uso contaminados siguiendo los procedimientos relacionados con los productos infecciosos o potencialmente infecciosos. Es responsabilidad de cada laboratorio la gestión de sus desechos y efluentes según su naturaleza y peligrosidad, garantizando (o haciendo garantizar) su tratamiento y eliminación, según las reglamentaciones aplicables. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. F.Barré-Sinoussi, J.C. Chermann, F.Rey et al. Isolation of T- Lymphotropic Retrovirus from a Patient at Risk for acquired Immune Deficiency Syndrome (AIDS). 20 May Science.Vol.220. page F.Clavel, D.Guétard, F.Brun-Vézinet et al. Isolation of a New human Retrovirus from West African Patients with AIDS. 18 July SCIENCE Vol 233 page R.de Leys, B.Vanderborght, M Vanden Haesevelde and al. Isolation and Partial Characterization of an Unusual Human Immunodeficiency Retrovirus from Two Persons of West- Central African Origin. Journal of Virology. Mar.1990.p M.Guyader, M.Emerman, P.Sonigo et al. Genome organization and transactivation of the human immunodeficiency virus type 2. Nature. 16 april Vol 326 p M.Popovic, M.G.Sarngadharan, E. Read et al. Detection, Isolation, and Continuous Production of Cytopathic Retroviruses (HTLV-III) from Patients with AIDS and Pre- AIDS. Science. 4 May Vol.224. p World Health Organization, AIDS epidemic update. December p S.Kleinman, M.P.Busch, J.J.Korelitz et al. The Incidence/Window Period Model and its Use to Assess the Risk of Transfusion-Transmitted Human Immunodeficiency Virus and Hepatitis C Virus Infection. Transfusion Medecine Reviews. July Vol 11, N 3 p M.Von Sydow, H.Gaines, A.Sönnerborg et al. Antigen detection in primary HIV infection. British Medical Journal vol January p A.Galetto-Lacour, S.Kinloch-de Loës, b.hirschel et al. Primoinfection VIH : un diagnostic souvent évoqué mais posé tardivement. Schwerz.Med Wochenschr 1995 : 125 n 8. p T.Meier, E.Knoll, M.Henkes et al. Evidence for a diagnostic window in fourth generation assays for HIV. Journal of Clinical Virology vol.23, 2001, p TABLA DE SIMBOLOS Símbolo Significado Número de catálogo Producto sanitario para diagnóstico in vitro Fabricante Limite de temperatura Fecha de caducidad Codigo de lote Consulte las instrucciones de uso Contenido suficiente para <n> pruebas BIOMERIEUX, el logo azul, VIDAS y SPR son marcas utilizadas, depositadas y/o registradas que pertenecen a biomérieux SA o a alguna de sus filiales. Cualquier otro nombre o marca registrada pertenece a su correspondiente propietario biomérieux SA RCS LYON Marcy-l'Etoile / France Tél. 33 (0) Fax 33 (0) Imprimé en France