AREA DE PRODUCCION AGRICOLA

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1 Proyecto núm. SC ETIOLOGIA, EPIDEMIOLOGIA Y CONTROL DE LAS MANCHAS FOLIARES CAUSADAS POR STEMPHYLIUM SP. EN EL CULTIVO DEL AJO Equipo Investigador M.ª José Basallote Ureba (Dra. C.B.); Enrique Centeno Guerra (I.T.A.); Carlos José López Herrera (Dr. I.A.); Aurora Pérez de Algaba y de la Torre (Dra. C.B.); Ana María Prados Ligero (Dra. C.B.). Equivalente de jornada completa: 2,60 Centro de Investigación Centro de Investigación y Desarrollo Agrario Alameda del Obispo. Córdoba Duración: Enero, Diciembre, Coste: Miles de pesetas: Financiación INIA: 100% 89

2 PLANTEAMIENTO Y OBJETIVOS El desarrollo del proyecto de I+D 8571 permitió determinar los principales problemas fitopatológicos del cultivo del ajo en Andalucía y poner en evidencia la existencia de una enfermedad que no se había detectado hasta ese momento. Dicha enfermedad afecta a la parte aérea de la planta y se caracteriza por la aparición de dos tipos de lesiones en hojas: manchas elipsoidales pequeñas, deprimidas y de color blanco y/o manchas en forma de ojal, de tamaño variable (pueden hacerse mas extensas después de su aparición, a diferencia de las blancas que no modifican su tamaño), y color pajizo al inicio y púrpura mas tarde. Ambos tipos de lesiones pueden aparecer por separado o a la vez en las plantas de ajo y están asociadas con extensas necrosis que progresan desde el ápice hasta la base de la hoja. Esta sintomatología aparece inicialmente en las hojas mas viejas, pero cuando las condiciones ambientales son favorables para el desarrollo de la enfermedad, afecta a toda la parte aérea, ocasionando la seca prematura de las plantas. A consecuencia de esto se frena el desarrollo de los bulbos y se producen importantes reducciones en los rendimientos del cultivo. En inspecciones realizadas en las áreas mas importantes del cultivo en Castilla - La Mancha se detectó la misma sintomatología observada en los campos comerciales de ajo de Andalucía, aunque las epidemias se iniciaron mas tarde y la severidad de los ataques fue bastante menor. Además, se tuvo constancia de la presencia de la enfermedad en otras áreas de cultivo de España, así como en campos de cebolla y espárrago próximos a parcelas de ajo afectadas por las manchas foliares. Síntomas similares a las manchas foliares del ajo han sido descritos previamente en cultivos de ajo, cebolla y espárrago de otros países, y se han asociado con el hongo Stemphylium vesicarium. El desarrollo de la enfermedad es favorecido por diversos factores, fundamentalmente por determinadas variables climáticas. Aparentemente, los síntomas no se hacen evidentes hasta que prevalecen al mismo tiempo unas condiciones óptimas de temperatura y humedad. Las observaciones realizadas sugieren que las epidemias se ven favorecidas por condiciones de humedad próximas a saturación (lluvia, rocío, riegos por aspersión) y por temperaturas en el rango de C. Otro factor determinante en el desarrollo de las epidemias de manchas foliares son los restos de plantas afectadas que quedan en el campo tras la recolección, puesto que en investigaciones preliminares se ha observado el desarrollo sobre los mismos, de cuerpos fructíferos de Pleospora sp., teleomorfo de S. vesicarium. Dada la importancia económica y social de los cultivos de ajo, cebolla y espárrago en Andalucía, y el desconocimiento existente acerca de esta nueva enfermedad, nos planteamos la necesidad de acometer las investigaciones necesarias para determinar su etiología, los factores que influyen en la infección, así como los que limitan el inicio y el desarrollo de las epidemias de manchas foliares y, finalmente, las medidas de lucha mas adecuadas para un control racional de la enfermedad, tanto desde el punto vista medioambiental como económico. Por todo ello, los objetivos de este trabajo han sido: 1. Estudiar la variación patogénica de aislados de Stemphylium procedentes de manchas foliares. 2. Determinar el papel de los restos de plantas de ajo con manchas foliares en el desarrollo de las epidemias. 3. Determinar la influencia de la humedad y de la temperatura en las infecciones por S. vesicarium. 4. Control integrado de las manchas foliares. Además de los objetivos mencionados, en inoculaciones realizadas en condiciones controladas, se ha estudiado la influencia de la concentración de inóculo en la severidad de los síntomas, y la reacción de diferentes cultivares de ajo a la infección por S. vesicarium. 90

3 Las prospecciones efectuadas en campos comerciales de ajo, cebolla y espárrago de Andalucía mostraron que las manchas foliares tienen mayor incidencia e importancia en los dos primeros cultivos, mientras que en espárrago la enfermedad sólo se ha detectado hasta el momento en plantaciones de muchos años. La caracterización de los aislados procedentes de las manchas foliares indicó que la enfermedad en las principales zonas productoras españolas es ocasionada por Stemphylium vesicarium (Wallr.) E. Simmons, un hongo aéreo cuya fase sexual, Pleospora sp., se desarrolla en los restos de plantas infectadas. Las pruebas de patogenicidad realizadas con aislados de S. vesicarium procedentes de ajo, cebolla y espárrago sobre los tres huéspedes mencionados indicaron que éste hongo es el agente causal de la mancha blanca y la mancha púrpura en los tres cultivos mencionados. Nuestros resultados en condiciones controladas señalaron que para la infección y la colonización posterior de la planta por este patógeno, se requieren al menos 24 hr en una atmósfera saturada de humedad, una temperatura de C y un fotoperiodo de 12 h. RESULTADOS En condiciones de humedad y temperatura favorables para el desarrollo de la enfermedad, el umbral de inóculo requerido para obtener una reacción consistente de severidad, depende aparentemente de la virulencia de los aislados de S. Vesicarium. Los factores ambientales mas importantes en el desarrollo y la maduración de las pseudotecas de Pleospora sp. fueron alta humedad (próxima a saturación) y baja temperatura (5-10 C). La liberación de las ascosporas siempre estuvo asociada con la ocurrencia de lluvia o rocío. El enterrado de los restos de ajo no impidió el desarrollo de las pseudotecas de Pleospora sp., pero sí ocasionó la degeneración de una alta proporción de cuerpos fructíferos y evitó la liberación de las ascosporas en el aire. La reacción observada en siete cultivares de ajo a la inoculación con aislados de S. vesicarium indicó la existencia de marcadas diferencias en susceptibilidad. Los experimentos de control químico llevados a cabo en campo, durante los años 1993/1996 han demostrado la eficacia de tebuconazol, procimidona y procimidona en alternancia con clortalonil, en el control de las manchas foliares del ajo ocasionadas por S. vesicarium. INFORMACION CIENTIFICA Y TECNICA PROPORCIONADA POR EL PROYECTO. POSIBLES APLICACIONES VARIACION PATOGENICA DE AISLADOS DE STEMPHYLIUM PROCEDENTES DE MANCHAS FOLIARES Los aislamientos de mancha blanca y mancha púrpura procedentes de plantas afectadas de las principales áreas de los cultivos de ajo y cebolla de España, así como los recuperados de campos comerciales de espárrago de Andalucía, se identificaron como S. vesicarium, de acuerdo con sus características morfológicas. Por otra parte, las características de las pseudotecas, ascas y ascosporas, desarrolladas sobre los restos de ajos, fueron similares a las descritas para P. allii en cebolla. Por último, las características conidiales de los cultivos monoascospóricos se correspondieron con las de S. vesicarium. La similitud de los síntomas de manchas foliares inducidos en plantas de ajo, cebolla y espárrago, en inoculaciones artificiales, en todas las combinaciones huésped/aislado testadas, indicaron una baja especificidad para S. vesicarium, al menos dentro de las Liliaceas. No obstante, se observó una reacción mas severa cuando los aislados se inocularon sobre el huésped del que procedían. 91

4 PAPEL DE LOS RESTOS DE AJO INFECTADOS POR S.VESICARIUM EN EL DESARROLLO DE LAS EPIDEMIAS DE MANCHAS FOLIARES Pleospora sp. colonizó extensa ( pseudotecas/mm 2 ) y rápidamente, restos de hojas de ajo infectadas por S. vesicarium que se depositaron en la superficie del suelo a principios del otoño. El desarrollo y la maduración de las pseudotecas estuvieron altamente correlacionados con dos variables climáticas: la lluvia acumulada y, el número de horas en las que la temperatura media fué de 5-10 C y la humedad relativa próxima a saturación ( 98%). La maduración de los cuerpos fructíferos tuvo lugar desde mediados de Diciembre hasta principios de Marzo, alcanzándose más rápidamente en aquellos años en los que se registró una alta pluviometría en los 15 días que siguieron a la deposición de los restos Las primeras pseudotecas vacías se observaron desde finales de Enero hasta finales de Abril. Coincidiendo este hecho con las primeras capturas de ascosporas registradas en un capturador volumétrico de esporas situado en las proximidades de los restos. Los picos de máximas capturas se correspondieron con la ocurrencia de lluvia o rocío en días precedentes. La liberación de las ascosporas en el aire coincidió con la detección de los primeros síntomas de mancha blanca en una parcela trampa de ajos ubicada en las cercanías de los restos. Este hecho indica el importante papel de este tipo de inóculo en el desarrollo de las epidemias. INFLUENCIA DE LA HUMEDAD Y LA TEMPERATURA EN EL DESARROLLO DE LAS MANCHAS FOLIARES Los resultados obtenidos en las pruebas de patogenicidad realizadas en condiciones controladas señalaron que para que tengan lugar las infecciones por S. vesicarium es necesario un ambiente saturado de humedad durante un periodo superior a 6 h. Sin embargo, para obtener un nivel significativo de enfermedad se requirieron periodos superiores a la 24 h. Además, se observó un incremento de los síntomas en relación con la edad de las plantas y el periodo de humectación tras la inoculación. El nivel de susceptibilidad fue mas alto en plantas de 5 semanas que en plantas de 3 semanas, cuando se dispusieron en un atmósfera saturada de humedad durante 48 o mas horas. Las observaciones de campo también mostraron que las epidemias fueron mucho mas severas en primaveras lluviosas. Por otra parte, en condiciones controladas las infecciones tuvieron lugar en un rango de temperaturas de C (16-20/18-26 C, noche/día) y un fotoperiodo de 12 h. 92 EFECTO DE LA CONCENTRACION DE INOCULO EN LA SEVERIDAD DE LAS INFECCIONES Se ha determinado la relación entre la concentración de conidias de S. vesicarium y la severidad de la reacción en plantas de ajo inoculadas artificialmente. Los síntomas característicos de la enfermedad se reprodujeron con cualquiera de las concentraciones de inóculo utilizadas (3X X10 3 ), pero la severidad de los síntomas fué significativamente mayor a las concentraciones mas altas. CONTROL INTEGRADO DE LAS MANCHAS FOLIARES OCASIONADAS POR S. VESICARIUM EN EL CULTIVO DEL AJO Medidas culturales El enterrado de restos de ajo, infectados por S. vesicarium, en el momento de la implantación del cultivo, resultó en una importante reducción de los niveles de colonización de dichos restos por Pleospora sp., debido posiblemente a la competencia con otros hongos saprofìtos. La disposición de las hojas 10 cm por debajo de la superficie del suelo facilitó su degradación, incrementó el número de pseudotecas degeneradas y, aunque no impidió la maduración de un pequeño porcentaje de pseudotecas, si evitó la liberación de las ascosporas al aire. Esta práctica cultural podría ser, por tanto, una medida efectiva a tener en cuenta en el control integrado de las manchas foliares. Susceptibilidad de cvs. de ajo a la infección por S. vesicarium Los siete cvs. de ajo testados en condiciones controladas se mostraron susceptibles a las infecciones por S. vesicarium, pero difirieron claramente respecto a la incidencia y severidad de la enfermedad. Aparentemente los mas susceptibles fueron Blanco de Vallelado y Morado de Pedroñeras, y la susceptibilidad mas baja se correspondió con B6P1, B4P17, Iberose y Golourose. Sería necesario corroborar estos resultados en condiciones de campo para decidir la conveniencia de utilizarlos en futuros programas de control de la enfermedad. Control químico Los resultados de nuestros experimentos de campo indicaron un buen control de las manchas

5 foliares ocasionadas por S vesicarium cuando se aplicaron a intervalos regulares (aproximádamente cada 10 días) tebuconazol o procimidona (sóla o en alternancia con clortalonil) desde la aparición de los primeros síntomas (4-9 aplicaciones). También se observó un efecto positivo sobre la producción y la calidad del cultivo, particularmente en aquellos años en que la climatología imperante favoreció el desarrollo de las epidemias de manchas foliares. PUBLICACIONES Artículos científicos Basallote, M.J., Prados, A.M., Perez de Algaba, A., Melero, J.M First report in Spain of two leaf spots of garlic caused by Stemphylium vesicarium. Plant Disease, Artículos de divulgación Basallote, M.J., Centeno, E., Melero, J.M., Perez de Algaba, A., Prados, A.M Manchas foliares ocasionadas por Stemphylium vesicarium en el cultivo del ajo. Phytoma España, Trabajos presentados a congresos, reuniones o simposios Basallote Ureba, M.J., Prados Ligero, A.M., Melero Vara, J.M. Etiology of leaf spots on garlic in southern Spain. Fifth International Workshop on Allium White Rot. Córdoba (España). Mayo, Ed.: A.R. Enwistle and J.M. Melero Vara. Prados, A.M., Melero, J.M., Basallote, M.J. Development of the teleomorf of Stemphylium vesicarium in garlic debris affected by leaf spots. 9th Congress of the Mediterranean Phytopatological Union. Kusadasi-Aydin (Türkiye). Septiembre, Ed.: Turkish Phytopatological Society. Basallote Ureba, M.J., Prados Ligero, A.M., Melero Vara, J.M. Control químico de las manchas foliares ocasionadas por Stemphylium vesicarium en el cultivo del ajo. VIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Fitopatología. Córdoba (España). Septiembre, Ed.: Sociedad Española de Fitopatología. Basallote Ureba, M.J., Centeno Guerra, E., Perez de Algaba de la Torre, A., Prados Ligero, A.M. Manchas foliares en cebolla y espárrago ocasionadas por Stemphylium vesicarium. Grupo de trabajo de laboratorios de diagnóstico y prospecciones fitosanitarias. Vitoria (España) Basallote Ureba, M.J., Prados Ligero, A.M. Investigaciones preliminares en el control de las manchas foliares del ajo ocasionadas por Stemphylium vesicarium. VII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Fitopatología. Sitges (España). Octubre, Ed.: Programa y Resúmenes de comunicaciones VIII Congreso SEF. Prados Ligero, A.M., Basallote Ureba, M.J. Desarrollo de Pleospora sp. sobre restos de ajo afectados por manchas foliares. VIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Fitopatología. Córdoba (España). Septiembre, Ed.: Sociedad Española de Fitopatología. Libros Prados, A.M., Melero, J.M., Basallote, M.J Development of the teleomorph of Stemphylium vesicarium in garlic debris affected by leaf spots. Ed.: The Turkish Phytopathological Society Otros trabajos de difusión de resultados Ponencia en Jornadas Técnicas del ajo sobre Enfermedades causadas por hongos en el cultivo del ajo, organizadas por la Consejería de Agricultura y Medio Ambiente de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha, Las Pedroñeras (Cuenca), 1-6 Septiembre, Ficha técnica nº 75 titulada Stemphylium vesicarium (Wall.). E. Simmons. Manchas foliares del ajo En: Fichas de diagnóstico en laboratorio de organismos nocivos de los vegetales. Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación. 93

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