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Inés Macías Vera
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1 2do. Simposio Internacional: Odontología y SIDA El SIDA nos compete a todos Hotel Intercontinental Santiago de Cali, Colombia. Abril 8 / 2006 ORGANIZA: Corporación de Lucha contra el SIDA Universidad del Valle Colegio Odontológico Colombiano Universidad Santiago de Cali 1

Abril 8 / 2006 ORGANIZA: Corporación de Lucha contra el SIDA

2 Papel del Citomegalovirus en la patogénesis de la Enfermedad Periodontal Javier Enrique Botero Odontólogo Periodoncista Estudiante Doctorado Ciencias Biomédicas Universidad del Valle 2

3 [+] La Enfermedad 3

4 La enfermedad periodontal en una patología inflamatoria que resulta de la interacción de múltiples factores: bacterias, sistema inmune y factores ambientales. 4

5 La biopelicula La superficie radicular, el surco periodontal y la bolsa periodontal es un lugar donde los microorganismos pueden colonizar. 5

6 Encía clínicamente sana Ligero infiltrado inflamatorio: Neutrofilos Volumen colágeno 90% Mínimo fluid crevicular 6

7 Primera etapa (lesión temprana) Epitelio de unión: IL-8, IL-1 α, PgE2, MMP, TNFa Vascular: IL1β, TNFα PMNs: ROI, MMP8, fagocitosis! Fluido crevicular " Colágeno 7

8 Segunda etapa (lesión temprana) Epitelio de unión: IL-8, IL-1 α, PgE2, MMP, TNFa Vascular: IL1β, TNFα PMNs: ROI, MMP8, fagocitosis Macrófagos: IL-1β, IL-1α, IL-8, TNFα, PgE2, IL-12, MMPs, INFγ, MCP, MIP Linfocitos T: CD4, CD8!! Fluido crevicular "" Colágeno " Fibroblastos 8

9 Tercera etapa (lesión constituida) PMNs: ROI, MMP8, fagocitosis Macrófagos: IL-1β, IL-1α, IL-8, TNFα, PgE2, IL-12, MMPs, INFγ, MCP, MIP Linfocitos T: CD4, CD8 Linfocitos B Fibroblastos: MMPs, IL1β!!! Fluido crevicular """ Colágeno "" Fibroblastos 9

IL-12, MMPs, INFγ, MCP, MIP Linfocitos T: CD4, CD8 Linfocitos

10 Cuarta etapa (lesión avanzada) Macrófagos: IL-1β, IL-1α, IL-8, TNFα, PgE2, IL-12, MMPs, INFγ, MCP, MIP Linfocitos T: CD4, CD8 Plasmocitos IgG Fibroblastos: MMPs, IL1β!!!! Fluido crevicular """"" Colágeno """ Fibroblastos 10

11 La inflamación induce la destrucción de los tejidos periodontales. 11

12 [+] La Evidencia 12

13 El virus Citomegalovirus (HCMV) Herpesvirus (grupo β). Infecta a la mayoría de las personas (40-70%, HIV+ 87.2%) Se transmite por saliva, orina, sangre, órganos. Generalmente no causa síntomas en su infección primaria (fiebre, leucopenia, hepatitis, neumonía, gastritis, colitis, retinitis, anormalidades congenitas). Infección latente (epitelio, monocitos, linfocitos, otras). 13

2%) Se transmite por saliva, orina, sangre, órganos.

14 Estudio Parra & Slots 1996 Contreras & Slots 1996 Contreras et al 1997 Contreras & Slots 1998 Mac Donald et al 1996 Velazco et al 1999 Ting et al 1999 Contreras et al GUNA, PCR 20 sitios GTR, PCR, cultivo microbiológico 1 paciente Papillon Lefevre, PCR viral y bacteriano 11 Pal, PCR Metodología Muestras de placa bacteriana, 30 periodontitis, 27 gingivitis, PCR 27 pacientes con periodontitis, PCR 6 Pc, 3 Pal, rt-pcr mrna mensajero 30 Pcs, 38 Pcm, 31 Pcl, 41 Gingivitis, PCR, cultivo bacteriano Resultados HCMV mas prevalente (60%), mayor frecuencia en periodontitis en comparación con gingivitis. Alta frecuencia de herpesvirus en bolsas profundas (89%) en comparación con bolsas poco profundas (56%). HCMV (59%), EBV 1 (27%), coinfección (36%), infección viral (68%) 2/6 Pc replicación activa, 2/3 Pal replicación activa, HCMV Sitios con mas de 10% bacterias y/o virus, menos ganancia de inserción (5.6mm versus 3.0mm;P=0.0005) Presencia de EBV y HCMV, en coinfección con periodontopaticos Co-infección dos o mas virus Co-infección dos o mas virus o virus / bacteria (p=0.05) de acuerdo al diagnostico 14

periodontitis, PCR 6 Pc, 3 Pal, rt-pcr mrna mensajero 30 Pcs, 38 Pcm, 31 Pcl, 41 Gingivitis, PCR, cultivo bacteriano Resultados HCMV mas prevalente (60%), mayor frecuencia en periodontitis en

15 Estudio Contreras et al 1999 Contreras et al 2000 Michalowicz et al 2000 Contreras et al 2001 Kamma et al 2001 Contreras & Slots 2001 Saygun et al 2002 Kubar et al pacientes HIV+, 14 pacientes HIV-, PCR 16 Pal, PCR Metodología 20 biopsias periodontitis, 3 biopsias salud, fraccionamiento celular MACS, inmunofluorescencia, PCR 25 muestras placa bacteriana bolsas y biopsias periodontitis, PCR Pacientes periodontitis Jamaica PCR periodontitis crónica PCR, 30 Pcs, 21 salud Real time PCR, 16 Pal, 15 salud Resultados HCMV infecta MO, MΦ y menos frecuentemente LT y LB en tejido periodontal Se identifican herpesvirus simultáneamente en bolsas y tejido gingival Asociación entre P.gingivalis y HCMV Alta frecuencia de EBV en periodontitis asociada a HIV Presencia de herpesvirus en sitios activos, respuesta a la terapia Alta frecuencia de HSV 1 en comparación de HSV 2, tanto en tejido como GCF Mayor frecuencia de HCMV y EBV en sitios profundos Mayor frecuencia de HCMV en enfermedad y mayor carga viral en sitios profundos 15

periodontitis, PCR Pacientes periodontitis Jamaica PCR periodontitis crónica PCR, 30 Pcs, 21 salud Real time PCR, 16 Pal, 15 salud Resultados HCMV infecta MO, MΦ y menos frecuentemente LT y LB en

16 Modelo de Patogénesis en Enfermedad Periodontal Agente Infeccioso HCMV Agente Infeccioso A.actinomycetemcomitans P.gingivalis T.forsythia E.corrodens D.pneumosintes Entericos Tejidos Periodontales Invasión Degradación Respuesta Inmune Inflamación Citoquinas (IL1β, TNFα) Células (LTCD4, LB, MΦ) Metabolismo Periodonto Tejido Conectivo Tejido Óseo Enfermedad Periodontal Factores ambientales Inmunosupresión, tabaco, injurias Slots & Contreras 2000-Oral Microbiol Immunol 16

pneumosintes Entericos Tejidos Periodontales Invasión Degradación Respuesta Inmune Inflamación Citoquinas (IL1β, TNFα)

17 Para recordar El Citomegalovirus no causa la enfermedad periodontal, pero sus mecanismos de replicación y virulencia pueden agravar el proceso destructivo periodontal. 17

18 [+] La Perspectiva 18

19 Co-infección microorganismos periodontopaticos y HCMV. Efectos de la infección por HMV sobre la homeostasis de los fibroblastos gingivales. Modulación de la producción de citoquinas por HCMV en fibroblastos gingivales. Botero JE, Contreras A, Parra B. Papel del citomegalovirus en la enfermedad periodontal (investigación en curso). 19

Modulación de la producción de citoquinas por HCMV en fibroblastos gingivales.

20 CAL site PD site HCMV+ (n=5) HCMV- (n=10) La perdida de inserción y profundidad al sondaje en los sitios muestreados es mayor en sujetos HCMV+. mean CAL mean PD mm porcentaje HCMV+ (n=5) HCMV- (n=10) 0 IP parametros clinicos BOP Botero JE, Contreras A, Parra B. Papel del citomegalovirus en la enfermedad periodontal (investigación en curso). 20

mean CAL mean PD 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 mm porcentaje 70 60 50 40 30 20 10 HCMV+ (n=5) HCMV- (n=10)

21 Ent rods D.pneumo E.corrodens M.micros Fuso Eub spp Campy spp T.forsythia P.interm / P. nigresc HCMV+ (n=5) Los niveles de microorganismos periodontopaticos y superinfectantes son mayores en pacientes HCMV+. HCMV- (n=10) P.gingivalis A.actinom counts x 10 5 Ent rods D.pneumo E.corrodens M.micros Fuso Eub spp Campy spp T.forsythia P.interm / P. nigresc P.gingivalis Botero JE, Contreras A, Parra B. Papel del citomegalovirus en la enfermedad periodontal (investigación en curso). A.actinom counts x

22 Infección de HCMV en fibroblastos gingivales. Inmunofluorescencia (anti pp72). Magnificación original 40x. Botero JE, Contreras A, Parra B. Papel del citomegalovirus en la enfermedad periodontal (investigación en curso). 22

23 Cultivo de HCMV Towne en fibroblastos de pulmón humano embrionario 0 días 1 día 2 días 4 días 5 días 6 días Botero JE, Contreras A, Parra B. Papel del citomegalovirus en la enfermedad periodontal (investigación en curso). 23

24 En biopsias de tejido gingival humano, la expresión de mrna para TNFα e IL1β se encuentran elevados, sugiriendo asi la importancia de citoquinas proinflamatorias en la destrucción periodontal. Botero JE, Contreras A, Parra B. Papel del citomegalovirus en la enfermedad periodontal (investigación en curso). 24

25 La infección por HCMV o algún otro herpesvirus, podría explicar algunos casos de periodontitis severa, periodontitis agresivas o casos que no pierden inserción progresivamente y no responden a tratamiento convencional. 25

26 [+] Las Conclusiones 26

27 La evidencia actual sugiere que algunos herpesvirus son frecuentemente detectados en pacientes con periodontitis. HCMV es uno de los mas frecuentes. Los mecanismos de replicación y virulencia del virus pueden afectar el sistema inmune y la homeostasis de los tejidos periodontales. 27

28 Corporación de Lucha contra el SIDA Universidad del Valle Colegio Odontológico Colombiano Universidad Santiago de Cali COLCIENCIAS (proyecto ) [+] Agradecimientos 28

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