Clean Air Technology

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1 Clean Air Technology Jornada de Seguridad Biológica: Riesgos y Garantías Universidad de Navarra, Feb 2014 El flujo laminar normativas y principio de funcionamiento 1

2 Cantidad de particulas en el aire Cantidad de particulas en diferentes ambientes Cantidad de particulas generadas por la actividad humana Ambiente Nº Particulas/dm 3 Ambiente Nº Particulas/dm 3 Ártico Océano Campo Ciudad Carretera local Humo del tabaco Aire estéril: La normativa Europea: ISO Hay menos de ,1 µm (0,001 mm) en un metro cúbico de aire Partícula de polen 10 µm 1 micrón Micrografía de cabello humano 2

3 Aire estéril: Equivalencias entre diferentes normativas Flujo Laminar Esteril: Principio de funcionamiento (I) Flujo Turbulento Flujo Laminar Ventajas: Distribución homongénea y paralela de líneas de aire. Efecto barrido e inexistencia de zonas muertas Evita la contaminación cruzada 3

4 Flujo Laminar Esteril: Principio de funcionamiento (II) 0,40 m/s 0,30 m/s 0,20 m/s Barreras de seguridad primaria: cabinas Cabinas de flujo laminar: horizontal y vertical Aplicación: Manipulación de productos no tóxicos Protección: Producto Cabinas de seguridad biológica: clase I, clase II y clase III Aplicación: Manipulación de productos tóxicos y/o con riesgo de infección Protección Clase I: usuario y ambiente Clase II: producto, usuario y ambiente Clase III: produto, usuario y ambiente Aisladores de laboratorio: de presion positiva y negativa Aplicación: Aislador de presión positiva: para productos sin riesgo biologico pero que requieren de elevada esterilidad Aisladores de presión negativa: para manipular substancias nocivas como la preparación de productos citotóxicos. 4

5 Cabinas de flujo laminar vertical y horizontal LAF horizontal: principio de funcionamiento Protección Producto Usuario Ambiente Nivel Total Nula Nula Entrada de aire de la habitación Prefiltro de entrada de aire Ventilador de alta eficiencia Filtro HEPA H-14 Flujo de aire laminar estéril Área de trabajo sin frontal Flujo laminar clase 10 (ISO 4) 5

6 LAF horizontal: Modelos standard y especiales Modelo Tamaño (mm) Mini H 670 AH MH BH Modelo especial Cabina para Fecundación In-Vitro (FIV) Instalación de zona calefactada para la manipulación de ovocitos, embriones y semen. Temperatura constante: (37+/-0,5) ºC Preinstalación de lupa estereoscópica (opcional) LAF Vertical serie 100: Principio de funcionamiento 10% de extracción Protección Producto Usuario Ambiente Nivel Total Básica Nula Entrada de aire de la habitación Ventilador de alta eficiencia Filtro HEPA H-14 Prefiltro de extracción Flujo de aire laminar estéril Flujo de extracción Flujo laminar clase 10 (ISO4) 6

7 LAF Vertical serie 100: Modelos standard y aplicaciones especiales Modelo Tamaño (mm) Mini V 670 PV AV BV CV Aplicación especial Superficie antivibración para poder colocar una balanza de precisión Aplicable a cualquier cabina LAF Vertical con contención serie 30/70: Principio de funcionamiento Serie 30/70 30% de extracción Protección Producto Usuario Ambiente Nivel Total Media Total Entrada de aire de la habitación Ventilador de alta eficiencia Filtro HEPA H-14 Filtro HEPA H14 de extracción Flujo de aire laminar estéril Flujo de extracción estréril Flujo laminar clase 10 (ISO4) 7

8 LAF Vertical con contención serie 30/70: Modelos standard y especiales Modelo Tamaño (mm) PV 30/ AV 30/ BV 30/ CV 30/ Modelo especial Estabulario: cabina especial para la investigación con animales Sistema de protección especial de los filtros HEPA para evitar la prematura colmatación de estos. Diseño silencioso para evitar el estres de los animales Resistente a los frecuentes procesos de limpieza y desinfección LAF Vertical con contención serie 30/70: Especial Animalario -ZOON Modelo especial Modelo Tamaño (mm) PV 30/ AV 30/ BV 30/ CV 30/ Estabulario: cabina especial cambio de jaulas Ligera (aluminio) y fácil de trasladar. Altura regulable automaticamente Resistente a los frecuentes procesos de limpieza y desinfección Bajo consumo 8

9 Cabinas de Seguridad Biológica Principio de funcionamiento y modelos Niveles de riesgo biológico (BSL): Definición y ejemplos BSL Riesgo de infección en el hombre Riesgo de propagación al colectivo Profilaxis Ejemplos BSL1 BSL2 BSL3 BSL4 Poco probable que cause enfermad Puede causar una enfermedad Enfermedad grave Enfermedad muy grave No Peligro para el usuario y riesgo que se propague al colectivo Serio peligro para el usuario y riesgo que se propague al colectivo Serio peligro para el usuario y elevado riesgo que se propague al colectivo No es necesario Generalmente existen profilaxis o tratamientos eficaces Generalmente existen profilaxis o tratamientos eficaces No existen generalmente profilaxis o tratamientos eficaces E. Coli, varicela, Hepatitis canina, Bacillus subtilis, cultivos de celulas y bacterias no infecciosas Hepatitis B, Hepatitis C, gripe, salmonelas, VIH, Tembladera y en genral toda maiipulación de tejidos humanos o derivados sanguinios de los que se desconozca si existe contaminación Ántrax, paperas, virus del nilo occidental, SRAS, viruela, tuberculosis, tifus, fiebre amarilla, EEB. Fiebre boliviana, Dengue, Virus de Marburgo, Ébola, Hanta, Virus de Lassa y otras enfermedades hemorrágicas 9

10 Normativas de las CSB Normativa Europea: EN Las cabinas de seguridad biológica deben cumplir con la normativa europea EN (En España UNE-EN 12469) Solo el certificado emitido por una entidad independiente de reconocido prestigio avala este cumplimiento. Esta normativa asegura que la cabina proporciona el nivel de seguridad prometido Cabina de seguridad Biológica Clase I: Principio de funcionamiento Protección Producto Nivel Nula 3 3 Usuario Ambiente Alta Alta Entrada de aire de la habitación Ventilador de alta eficiencia 3 Filtro HEPA H-14 de extracción 4 Flujo de extracción estéril 10

11 Cabina de seguridad Biológica Clase II: Principio de funcionamiento Protección Nivel Producto Total 3 6 Usuario Ambiente Alta Alta Entrada de aire de la habitación Ventiladores de alta eficiencia Filtro HEPA H-14 de extracción Filtro HEPA H-14 5 Flujo laminar estéril clase 10 6 Flujo de extracción estéril Flujo laminar clase 10 (ISO4) CBS Clase II: Diagrama de flujo 30 % extracción Plenums interactivos pero independientes, los ventiladores y los sensores controlan el flujo de la cámara y de la extracción Velocidad flujo laminar: 0,4 m/s Cámara de trabajo de una sola pieza, acero inox Superficie de trabajo en piezas HEPA Filter Exhaust fan Plenum Impulsion fan Plenum External Exhaust Laminar flow Working Chamber 70 % de recirculación del total del flujo a través de filtro HEPA Mueble de la cabina de acero pintado epoxy Iluminación por encima de 1100 lux Frontal 30 de % cristal of lab laminado inflow y templado permitiendo acceso total a la cámara de trabajo y limpieza por ambos lados Back slots Front slots Vel de entrada de aire: 0,5 m/s Flujo laminar ISO 4 (class 10) : Filtración % partículas > 0,3 mm % según EN

12 Cabina de seguridad Biológica Clase III: Principio de funcionamiento 5 Protección Producto Nivel Total 2 Usuario Ambiente Total Total 1 Entrada de aire de la habitación Filtro HEPA-14 de extracción Filtro HEPA H-14 Flujo laminar estéril clase 10 5 Flujo de extracción estéril Sin regimen de flujo laminar CSB Clase II: Diferentes diseños para distintas necesidades Bio II Advance BioVanguard 12

13 CSB: Dimensiones Diseño compacto El innovador diseño compacto proporciona a la Bio II Advance unas grandes prestaciones en el mínimo espacio. Con 759 mm de profundidad y 1260 mm de alto es la cabina más compacta del mercado CSB: Cristal frontal fácil de limpiar Fácil limpieza y acceso al interior de la cabina 13

14 CSB: Control con regulación automática Control con autorregulación de la colmatación de los filtros Control con regulación automática (monitorización por microprocesador) que compara continuamente los valores reales de los parámetros seleccionados con los valores de validación. CSB: Pantalla de fácil lectura Parámetros: Nivel de colmatación de los filtros: permite la planificación del cambio de filtros. Velocidad del flujo laminar 14

15 CSB: Sistema de alarmas fiable Código cromático indicando visualmente el estado: Pantalla verde: Cabina en condiciones seguras Pantalla roja: Cabina fuera de especificaciones Pantalla amarilla: UV en funcionamiento CSB: Ergonomía Ventanas laterales Reposabrazos Inclinación frontal de 10º La parte frontal con ángulo de 10º permite adoptar una postura de trabajo ergonómica y evita la fatiga. Laterales de vidrio transparente, maximizan la luz y la visibilidad en el interior, ofreciendo un entorno de trabajo luminoso y abierto Doble reposabrazos de serie extraible 15

16 CSB: Estanqueidad de la cámara Sellado hermético por junta de silicona Sin Junta: fugas Con Junta: hermeticidad CSB: Todos los servicios desde el frontal Fácil y rapido sistema de cambio de filtros Único e innovador 4F System Fast, Friendly & efficient System : el sistema patentadodecambiodefiltrosserealizaporlapartefrontaldelacabinacon la ayuda de herramientas comunes, reduciendo en tan solo 5 minutos el tiempo requerido para cambiar filtros. 16

17 CSB: Prefiltración Prefiltro que cubre el 100% del retorno del aire Incrementa drásticamente la vida de los filtros HEPA Maximiza el efecto de descontaminación (sin capas de suciedad en el interior de la cabina) CSB: Sin pre-filtro 17

18 CBS con tercera etapa de filtración CSB Clase II para manipular citostaticos (I) 7 Protección Nivel Producto Biológico Total Producto Citotóxico Usuario Ambiente Total Alta Alta 1 Entrada de aire de la habitación 6 2 Filtro HEPA H-14 de recogida de citostaticos 1 3 Ventiladores de alta eficiencia 4 Filtro HEPA H-14 de extracción 5 Filtro HEPA H-14 de flujo laminar 6 Flujo laminar estéril clase Flujo de extracción estéril Flujo laminar clase 10 (ISO4) 18

19 BioVanguard B Prefiltro BioVanguard B medidas (mm) BioVanguard B BioVanguard B CSB Clase II para manipular citostaticos Cambio de filtros

20 Cabina informatizada Lector código de barras Pantalla tàctil integrada Impresora código de barras Aisladores de laboratorio 20

21 Tecnologias para la protección del producto y/o el usuario Fiabilidad en cuanto a uso Habitación sin clasificación Habitación clasificada Cabina de flujo laminar ASEPTICOS Barrier system AISLADORES Asepticos Abiertos Asepticos cerrados Asepticos con contención cerrados CONTENCION Contención cerrados Barrier system Cabina Seguridad Biológica Zona Clasificasda Zona no clasificada Presión positiva Presión Negativa Protección producto Protección Usuario Aislador de presion positiva: Sterilator La cámara de trabajo del Sterlilator se encuentra en presión positiva respecto a la habitación. La cámara de trabajo está a una presión ligeramente superior que los SAS de materiales para asegurar las condiciones asépticas de la cámara donde se manipulan las muestras 21

22 Aislador de presion positiva: Cytolator La cámara de trabajo del Cytolator se encuentra en presión negativa respecto a la habitación La cámara de trabajo está a una presión ligeramente inferior que los SAS de materiales para asegura la protección del producto, usuario y ambiente Aisladores de laboratorio: Modelos estandar Sterilator Size (mm) CS CS Cytolator Size (mm) CS CS

23 CSB Clase III: MSC III El área de trabajo de la Cabina se encuentra a una presión negativa como mínimo de 200 Pa respecto a la habitación. La presión de la cámara de trabajo es negativa para proporcionar protección máxima al usuario. Sin régimen de flujo laminar: se recomienda la manipulación únicamente de una muestra para evitar contaminaciones cruzadas. CSB Clase III: Modelos estandar MSC III Size (mm) MSC III MSC III MSC III

24 Rango de Cabinas y Aisladores para trabajos de alto riesgo Biologico en laboratorios MSC III Manipulación de agentes BSL 4 STERILATOR Manipulación de productos sin alto riesgo biológico pero con necesidad de un ambiente extremandamente estéril CYTOLATOR Proceso de productos Citotóxicos ISOFLOW Aislador Modular Cabinas de flujo laminar vs Aisladores Ventajas e inconvenientes Cabinas de flujo laminar Flujo laminar vertical Menor precio del equipo Mayor ergonomía Requiere que el equipo este en una zona sin corrientes de aire (puertas, salidas de aire acondicionado) y que el usuario trabaje de forma adecuada en su interior (sin movimientos bruscos de brazos y desplazamiento de muestras/material...) CSB clase II Construida según normativa EN y certificación TUV Nord Menor precio del equipo Mayor ergonomía Requiere que el equipo este en una zona sin corrientes de aire (puertas, salidas de aire acondicionado) y que el usuario trabaje de forma adecuada en su interior (sin movimientos bruscos de brazos y desplazamiento de muestras/material...) Aisladores Aislador de P (+) Presión positiva de 50 Pa garantizan una elevada esterilidad de la zona de trabajo No hace falta ningún tipo de requerimiento de ubicación ni manipulado Aislador de P (-) No están regulados por ninguna normativa Europea. Presión negativa de 90 Pa garantizan elevada protección al usuario No hace falta ningún tipo de requerimiento de ubicación ni manipulado 24

25 Cabinas de flujo laminar vs Aisladores Ventajas e inconvenientes Cabinas de flujo laminar CSB clase II con tercera etapa de filtración Construida según normativa EN y certificación TUV Nord Menor precio del equipo Mayor ergonomía Requiere que el equipo este en una zona sin corrientes de aire (puertas, salidas de aire acondicionado) y que el usuario trabaje de forma adecuada en su interior (sin movimientos bruscos de brazos y desplazamiento de muestras/material...) CSB clase III Construida según normativa EN Presión mínima de 200 Pa en la cámara de trabajo según normativa Estrictas pruebas de estanqueidad según normativa. Para manipulación de patógenos del grupo 4 Aisladores Aislador de P (-) con tercera etapa de filtración No están regulados por ninguna normativa Europea. Presión negativa de 90 Pa garantizan elevada protección al usuario No hace falta ningún tipo de requerimiento de ubicación ni manipulado Aislador de P (-) No están regulados por ninguna normativa Europea. Presión negativa de 90 Pa. No es aconsejable este tipo de aisladores para el manipulado de patógenos del grupo 4. Ubicación, Instalación y Validación 25

26 CSB: Ubicación, Instalación y Validación Las CSB son uno de los pasos a tener en cuenta de los programas de Bioseguridad Las Buenas Practicas de Laboratorio (GLP s) son indispensables para trabajar de forma biosegura Ubicación: Aspectos a considerar Antes escoger la ubicación de su CSB, verificar si: Es posible el acceso al emplazamiento final? El recorrido de la CSB al emplazamiento escogido se realizará por ascensor o escaleras? Que dimensiones tiene todo el recorrido? Considere el espacio del ascensor/escaleras, espacio de los pasillos, puertas etc El usuario tendrá suficiente espacio para realizar su trabajo dentro de la cabina una vez instalada? La altura de su laboratorio es superior a 2,5 m? 26

27 Ubicación optima: Cabina Cabina 30 cm 1 m Cabina 1,5 m 1,45 m Cabina 2,5 m Cabina Cabina 1 m 2,5 m 0,72 m Cabina Cabina 1,5 m 1 m Instalación: conducción al exterior La CSB debe ser conducida al exterior? Y si ésta es necesaria, de que longitud estamos hablando? La CSB se conducirá al exterior: Cuando se trabaje con productos volátiles o vapores tóxicos (considerando también los productos utilizados para la limpieza y su concentración) Cuando la diferencia entre la cabina y el techo sea inferior a 30 cm 27

28 Instalación: Accesorios para la conducción al exterior Existen diferentes accesorios para la correcta conducción de la cabina al exterior: Conexion tipo campana (canopy) para una extracción conducida segura Valvula antiretorno Validación Después instalar la cabina, esta debe ser validada con los siguientes tests: Test de validación después de la instalación de la CSB CFL H CFL V 10% CFL V 30% CSB CYTO Validación de filtros Hepa-14: Fugas del filtro de flujo laminar Validación de filtros Hepa-14: Fugas del filtro de extracción Validación de filtros Hepa-14: Fugas del filtro de aspiración Test de velocidad del flujo laminar sí sí sí sí sí n/a n/a sí sí sí n/a n/a n/a n/a sí sí sí sí sí sí Test de velocidad entrada de n/a sí sí sí sí Diferencial de presión sí sí sí sí sí Test de humo sí sí sí sí sí 28

29 Validación: Certificación individual Como trabajar de forma segura en una Cabina de Flujo Laminar 29

30 Como trabajar de forma segura en una CSB (I) 1. Prepare la hoja de trabajo (check list de los materiales) para planificar la actividad a realizar en la cabina y utilizar el equipo de protección personal necesario para un trabajo seguro: a. Identifique todo el material necesario para llevar a cabo el trabajo: Equipos Cultivos Medios de cultivo, reactivos Materiales b. Utilice el equipo de protección personal necesario: Guantes, bata y otras prendas de vestir para: Protegerle de los agentes con los que trabaja Que usted no contamine la cabina, los cultivos o otros materiales de investigación Como trabajar de forma segura en una CSB (II) 2. Prepare la cabina antes de empezar a trabajar: a. Encienda la cabina 5 minutos antes de empezar a trabajar en ella para estabilizar el flujo laminar. 3. Trabaje en la cabina de forma segura para minimizar su riesgo de contaminación y el de la muestra: a.limpie ydesinfectelasuperficiedetrabajo,elinteriordelacámara y el cristal con una solución bactericida adecuada, alcohol al 70% o el desinfectante adecuado para cada ocasión. b. Desinfecte todos los objetos (materiales y equipos) antes de situarlos en el interior de la cabina. c. Ubique todo el material a utilizar en el interior de la cabina antes de empezar a trabajar para evitar que ningún contaminante pase hacia dentro o hacia fuera del área de trabajo. d. Mantenga todos los objetos a 10 cm del cristal. 30

31 Como trabajar de forma segura en una CSB (III) e. No sitúe los objetos encima del perforado (frontal y trasero) para no bloquear el flujo laminar. f. No obstruya la extracción de la cabina. g. No obstruya la sonda de velocidad de la cabina. h. No sobrecargue la cabina: ubique en su interior únicamente el material que necesite para el trabajo a realizar en ese momento. i. No utilice las cabinas como almacén de productos o material de laboratorio. j. Divida su área de trabajo en tres zonas: Área para residuos: recipiente de residuos Área de trabajo Área limpia: reactivos, medios de cultivo Como trabajar de forma segura en una LAF (IV) Distribuyendoelmaterialenestastreszonas conseguirá: Realizar el mínimo número posible de movimientos en la cabina No mezclar materiales estériles con residuos. Tener despejada la zona de manipulación (área de trabajo). Tener controlado el material residual dentro de un recipiente controlado. k. Cuando mueva objetos dentro de la cabina procure: Realizar movimientos suaves Mover manos y brazos desde fuera hacia dentro de la cabina, intentando no realizar movimientos laterales. 31

32 Como trabajar de forma segura en una LAF (V) l. Trabaje bajo las siguientes técnicas asépticas: Mantenga las botellas, viales y tubos paralelos al flujo laminar. Vaya transfiriendo continuamente el material desechable en el contenedor de residuos. Si es posible, trabaje con un único cultivo cada vez y recoja antes de pasar al siguiente. Introduzca en la cabina material libre de partículas por lo que es preferible el uso de tubos con tapones de rosca en lugar de algodón. Todo el material que introduzca en la cabina debe estar en un recipiente cerrado para evitar la contaminación al exterior. No introduzca materiales que emitan fácilmente partículas como el papel, madera, cartón, lápices o gomas de borrar. Como trabajar de forma segura en una LAF (VI) 4. Una vez finalizado el trabajo: Desinfecte todas las superficies de la cabina: Superficie de trabajo Laterales y pared frontal Cristal Debajo de las bandejas (si es accesible) Quítese el equipo de protección personal y deseche lo necesario 32

33 Como trabajar de forma segura en una LAF (VII) 5. Otras recomendaciones útiles No es recomendable el uso de mecheros Bunsen o similares para evitar turbulencias del flujo laminar o el deterioro de los filtros Hepa. Las cabinas deben estar ubicadas lejos de puertas y ventanas para evitar posibles corrientes de aire que puedan alterar el flujo laminar y por lo tanto disminuir su protección. Durante la utilización de la cabina, no está permitido comer, beber o masticar chicle. No se pueden manipular gases corrosivos, inflamables o explosivos dentro de la cabina. Las partes no accesibles de la cabina (ventiladores, plenums, filtros ) solo pueden ser manipuladas por técnicos autorizados. Para garantizar una total seguridad, se recomienda a todos usuarios que ante cualquier duda consulten el manual o acudan a su responsable Muchas gracias por su atención Preguntas y respuestas 33

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