Allexandra Díaz

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1 Allexandra Díaz

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4 Glicoproteínas de membrana: Estabilización membrana Adhesión y agregación Receptores Trasporte Actividad enzimática

5 ANTIGENOS PLAQUETARES COMPARTIDOS Hematíes: ABO, Lewis, P, I -Leucocitos: HLA clase I ESPECIFICOS HPA Grupos sanguíneos plaquetarios y granulocitarios. Importancia clínica. Dr. Eduardo Muñiz Diaz Jefe de la División de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits.

6 Complejos GP de la membrana plaquetar Grupos sanguíneos plaquetarios y granulocitarios. Importancia clínica. Dr. Eduardo Muñiz Diaz Jefe de la División de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits.

7 Complejo glicoproteico IIb IIIa Grupos sanguíneos plaquetarios y granulocitarios. Importancia clínica. Dr. Eduardo Muñiz Diaz Jefe de la División de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits.

8 Complejo glicoproteico Ib-IX-V Grupos sanguíneos plaquetarios y granulocitarios. Importancia clínica. Dr. Eduardo Muñiz Diaz Jefe de la División de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits.

9 Complejo glicoproteico Ia - IIa Grupos sanguíneos plaquetarios y granulocitarios. Importancia clínica. Dr. Eduardo Muñiz Diaz Jefe de la División de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits.

10 Von dem borme y Decary 1990 Sistema de grupo Plaquetario 1959, Van Loghem detecto en el suero de una paciente que desarrollo PTP un AC que aglutinaba el 98% de las plaquetas testeadas 1961, Van Der Weerdt, AC regularde tipo IgM detectado en suero de pacientes politransfunidos Von Dem Borne a partir e un caso de TFNA, tras el estudio del AC materno mediante la tecnica de inmunofluorecenica, posteriormente en dos caso Shibata en Japón y Friedman de PTP y Aster en EEUU. Primer sistema descrito en población no caucasoide. Kiefel y Kelton en HPA-5b detectado por MAIPA en un caso de TFN moderada. HPA-5ª en pacientes politransfundido. Kelton Implicados en PTP y TFNA

11 Von dem borme y Decary 1990 Antígenos de baja frecuencia

12 IMPORTANCIA CLINICA Trombocitopenia fetal/neonatal aloinmune (TFNA) Purpura Postransfusional (PPT) Refrectariedad inmune Trombocitopenia Aloinmune Pasiva Trombocitopenia asociada al trasplante debido a aloanticuerpos plaquetarios. 1 caso por cada recién nacidos. Homologable a la EHRN por incompatibilidad Rh D. 30 % casos en la primera gestación. Fallo en el incremento del Desarrollo numero Poco frecuente de de hemorragia plaquetas pero cerebral después potencialmente en de grave. un 10-30% transfusiones Se caracteriza de los 5-10 días después de la casos. seguidas por con la concentrados aparición brusca transfusión de cualquier Poco plaquetarios. de trombocitopenia pocas frecuente: abortos, componente. horas después de la transfusión anemia fetal. Aparición de un componente súbita de sanguíneo. trombocitopenia Aloanticuerpo intensa el componente transfundido.

13 Técnicas de Detección de Anticuerpos Anti-Plaquetarios MAIPA ELISA PIFT Aglutinación en látex Adherencia de células rojas en fase solida Citometría de Flujo

14 MAIPA Inmovilización de antígenos plaquetares mediante anticuerpos monoclonales Fundamento: Técnica sensible, permite definir simultáneamente la especificidad del anticuerpos detectado y la glicoproteína en la cual se localiza el antígeno así como, determinar si las inmunoglobulinas están dirigidas contra antígenos HLA u otros específicos de plaquetas Técnicas de Estudio Dra. Núria Nogués Galvez. Laboratorio de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits. Barcelona.

15 MAIPA Inmovilización de antígenos plaquetares mediante anticuerpos monoclonales

16 SPRCA Adherencia de células rojas a una fase solida Fundamento: Una Monocapa de plaquetas de donante es inmovilizada mediante centrifugación en la superficie de los pocillos de micro placa. Detecta: Anticuerpo antiplaquetarios, rastreo de anticuerpos leucocitarios, pruebas de compatibilidad plaquetaria, tipificación antigénica y cuantificación de IgG asociada a plaquetas. Técnicas de Estudio Dra. Núria Nogués Galvez. Laboratorio de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits. Barcelona.

17 SPRCA Adherencia de células rojas a una fase solida Comparación de las técnicas de identificación de anticuerpos en pacientes con refracteriedad plaquetaria de tipo inmunitario en Colombia Ginna Alexandra Urrego Montoya Tesis. 2009

18 ELISA Fundamento: Se basa en la detección de un antígeno inmovilizado sobre una fase solida mediante anticuerpos que directa o indirectamente producen una reacción cuyo producto, por ejemplo un colorante, puede ser medido espectrofotométricamente Detecta: Anticuerpos HLA y anticuerpos antiplaquetarios. Técnicas de Estudio Dra. Núria Nogués Galvez. Laboratorio de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits. Barcelona.

19 PIFT Prueba Inmunofluorescente especifico para plaquetas Fundamento: Consiste en evidenciar la presencia de los Aloanticuerpos del suero problema fijados a la membrana de las plaquetas control mediante una antiglobulina human fluorescente. Detecta: Anticuerpos anti-plaquetarios y antileucocitarios (anti- HLA) Técnicas de Estudio Dra. Núria Nogués Galvez. Laboratorio de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits. Barcelona.

20 Técnica de aglutinación en Latex Fundamento: Técnica que hace visible los complejos Ag-AC por la aglutinación que producen los AC cuando el AG forma parte o se ha unido artificialmente a la superficie de los glóbulos rojos, plaquetas, leucocitos o partículas de látex. Las partículas de látex se cubren ya sea con un AG o un AC. Detecta: Anticuerpos antiplaquetarios y anticuerpos antileucocitarios. Técnicas de Estudio Dra. Núria Nogués Galvez. Laboratorio de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits. Barcelona.

21 TECNICAS DE ESTUDIO A pesar del gran numero de técnicas descritas, no existe ninguna que este exenta de limitaciones y que pudiera considerarse como la técnica idónea para la detección de anticuerpos anti-hpa, sea cual sea la especificidad contra la que va dirigido. Por este Razón, la utilización conjunta de al menos, dos técnicas se considera esencial para cubrir al máximo las posibilidades de detectar anticuerpos anti plaquetarios. Kaplan 1998 Técnicas de Estudio Dra. Núria Nogués Galvez. Laboratorio de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits. Barcelona.

22 Técnicas para la tipificación de los antígenos plaquetarios Técnicas basadas en la utilización de sueros de origen humano. Anticuerpos monoclonales contra antígenos HPA. Análisis del genotipo HPA mediante técnicas de biología molecular. PCD-ASRA (Allele specific restriction analysis). PCR-SSP ( Sequence specific primers) Discriminación alélica mediante PCR con sondas fluorogénicas. Técnicas de Estudio Dra. Núria Nogués Galvez. Laboratorio de Inmunohematología. Banc de Sang i Teixits. Barcelona.

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&! &  # '!  # $ % ( ) !"#$% &! & "#' ( )" PLAQUETAS Célula progenitora : Megacariocito Tamaño: entre 2 a 5 µm. Proceso de hemostasia en cuatro fases: - adhesión - reacción de liberación - agregación - actividad procoagulante

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