AmnioMonlabTest ALL-5475 INSTRUCCIONES DE USO
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- Dolores Salas Ortiz
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1 AmnioMonlabTest ALL-5475 INSTRUCCIONES DE USO
2 Atención, consulte las instrucciones de uso Sólo para uso diagnóstico in vitro Índice de símbolos Pruebas por kit Uso por Fabricante No lo reutilice Guárdelo entre 2 y 30 ºC Número de lote REF Catálogo # Directiva 98/79/CE Versión 4 Actualizado el 24/12/2009 Fabricado por BioSynex 12, rue Ettoré Bugatti BP ESTRASBURGO Cedex 2 - FRANCIA
3 Ref. N.: ALL-5475 Sólo para uso in vitro 1- INDICACIONES AmnioMonlabTest Prueba rápida para la detección de IGFBP-1 (insulin growth factor binding protein-1) AmnioMonlabTest es una prueba simple y rápida que permite la detección in vitro de IGFBP-1 ( insulin growth factor binding protein-1) a partir de un exudado vaginal. La prueba AmnioMonlabTest está diseñada para detectar la rotura de las membranas fetales en mujeres embarazadas a partir de un exudado vaginal. 2- INTRODUCCIÓN La rotura prematura de membranas o RPM es bastante frecuente y sucede en entre un 5 y un 10% de los embarazos. Puede provocar parto prematuro o infección fetal. La pérdida de líquido amniótico no es detectable mediante análisis clínicos convencionales en todos los casos y, en ocasiones, es útil realizar una prueba de confirmación. Las pruebas biológicas se fundamentan en la detección de alcalinización vaginal, fácil de realizar, sensible y económica aunque poco específica, o en la presencia de una molécula, presente desde un punto de vista fisiológico, en concentraciones altas en el líquido amniótico (diamina oxidasa, alfafetoproteína, fibronectina y IGFBP-1). 3- PRINCIPIO Un anticuerpo monoclonal se moviliza en una membrana de nitrocelulosa. Después de la recogida de la muestra vaginal, se sumerge el exudado en una solución de extracción. Las IGFBP-1 de la muestra fluirán a lo largo de la membrana y se capturarán a nivel del anticuerpo de captura. La señal de color se genera mediante partículas de oro coloidal en las que se moviliza un anticuerpo IGFBP-1 específico que se une al complejo antígenoanticuerpo, de forma que se creará una línea de color morado. La presencia de la banda morada de control interno en la parte superior de la membrana permite la validación de un procedimiento correcto. 4- MATERIAL SUMINISTRADO AmnioMonlabTest contiene los siguientes componentes para realizar el análisis: Instrucciones de uso Hisopo de dacrón esterilizado para exudado vaginal Vial de dosis unitaria de tampón de extracción 5- MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO Cronómetro con alarma 6- LIMITACIONES DE LA PRUEBA 1) El procedimiento de la prueba, sus precauciones y la interpretación de los resultados deben seguirse con el máximo rigor. 2) Como en todas las pruebas diagnósticas, el resultado de la prueba debe ser consistente con los hallazgos clínicos. 3) Los resultados positivos falsos podrían estar relacionados con la presencia de IGFBP-1 derivadas de una hemorragia importante o de las células deciduales del cuello uterino cuando el cuello uterino tiene la suficiente madurez. 3
4 4) Los resultados negativos falsos podrían aparecer cuando el examen se realiza después de las 12 horas siguientes a la detención de pérdida de líquido amniótico. 5) El hisopo debe diluirse en el tubo de extracción de manera inmediata después de la recogida de la muestra. A continuación, el tubo puede dejarse durante un máximo de seis horas a temperatura ambiente o a 4 ºC antes de realizar la prueba ya que las proteasas de las secreciones vaginales pueden alterar las IGFBP-1 si se conserva durante más de seis horas. 7- ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD La prueba AmnioMonlabTest está envasada en una bolsa de aluminio con bolsita desecante. La prueba debe almacenarse en un lugar fresco y seco entre 2 y 30 C. El kit tiene una vida útil de 18 meses a partir de la fecha de fabricación. No deben congelarse las tiras y deben protegerse de la humedad. Una vez abierta la bolsa, la prueba debe realizarse en un máximo de una hora. 8- PRECAUCIONES 1) Utilice guantes desechables al manipular material potencialmente infeccioso y al realizar el análisis. 2) No ingiera alimentos, ni fume ni beba al manipular las muestras. 3) Limpie los vertidos a fondo mediante un desinfectante adecuado. 4) No utilice el kit después de la fecha de caducidad. 5) No abra la bolsa de aluminio hasta que alcance la temperatura ambiente para evitar la condensación. 6) Para obtener los mejores resultados, siga el procedimiento de la prueba y las instrucciones de almacenamiento al pie de la letra. 7) No reutilice tiras reactivas, hisopos ni tubos de disolución. 9- RECOGIDA Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS Utilice el hisopo de dacrón esterilizado para recoger secreciones de la pared vaginal. Abra la bolsa y coloque el hisopo en la vagina a cinco centímetros de profundidad durante un minuto. Como alternativa, se puede utilizar un espéculo y la secreción vaginal se puede recoger dejando el hisopo en la vagina a cinco centímetros de profundidad durante 15 segundos. Debe evitarse la recogida de muestras del cuello uterino o del fondo de saco posterior. Las células epiteliales localizadas en esas zonas pueden contener niveles elevados de IGFBP-1 fosforiladas que pueden provocar una reacción cruzada con la prueba. 10- CONTROL DE CALIDAD La prueba lleva incorporado un procedimiento de control interno (línea de control) que permite controlar que ese procedimiento se ha realizado de forma correcta. 11- PROCEDIMIENTO 1) Espere a que el kit completo y las muestras alcancen la temperatura ambiente antes de realizar la prueba. 2) Una vez que se abra la bolsa, debe utilizarse antes del transcurso de una hora. 3) Abra el vial de dosis unitaria y colóquelo en posición vertical sobre una superficie llana y horizontal. 4) Sumerja el exudado en el vial de dosis unitaria y gírelo durante 10 segundos y deseche el exudado. 5) Introduzca la tira en el vial con las flechas hacia abajo. Golpee la varilla con suavidad en el fondo del tubo para facilitar la migración, Mantenga la tira en el tubo en posición vertical durante 10 minutos. 6) Lea el resultado en los diez minutos posteriores a la inmersión de la tira en el tubo. No interprete ninguna banda de prueba que aparezca 15 minutos después de sumergir la tira en el vial. 4
5 12- INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS POSITIVO: Presencia de una línea de prueba de color morado, incluso si la intensidad es débil, y una línea de control morada Presencia de líquido amniótico en la muestra NEGATIVO: Ausencia de una línea de prueba morada y presencia de una línea de control morada El líquido amniótico no está presente en la muestra NO VÁLIDO: Ausencia de banda de control de color morado Las dos causas más frecuentes de invalidez de los resultados son: un procedimiento erróneo y una viscosidad elevada de la muestra. La prueba debe realizarse de nuevo con una nueva tira 13- CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO Límite de detección: Se evaluaron varias muestras de líquido amniótico del segundo y tercer trimestre en un ensayo de adición. En todos los casos, AmnioMonlabTest tuvo la capacidad de detectar al menos 1 µl de líquido amniótico. Evaluación clínica: En un estudio clínico hospitalario, se comparó la prueba AmnioMonlabTest con otra prueba de flujo lateral con tiras reactivas para detectar RPM. Ya que no existen medios verificables para confirmar el diagnóstico de RPM leve para la validación de las pruebas biológicas, se considera como confirmado si el parto tiene lugar dentro de las 48 horas posteriores a la prueba. Este es un criterio subjetivo que suele admitirse por parte de los ginecólogos. En 94 casos completos: - Las dos pruebas dieron un resultado negativo en 31 casos en los que el parto siempre tuvo lugar transcurridas las 48 horas posteriores a la prueba; - Las dos pruebas sólo dieron un resultado positivo en 38 casos. En 37 casos, el parto tuvo lugar dentro de las 48 horas siguientes a la prueba; - En los 25 casos restantes, siempre se dio la misma discrepancia: la prueba de AmnioMonlabTest resultó positiva mientras que la otra prueba RPM dio negativa; sólo en dos casos, el parto tiene lugar transcurridas 48 horas desde la realización de la prueba y en todos los demás, 48 horas antes de la prueba; Los resultados muestran una mayor sensibilidad para la prueba AmnioMonlabTest, sin pérdida significativa de la especificidad en comparación con la otra prueba. Número de muestras Aparición del parto AmnioMonlabTest Otra prueba 31 Más de 48 horas después de la prueba OPTIMA Más de 48 horas después de la prueba Más de 48 horas después de la prueba Dentro de las 48 horas Dentro de las 48 horas + - 5
6 AmnioMonlabTest CON ROTURA El parto ocurre dentro de las 48 horas SIN ROTURA El parto ocurre después de las 48 horas posteriores a la prueba AmnioMonlabTest POSITIVO 60 3 AmnioMonlabTest NEGATIVO 0 31 Sensibilidad = 60/60 = 100% Especificidad = 31/34 = 91% OTRA PRUEBA CON ROTURA El parto ocurre dentro de las 48 horas SIN ROTURA El parto ocurre después de las 48 horas posteriores a la prueba PRUEBA POSITIVA 37 1 PRUEBA NEGATIVA Sensibilidad = 37/60 = 62% Especificidad = 33/34 = 97% 14- BIBLIOGRAFÍA 1. Friedman ML, McElin TW. Diagnosis of ruptured fetal membranes. Am J Obstet Gynecol 1969:104: Steinman G, Kleiner GJ, Greston WM. Spontaneous rupture of membranes. NY St. J Med 1979: Koninckx PR, Trappeniers H, van Assche FA. Prolactin concentration in vaginalfluid: a new method for diagnosing ruptured membranes. Br J Obstet Gynaecol 1981;88: Rochelson BL, Richardson DA, Macri JN. Rapid assay: possible application in the diagnosis of premature rupture of the membranes. Obstet Gynecol 1983;62: Bell SC, Hales MW, Patel SR, Kirwan PH, Drife JO, Milford-Ward A. Amniotic fluid concentrations of secreted pregnancyassociated endometrial alpha1 and alpha2 globulins (alpha1 and alpha2 PEG). Br J Obstet Gynaecol 1986:93: Suikkari AM, Rutanen EM, Seppällä M. Circulating levels of immunoreactive insulin-like growth factor-binding protein in nonpregnant women. Hum Reprod 1987:2: Bell SC, Keyte JW; N-terminalo amnio acid sequence of human pregnancy-associated endometrial alpha1-globulin, an endometrial insulin-like growth factor (IGF) binding protein Evidence for two small molecular weight IGF binding proteins. The Endoc Soc 1988: Rutanen EM, Pekonen F, Kärkkainen T. Measurement of insulin-like growth factor binding protein-1 in cervical/vagonal secretions: comparison with the ROM-check membrane immunoassay in the diagnosis of ruptured fetal membranes. Clin Chim Acta 1993:214: Medina TM, Hill DA. Preterm premature rupture of membranes: diagnosis and management. Am Famil Physic 2006:73: Lockwood CJ, Wein R, Chien D, Ghidini A, Alvarez M, Berkowitz RL. Fetal membrane rupture is associated with the presence of insulin-like growth factor-binding protein-1 in vaginal secretions. Am J Obstet Gynecol 1994;171: Guibourdenche J, Luton D, André E, Noël M, Porquet D. Détection rapide de l Insulin-like growth factor-binding protein-1 et de la fibronectine fœtale dans les sécrétions cervico-vaginales pour le diagnostic de la rupture prématurée des membranes. Ann Clin Biochem 1999 :36 : Sucak A, Moroy P, Cakmak P, Mungan T, Mollamahmutoglu L, Danisman N. Insulin-Like Growth Factor Binding Protein-I; a rapid detection of amniotic fluid leakage after amniocentesis. Turk J Med Sci 2005:35: Talabani H, Recoules A, Grenier S, Luton D, Paper T, Porquet D, Oury JF, Guibourdenche J. L alpha1-microglobuline placentaire dans les sécrétions vaginales : un nouveau marqueur de la rupture prématurée des membranes. Act Pharm Biol Clin 2005 :12 : Akercan F, Cirpan T, Kazandi M, Terek MC, Mgoyi l, Ozkinay E. The value of insulin-like growth factor binding protein-1 in the cervical-vagonal secretion detected by immunochromatographic dipstick test in the prediction of delivery in women with clinically unconfirmed preterm premature rupture of membranes. Eur J Obstet Gynecol Rep Biol 2005:121:
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