PRÁCTICA 01 EL MICROSCOPIO COMPUESTO
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- Pedro Díaz Alvarado
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1 PRÁCTICA 01 EL MICROSCOPIO COMPUESTO OBJETIVOS: 1. Recordar las partes mecánicas y ópticas del microscopio. 2. Comprender la interrelación entre parte óptica y mecánica. 3. Manejar perfectamente el mecanismo de enfoque del microscopio. 4. Practicar lo estudiado en enfoques de preparaciones de práctica. INTRODUCCIÓN MATERIAL: * Microscopios * Preparaciones con letras * Preparaciones de ensayo El microscopio (mikrós, pequeño y skopéoo, observar) fue acuñado con este nombre por Jean Faber en Ya los antiguos babilonios utilizaban lupas; pero el verdadero impulsor del microscopio fue Anton van Leeuwenhöek ( ) que construía microscopios con lentes convexas y observaba distintas estructuras, fue el primero que dibujó y observó Protozoa. Hay diversas clases de microscopios, simple, de contraste de fases, electrónico, de barrido, etc; nosotros usaremos el compuesto, que consta: a) Parte mecánica, b) Parte óptica c) Sistema de iluminación. La parte mecánica ha sido estudiada en la ESO y 1º de BAC, por lo tanto, en este curso se estudiará la parte óptica y el sistema de iluminación. 1. PARTES ÓPTICAS E ILUMINACIÓN DEL MICROSCOPIO 1.1. SISTEMA DE REFRACCIÓN Un microscopio compuesto tiene dos lentes, objetivo (situado cerca del objeto) y ocular (situado cerca del ojo). El aumento primario del objeto es producido por el objetivo, y el aumento final se realiza en el ocular. Microscopio - 1
2 El poder de resolución es la capacidad de mostrar distintos y separados dos puntos muy cercanos. Cuanto mayor sea el poder de resolución, mayor será la definición del objeto. El poder de resolución depende de ë (longitud de onda utilizada) y de AN: APERTURA NUMÉRICA (característica de la lente que depende del índice de refracción del medio y del seno del ángulo de apertura). Como ë es constante, el poder de resolución depende de AN, la apertura numérica. El ojo tiene un poder de resolución de 0,1 mm; y el microscopio de 0,12 F. Un diámetro de 0,2 Fm, si se aumenta 1000 veces aparecerá como un objeto de 0,2 mm El poder de resolución por lo tanto es directamente proporcional a ë, e inversamente proporcional a AN 1 Un factor que afecta a la apertura numérica es, además, de la talla de la lente, el medio a través del cual atraviesa la luz. Mientras el objetivo está separado del objeto por el aire, la AN nunca es mayor que 1; si se desean valores mayores que 1, el objetivo deberá estar inmerso en aceite de cedro que aumente el índice de refracción entre 1,2 y 1,4 (esta lente se denomina lente de inmersión y se diferencia de las otras con la palabra oil. Este objetivo nunca se utiliza sin aceite y una vez utilizado hay que limpiarlo rápidamente para que no se seque el aceite SISTEMA DE ILUMINACIÓN Este sistema es importante, ya que la luz debe enfocarse sobre la preparación mediante el condensador; subir o bajar el condensador hace que el foco de luz se disponga en un punto. El diafragma controla el diámetro del círculo de luz que alcanza el objeto. Si la luz es brillante se deberá cerrar el diafragma. Otro aspecto que varía la nitidez de la observación es la profundidad de campo (espesor de la preparación). A mayor aumento la profundidad es menor de 1 Fm. La profundidad de campo es inversamente proporcional al aumento utilizado. λ PR = 1 AN Microscopio - 2
3 2. MANEJO DEL MICROSCOPIO El microscopio es un aparato delicado y de precisión, en consecuencia, su manejo ha de realizarse con sumo cuidado. Bajo ningún concepto se desmontará pieza alguna, ya que este hecho podría acarrear desajustes de difícil solución. 1. COLOCAR LA PLATINA EN UNA POSICIÓN ALEJADA DE LOS OBJETIVOS, CON EL OBJETIVO DE MENOR AUMENTO PREPARADO PARA SU UTILIZACIÓN. LA PLATINA DEBE ESTAR DIRIGIDA HACIA EL OBSERVADOR. 2. PONER LA PREPARACIÓN SOBRE LA PLATINA Y CENTRARLA. 3. CONECTAR LA LUZ Y ABRIR COMPLETAMENTE EL DIAFRAGMA. 4. SUBIR LA PLATINA HASTA LA PROXIMIDAD DEL OBJETIVO, O BAJAR EL OBJETIVO HACIA LA PROXIMIDAD DE LA PREPARACIÓN CON EL MANDO MACROMÉTRICO. PARA HACER ESTA OPERACIÓN NO MIRAR POR EL OCULAR. 5. MIRAR POR EL OCULAR Y ALEJAR EL OBJETIVO DE LA PREPARACIÓN (BIEN ALEJANDO EL OBJETIVO O LA PLATINA) CON EL MACROMÉTRICO HASTA QUE SE VEA CON CLARIDAD. 6. GRADUAR LA INTENSIDAD DE LA LUZ CON EL DIAFRAGMA. CUANTO MENOR SEA EL AUMENTO DEBERÁ ESTAR MÁS CERRADO. 7. FIJARSE EN EL AUMENTO DEL OBJETIVO Y PASAR A OTRO OBJETIVO MOVIENDO EXCLUSIVAMENTE EL REVOLVER. AHORA SE MANEJARÁ EL TORNILLO MICROMÉTRICO PARA ENFOCAR. 8. PARA RETIRAR LA PREPARACIÓN: PONER EL OBJETIVO DE MENOR AUMENTO Y ALEJAR EL OBJETIVO DE LA PREPARACIÓN CON EL TORNILLO MACROMÉTRICO. Microscopio - 3
4 3. PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO Rellenar los distintos recuadros en blanco siguientes e informarse bibliográficamente sobre la marcha de los rayos luminosos a través de las lentes. Microscopio - 4
5 AUTOEVALUACIÓN a) Definir los siguientes términos: macrométrico revólver objetivo oil tornillo de enfoque pie platina aumento aceite de cedro diafragma ocular condensador charnela lámpara enfoque micrométrico brazo espejo b) )De qué partes del microscopio depende la correcta iluminación? c) )A qué parte del microscopio debe dirigirse la luz de la lámpara? d) )Cómo varía la iluminación al abrir o cerrar el diafragma? e) )Cómo varía la iluminación al desplazar el condensador? f) )Cuántos grupos de lentes hay? )Qué nombre reciben? g) Escribir e interpretar las inscripciones que llevan cada grupo de lentes. h) Enfocando preparaciones con letras interpreta el funcionamiento de los tornillos macro y micrométrico. i) )Qué se entiende por profundidad de campo? Microscopio - 5
6 j) )Cuáles son las tres características que tiene la imagen final del microscopio compuesto? Al desplazar el portaobjetos en qué sentido se mueve la imagen al mirar por el ocular. k) )Cuántas imágenes se forman del objeto desde la preparación hasta el ojo? l) )Cómo se calcula el aumento total del microscopio? m) Analizar las relaciones que hay entre: * El aumento del objetivo y del ocular y el campo de la preparación, * el enfoque y los distintos objetivos según los vayamos cambiando, * el aumento y la iluminación. n) )Por qué es interesante centrar lo que nos interesa observar de la preparación si queremos observarlo a gran aumento? MICROSCOPIO N1 GRUPO N1 FECHAS DE UTILIZACIÓN: RECOGER Y LIMPIAR todo el material; dejar el sitio limpio y ordenado. Sello del Laboratorio Microscopio - 6
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