BANCO DE TEJIDOS FETALES
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- Pedro Parra Vázquez
- hace 7 años
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1 una aventura fetal BANCO DE TEJIDOS FETALES Joan Carles Ferreres, Núria Camats, Berta Domínguez, Francesc Borràs, Teresa Vendrell, Elena Carreras, M. Angeles Sánchez, Núria Torán Comité científico del BTF-HUVH. Servicios de Anatomía Patológica, Obstetricia y Unidad de Genética. HUVH. UAB Curso de Primavera Macroscopía: el arte del Tallado, SEAP, 2010
2 antecedentes solicitud de tejido fetal a los patólogos que tenemos acceso a este tipo de muestras necesidad de regulación (consentimiento informado / CEIC / estructura de banco de tejidos) disponibilidad de este tipo de muestras
3 el proyecto: la oportunidad HUVH: aproximadamente 150 ILEs/año de fetos de entre semanas de gestación aproximadamente ILEs/año de fetos de menos de semanas, obtenidos mediante legrado obstétrico posibilidad de establecer un circuito de obtención rápida de las muestras (1 hora) planteamiento como proyecto de investigación posibilidad de contratar un becario
4 trabajo colaborativo Servicio de Obstetricia diagnóstico prenatal selección de los casos práctica de la ILE Unidad de Genética Clínica soporte al diagnóstico BTF Servicio de Anatomía Patológica realización de la autopsia diagnóstico obtención de las muestras registro almacenamiento extracción de ADN control de calidad articulación del funcionamento como Banco de Tejidos
5 qué se ha hecho? Redacción de un Reglamento de Funcionamento: Comité de Dirección y Comité Científico del BTF. Aprobación por parte de la Gerencia del HUVH Integración dentro del Biobanco HUVH (2009) Desde 2003 recogida de material: muestras tisulares distintas en los fetos obtenidos mediante parto inducido / las muestras de tejidos que se reconocen macroscópicamente en el material de legrado obstétrico congelación en nitrógeno líquido isopentano Criomoldes (OCT) tubos 1,5 ml
6 qué se está haciendo? Inclusión en el BTF de los casos que cumplen: consentimiento informado (para BTF y para autopsia) Autorización de estudio tisular de pérdidas gestacionales autorizo la recogida de tejidos y anejos para estudio terapéutico y genético Tiempo de recogida de menos de 1 hora desde la expulsión No enfermedad infecciosa Percepción de que el material es idóneo: Aspecto macroscópico de diversos tejidos (SNC, hígado...)
7 marco legal Ley de despenalización del aborto (Ley Orgánica 9/95, de 5 de julio). para evitar un grave peligro para la vida o la salud física o psíquica de la embarazada que el embarazo sea consecuencia de un hecho constitutivo de delito de violación siempre que el aborto se practique dentro de las 12 primeras semanas de gestación y que el mencionado hecho hubiese sido denunciado. que se presuma que el feto habrá de nacer con graves taras físicas o psíquicas, siempre que el aborto se practique dentro de las 22 primeras semanas de gestación. Ley de salud sexual y reproductiva y de la interrupción voluntaria del embarazo (Ley Orgánica 2/2010, de 3 de marzo) a petición de la embarazada durante las 14 primeras semanas grave riesgo para la vida o la salud de la embarazada dentro de las 22 semanas. riesgo de graves anomalías en el feto (hasta la 22 semana de gestación) cuando se detecten anomalías incompatibles con la vida o cuando se detecte una enfermedad extremadamente grave e incurable en el feto (en cualquier momento de la gestación, cuando se realice el diagnóstico)
8 tipología de la ILE, ventajas e inconvenientes Realización de la ILE: 2 situaciones distintas Gestaciones de menos de semanas de gestación: Legrado obstétrico Tiempo 0 controlado a efectos de demora en la recogida de muestras. Material habitualmente fragmentado. Reconocimiento de cantidad variable de tejidos Material obtenido en condiciones óptimas de preservación de ADN y ARN Cantidad limitada
9 tipología de la ILE, ventajas e inconvenientes Realización de la ILE: 2 situaciones distintas Gestaciones de entre 17 y 22 semanas de gestación: Inducción del parto (o excepcionalmente intervención cesárea) Inicio de la inducción aproximadamente a las 22 horas del día anterior Expulsión entre las 8-20 horas del día siguiente Tiempo 0 menos controlado. Únicamente tiempo desde la expulsión Abundante material con posibilidad de recogida de todo tipo de tejidos Mayor facilidad para conseguir tejidos a demanda
10 ILE y autopsia fetal Integración de la recogida de muestras en el acto médico de la autopsia fetal. La recogida de muestras no puede comprometer la calidad de la autopsia La realización de la autopsia debe intentar no demorar la recogida de muestras para el BTF Profesionales altamente especializados (equipo de patólogos pediátricos) Autopsia: elemento fundamental para corroborar los diagnósticos prenatales y elemento básico para realizar consejo genético a la pareja
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12 aportación de la autopsia al BTF Registro del caso en una base de datos: Aspectos técnicos (fecha, hora, tiempo...) características de almacenamiento, localización de las muestras Datos gestación Tejidos congelados/caso Codificación de diagnósticos principales y dx secundarios una vez realizado el informe de la autopsia (código SALUS) La codificación de los diagnósticos autópsicos en la BD del banco aporta gran valor cualitativo a la hora de seleccionar los casos
13 CÓDIGO TEJIDO CÓDIGO TEJIDO tipos de muestras AD Adrenales AO Aorta P Pulmón BA Bazo PD Pulmón dcho CA Cartílago (rodilla) PI Pulmón Izq CO Corazón (ápex) R Riñón CR Cárdias RD Riñón dcho OV, TE Genitales RI Riñón izq HI Hígado TI Timo HU Hueso. (costillas) TR Tiroides IN, ID, C1, C2, C3, C4 Intestino: delgado, colon VU Vejiga urinaria MU Músculo (psoas) PC Placenta OJ Globo ocular CU Cordón umbilical PA Páncreas PL Piel
14 tipos de muestras CÓDIGO S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S0 SE DNA HI RNA HI RNA P TEJIDO SNC. Corteza frontal. Primer corte (sin ventrículo) SNC. Corteza frontal. Con ventrículo. SNC. Núcleos basales SNC. Núcleos basales SNC. Corteza occipital. Con ventrículo. SNC. Corteza occipital. Primer corte (sin ventrículo) SNC. Cerebelo SNC. Tronco encefálico SNC. Cerebelo y tronco encefálico SNC (sin especificar) Corteza cerebral Hígado. Muestra para extracción de DNA. Hígado. Muestra para extracción de RNA. Pulmón. Muestra para extracción de RNA.
15 tipos de muestras CÓDIGO S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S0 SE DNA HI RNA HI RNA P TEJIDO SNC. Corteza frontal. Primer corte (sin ventrículo) SNC. Corteza frontal. Con ventrículo. SNC. Núcleos basales SNC. Núcleos basales SNC. Corteza occipital. Con ventrículo. SNC. Corteza occipital. Primer corte (sin ventrículo) SNC. Cerebelo SNC. Tronco encefálico SNC. Cerebelo y tronco encefálico SNC Hasta 40 muestras tisulares diferentes por caso Corteza cerebral Hígado. Muestra para extracción de DNA. Hígado. Muestra para extracción de RNA. Pulmón. Muestra para extracción de RNA.
16 Hasta 31/12/2009 Banco de Tejidos Fetales Año Nº casos Muestras Total
17 Legrados SG Nº Casos * Totales 494 Banco de Tejidos Fetales Inducción parto SG Nº Casos * Totales 483 * Hasta 15/04/2010
18 Tipología de los casos Banco de Tejidos Fetales Casos control: ILE por causa materna Cariotipo normal Ausencia de anomalías en la autopsia Con patología: Alteración cromosómica Anomalía congénita Selección de muestras según requerimientos del grupo investigador (edad gestacional, tejido, patología ) Posibilidad de obtener muestras a demanda de forma prospectiva
19 control de calidad del material Extracción de RNA de un 5-10% de los casos congelados y análisis de las diferentes subunidades 18S y 28S ribosomales. Encuesta a receptores del material del BTF
20 Banco de Tejidos Fetales CASOS TOTALES ( ) Cardiopatías 35,00 Alteraciones óseas % respecto al total de casos 30,00 25,00 20,00 15,00 10,00 5,00 0,00 8,15 2,37 11,56 3,51 20,02 4,85 1 Diagnósticos 1,03 4,95 12,38 28,79 Alteraciones del SNC Alteraciones nefrourológicas Trisomía 21 Trisomía 18 Trisomía 13 Otras cromosomopatías Otras alteraciones Evaluación morfológica normal
21 Banco de Tejidos Fetales CASOS TOTALES ( ) Cardiopatías 35,00 Alteraciones óseas % respecto al total de casos 30,00 25,00 20,00 15,00 10,00 5,00 0,00 8,15 2,37 11,56 3,51 20, % 4,85 1,03 4,95 12,38 28,79 Alteraciones del SNC Alteraciones nefrourológicas Trisomía 21 Trisomía 18 Trisomía 13 Otras cromosomopatías Otras alteraciones 1 Diagnósticos Evaluación morfológica normal
22 34.68 %
23 Alteraciones cromosómicas (n=292) ( ) Banco de Tejidos Fetales semanas de gestación
24 muestras de más de 950 fetos (8-22 semanas) extracción de DNA en 288 casos control de calidad de las muestras (RNA) qué se ha hecho? colaboración con 35 proyectos de investigación suministro de aproximadamente 650 muestras
25 funcionamiento del BTF circuito de solicitudes, de tramitación (Comité Científico CEIC), respuesta y convenio de colaboración con la Fundació de Recerca Hospital Universitari Vall d Hebron Solicitud Grupo de Investigación Evaluación Comité Científico BTF Evaluación CEIC Cálculo costes Convenio colaboración Selección de muestras y envío BTF Estudio viabilidad técnica Criterios: -Proyectos Nacionales -Proyectos evaluados -Proyectos investigadores HUVH Envio convenio y costes Firma convenio y aceptación costes
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28 futuro selección de casos: mantener un fondo estable de controles y casos con patologías frecuentes incorporar casos de patologías muy infrecuentes incorporar casos de patologías a demanda en función de las solicitudes hacer difusión de la existencia del BTF y de la forma de acceder al material (página web) realizar estudios de investigación propios
29 Contacto con el BTF: muchas gracias!
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