Petrifilm Recuento de Enterobacteriaceae

Transcripción

1 3 Petrifilm Recuento de Enterobacteriaceae Guía de Interpretación Recuento de Enterobacteriaceae = 13 Es fácil contar las colonias de Enterobacteriaceae en placas Petrifilm Recuento de Enterobacteriaceae. Un indicador rojo en la placa colorea todas las colonias, y el film superior atrapa el gas si es producido por las bacterias. Las bacterias productoras de ácido aparecen como colonias rojas rodeadas por una zona amarilla asociada a la producción de ácido que es detectado por el indicador de ph del medio. Los productores de ácido y gas se consideran presuntamente Enterobacteriaceae. Las colonias de Enterobacteriaceae pueden tener diferentes características en el Petrifilm Recuento de Enterobacteriaceae. Las Enterobacteriaceae pueden producir colonias asociadas a burbujas de gas (ver figura 1, círculo 1). Asimismo, pueden producir colonias rojas con zonas ácidas (ver figura 1, círculo 2). Por último, las Enterobacteriaceae producen colonias rojas asociadas a una zona ácida y a burbujas de gas (ver figura 1, círculo 3). Los círculos 1 y 3 de la figura 1 muestran también como las formas de las burbujas pueden variar. Algunas veces el gas defonlla la colonia y hace que la colonia «perfile» la burbuja como en el círculo 3. Recuento de Enterobacteriaceae = 9 La figura 2 muestra una placa Petrifilm Recuento de Enterobacteriaceae con algunas Enterobacteriaceae y un gran número de colonias de Gram negativos no Enterobacteriaceae.

2 3 4 Recuento de Enterobacteriaceae = 0 Observar el cambio del color del gel en las figuras 3 a 8. Al aumentar el recuento de Enterobacteriaceae, el color del gel cambia de púrpura a amarillo o crema. Recuento de Enterobacteriaceae = 35 Recuento de Enterobacteriaceae = 77 La gama recomendada de recuento en las placas Petrifilm Recuento de Enterobacteriaceae es entre colonias. Las muestras con recuentos mayores de 100 Enterobacteriaceae por placa se deben estimar. Ver figura 5. 5 Recuento de Enterobacteriaceae = TNTC (est) Las placas Petrifilm Recuento de Enterobacteriaceae con colonias demasiado numerosas para el recuento (TNTC) tienen un color del gel amarillento además de una de las siguientes características : 1) colonias muy pequeñas, o 2) muchas burbujas de gas. Ver figura 6. 6

3 7 8 Recuento de Enterobacteriaceae = TNTC (est) En la figura 7, el recuento es tan alto que las zonas ácidas y las burbujas de gas no se ven claramente. Un color amarillento del gel indica que el resultado es TNTC. Recuento de Enterobacteriaceae = TNTC (est) La placa Petrifilm Recuento de Enterobacteriaceae de la figura 8 tiene dos características indicando placas TNTC : 1) color amarillento del gel y 2) muchas colonias pequeñas. Recuento de Enterobacteriaceae = 44 Pueden aparecen burbujas como artefactos debidos a inoculaciones inadecuadas de las placas Petrifilm Recuento de Enterobacteriaceae. En este caso, las burbujas tienen forma irregular y no se asocian a una colonia roja. Ver figura 9. 9 Recuento de Enterobacteriaceae = 2 Las partículas alimenticias a menudo tienen formas irregulares o filamentosas y no están asociadas a burbujas de gas o zonas ácidas. Ver figura

4 11 Recuento de Enterobacteriaceae = 29 Las partículas alimenticias también pueden aparecer como puntos oscuros pero no asociados a burbujas de gas o zonas ácidas. Ver figura 11.

5 Petrifilm Recuento de Enterobacteriaceae Instrucciones de uso Almacenamiento Petrifilm Petrifilm Petrifilm 1 Refrigerar las bolsas cerradas ( 8 C). Usar antes de la fecha de caducidad impresa en la bolsa. 2 Para cerrar las bolsas, doblar los extremos y cerrarlos con celo. 3 Mantener las bolsas cerradas de nuevo a 25 C y < 50% HR. No refrigerar las bolsas abiertas. Usar las placas Petrifilm en 1 mes desde su apertura. Préparación 4 Preparar una dilución del producto alimenticio a 1:10 o superior. Pesar o pipetear la muestra en una bolsa Whirlpac, bolsa Stomacher, botella de dilución o cualquier otro contenedor estéril apropiado. Inoculación 5 Añadir una cantidad adecuada de diluyente. Pueden ser los métodos standard de tampón fosfato, agua peptonada al 0,1 %, agua destilada, solución salina fosfato tamponada, o tampón de Butterfield. Para productos ácidos, ajustar el ph entre 6,5 y 7,5 con NaOH 1 N. No usar tampones que contengan citrato de sodio o tiosulfato. 6 Mezclar u homogeneizar la muestra mediante los métodos usuales. 7 Colocar la placa Petrifilm en una superficie plana. Levantar el film superior. 8 Con una pipeta perpendicular a la placa Petrifilm, colocar 1 ml de muestra en el centro del film inferior. 9 Bajar el film superior con cuidado evitando introducir burbujas de aire. No dejarlo caer.

6 cara con REBORDE cara LISA Con la cara lisa hacia abajo, colocar el aplicador en el film 10 superior sobre el inóculo. Con cuidado, presionar el aplicador 11 para repartir el inóculo sobre el área circular. No girar ni deslizar el aplicador. Levantar el aplicador. Esperar un 12 minuto a que solidifique el gel. Incubación Interpretación <70 F 13 Incubar las placas Petrifilm cara arriba en pilas de hasta 20 placas a temperatura de 35 C ± 1 C ó 37 C ± 1 C durante 24 ± 2 horas. Leer las placas Petrifilm en un 14 contador de colonias standard tipo Quebec o una fuente de luz con aumento. Para leer los resultados, consultar la Guía de Interpretación. Para aislar colonias para posterior 15 identificación, levantar el film superior y coger la colonia del gel. Comentarios adicionales Nota: recordar inocular y poner el aplicador antes de pasar a la siguiente placa. 3 3M Espana, S.A. Departamento de Microbiologia C/Juan Ignacio Luca de Tena, Madrid Tel. : Fax : For Europe, please contact : Laboratoires 3M Santé Tél. : (33) Fax : (33)