NORMA TÉCNICA ECUATORIANA NTE INEN-ISO

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1 Quito - Ecuador NORMA TÉCNICA ECUATORIANA NTE INEN-ISO 17375:2013 NÚMERO DE REFERENCIA ISO 17375:2006 (E) ALIMENTOS PARA ANIMALES. DETERMINACIÓN DE AFLATOXINA B 1 (IDT) Primera Edición ANIMAL FEEDING STUFFS DETERMINATION OF AFLATOXIN B1 First Edition DESCRIPTORES: alimentos, animales, ensayo, aflatoxina B1 ICS:

2 ICS: CONTENIDO Página Prologo.. ii 1 Objeto y campo de aplicación 1 2 Referencias normativas Principio 1 4 Reactivos Equipos 4 6 Procedimiento Acondicionamiento de la columna de inmunoafinidad CIA Extracción Limpieza de Inmunoafinidad Derivatizacion post-columna Curva de calibración Cálculo Procedimiento de adición para la determinación de la recuperación 8 7 Precisión Ensayo de interlaboratorio Repetibilidad Reproducibilidad Informe de prueba.. 9 Anexo A (informativo) Resultados de un ensayo interlaboratorio 10 Bibliografia 11 -i

3 ICS: Prólogo ISO (la Organización Internacional de Normalización) es una federación mundial de organismos nacionales de normalización (Organismos miembros de ISO). El trabajo de preparación de las normas internacionales normalmente se realiza a través de la norma ISO comités técnicos. Cada organismo miembro interesado en una materia para la cual un comité técnico ha sido, tiene el derecho de estar representado en dicho comité. Las organizaciones internacionales, gubernamentales y organizaciones no gubernamentales, en coordinación con ISO, también participan en el trabajo. ISO colabora estrechamente con la Comisión Electrotécnica Internacional (IEC) en todas las materias de normalización electrotécnica. Las Normas Internacionales se redactan de acuerdo con las reglas establecidas en las Directivas ISO/IEC, Parte 2. La tarea principal de los comités técnicos es preparar Normas Internacionales. Proyecto de Normas Internacionales adoptados por los comités técnicos son enviados a los organismos miembros para su votación. La publicación como Norma Internacional requiere la aprobación por al menos el 75% de los organismos miembros con derecho a voto. Se llama la atención a la posibilidad de que algunos de los elementos de este documento pueden ser objeto de derechos de patente. ISO no se hace responsable de la identificación de cualquiera o todos los derechos de dichas patentes. La ISO fue preparada por el Comité Técnico ISO/TC 34, Productos alimenticios, Subcomité SC 10, Alimentos para animales. Prólogo Nacional Esta norma nacional NTE INEN-ISO es una traducción idéntica de la norma internacional ISO 17375:2006 Animal feeding stuffs. Determination of Aflatoxin B 1, Primera edición. Esta norma reemplaza a la NTE INEN 1563:1989. Alimentos zootecnicos. Determinación del contenido de Aflatoxina B 1, que se considera obsoleta técnicamente debido a los desarrollos internacionales. Para el propósito de esta norma, se han hecho los siguientes cambios editoriales: a) Las palabras esta norma internacional han sido reemplazadas por esta norma nacional -ii

4 ICS: Norma Técnica Ecuatoriana Voluntaria ALIMENTOS PARA ANIMALES DETERMINACIÓN DE AFLATOXINA B 1 NTE INEN-ISO 17375: Objeto y campo de aplicación Esta norma nacional especifica un método para la determinación de aflatoxina B 1 en los alimentos zootécnicos usando cromatografía líquida de alto rendimiento con derivatización post-columna. Es aplicable a los alimentos zootécnicos con un contenido de grasa de hasta el 50%. El límite de cuantificación de este método ha demostrado ser mejor que 0,5 µg/kg para la aflatoxina B 1 para una relación señal-ruido de 6. NOTA El método se basa en el que se da en la Referencia [1]. 2 Referencias normativas Los siguientes documentos de referencia son indispensables para la aplicación de este documento. Para referencias fechadas, sólo aplica la edición citada. Para las referencias sin fecha se aplica la última edición del documento referido (incluyendo cualquier modificación). ISO 3696:1987, Water for analytical laboratory use Specification and test methods 3 Principio Una muestra de ensayo se extrae con una solución de disolvente (acetona/agua). El extracto de la muestra se filtra, se diluye con agua o una solución salina tamponada de fosfato a una concentración de disolvente especificada. Una porción de ensayo se aplica sobre una columna de inmunoafinidad (CIA) que contiene anticuerpos específicos para la aflatoxina B 1. La aflatoxina B 1 se elimina de la CIA con metanol puro, y luego es cuantificada por cromatografía líquida de fase inversa de alto rendimiento (RP-HPLC) con derivatización post-columna (PCD) que implica la bromación. El PCD se logra con bromo o perbromuro de bromhidrato de piridinio (pbpb), cualquiera de los dos generados electroquímicamente seguido de detección de fluorescencia. 4 Reactivos Utilizar únicamente reactivos de grado analítico reconocido, salvo que se especifique lo contrario. ADVERTENCIA - Este método requiere el uso de líquidos tóxicos inflamables, tales como acetona, metanol y acetonitrilo. Evite el contacto y manténgase alejado del calor, chispas o llama abierta. NOTA Los procedimientos de descontaminación de residuos de laboratorio [2], [3] se han desarrollado y validado por el Agencia Internacional para la Investigación sobre el Cáncer (OMS). 4.1 Agua, cumpliendo con grado 3 de acuerdo con la norma ISO 3696: Tampón de fosfato salino (PBS), ph 7,4. La PBS se pueden preparar a partir de cloruro de potasio (0,20 g), fosfato dihidrógeno de potasio (0,20 g), fosfato anhidro disódico de hidrógeno (1,16 g) [o fosfato de hidrógeno disódico dodecahidratado (2,92 g)] y cloruro de sodio (8,00 g) que se añaden a 900 ml de agua purificada. Ajustar el ph a 7,4 (con 0,1 mol/l de HCl o 0,1 mol/l de NaOH según el caso) y diluir la solución hasta 1,0 l. DESCRIPTORES: Alimentos, animales, ensayo, aflatoxina b

5 Documento: NTE INEN-ISO ORIGINAL: Fecha de iniciación del estudio: Fechas de consulta pública: No se realizo Subcomité Técnico: Fecha de iniciación: Integrantes del Subcomité Técnico: NOMBRES: INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA TÍTULO: ALIMENTOS PARA ANIMALES. DETERMINACIÓN DE AFLATOXINA B 1 Mediante compromiso presidencial N 16364, el Instituto Ecuatoriano de Normalización INEN, en vista de la necesidad urgente, resuelve actualizar el acervo normativo en base al estado del arte y con el objetivo de atender a los sectores priorizados así como a todos los sectores productivos del país. Para la revisión de esta Norma Técnica se ha considerado el nivel jerárquico de la normalización, habiendo el INEN realizado un análisis que ha determinado su conveniente aplicación en el país. La Norma en referencia por ser una adopción de una norma internacional no ha sido sometida a consulta pública y por ser considerada EMERGENTE no ha ingresado a Subcomité Técnico. REVISIÓN: Fecha de aprobación anterior por Consejo Directivo Oficialización con el Carácter de por Acuerdo No. de publicado en el Registro Oficial No. de Fecha de iniciación del estudio: Fecha de aprobación: INSTITUCIÓN REPRESENTADA: Código: Otros trámites: : Esta NTE INEN-ISO 17375:2013, reemplaza a la NTE INEN 1563:1989 La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficializada como: Voluntaria Por Resolución No de Registro Oficial No. 105 de

6 Instituto Ecuatoriano de Normalización, INEN - Baquerizo Moreno E8-29 y Av. 6 de Diciembre Casilla Telfs: (593 2) al Fax: (593 2) Dirección General: direccion@inen.gob.ec Área Técnica de Normalización: normalizacion@inen.gob.ec Área Técnica de Certificación: certificacion@inen.gob.ec Área Técnica de Verificación: verificacion@inen.gob.ec Área Técnica de Servicios Tecnológicos: inenlaboratorios@inen.gob.ec Regional Guayas: inenguayas@inen.gob.ec Regional Azuay: inencuenca@inen.gob.ec Regional Chimborazo: inenriobamba@inen.gob.ec URL: