Tema: Géneros Legionella, Haemophilus, Bordetella y Brucella. Departamento de Microbiología Curso 2013/2014

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1 Tema: Géneros Legionella, Haemophilus, Bordetella y Brucella Departamento de Microbiología Curso 2013/2014

2 Legionella spp.: características Cocobacilos gramnegativos pleomórficos. Crecimiento lento. Muy exigentes desde el punto de vista nutricional (medios especiales con L- cisteina, hierro). Aerobios estrictos

3 Legionella spp.: patogenia

4 Legionellapneumophilamultiplicándose dentro de macrófagos

5 Legionella pneumophila: Inhibición de la fusión del fagolisosoma Bacterial Pathogenesis. A Molecular Approach ISBN:

6 Legionella pneumophila

7 Legionella spp.: cuadros clínicos Legionelosis: Neumonía. Necesita tratamiento antimicrobiano (macrólidoso fluoroquinolonas). Fiebre de Pontiac: Similar a una gripe. Sin neumonía. Resolución espontánea sin tratamiento.

8 Legionelosis: Diagnóstico Tinciones: IFD. Cultivo (agar CBYE). Antigenuria. Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (PCR en tiempo real). Serología: IFI.

9 Legionella: Tinción fluorescente Legionella: Cultivo en agar carbón extracto de levaduras

10 Tratamiento Legionelosis Azitromicina. Fluorquinolonas. Eritromicina. Doxiciclina. Rifampicina (nunca sola).

11 Legionella spp.: epidemiología Reservorio medioambiental Aguas estancadas. Agua torres refrigeración. Sistemas aire acondicionado. Crecimiento intracelular (amebas ). Crecimiento en biocapas.. Transmisión Aire contaminado: a partir agua contaminada. No transmisión persona-persona. Profilaxis

12 G. Haemophilus: Características generales BGN pleomórficos. Nutricionalmente exigentes. Aerobios estrictos. Requiere factores especiales en los medios de cultivo para su crecimiento: Factor X = Hemina Factor V = NAD Hematíes lisados (sangre precalentada) AGAR CHOCOLATE

13 CLASIFICACIÓN HAEMOPHILUS Especie Localización H. influenzae Tracto respiratorio H. haemolyticus y boca H. parahaemolyticus H. aegyptius Ojo H. aphrophilus Placa dental H. paraprophilus H. seguis H. ducreyi Tracto genital

14 H. influenzae Cepas capsuladas: Antígeno polisacarido capsular:6 serotipos: a, b, c, d, e, f. Serotipo b más virulento. El 95% de los cuadros son invasivos. Cepas no capsuladas: Menor virulencia. Infecciones menos graves.

15 G. Haemophilus: Tipo Portadores Patogenicidad Serotipo b 2-4 % Otros serotipos (a, c, d, f) No capsuladas 50-80% Inf. sistémicas: meningitis, epiglotitis 1-2 % Rara vez Inf. Localizadas: EPOC, ORL..

16 H. Influenzae : Patogenia FACTORES DE VIRULENCIA: CÁPSULA (tipo b). Pili y adhesinas. IgA-Proteasa. OMPs. LPS. Afinidad por Fe.

17 H. Influenzae : Patogenia Colonización de la mucosa nasofaringea. Cápsula, pili, adhesinas, IgA-Proteasa Invasión de tejidos. Cápsula, LPS Bacteriemia y metástasis a distancia. Infecciones por contigüidad.

18 Cuadros clínicos producidos por H. influenzae tipo b MENINGITIS: Edad: 3 meses 6 años. Clínica: cefalea intensa, fiebre elevada, rigidez de nuca. Mortalidad: 3-10%. Secuelas: 9-45 %. EPIGLOTITIS AGUDA: Edad: 2-7 meses. Clínica: odinofagia, fiebre, disnea. Alta mortalidad si no se inicia el tratamiento rápidamente.

19 Cuadros clínicos H. influenzae NIÑOS Cepas capsuladas: infecciones graves Meningitis. Epiglotitis aguda. Celulitis. Artritis. Neumonía. ADULTOS Cepas NO capsuladas: infecciones menos graves Sinusitis. Otitis Conjuntivitis. Reagudización EPOC.

20 Diagnóstico Obtención de muestras clínicas: LCR, sangre, exudado ótico Tinción de GRAM Cultivo Identificación bioquímica Factores X y V Identificación serológica: Serotipos a-f CIE Aglutinación con partículas de latex

21 Vacunas y tratamiento H. influenzae tipo b VACUNAS CONJUGADAS Polisacárido capsular conjugado con una proteína portadora (toxoide tetánico, diftérico y proteínas de la membrana externa de meningococo). INCORPORADA en los programas de 20 países. Eficacia superior al 90%. TRATAMIENTO -Betalactámicos: Ampilina Amoxicilna-clavulánico Cefalosporinas

22 Género Bordetella Características generales Bacilos gram negativos pleomórficos. Aerobios estrictos. Bacterias exigentes. Requieren medios de cultivo especiales con sangre, albumina, carbón y almidón (Bordet-Gengou). Especies: B. pertussis B. parapertussis B. bronchiseptica

23 B. pertussis: patogenia Transmisión vía respiratoria (gotitas de pfluge). Adherencia al epitelio traqueobronquial ciliado. Adhesión, inmovilización de los cilios y destrucción del epitelio. Producción local de toxinas y enzimas: Toxina pertussis. Pertactina. Toxina dermonecrótica. Hemaglutinina. Citotoxina. Toxina adenilatociclasa. Inflamación y exudado bronquial: TOSFERINA

24 B. pertussis: patogenia

25 Tosferina: cuadro clínico P. INCUBACIÓN: 7-14 días. P. CATARRAL: 1-2 semanas: Mayor contagiosidad Rinorrea. Tos. Conjuntivitis. Febrícula. P. ESTADO: 4-6 semanas. Accesos de tos (10-15 días). Vómitos. Desnutrición. No fiebre alta. COMPLICACIONES: Respiratorias: Otitis. Neumonía. Abdominales: Hernias. Prolapso rectal. Hemorragias: Petequias. Epixtasis. Nerviosas: Convulsiones. Coma. P. DECLINACIÓN: 2-3 semanas.

26 Tosferina: cuadro clínico

27 Diagnóstico microbiológico TOMA DE MUESTRAS Ex. Nasofaringeo (Periodo catarral). CULTIVO. Medio Bordet-Gengou. INMUNOFLUORECENCIA DIRECTA: Falsos positivos. MÉTODOS MOLECULARES: PCR en lavado nasofaringeo DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO: No disponible

28 Vacunas Tosferina Vacuna celular de B. pertussis muerta: Efectos secundarios: Leves: febricula, dolor local, inflamación Graves: convulsiones, daño cerebral (frecuencia < 0.1%) Vacunas acelulares: Monovalente. Toxina. 71% Bivalente. Hemaglutinina. 80% Trivalente. + Pertactina. 84% Tetravalente. + fimbria. 89% Vacuna celular 50% Eficacia

29 Género Brucella Cocobacilos gramnegativos pequeños. No encapsulados e inmóviles. Crecimiento lento. Exigente desde el punto de vista nutricional. Aerobio estricto (CO 2 ). 6 especies: 4 producen brucelosis a humanos.

30 Especies de Brucella productoras de patología en humanos Especie Reservorio B. mellitensis Cabras, ovejas B. abortus Ganado vacuno B. suis Cerdos B. canis Perros

31 Estructura antigénica Lipopolisacárido: Lípido A y polisacárido O (AgB). Cepas R. (B. ovis, B. canis). Polisacárido B: Fase S. Proteínas Membrana Externa: OMP (Ag. Comunes). Antígenos citoplasmáticos.

32 Brucella: Patogenia Patógeno intracelula ar facultativo Sobreviven en el fagosoma : Inhibición de la degranulación. Resistencia sistemas bactericidas oxígeno-dependientes. Formación de granulomas. Destrucción tisular.

33 Brucelosis. Clínica Inhalación/ingesta. No persona persona. Dosis infectiva = organismos. Periodo Incubacion = 5 días - > 6 meses. Duracion enfermedad = semanas a meses. Cuadro agudo: Fiebre, sudoración profusa, malestar general, dolor de cabeza y muscular. Manifestaciones locales: osteoarticulares y genitourinarias (neurológicas,endocarditis). Frecuentes recaidas. Sin tto, cronicidad. Mortalidad: < 5%.

34 Brucelosis: diagnostico directo Cultivo: Hemocultivo. Medulocultivo. Identificación: Morfología colonia. Oxidasa. Aglutinación. Métodos moleculares: PCR. Hemocultivos positivos Pacientes febriles 68-86% Medulocultivos 92% Pacientes apiréticos 32% Recaídas 80%

35 Brucelosis: Diagnóstico indirecto Rosa de Bengala. Aglutinación. Test de Coombs. ELISA: IgG, IgA, IgM.

36 Brucelosis: Epidemiología y Profilaxis Reservorio: Animal Vacunación. Mecanismo de transmisión: Leche y derivados Higiene alimentaria. Huéspedes: Profesionales Vacunación (?).

37 Brucelosis: Epidemiología y Profilaxis

38 Francisella F. tulariensis Tularemia o fiebre glandular Cocobacilo G- muy pequeño Parasito intracelular Reservorio: diversos animales y artrópodos

39 Grupo HACEK y otros bacilos G- exigentes

40 Grupo HACEK y otros bacilos G- exigentes

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