Nestlé; Centro de Investigación, Vers chez les Blanc, 26 Lausanne 1000, Suiza

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1 British Journal of Nutrition (2011), 105, Los autores 2011 doi: 10,1017/S Una dieta rica en cereales integrales aumenta la betaína plasmática y tiende a disminuir el colesterol total y el colesterol LDL en comparación con una dieta de cereales refinados en personas sanas Alastair B. Ross*, Stephen J. Bruce, Anny Blondel-Lubrano, Sylviane Oguey-Araymon, Maurice Beaumont, Alexandre Bourgeois, Corine Nielsen-Moennoz, Mario Vigo, Laurent-Bernard Fay, Sunil Kochhar, Rodrigo Bibiloni, Anne-Cécile Pittet, Shahram Emady-Azar, Dominik Grathwohl y Serge Rezzi Nestlé; Centro de Investigación, Vers chez les Blanc, 26 Lausanne 1000, Suiza (Recibido el 23 de julio de 2010 Revisado el 9 de noviembre de 2010 Aceptado el 12 de noviembre de Publicado primero en Internet el 28 de enero de 2011) Abreviaturas: CRP, proteína C-reactiva; CR, cereal refinado; CI, cereal integral. *Autor para la correspondencia: A. B. Ross, fax , correo electrónico Resumen Estudios epidemiológicos han demostrado repetidas veces que los alimentos con cereales integrales (CI) reducen el riesgo de diversas enfermedades relacionadas con los hábitos de vida, si bien no se han identificado resultados clínicos y mecanismos constantes. Para comparar los efectos de una dieta rica en CI con los de una dieta equiparable de cereales refinados (CR) sobre biomarcadores plasmáticos y parámetros de la salud intestinal, 17 personas sanas (11 mujeres y 6 varones) completaron un estudio cruzado exploratorio con una dieta de intervención de 2 semanas, basada en alimentos integrales o refinados, separada por un lavado de al menos 5 semanas. Ambas dietas fueron iguales, salvo en el uso de alimentos integrales (150 g/día) o refinados. Los participantes se sometieron a una estimulación posprandial de 4 horas el día 8 de cada dieta de intervención. Después de 2 semanas, la dieta CI tendió a disminuir las concentraciones plasmáticas de colesterol total y colesterol LDL (ambos valores P = 0,09), pero no modificó las concentraciones plasmáticas de colesterol HDL, glucosa en ayunas, proteína C- reactiva u homocisteína, en comparación con la dieta CR. Las concentraciones plasmáticas de betaína y alquilresorcinol se elevaron después de 1 semana con la dieta CI (P = 0,01 y P < 0,0001, respectivamente). Las poblaciones de Clostridium leptum en las heces aumentaron después de la dieta CI, junto con una tendencia a una disminución del ph del agua fecal (P = 0,096) y un aumento de la frecuencia de las deposiciones (P < 0,0001) en comparación con la dieta CR. Una intervención controlada breve con una serie de productos comerciales basados en cereales integrales tendió a mejorar los biomarcadores de ECV en comparación con la dieta CR. Los cambios de la microbiota fecal relacionados con el aumento de la fermentación de la fibra y de las concentraciones plasmáticas de betaína indican que tanto la fibra como los componentes fitoquímicos de los CI son importantes en la mediación de cualquier posible efecto en la salud. Palabras clave: dieta de cereales integrales, lípidos plasmáticos, biomarcadores, betaína, alquilresorcinoles, microbiota intestinal NS British Journal of Nutrition

2 Los cereales integrales aumentan la betaína plasmática 2 Estudios epidemiológicos han señalado que las dietas ricas en cereales integrales (CI) reducen el riesgo de numerosas enfermedades relacionadas con el régimen de alimentación, como las ECV (1,2), la diabetes (3), la obesidad, el síndrome metabólico (4) y algunos cánceres (5) ; se han obtenido resultados semejantes en muchas poblaciones. Los mecanismos que se han propuesto para explicar la disminución del riesgo de enfermedad tienen que ver con la fibra y el contenido fitoquímico de los CI, en comparación con los cereales refinados (6,7). En los estudios publicados se ha comprobado que una serie de intervenciones basadas en dietas de cereales integrales disminuyen las concentraciones plasmáticas de colesterol total y colesterol LDL (8-11), reducen la presión arterial (12-14), mejoran los parámetros de la insulina (15-17) y mejoran los marcadores de la función intestinal (18,19). En la mayoría de los casos, estos estudios se llevaron a cabo con personas que ya tenían riesgo de enfermedad (p. ej., sobrepeso/obesidad, hipercolesterolemia, hiperinsulinemia). A menudo, en estos estudios de intervención se utilizaron alimentos preparados especialmente basados en un solo cereal (p. ej., centeno o cebada) en vez de alimentos integrales ya disponibles para los consumidores, y los criterios de valoración generalmente consistieron solo en mediciones habituales de bioquímica sanguínea. Además, en los estudios de intervención con seres humanos no se han obtenido siempre resultados evidentes de la alimentación con cereales integrales sobre los marcadores del riesgo de ECV (20-22), por lo que algunos autores han puesto en duda el efecto corto plazo de una dieta CI (23). Aparte de los resultados variables de los estudios de intervención, no están claros los mecanismos por los cuales una dieta CI puede mejorar la salud. Aunque la fibra dietética explicaría muchos beneficios posibles de los CI (24), la investigación epidemiológica ha demostrado con frecuencia efectos beneficiosos en las ECV incluso después de tener en cuenta el aporte de fibra, lo que indica que también intervienen otros componentes de los CI (25). Recientemente ha cobrado interés la implicación de la glicina betaína (betaína), un donante de metilos presente en concentraciones elevadas en los alimentos integrales basados en trigo y centeno (26,27). El suministro de una cantidad mayor de betaína podría ser un mecanismo adicional para la reducción del riesgo de ECV resultante del aporte de CI, primordialmente mediante su intervención en la conversión del factor de riesgo cardiovascular homocisteína en metionina (28,29). Uno de los objetivos de las recomendaciones dietéticas de cereales integrales es que las personas sanas sustituyan las raciones de cereales refinados (CR; cereales en los que se eliminan el salvado y el germen mediante molienda) por productos CI con el fin de reducir el riesgo de ECV (30), aunque pocos estudios de intervención han comparado específicamente el efecto de alimentos integrales con alimentos refinados equiparados en personas sanas (14,21). Para comprender mejor algunos de los posibles mecanismos de las ventajas potenciales de sustituir los alimentos refinados por alimentos integrales, diseñamos un estudio exploratorio controlado para comparar el efecto a corto plazo de una dieta rica en cereales integrales comerciales con una dieta rica en cereales refinados sobre los parámetros relacionados con la salud cardiovascular y digestiva en personas sanas. Materiales y métodos Diseño del estudio El estudio se diseñó como un ensayo cruzado para comparar el efecto de una dieta rica en CI con una dieta rica en CR. Tras un periodo de preinclusión de 1 semana, en el que

3 3 A.B. Ross y cols. se indicó a los participantes que no consumiesen alimentos integrales (lo que se controló mediante diarios y determinaciones de los alquilresorcinoles plasmáticos (31) ) para disponer de un nivel basal similar con respecto al aporte de CI, se aleatorizó los participantes para recibir una dieta CI o CR durante 2 semanas. Esta dieta estaba controlada, pues el centro del estudio suministró todos los alimentos. Después del periodo de intervención de 2 semanas, se indicó a los participantes que no consumiesen ningún alimento integral (como en el periodo de preinclusión) durante 2 semanas para determinar cuánto duraban los cambios debidos a la dieta de intervención (periodo postintervención). Tras un periodo de lavado de 5-7 semanas entre el final del periodo postintervención y el comienzo de la siguiente preinclusión, los participantes repitieron el mismo protocolo, pero tomaron la otra dieta durante el periodo de intervención (Fig. 1). Al principio del estudio y con intervalos de una semana durante las 5 semanas siguientes del estudio se obtuvieron muestras de sangre y orina de 24 horas (seis puntos temporales en total). Además, se recogieron muestras fecales puntuales (primera deposición durante el día) en el momento basal y después del periodo con la dieta de intervención de 2 semanas. Como era posible que los cambios resultantes de las dietas no fuesen evidentes en muestras plasmáticas en ayunas, se efectuó un subestudio posprandial. El día 8 de ambas dietas de intervención, los participantes consumieron un cereal integral para desayuno (shredded wheat, trigo desmenuzado) o un cereal refinado para desayuno (cornflakes, copos de maíz), adecuado para la dieta que estaban siguiendo. Se obtuvieron muestras de sangre de los participantes a los 0, 60, 120, 180 y 240 minutos del desayuno (Fig. 1). El presente estudio se llevó a cabo de conformidad con los principios establecidos en la Declaración de Helsinki, y todos los procedimientos con seres humanos recibieron la aprobación del Comité de ética de la región de Lausana, cantón de Vaud (Suiza). Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los participantes. El estudio se realizó entre febrero y diciembre de Participantes Se seleccionó a 22 personas para el estudio. Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de cada una de ellas, y la selección tuvo lugar tras la cumplimentación de un cuestionario médico y la confirmación del cumplimiento de los criterios de inclusión y exclusión (personas sanas [perfil lipídico en sangre normal, IMC de kg/m 2, ausencia de enfermedad crónica o reciente, ausencia de uso reciente de antibióticos o medicación y no fumadores] de 20 a 50 años y con un consumo habitual bajo de cereales integrales [< 30 g/día, según lo determinado por un FFQ (cuestionario de frecuencia alimentaria) (31) ]). Preinclusión Dieta CI Dieta PI 1 semana Fase 1: 5 semanas Lavado (5-7 semanas) Fase 2: 5 semanas Desayuno min Subestudio posprandial Fig. 1. Diseño del estudio. Durante el primer periodo con dieta de intervención, los participantes consumieron una dieta rica en cereales integrales (CI) o una dieta rica en cereales refinados

4 Los cereales integrales aumentan la betaína plasmática 4 (CR). Durante el segundo periodo con dieta de intervención, siguieron la dieta que no habían recibido en el periodo anterior. "Dieta PI" es la dieta post-intervención de 2 semanas cuando se indicó a los participantes que no tomasen cereales integrales., puntos de muestreo; P, cuando el muestreo posprandial tuvo lugar el día 8 de cada intervención dietética de 14 días. Alimentos del estudio Todos los alimentos utilizados en el estudio eran productos comerciales de Nestlé SA internacional o adquiridos en supermercados (Lausana [Suiza] y Huskvarna [Suecia]). El contenido de CI, energía, proteínas, grasas, hidratos de carbono y fibra se determinó a partir de las composiciones declaradas de ingredientes y nutrientes. Se supuso que el componente CI de los alimentos tenía las tres fracciones anatómicas principales del cereal (salvado, germen y endospermo) en las mismas proporciones que en el producto natural. También se analizó el contenido de alquilresorcinol (32) y betaína (27) en los cereales. Se diseñaron menús de CI y CR para suministrar un aporte energético total similar, empleando alimentos basados en cereales como fuente principal de hidratos de carbono (Tabla 1). El aporte energético diario deseado era de 8,5 MJ (2032 kcal) para la dieta CR y de 8,8 MJ (2107 kcal) para la dieta CI. Se proporcionó pan (trigo integral o refinado dependiendo de la dieta) con el almuerzo y la cena, y se usó como alimento discrecional para que los participantes comiesen más o menos en función de sus necesidades energéticas individuales. Se diseñaron siete menús diarios diferentes para cada una de las dietas CI y CR, y cada menú se repitió dos veces durante el periodo con dieta de intervención de 2 semanas. Se utilizó una gran variedad de diferentes alimentos integrales y refinados en el estudio para que los participantes no se cansasen de la dieta. No fue posible obtener alimentos con cereales integrales o refinados equivalentes porque no se dispuso con facilidad de equivalentes refinados (p. ej., avenas integrales o avenas refinadas), pero se hizo todo lo posible para emparejar cereales equivalentes. En conjunto, la dieta CI contenía un 64% de trigo integral, un 13% de avenas integrales y un 9% de arroz integral (el resto era cebada y centeno), mientras que la dieta CR contenía un 66% de trigo refinado, un 27% de arroz blanco y un 8% de maíz refinado. El aporte prescrito medio diario de cereales integrales durante la dieta CI fue de 150 g CI/día basado en el peso seco. El aporte prescrito medio de cereales en total fue de 277 g para la dieta CR y 275 g para la dieta CI (ingredientes CI y CR combinados, también peso seco). Durante las fases de intervención, las comidas se tomaron en un comedor en la unidad metabólica del Centro de Investigación de Nestlé o se suministraron preenvasadas para prepararlas en casa. El cumplimiento de las dietas sin CI en los periodos de preinclusión y post-intervención, y de la dieta de intervención, se supervisó mediante diarios de alimentación y averiguando si las concentraciones plasmáticas de alquilresorcinol se mantenían dentro del intervalo previsto para una dieta sin CI. Se indicó a los participantes que anotasen todos los posibles alimentos CI que consumiesen durante estos periodos. Durante las fases de intervención, también se pidió a los participantes que anotasen la cantidad de todas las bebidas distintas del agua consumidas, así como los alimentos adicionales consumidos y la actividad física. Se pesó cualquier alimento, incluido el pan, sobrante de la dieta de intervención y se registró para determinar el consumo exacto de alimentos. Las bebidas, los alimentos adicionales y los alimentos del estudio sobrantes se emplearon para cuantificar el consumo total de nutrientes durante el ensayo.

5 5 A.B. Ross y cols. Para calcular el consumo de nutrientes durante los periodos con dieta de intervención se empleó un programa de base de datos de composición de nutrientes (Genesis; ESHA Research, Salem, OR, EE.UU.) utilizando datos de las tablas suizas de composición de nutrientes. Tabla 1. Modelo de menú* Día 1 Día 2 Día 3 Día 4 Día 5 Día 6 Día 7 Desayuno Cereal para desayuno Cereal para desayuno Cereal para desayuno Cereal para desayuno Cereal para desayuno Cereal para desayuno Cereal para desayuno Plátano Manzana Bayas surtidas Plátano Manzana Plátano Bayas surtidas Leche Leche Leche Leche Leche Leche Leche Tentempié Galletas saladas Galletas saladas Galletas saladas Galletas saladas Galletas saladas Galletas saladas Galletas saladas Mantequilla Mantequilla Mantequilla Mantequilla Mantequilla Mantequilla Mantequilla Queso Queso Queso Queso Queso Queso Queso Almuerzo Pasta Cuscús Tortellini Risotto Pasta Tallarines de Pizza arroz Salsa de queso Pollo Salsa de tomate Ensalada mixta Salsa boloñesa Salsa de chile dulce Ensalada mixta Ensalada Verduras Ensalada Bistec Queso Tres rollitos Pan mixta marroquíes mixta parmesano primavera Pan Pan Pan Pan Ensalada mixta Pan Verduras en sofrito Pan Tentempié Barrita de cereales Cena Barrita de cereales Barrita de cereales Barrita de cereales Barrita de cereales Barrita de cereales Barrita de cereales Naranja Naranja Naranja Naranja Naranja Naranja Naranja Plato Plato Plato Plato Plato Plato Plato congelado congelado congelado congelado congelado congelado congelado Pan Pan Pan Pan Pan Pan Pan Mantequilla Mantequilla Mantequilla Mantequilla Mantequilla Mantequilla Mantequilla Tentempié Yogur Yogur Yogur Yogur Yogur Yogur Yogur Chocolate Chocolate Chocolate Chocolate Chocolate Chocolate Chocolate * Los productos basados en cereales en cada ocasión se basaron en ingredientes integrales o refinados. Los platos congelados contenían pasta o arroz como su componente de hidratos de carbono. El menú del día 7 se tomó dos veces en cada grupo de intervención. Alimentos que estaban disponibles como cereales integrales o refinados. Métodos analíticos Plasma. Se separó el plasma de la sangre mediante centrifugación a 1000 g durante 10 minutos a 4 C. Las concentraciones plasmáticas de colesterol total, colesterol HDL, colesterol LDL, TAG, glucosa y proteína C-reactiva (CRP) se analizaron utilizando kits enzimáticos en un autoanalizador XPAND (los equipos y el instrumento procedían de Dade Behring, Dudningen, Suiza). La homocisteína se analizó mediante HPLC usando un kit (Bio-Rad AG, Reinach, Suiza) (33), mientras que la betaína se analizó mediante cromatografía de líquidos con dilución isotópica MS/MS (27). Los alquilresorcinoles se extrajeron mediante extracción de líquido-líquido, se purificaron mediante extracción de fase sólida e intercambio aniónico en modo mixto y se analizaron mediante GC-MS según el método de Landberg y cols. (34). Heces. Las muestras de heces se recogieron en bolsas Stomacher (Seward Limited, Worthing, West Sussex, Reino Unido), mantenidas a 4 C antes de la recogida por el centro del estudio, donde se almacenaron a 40 C. El peso seco fecal se determinó después de liofilización durante 48 horas. El agua fecal se produjo según el método de

6 Los cereales integrales aumentan la betaína plasmática 6 Klinder y cols. (35), por el cual se añadió agua destilada dos veces (p/v) (con azida sódica 3 mm para evitar el crecimiento microbiano) a la muestra en una bolsa Stomacher y se mezcló empleando un mezclador Stomacher (Seward Limited) durante 2 minutos. Si la homogeneización no era completa, se procedía manualmente y las muestras se volvían a mezclar con el mezclador Stomacher. Se transfirió una alícuota de 20 ml a un tubo de ultracentrifugadora y se centrifugaron los tubos a g durante 120 minutos a 4 C. Se dividió el sobrenadante en alícuotas para un análisis ulterior. El ph del agua fecal se determinó empleando una sonda de ph. Se dividieron las heces húmedas en alícuotas antes del procesamiento para el agua fecal y se congelaron a -80 C antes del análisis microbiano mediante PCR cuantitativa. Los detalles de este procedimiento y las sondas utilizadas figuran en la documentación complementaria disponible en Se cuantificaron las bacterias en total y los grupos de Bacteroides, Bifidobacterium, Clostridium coccoides, Clostridium leptum, Enterobacteria, Enterococcus y Lactobacillus. Estos grupos representan los tipos que constituyen la mayor parte de la microbiota intestinal. Durante los periodos con dieta de intervención, se pidió a los participantes que anotasen el número de deposiciones al día. Se usaron estos datos durante 14 días para determinar la frecuencia de deposiciones (deposiciones/día) durante cada periodo con dieta. Análisis estadísticos Todos los resultados se analizaron mediante ANCOVA en un modelo mixto, en el que los efectos de las dietas se examinaron utilizando la dieta, el periodo, el momento basal y otras covariables como efectos fijos y el participante como efecto aleatorio. No se supuso un efecto de arrastre. Para el análisis de los recuentos de bacterias en heces, los inferiores al límite de detección se fijaron en dicho límite (10 6 unidades formadoras de colonias/g) a efectos analíticos. A continuación, los recuentos de bacterias se transformaron logarítmicamente y se analizaron mediante ANCOVA, como se ha señalado antes. Además, se empleó el ANOVA con mediciones repetidas para valorar el efecto de las dietas a lo largo del tiempo. Todos los análisis se realizaron solo con los 17 participantes que completaron el estudio. Además, no se corrigió el nivel de significación para ajustar respecto a múltiples análisis de los datos debido a la naturaleza exploratoria de las hipótesis estudiadas. Por tanto, se indican los valores P no ajustados y se consideran significativos los resultados si P < 0,05 (tendencias reseñadas si P < 0,2). Los análisis estadísticos se llevaron a cabo empleando NCSS para Windows 2007 (Kaysville, UT, EE.UU.) y SAS (versión 9.1; SAS Institute, Cary, NC, EE.UU.). Resultados Participantes De las 22 personas seleccionadas para el estudio, cinco se retiraron prematuramente y 17 lo completaron. Una persona abandonó por incapacidad para cumplir la dieta de intervención (consumió < 50 % de sus necesidades energéticas diarias estimadas), una abandonó por una enfermedad no relacionada y otras tres abandonaron por viajes imprevistos durante el estudio. Las concentraciones plasmáticas basales (después del

7 7 A.B. Ross y cols. periodo de preinclusión) de lípidos, glucosa, CRP, homocisteína, betaína y alquilresorcinol no diferían entre los dos grupos del estudio (Tabla 2). Consumo de alimentos y cumplimiento El aporte energético medio fue de 8,4 MJ/día (2013 kcal/día) con la dieta CI y 8,6 MJ/día (2064 kcal/día) con la dieta CR (Tabla 3). No hubo diferencias en el aporte total de energía, proteínas, grasas o hidratos de carbono entre las dos dietas. Sin embargo, el aporte total de fibra, fibra de cereales, alquilresorcinol y betaína de cereales fue mayor durante la dieta CI (todos los valores P < 0,001). El aporte registrado medio de CI durante la dieta CI fue de 151 g/día. Ningún participante refirió haber consumido alimentos CI durante los periodos de preinclusión o post-intervención, ni durante la dieta CR. Las concentraciones plasmáticas totales de alquilresorcinoles en todos los participantes fueron inferiores a 82 (mediana, 24) nmol/l durante los periodos de preinclusión y posición intervención, con la excepción de un participante. Esta persona presentó una concentración de alquilresorcinol de 238 nmol/l una semana después de la dieta CR, lo que indica que había consumido recientemente trigo integral antes del muestreo. En conjunto, las concentraciones de alquilresorcinol durante los periodos de preinclusión y post-intervención no difirieron significativamente respecto a la dieta CR. Esto indica que todos los participantes no tomaron trigo integral ni centeno integral, tal como se les había pedido, con la excepción de una persona en un punto temporal. El cociente homólogo C17:0/C21:0, que puede distinguir entre una dieta basada en trigo y una dieta basada en centeno (36), fue concordante con el consumo de productos basados en trigo. Biomarcadores plasmáticos Después de 1 semana, la concentración plasmática de TAG fue mayor con la dieta CI que con la dieta CR (1,09 frente a 0,89 nmol/l; P = 0,05). Tras 2 semanas con la dieta CI, hubo una tendencia a una disminución del 3% del colesterol total y del 9% del colesterol LDL en comparación con la dieta CR (ambos valores P = 0,09), pero no hubo ninguna diferencia entre las dos dietas en la concentración plasmática de TAG. No se observaron variaciones de las concentraciones plasmáticas de colesterol HDL, glucosa, CRP u homocisteína 1 o 2 semanas después de iniciar la dieta CI, en comparación con puntos temporales equivalentes para la dieta CR (Tabla 4). La betaína plasmática aumentó después de 1 semana con la dieta CI (P = 0,01), y las concentraciones descendieron a las 2 semanas, con una diferencia menos acentuada entre las dos dietas (P = 0,08). La concentración plasmática basal media de alquilresorcinoles, unos biomarcadores del consumo de trigo y centeno integrales, fue de 46 (mediana 34; intervalo 6-144) nmol/l, lo que era de esperar porque se seleccionó a los participantes como poco consumidores de CI. Los alquilresorcinoles plasmáticos aumentaron en un promedio de 14,5 veces después de 1 semana con la dieta CI y se mantuvieron aproximadamente en la misma concentración después de 2 semanas (ambos valores P < 0,001). Durante la dieta CR, los alquilresorcinoles plasmáticos aumentaron de forma moderada a nmol/l (P < 0,05 en comparación con después de los periodos de preinclusión y post-intervención) como consecuencia de la gran cantidad de productos de trigo refinado en la dieta. Las concentraciones plasmáticas de alquilresorcinoles retornaron a los valores basales después de 1 semana del periodo post-intervención (P > 0,6). La media de las concentraciones totales de alquilresorcinoles durante dicho periodo fue de 28 (mediana 24; intervalo 7-82) nmol/l (excluido un valor atípico), mientras que la media de las concentraciones totales de alquilresorcinoles durante la

8 Los cereales integrales aumentan la betaína plasmática 8 dieta CR fue de 45 (mediana 41; intervalo 25-98) nmol/l. Las concentraciones de alquilresorcinoles retornaron a los valores basales después de 1 semana con la dieta post-intervención sin CI (tras la preinclusión, media 23 (mediana 15; intervalo 7-67) nmol/l; 1 semana después de la intervención, media 38 (mediana 32; intervalo 14-79) nmol/l; 2 semanas después de la intervención, media 30 (mediana 26; intervalo 8-82) nmol/l (P < 0,01)), lo que demuestra la ausencia de un efecto de arrastre evidente sobre los alquilresorcinoles plasmáticos 1 semana después de suspender la toma de CI. Tabla 2. Características basales de los participantes que completaron el estudio (Valores medios con sus errores estándar) Mujeres (n 11) Varones (n 6) CR basal CI basal CR basal CI basal Media EEM Media EEM Media EEM Media EEM Edad (años) 34,1 3,0 34,1 3,0 36,5 4,2 36,5 4,2 Peso (kg) 63,4 2,2 63,8 2,4 78,2 3,1 78,3 3,0 IMC (kg/m 2 ) 23,1 0,8 23,2 0,9 24,5 0,6 24,5 0,6 Colesterol total plasmático 4,7 0,2 4,6 0,2 4,5 0,5 4,5 0,4 (mmol/l) Colesterol HDL plasmático 1,7 0,2 1,7 0,1 1,4 0,1 1,4 0,0 (mmol/l) Colesterol LDL plasmático 2,6 0,2 2,5 0,2 3,0 0,5 2,9 0,4 (mmol/l) TAG plasmático (mmol/l) 1,0 0,2 1,0 0,1 0,8 0,1 0,7 0,1 Glucosa plasmática (mmol/l) 4,9 0,1 4,9 0,1 5,1 0,1 5,1 0,0 CRP plasmática (mg/l) 5,6 2,0 3,0 1,0 1,7 0,2 2,2 0,9 Homocisteína plasmática 10,7 1,0 10,9 0,9 10,9 1,3 10,7 1,3 (µmol/l) Betaína plasmática (µmol/l) 32,3 4,4 33,4 5,8 59,4 10,6 49,8 3,6 Alquilresorcinoles totales 46,2 10,8 25,4 3,9 74,5 17,9 48,3 10,6 plasmáticos (nmol/l) CR, cereal refinado; CI, cereal integral; CRP, proteína C-reactiva. Tabla 3. Consumo real de nutrientes durante los periodos con las dos dietas de intervención (Valores medios y desviaciones estándar) Dieta de cereales refinados Dieta con cereales integrales Media DE Media DE P Energía kj ,51 kcal ,51 Proteínas (g) ,45 Grasas (g) ,42 Hidratos de carbono (g) ,08 Fibra total (g) < 0,001 Fibra de cereales (g) < 0,001 Consumo total de cereales (g) ,34 Consumo total de cereales integrales < 0,001 (g de materia seca) Alquilresorcinoles (mg) < 0,001 Betaína de cereales (mg) < 0,001 Durante la estimulación posprandial, no hubo diferencias entre las dos dietas en el TAG o la glucosa (Figs. 2 y 3, respectivamente). Tras el desayuno con CI, la betaína plasmática aumentó en relación con el desayuno con CR en puntos temporales

9 9 A.B. Ross y cols. comparativos (Fig. 4). La betaína aumentó un 18% a los 120 minutos de la comida CI con respecto al valor basal (P < 0,01). También aumentó, con respecto a dicho valor, a los 60 minutos de la comida CR (P < 0,05), aunque la concentración de betaína en el maíz es baja (27). Los alquilresorcinoles plasmáticos aumentaron de forma moderada con relación a las concentraciones en ayunas y fueron siempre diferentes respecto a los mismos puntos temporales durante la dieta CR (Fig. 5). Aunque el aporte de energía fue similar con ambas dietas, hubo una tendencia a que la dieta CI produjese una pérdida de peso de 0,5 kg durante el periodo de intervención de 2 semanas, en comparación con la dieta CR (P = 0,19). Parámetros fecales No hubo ninguna modificación global de la población de la microbiota fecal, con la salvedad del grupo de C. leptum, que aumentó ligeramente después de la dieta CI (P = 0,02), y una tendencia a un incremento de las especies de Enterococcus (P = 0,06) (Tabla 5). La variabilidad interindividual fue grande para las bacterias en total y todas las especies bacterianas analizadas. Se observó una tendencia a una disminución del ph del agua fecal con la dieta CI en comparación con la dieta CR (7,14 frente a 7,38; P = 0,063 para la diferencia en la variación con respecto al momento basal), mientras que la frecuencia de las deposiciones aumentó (1,40 frente a 0,96 deposiciones/día; P < 0,0001). Dos participantes señalaron que habían tenido problemas de estreñimiento durante la dieta CR. Tabla 4. Mediciones plasmáticas de bioquímica clínica y efecto de la dieta con cereales integrales (CI) en comparación con la dieta con cereales refinados (RG) (Valores medios con sus errores estándar e intervalos de confianza del 95%) CR CI CR-CI* Medía EEM Media EEM Media IC del 95% Semana 1 Colesterol total (mmol/l) 4,12 0,14 4,08 0,17 0,03-0,17, 0,24 Colesterol LDL (mmol/l) 2,39 0,14 2,25 0,15 0,15-0,13, 0,43 Colesterol HDL (mmol/l) 1,62 0,07 1,57 0,07 0,08-0,05, 0,22 TAG (mmol/l) 0,89 0,10 1,09 0,15-0,27-0,54, 0,00 Glucosa (mmol/l) 4,87 0,07 4,83 0,10-0,03-0,24, 0,17 Proteína C-reactiva (mg/l) 2,90 0,82 3,10 0,85 0,29-0,92, 1.49 Homocisteína (µmol/l) 8,83 0,68 8,87 0,61-0,04-0,65, 0,58 Betaína (µmol/l) 37,46 3,81 47,45 5,38-10,17-17,60, -2,73 Alquilresorcinoles en total 46,7 4,2 333,9 39,5-291,6-367,0, -216,3 (nmol/l) Semana 2 Colesterol total (mmol/l) 4,12 0,14 3,91 0,12 0,18-0,03, 0,38 Colesterol LDL (mmol/l) 2,31 0,12 2,16 0,10 0,18-0,04, 0,40 Colesterol HDL (mmol/l) 1,62 0,10 1,59 0,07 0,07-0,06, 0,20 TAG (mmol/l) 0,97 0,10 1,00 0,12-0,09-0,28, 0,09 Glucosa (mmol/l) 5,07 0,07 5,06 0,07-0,03-0,19, 0,14 Proteína C-reactiva (mg/l) 3,01 0,90 3,38 0,92-0, , 1.97 Homocisteína (mmol/l) 8,57 0,60 8,78 0,62-0,16-0,62, 0,29 Betaína (mmol/l) 36,72 3,47 41,74 4,49-5,07-10,86, 0,71 Alquilresorcinoles en total 43,5 4,2 357,4 39,7-318,4-391,7, -245,0 (nmol/l) * Corregidos respecto al valor basal. Los análisis estadísticos se corrigieron respecto al orden del tratamiento, la edad, el sexo, el IMC y las concentraciones basales. P = 0,05. P = 0,01. P < 0,0001. P < 0,1.

10 Los cereales integrales aumentan la betaína plasmática 10 Discusión Los cereales integrales se recomiendan como una parte importante de una dieta sana, y se aconsejan específicamente al menos tres raciones (48 g)/día en las Dietary Guidelines for Americans de 2005; se recomiendan cada día hasta 170 g (30), mientras que en Dinamarca se recomiendan al menos 75 g/10 MJ para los adultos (37). En el presente estudio diseñamos una dieta que utilizaba cereales como fuente principal de hidratos de carbono en cada comida con el fin de observar las respuestas probables a una dieta con cereales integrales, en comparación con una dieta con cereales refinados, durante un periodo relativamente breve (2 semanas). Las dos dietas estaban bien emparejadas en cuanto a contenido energético total y composición de macronutrientes, y no hubo diferencias entre los consumos reales de macronutrientes entre las dos dietas, con la excepción de la fibra. El contenido de fibra de la dieta CI, 34 g/día, está en el nivel superior de las recomendaciones nutricionales suizas, mientras que la dieta CR (19 g/día) era equivalente al aporte normal en la población suiza francófona (M. Vidal y cols., resultados no publicados), de forma que la dieta CR no se puede definir como específicamente baja en fibra. El aporte de otros nutrientes relacionados con CI medidos, a saber, betaína y alquilresorcinoles, estaba en el nivel superior de los aportes estimados de cereales (38,39). Fig. 2. Concentraciones plasmáticas de TAG vigiladas durante 240 minutos después de un desayuno con cereales integrales (trigo desmenuzado) o un desayuno con cereales refinados (copos de maíz). Las intervenciones se llevaron a cabo en el contexto de una dieta rica en cereales integrales o refinados. Los valores son medias, con errores estándar representados por barras verticales., dieta con cereales refinados;, dieta con cereales integrales. TAG plasmático (mmol/l) Tiempo (min) Fig. 3. Concentraciones plasmáticas de glucosa vigiladas durante 240 minutos después de un desayuno con cereales integrales (trigo desmenuzado) o un desayuno con cereales refinados (copos de maíz). Las intervenciones se llevaron a cabo en el contexto de una dieta rica en cereales integrales o refinados. Los valores son medias, con errores estándar representados por barras verticales., Dieta con cereales refinados;, dieta con cereales integrales. Glucosa plasmática (mmol/l) Tiempo (min) Fig. 4. Concentraciones plasmáticas de betaína vigiladas durante 240 minutos después de un desayuno con cereales integrales (trigo desmenuzado) o un desayuno con cereales refinados (copos de maíz). Las intervenciones se llevaron a cabo en el contexto de una dieta rica en cereales integrales o refinados. Los valores son medias, con errores estándar representados por barras verticales. a,b,y,z Los puntos temporales en la misma dieta con letras distintas fueron significativamente diferentes (P < 0,05). Todos los puntos temporales entre las dietas fueron significativamente diferentes (P < 0,05)., Dieta con cereales refinados;, dieta con cereales integrales. Betaína plasmática (μmol/l) Tiempo (min) Algunos estudios han revelado que una dieta rica en CI disminuye las concentraciones plasmáticas de colesterol total y colesterol LDL (9,11,40), y en el contexto de la breve duración de la intervención, es llamativa la tendencia a una disminución del colesterol

11 11 A.B. Ross y cols. LDL, sobre todo porque todos los participantes estaban aparentemente sanos y tenían un colesterol normal en el momento basal. El posible motivo de que algunos estudios bien ejecutados no hayan detectado un efecto de los CI sobre el colesterol plasmático es el tipo de control utilizado. Por ejemplo, se ha comparado una dieta CI con una dieta baja en CI (21) o los participantes añadieron alimentos integrales a su dieta en vez de sustituir los alimentos refinados como se recomendaba (22,23). Estos resultados dan a entender que es importante una dieta de control CR bien definida para examinar los efectos de una dieta CI. La tendencia a una disminución del colesterol plasmático en el presente estudio respalda de nuevo las observaciones repetidas en estudios epidemiológicos de que las dietas ricas en cereales integrales protegen frente a las ECV (2). Fig. 5. Concentraciones plasmáticas de alquilresorcinoles vigiladas durante 240 minutos después de un desayuno con cereales integrales (trigo desmenuzado) o un desayuno con cereales refinados (copos de maíz). Las intervenciones se llevaron a cabo en el contexto de una dieta rica en cereales integrales o refinados. Los valores son medias, con errores estándar representados por barras verticales. a,b,c Los puntos temporales en la misma dieta con letras distintas fueron significativamente diferentes (P < 0,05). Todos los puntos temporales entre las dietas fueron significativamente diferentes (P < 0,001)., Dieta con cereales refinados;, dieta con cereales integrales. Alquilresorcinoles plasmáticos en total (nmol/l) Tiempo (min) No se observaron diferencias entre las dietas en las concentraciones plasmáticas de TAG, glucosa, CRP u homocisteína. Aunque algunos estudios han indicado un efecto de los alimentos integrales en estos marcadores, como la CRP (41), es posible que dichos alimentos tengan un efecto limitado o nulo en los sujetos en que los biomarcadores se encuentren en concentraciones normales para personas sanas. En el caso de la glucosa, podrían precisarse pruebas de estimulación específicas para observar los efectos en el metabolismo de la glucosa, como en un estudio reciente, que reveló que una cena basada en CI mejoraba el metabolismo de la glucosa al día siguiente por la mañana (42). Algunos CI, en particular el trigo y el centeno, son buenas fuentes de betaína dietética (27), y se ha señalado que esta sustancia es uno de los componentes beneficiosos de los alimentos integrales CI (28), si bien se ha realizado aparentemente poca investigación sobre el efecto de una dieta rica en CI en las concentraciones plasmáticas de betaína. La betaína es un donante de metilos con numerosas funciones metabólicas descritas (43), muy en especial como osmolito y como donante de un grupo metilo en la conversión de homocisteína en metionina. Se ha comprobado que la betaína disminuye la homocisteína en seres humanos (44), aunque el aporte dietético estimado de betaína no se asoció a una homocisteína plasmática menor en mujeres en un estudio epidemiológico (45). Unas concentraciones plasmáticas mayores de betaína se asociaron a valores menores de colesterol no HDL, TAG, IMC, porcentaje de grasa corporal, perímetro de la cadera (29) y marcadores de inflamación (46), pero el aporte de betaína no se ha asociado a una disminución de las ECV (47). Esto pone de relieve la importancia de distinguir entre mayor aporte de betaína y elevación de la betaína plasmática, pues solo esta última tiene posibles efectos beneficiosos. La elevación de la homocisteína plasmática se ha relacionado con aumento del riesgo de ECV y de los marcadores de dicho riesgo (p. ej., incremento de la presión arterial y elevación de los lípidos séricos (48,49) ), y se ha observado una asociación entre disminución del riesgo de ECV y consumo de cereales integrales (2,14). El aumento de la betaína plasmática después de 1 semana en el presente ensayo fue relativamente pequeño, pero ninguno de los

12 Los cereales integrales aumentan la betaína plasmática 12 participantes tenía concentraciones de betaína llamativamente bajas en el momento basal (< 18 µmol/l) (50), y la dieta CR no era sensiblemente baja en betaína o carente de colina (el precursor metabólico directo de la betaína) (27). Además, se considera que las concentraciones plasmáticas de betaína están bajo un estricto control metabólico (51). Las concentraciones de homocisteína no variaron durante esta intervención, pero ningún participante presentaba concentraciones de homocisteína muy elevadas (> 15 µmol/l). Durante la estimulación posprandial, la betaína plasmática, que estaba elevada en comparación con la dieta CR en el tiempo 0, aumentó aún más después de 120 minutos, lo que indica un incremento transitorio más importante de la betaína plasmática antes de la eliminación del plasma. Con anterioridad se había comprobado que la betaína alcanza un valor máximo en el plasma a los minutos de la dosis después de una comida rica en betaína (52) y a los minutos de la dosis después de recibir 1,6 g de betaína pura (53). La dosis estimada de betaína a partir del cereal de trigo integral para desayuno en el presente estudio fue de 53 mg, aproximadamente 10 veces menor que la utilizada en la comida de prueba por Atkinson y cols. (52) y veces menor que la betaína pura empleada por Schwab y cols. (53), y refleja con más exactitud el efecto de una ración de desayuno habitual sobre la betaína plasmática. Las diferencias observadas indican que la dosis y la matriz tienen una pequeña influencia en la farmacocinética. Después de 2 semanas, no hubo diferencias en la betaína plasmática entre las dos dietas. Esto podría atribuirse en parte al hecho de que poca betaína corporal parece almacenarse en el plasma y que la acumulación es rápida (hasta 20 veces la de las concentraciones plasmáticas) en el hígado y los riñones (54,55). Con anterioridad, se había señalado que la betaína aumenta las concentraciones plasmáticas de LDL y TAG al mismo tiempo que disminuye la homocisteína plasmática (56). Se piensa que esto se debe a un mayor suministro de betaína, que ahorraría colina para la producción de partículas VLDL; ello mejoraría el transporte de lípidos desde el hígado y, en consecuencia, aumentaría transitoriamente los lípidos plasmáticos (57). En el presente estudio, el incremento de la betaína al cabo de una semana se acompañó de un aumento del TAG; ambas sustancias disminuyeron después de 2 semanas. Como no hubo diferencias en el aporte de lípidos entre las dietas que explicasen el aumento de TAG después de 1 semana, tiene interés la posibilidad de un vínculo con un mayor aporte dietético de betaína. Tabla 5. Mediciones de la población de la microbiota fecal durante las dos intervenciones dietéticas y efecto de la dieta de cereales integrales (CI) en comparación con la dieta de cereales refinados (CR)* (Valores medios con sus errores estándar e intervalos de confianza del 95%; log 10 unidades formadoras de colonias/g de peso en fresco) CR CI CR-CI Media EE Media EE Media IC del 95% Bacterias en total 10,03 0,3 10,39 0,2-0,37-1,16, 0,41 Bifidobacterium 8,93 0,4 9,30 0,3-0,56-1,62, 0,49 Lactobacillus 6,82 0,2 6,66 0,1 0,01-0,45, 0,47 Enterobacteria 7,31 0,2 7,22 0,2 0,14-0,04, 0,32 Enterococcus 6,03 0,0 6,18 0,1-0,23-0,47, 0,01 Clostridium coccoides 9,64 0,3 9,89 0,3-0,42-0,15, 0,31 Clostridium leptum 9,24 0,3 10,05 0,1-0,82-1,51, -0,13 Bacteroides 8,43 0,3 8,72 0,3-0,31-1,38, 0,76 * Las muestras fecales correspondieron a recogidas puntuales de la primera deposición del día. Los análisis estadísticos realizados con los datos transformados logarítmicamente se corrigieron respecto a los recuentos basales de poblaciones bacterianas, el orden del tratamiento, la edad, el sexo y el IMC. P = 0,056. P = 0,023.

13 13 A.B. Ross y cols. Se ha propuesto que los alquilresorcinoles plasmáticos son biomarcadores del consumo de trigo y centeno integrales (58) ; varios estudios han indicado una estrecha correlación entre dicho consumo y su presencia en el plasma (31,59). No es sorprendente que en el presente estudio los alquilresorcinoles plasmáticos aumentasen considerablemente en comparación con la dieta CR. Como el trigo refinado sigue conteniendo bajas concentraciones de alquilresorcinoles (32), aún había bajas concentraciones en el plasma durante los periodos sin dietas CI y CR. Se dispone de pocos datos sobre las concentraciones plasmáticas de alquilresorcinoles en una dieta baja en cereales integrales o sin ellos, y los resultados del presente ensayo dan a entender que unas concentraciones de alquilresorcinoles totales inferiores a 60 nmol/l probablemente indican una dieta que no contiene CI. Además, confirman que los alquilresorcinoles plasmáticos son sensibles al trigo y el centeno integrales en la dieta, como indica el incremento pronunciado de la concentración con la dieta de intervención CI, si bien la cantidad de alquilresorcinoles consumidos en esta dieta se encuentra en el límite superior de lo que se consumiría como parte de una dieta "normal" (39). En el estudio posprandial se produjo un aumento relativamente pequeño de los alquilresorcinoles plasmáticos durante el periodo de medición de 240 minutos. Solo en un estudio se había investigado la farmacocinética de los alquilresorcinoles en seres humanos, después de una comida basada en pan de centeno; en este ensayo, el T max fue de 168 minutos aproximadamente (60), mientras que la concentración pareció aumentar a los 240 minutos en el presente estudio. En un ensayo de cerdos alimentados habitualmente con una dieta que contenía pan de centeno, los alquilresorcinoles plasmáticos se mantuvieron elevados a los 120 a 360 minutos (61), y se observó una notable diferencia en la farmacocinética de los alquilresorcinoles con la alimentación habitual y una comida a corto plazo. Los datos recopilados en el presente estudio durante 240 minutos indicarían que la farmacocinética de los alquilresorcinoles en seres humanos también es diferente si se mide en el contexto de una dieta habitual que contenga trigo o centeno integrales. La tendencia a una disminución del peso con la dieta CI fue inesperada porque la mayoría de los estudios de intervención que han abordado la cuestión de la pérdida o el mantenimiento del peso con dietas CI no han revelado efectos en la pérdida ponderal total (20,40,41), aunque datos epidemiológicos indican que el consumo de CI se asocia a un menor IMC (62,63), y en un estudio no revisado por expertos se reseñó una pérdida de peso de 0,9-1,4 kg con una dieta CI en comparación con una dieta CR equiparable energéticamente durante 4-6 semanas (64). Todos los participantes en el presente estudio tenían un peso normal (IMC < 26 kg/m 2 ), salvo uno que tenía un IMC de 29,6 kg/m 2, lo que hace más llamativa la tendencia a una variación del peso de 0,5 kg. Debido al contenido inherentemente elevado de fibra de los cereales integrales, en comparación con los cereales refinados, se ha pensado que los CI intervienen en la regulación de la microbiota intestinal y modifican el tránsito intestinal. Algunos estudios han indicado que dietas con trigo o centeno integrales alteran la química fecal, aumentando las concentraciones de ácidos grasos de cadena corta y reduciendo el ph fecal (18). El aumento de la frecuencia de las deposiciones era de esperar, y los cereales integrales habían demostrado anteriormente que son eficaces para aumentar dicha frecuencia en personas estreñidas (65). En un estudio se compararon los efectos de un cereal para el desayuno con trigo integral y los de un cereal para desayuno con salvado

14 Los cereales integrales aumentan la betaína plasmática 14 de trigo durante 3 semanas sobre las poblaciones de la microbiota fecal, y se observó que las poblaciones de bifidobacterias y lactobacilos/enterococos aumentaban con el trigo integral (19) ; en un estudio parecido se comprobó que un cereal de maíz integral para desayuno aumentaba las poblaciones de bifidobacterias fecales después de 3 semanas (66). En el periodo relativamente breve del presente ensayo hubo solo un efecto débil (menos de una variación logarítmica) sobre la microbiota fecal, con una tendencia a un incremento de Enterococcus, como en el estudio de Costabile y cols. (19), y un pequeño aumento del grupo de C. leptum. Se sabe que la subpoblación de C. leptum contiene una serie de especies bacterianas adaptadas para utilizar la fibra como sustrato y producir butirato (67). Abnous y cols. (68) observaron que las poblaciones de C. leptum aumentaban en ratas alimentadas con salvado de avena o trigo. Vitaglione y cols. (69) han propuesto recientemente que los compuestos fenólicos unidos en el complejo de la fibra dietética también modifican el medio intestinal, lo que puede tener importancia en la población de la microbiota intestinal, y que los clostridios se asocian al metabolismo de dichos compuestos (70). La tendencia observada a una disminución del ph del agua fecal con la dieta CI concuerda con el aumento de las bacterias productoras de butirato. Es probable que el periodo de intervención de 2 semanas fuese demasiado corto para advertir un efecto "pleno" de las dos dietas, y la mayoría de los estudios que se han centrado en la microbiota fecal duraron al menos 3 semanas (19). No obstante, el hecho de que pequeñas modificaciones de la microbiota fecal (y, en consecuencia, de la microbiota intestinal) ya fueran evidentes después de 2 semanas indica que las dietas basadas en CI a más largo plazo pueden tener un efecto en las poblaciones de la microbiota. Se precisan estudios de seguimiento para investigar los efectos a largo plazo de una dieta rica en CI sobre las poblaciones de la microbiota fecal. La presencia de numerosos resultados "de tendencia" en el presente ensayo da a entender que se podían haber obtenido resultados más significativos con un mayor número de participantes. La cantidad diaria de CI proporcionada durante el estudio fue grande en comparación con los aportes habituales de g/día (71,72) y los aportes mínimos recomendados de g (30,37), pero bien tolerada por los participantes, sin molestias derivadas del componente CI de las dietas. Esto podría deberse en parte al hecho de que todos los alimentos integrales estaban comercializados, por lo que su fin era gustar al consumidor y no el uso en un estudio científico. La utilización de alimentos basados en cereales integrales como base del componente de hidratos de carbono de una dieta normal parece ser una buena estrategia para aumentar el consumo de CI y parece tener efectos beneficiosos en los marcadores del riesgo de ECV, incluso en personas sanas. La mayoría de los estudios de los efectos de los cereales integrales en biomarcadores de enfermedad se han centrado en tipos específicos de cereales (p. ej., cebada y arroz integral (9,12,13), centeno (8,15,16,73), avena (40,74) y trigo (11) ), mientras que los estudios se han empleado una variedad de cereales generalmente no han indicado diferencias con respecto al control (21,22). En los ensayos que han usado una mezcla de CI se ha intentado reproducir lo que sería posible con una dieta mixta "normal", lo que ha llevado a controlar menos el consumo de CI en el grupo de control. En el presente estudio, una dieta de CI, que contenía sobre todo productos basados en trigo, redujo el colesterol LDL, un resultado que se había observado anteriormente con intervenciones a más largo plazo basadas en cebada y arroz integral (9), avena (40,74) y trigo (11). Parecería entonces que el efecto de los cereales integrales respecto a la disminución del colesterol no se consideraría necesariamente relacionado específicamente con estos cereales ricos en

15 15 A.B. Ross y cols. fibra soluble (avena y cebada), sino que se podría atribuir a una dieta generalmente rica en CI. Aunque el enfoque reduccionista tiende de forma natural a analizar los cereales individuales y las fracciones de cereal para esclarecer los componentes esenciales responsables de los efectos observados, también es importante realizar estudios de dietas mixtas, que tienen más probabilidades de reflejar lo que se podría consumir de forma regular y que quizá sea más fácil para el consumo a largo plazo. El presente estudio, aunque se caracterizó por el suministro de una gran cantidad de CI/día, demuestra que una dieta basada en CI comerciales mixtos puede disminuir el colesterol LDL a lo largo de un periodo relativamente breve. Conclusiones Este estudio indica una tendencia a un efecto de una dieta CI sobre el colesterol plasmático, lo que respalda los datos epidemiológicos de que los cereales integrales reducen el riesgo de ECV. La observación de que la betaína plasmática también aumentó como consecuencia de la dieta CI plantea nuevas posibilidades en relación con los mecanismos responsables de los efectos protectores de los cereales integrales (28) y avala la hipótesis de que los efectos beneficiosos de los CI van más allá de ser una fuente de fibra en la dieta (7). Se precisan nuevos estudios para confirmar que estos resultados se pueden reproducir con cantidades menores de CI y durante periodos más largos. Agradecimientos A. B. R., D. G. y M. B. diseñaron el estudio. A. B.-L., S. O.-A., M. B., A. B. y A. B. R. llevaron a cabo la parte clínica del estudio. S. J. B., C. N.-M., M. V., A. B.-L., R. B., A.- C. P. y A. B. R. realizaron los análisis químicos; L.-B. F., S. K. y S. R. proporcionaron recursos, y S. E.-A., D. G. y A. B. R. hicieron los análisis estadísticos. Todos los autores contribuyeron a la revisión final del artículo. El presente no recibió financiación específica de ningún organismo en los sectores público, comercial o sin ánimo de lucro. Se agradece la ayuda solícita de Fernand Beaud, los colegas de Nestlé internacional y el restaurante del Centro de Investigación de Nestlé por el suministro de los alimentos del estudio. También damos las gracias a las personas participantes. Todos los autores son empleados de Nestlé SA, una parte de una empresa de alimentación que fabrica una serie de productos de cereales integrales. Bibliografía

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