DUPLICACION DEL ADN. Dra Carmen Aída Martínez

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1 DUPLICACION DEL ADN Dra Carmen Aída Martínez

2 Definción El proceso de replicación de ADN es el mecanismo que permite al ADN duplicarse (es decir, sintetizar una copia idéntica)

3 Replicación La reproducción requiere la transmisión fiel de la información genética de padres a hijos Esto hace necesario una replicación exacta del ADN genómico completo Se necesita una compleja maquinaria para copiar las grandes moléculas de ADN que forman los cromosomas en procariotas y eucariotas Los virus utilizan esta maquinaria para replicar su ADN, alterando al ADN de la célula que infectó

4 Replicación como proceso Semiconservativo Cada hebra parental sirve como molde para la síntesis de una nueva hebra complementaria

5 Elementos necesarios para la replicación Enzima Principal: DNA Polimerasa Desoxirribonucleósidos 5 -trifosfatos (dntps) Proteínas adicionales: Primasa Helicasa De unión al ADN de cadena sensilla (SSB) Topoisomerasas Girasa Ligasa Secuencias de ADN para iniciar la replicación Proteínas que reconocen esa secuencia (ORC)

6 ADN polimerasas Enzimas con la capacidad de copiar exactamente una hebra molde de ADN Alfa (a) : participa conjuntamente con la Primasa en la síntesis de los fragmentos de okazaki Delta (d) : ensambla la hebra líder y la rezagada Gamma (g) : síntesis del ADN mitocondrial Epsilon (e): reparación del ADN

7 Características de las ADN polimerasas Todas las ADN polimerasas sintetizan ADN solo en dirección 5-3 añadiendo a la cadena en crecimiento un dntp al grupo OH del extremo 3

8 Características de las ADN polimerasas No son capaces de iniciar la síntesis del ADN de novo sino que necesitan de un cebador o iniciador preformado, llamado primer.

9 Topoisomerasa Topoisomerasas: catalizan la rotura reversible y la unión de las hebras de ADN, ruptura de puentes fosfodiester. Topoisomerasa I: reduce el número de enrollamientos negativos. Topoisomerasa II: ( DNA girasa) corta las dos cadenas y luego lo pasa por el lazo que ha formado.

10 Helicasa Helicasa: Catalizan el desenrrollamiento de la doble cadena, rompiendo los puentes de hidrógeno, separa la doble cadena

11 Enzimas que participan en la duplicación del ADN Primasa: coloca fragmentos cortos de ARN en los fragmentos de Okasaki de la hebra rezagada Ligasa: se encarga de unir los fragmentos de Okasaki

12 Proteínas de unión al ADN de cadena sencilla: se unen al ADN de cadena sencilla manteniendo extendidas las cadenas y evitando que vuelvan a formarse los puentes de hidrogeno. Proteinas SSB HELICASA

13 Pasos en la replicación

14 REPLICACION DEL ADN Topoisomerasa Se La La primasa separan polimerasa 1. El ADN sintetiza las es 2 alfa cadenas desenrollado y un delta cebador por coloca medio por de los ARN las de la helicasa o nucléotidos primer en topoisomerasas las complementarios dos cadenas en dirección 3. 5 Se - 3 unen ambas a cada cadenas simple las proteínas SSB que estabilizan las cadenas y evitan el enrollamiento

15 Horquilla de replicación Solamente una hebra del ADN se sintetiza de manera contínua (hebra adelantada o conductora) La otra hebra se forma a partir de pequeñas piezas discontinuas de ADN que se sintetizan al revés con respecto al movimiento de la horquilla de replicación (hebra rezagada o tardía) A estas piezas se les conoce como: Fragmentos de Okasaki

16 Fragmentos de Okasaki La enzima primasa sintetiza segmentos de ARN nucleótidos, llamados iniciadores, cebadores o primers (en eucariotas actúan la primasa y la ADN polimerasa a) Estos iniciadores se extienden con la ADN polimerasa (III en procariotas y ADN polimerasa d en eucariotas) Los iniciadores de ARN deben eliminarse y ser reemplazados por ADN en E. coli actúa una ARNasa H y la ADN polimerasa I En eucariotas actúan otras exonucleasas y la ADN polimerasa d Los fragmentos de Okasaki son unidos por ligasas

17 Origen de fragmentos de Okasaki

18 Eliminación de iniciadores

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22 REPLICACIÓN DEL ADN VIRAL

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25 Virus ARN Poseen una transcriptasa inversa Sintetiza una hebra de ADN a partir del ARN Luego, a partir de este ADN fabrica más copias de ARN

26 REPLICACIÓN DEL ADN BACTERIANO

27 Enzimas que participan en la duplicación del ADN en células procariotas Topoisomerasas: desenrollan y enrollan el ADN Helicasa: rompe los puentes de hidrógeno, separa la doble cadena Polimerasa III: coloca los nucleótidos de ADN, reconocimiento y corrección de ensamblaje. Primasa: coloca fragmentos cortos de ARN en los fragmentos de Okasaki de la hebra rezagada Ligasa: se encarga de unir los fragmentos de Okasaki Polimerasa I: función exonucleasa, retira los fragmentos cortos de ARN y los reemplaza por ADN Polimerasa II: rellena brechas y facilita la síntesis de DNA dirigida por plantillas dañadas.

28 ADN Bacteriano

29

30 REPLICACIÓN DEL ADN MITOCONDRIAL

31 ADN mitocondrial Replicación igual a ADN procariota variación cada 20,000 mil años Información genética solo por línea materna

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