Principios básicos utilizados en el control de calidad de las vacunas. Dra. María Baca-Estrada Health Canada (Ministerio de Salud de Canadá)

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1 Principios básicos utilizados en el control de calidad de las vacunas Dra. María Baca-Estrada Health Canada (Ministerio de Salud de Canadá)

2 Contenido Cómo evaluar la calidad de un producto? Características y limitaciones de los ensayos y métodos utilizados Establecimiento de las especificaciones de un producto Conclusiones 2

3 Consistencia de producción Asegurarse que los atributos de calidad son consistentes con los lotes utilizados en los ensayos clínicos pivotales Las especificaciones son clave para controlar la consistencia de la producción de componentes y del producto final Reconociendo las limitaciones que todos los ensayos tienen, deben ser capaces de detectar cambios en la calidad del producto (es decir, indicadores de la estabilidad) Los temas importantes incluyen: diseño del ensayo, la variabilidad, reactivos 3

4 Características de los Ensayos Utilizados en el CC de Vacunas No cuantitativos de aceptación/rechazo, ensayos en animales usando una dosis (e.g difteria y tétanos NIH, Farmacopea Europea; pirogenicidad en conejos, etc.) Cuantitativos in vivo (inmunogenicidad en animales usando varias dosis) Cuantitativos in vitro (ELISA, hemaglutinación, precipitación radial, UFP y UFC) Fisicoquímicos (HPLC, MS, HPAEC-PAD, NMR) 4

5 Ejemplos de Características Directamente Relacionadas con la Eficacia de la Vacuna Tipo de Vacuna Ensayo Comentario Bacteriana atenuada (BCG) Cultivo - conteo de colonias (UFC) Protección requiere replicación de la bacteria Viral atenuada (SRP, Polio Oral) Conteo de placas en cultivo celular (UFP) Protección requiere replicación del virus PS-conjugado (Hib, PnCon, Men-Con) HPLC - PS libre Protección requiere PS-conjugado a la proteína 5

6 Características específicas del producto Característica Especificación Vacuna A Vacuna B Polisacárido total 16-24µg/ml 18-30µg/ml Polisacárido libre = 10% Proteína total 10-20µg/ml Reportable % Adsorción = 87% Proteína libre = 10% = 95% = 2% 6

7 Retos en el Establecimiento de Especificaciones Apropiadas Limites máximos y mínimos del atributo de calidad no probados en estudios clínicos: Número limitado de dosis ensayadas Ensayos de potencia muy variables Intervalos de confianza 7

8 Establecimiento de especificaciones: información clínica, de estabilidad y variabilidad del ensayo 5.8 Maximum Bound 5.6 Max Release Limit Manufacturing Manufacturing Target Window 5.0 Clinical Window 4.8 Min Release Limit 4.6 Expiry Window Minimum Requirement Shelf-Life Cortesía de: Tim Schofield IABS Vaccine Stability Workshop Oct 2008, Ginebra 8

9 Evaluación de una vacuna nueva Evaluación del ensayo de potencia durante le registro sanitario Estudio de inmunogenicidad para evaluar la potencia de la vacuna. Se inmunizaron ratones 2 veces, se tomaron muestras de sangre a las 6 semanas y se midieron los títulos de anticuerpos en el suero mediante una prueba de ELISA El fabricante concluyó que la inmunogenicidad de los lotes de vacunas era comparable, puesto que los títulos de anticuerpos en suero, provenientes de diferentes lotes de vacuna con la cual se inmunizaron los ratones eran semejantes 9

10 Ensayo de potencia Ensayo diseñado para evaluar la potencia de una nueva vacuna en ratones Basado en la evaluación de anticuerpos (ELISA) La especificación propuesta es: = 100 EU/ml 10

11 Diseño de un ensayo de potencia en ratones ELISA 5 µg Control (-) 5 µg Control (-) 8 ratones / grupo 11

12 Justificación de la especificación EU/ml 784 EU/ml 210 EU/ml = 100 EU/ml* Control (-) 5 µg Lotes (validación) *Basado en 3-sigma (MGT 3 DS) 12

13 Ensayo de potencia (ratones) 200 Dosis Potencia (EU/ml) Rango µg µg µg µg Potency ,04 0,20 1,00 5,00 10,00 15,00 Dose 13

14 Cuál es el problema? Es el ensayo sensible a detectar diferencias en potencia? Qué modificaciones se pueden hacer para mejorar la sensibilidad? Qué problema existe con los ensayos en animales? Cuál(es) es(son) el(los) impacto(s) en utilizar este ensayo en estudios de estabilidad? 14

15 Puntos de discusión durante la evaluación Los resultados del estudio indican que la dosis utilizada estaba fuera de la curva dosis-respuesta. La prueba no es sensible! Los títulos inducidos por diferentes dosis son similares lo que indica que la prueba no es suficientemente sensible para detectar cambios en la cantidad de antígeno Se pidió al fabricante que cambiara el diseño del ensayo o desarrollara uno nuevo con mas sensibilidad 15

16 Establecimiento de especificaciones Criterios de aceptación para una prueba específica de control de calidad Estrategia de control para asegurar la calidad y consistencia del producto Las vacunas no son productos "genéricos" son productos con características específicas Deben centrarse en las características que son relevantes para la seguridad y eficacia del producto 16

17 Principios para establecer especificaciones Las especificaciones son especificas para cada producto, incluso si se utiliza el mismo ensayo Las especificaciones deben basarse en las características de los lotes de vacuna utilizados en estudios clínicos demostrando un perfil adecuado de seguridad y eficacia 17

18 Enfoque actual en materia reglamentaria (ICH Q6B) Proceso de fabricación Especificaciones son específicas, ya que cada proceso es diferente Estabilidad del producto final Se deben tener en cuenta la estabilidad del producto, especificaciones de liberación y de fin del período de validez Los estudios clínicos Evaluar que las especificaciones mínimas al final del período de validez mantengan la calidad del producto Los procedimientos analíticos Las especificaciones están vinculadas al ensayo 18

19 Consideraciones en el establecimiento de especificaciones Especificaciones diferentes à liberación del lote y fin del período de validez Asegurar la calidad de la vacuna durante todo el período de uso Relacionado con la estabilidad del producto Especificaciones al final del período de validez relacionadas con lotes utilizados en ensayos clínicos que demuestren efectividad y un perfil de seguridad adecuado 19

20 Ejemplos Vacuna Liberación Fin del período de validez Sarampión 3.5 Log10 CCID50/dosis 3.0 Log10 CCID50/dosis Paperas 4.8 Log10 CCID50/dosis 4.0 Log10 CCID50/dosis Fiebre amarilla = 5.04 Log10 PFU/dosis = 4.74 Log10 PFU/dosis Encefalitis japonesa DE50 = 100 ng DE50 = 460 ng Varicela 3.7 Log10 CCID50/dosis 3.3 Log10 CCID50/dosis Influenza atenuada (por cepa) 7.0 ± 0.5 Log10 FFU/dosis 6.5 Log10 FFU/dosis 20

21 Retos actuales en el establecimiento de especificaciones Vacunas nuevas y muy complejas La falta de caracterización de lotes clínicos, ensayos adecuados para monitorear la estabilidad Cambios en productos aprobados, por ejemplo remplazar un ensayo in vivo por otro in vitro La falta de armonización de los requisitos para establecer nuevas especificaciones 21

22 Conclusiones La consistencia de producción como base en la evaluación de la calidad del producto Existen limitaciones en los ensayos utilizados en CC, énfasis en la caracterización y el uso de varios parámetros relevantes durante la producción Las especificaciones son específicas del producto y del ensayo utilizado

23 Conclusiones (cont.) Las especificaciones deben de tener una relevancia con los lotes utilizados en estudios clínicos

24 Agradecimientos Dean Smith, Tong Wu, Joel Charboneau y Mariluz Pombo

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