TECHNOLOGY. CROSSMATCH TEST canino. primer test inmunocromatografico para reaccion cruzada con antiglobulina canina especifica.
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- Juan José Agüero Caballero
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1 CROSSMATCH TEST canino primer test inmunocromatografico para reaccion cruzada con antiglobulina canina especifica 20 minutos TECHNOLOGY - ahorra tiempo - facil manipulacion - resultados fiables - facil interpretacion
2 TECHNOLOGY test antiglobulina directo (DAT) [ Test de Coombs Directo ] Con anti-globulina canina especifica 10 minutos - ahorra tiempo - facil manipulacion - resultados fiables - facil interpretacion
3 IMPORTANCIA DEL TEST DIRECTO ANTIGLOBULINA (DAT) Prueba de Antiglobulina Directo (DAT) tiene por objeto detectar la presencia de inmunoglobulina y/o componentes de C3 sobre la superficie de glóbulos rojos de la sangre del paciente (RBC). DAT se utiliza en el diagnóstico de Anemia Hemolítica Inmune-mediada en perros. La tecnología clásica utiliza la incubación de la suspensión lavada de RBC con antisueros para que causen aglutinación. Este test inmunocromatográfico detecta la presencia de inmunoglobulina (IgG y IgM) y/o componentes C3 de unión a la superficie de glóbulos rojos. Un resultado positivo indica una sensibilización in vivo y por tanto se puede utilizar para indicar la presencia de anticuerpos autoinmunes. 1 CAJA DE LABTEST CONTIENE: 1 TUBO CON 10 MEMBRANAS (1MEMBRANA=1DAT) 1 TAMPÓN 10 FORMULARIOS DE RESULTA- DOS MATERILA NECESARIO ADICIONAL: 1 CENTRÍFUGA 1 PIPETA CON PUNTAS 1 TUBO 5ML POR CADA TEST
4 Extraer la muestra en tubo con EDTA, ACP, CPD. ***No se recomienda Lavar las células rojas 3 veces. (Ver procedimiento de lavado más abajo) Preparar un tubo (5ML) limpio y añadir 4 gotas de tampón. Coger 10µl del lavado de células rojas Mezclar los 10µl del lavado de células rojas con las 4 gotas del tampón, cuidadosamente. Tomar una membrana DAT e introducirla en el tubo que contiene la mezcla para permitir una completa migración. Procedimiento de lavado de Células Rojas (3 veces) Colocar la Tira DAT en el formulario de resultados para interpretar si el resultado es positivo o negativo. Repetir pasos 2/3/4 2 veces más Añadir 500µl de sangre entera en un tubo limpio de 15ml. Rellenar el tubo con 10ml de tampón salino y mezclar bien. Centrifugar el tubo 3 min a 1000g o 2300 rpm. Descartar el sobrenadante con tampón El objetivo es conseguir un sobrenadante claro o incoloro.
5 DAT NEGATIVO REACCIÓN NEGATIVA INDICA AUSENCIA DE ANTICUERPOS O COMPLEMENTO EN ERITROCITOS. DAT POSITIVO C = LÍNEA DE CONTROL Una reacción débil es un claro resultado positivo REACCIÓN POSITIVA (+/- hasta ++++) INDICA QUE LOS ERITROCITOS ESTÁN SENSIBILIZADOS (GLOBULOS ROJOS FIJADOS CON ANTICUERPOS Y/O C3) En un perro que sufre de anemia, es obligatorio realizar un DAT como se ilustra en los siguientes casos: DISTRIBUIDOR EXCLUSIVO: Eurovet Veterinaria comercial@euroveterinaria.com
6 XM NEGATIVO C = LÍNEA DE CONTROL REACCIÓN NEGATIVA FRENTE A <<XM>> INDICA QUE NO HAY ANTICUERPOS CIRCULANTES. EL DONADOR ES COMPATIBLE CON EL RECEPTOR. XM POSITIVO Una reacción débil es un claro resultado positivo REACCIÓN POSITIVA (+/- hasta ++++) FRENTE A <<XM>> INDICA LA PRESENCIA DE ALO-ANTICUERPOS O AUTOANTI- CUERPOS CIRCULANTES. EL DONADOR ES INCOMPATIBLE CON EL RECEPTOR. 1 CAJA DE LABTEST CONTIENE: 1 TUBO CON 5 MEMBRANAS (1MEMBRANA=1CROSSMATCH) 1 TAMPÓN DE LAVADO 1 TAMPÓN 1 (BLANCO) 1 TAMPÓN 2 (AZUL) 5 TUBOS LIMPIOS 5 TIRAS COLECTORAS 5 PIPETAS PEQUEÑAS (1ML) 5 PIPETAS PARA LAVADO (3ML) 5 FORMULARIOS DE RESULTADOS MATERILA NECESARIO ADICIONAL: KIT DE 5 CROSSMATCH EL LABTESTS XM PERMITE REALIZAR 5 TEST DE REACCIONES CRUZADAS. (1XM TEST=1RECEPTOR+1DONANTE) TODO EL MATERIAL ES INCLUIDO EN EL KIT, NO SE NECESITA NINGÚN REACTIVO. EL ÚNICO MATERIAL ADICIONAL NECESARIO ES UNA CENTRÍFUGA.
7 ENTRE ERITROCITOS DEL DONADOR Y SUERO/PLASMA DEL RECEPTOR Muestras: DONADOR: sangre entera (EDTA/ACD) RECEPTOR: centrifugar la sangre para obtener suero o plasma Tomar un tubo limpio y añadir 3 gotas del tampón 1 Sumergir el extremo de la tira colectora dentro de la sangre del DONADOR (10µl) Mezclar el extremo de la tira colectora en el tubo que contiene Tampón 1. Con una pipeta pequeña coger muestra de RECEPTOR (suero/plasma) y añadir 3 gotas dentro del tubo que contiene la suspensión. Mezclar suavemente la suspensión e incubar a Tª ambiente durante 10 minutos Con una pipeta grande coger Tampón de lavado y añadir 3ml dentro del tubo con la muestra. Centrifugar el tubo 1 minuto a 500G (o 1600RPM). Retirar el sobrenadante y repetir el paso 7 y 8 dos veces más. Añadir 3 gotas del Tampón 2 en el pellet y mezclar cuidadosamente. Coger una Tira XM e introducirlo en el tubo con la mezcla hasta que se complete la migración Colocar la Tira XM en el formulario de resultados para interpretar si el resultado es positivo o negativo. Reacción Cruzada Menor, realizar el mismo procedimiento tomando suero/plasma del DONADOR enfrentado con RBC del RECEPTOR.
8 DISTRIBUIDOR EXCLUSIVO: Eurovet Veterinaria
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