Pruebas para la orientación etiológica de una anemia

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1 Pruebas para la orientación etiológica de una anemia 1. VCM: Microcitosis o macrocitosis: Microcitosis: Ferropénica Talasemia Macrocitosis: Megaloblástica, otras 2. Reticulocitos: A. regenerativa o arregenerativa 3. VCM normal: normocítica : Arregenerativas: Aplasia medular Regenerativas: A. Hemolíticas Hemolisis intravascular: Hemoglobinemia Hemoglobinuria Disminución haptoglobina Hemolisis extravascular: Bilirrubinemia Esplenomegalia N O R M O C I T I C A S

2 ANEMI AS MI CROCÍ TI CAS 1. El hierro en el organismo 2. Anemia ferropénica: métodos de estudio Determinación de la sideremia (colorimetria) Capacidad total e índice saturación transferrina (saturación y sideremia) Determinación de la ferritinemia (RIA o IRMA) Tinción de Perls del aspirado de médula ósea 3. Diagnóstico diferencial anemias microcíticas

3 ANEMI AS MI CROCÍ TI CAS 1. El hierro en el organismo De transporte: TRANSFERRINA De depósito: FERRITINA (s) y HEMOSIDERINA (no s) Funcional: HEMOGLOBINA TRANSFERRINA: plasma Absorción = Excreción HEMOGLOBINA MO eritroblastos FERRITINA: MO eritroblastos HEMOSIDERINA: macrófagos MO, hígado y bazo

4 2. Anemia ferropénica: métodos de estudio Etapas de la deficiencia férrica: Depósito Transporte Funcional Ferropenia latente Ferropenia Larvada A. FERROPENICA: de Hb FROTIS: microcitos hipocrómicos DATOS de LABORATORIO El hierro en el organismo El hierro de transporte Sideremia: Fe en suero Índice de saturación de la transferrina (IST) Capacidad total de saturación de la transferrina (CTST) El hierro de depósito Ferritina Hemosiderina

5 Determinación de la sideremia TF Fe 3+ PRECIPITACIÓN TF + Fe 2+ REDUCCIÓN Fe 2+ + Cromógeno Compuesto coloreado Valores normales: hombres = μg/dl; mujeres = μg/dl SIDEREMIA Anemia ferropénica A. enfermedades crónicas Anemia inflamatoria Hemocromatosis (mayor absorción de Fe) Talasemias (trastorno en el uso de Fe, precipita) SIDEREMIA A. sideroblástica (trastorno en el uso de Fe) Alcohol (hepatitis agudas y crónicas)

6 Capacidad total e índice saturación transferrina CTST : Medida indirecta de TF (todo el Fe está unido a la TF) Suero problema + exceso de Fe satura la TF Determinación de sideremia después de eliminar exceso de Fe libre Valores normales: 2,5 4 g/l IST (33%): depende de la sideremia A mayor sideremia, mayor IST y viceversa Si disminuye la ferritina, aumenta la CTST Anemia ferropénica verdadera (disminución de Fe): Disminuye sideremia Disminuye IST Disminuye ferritina Aumenta CTST Trastornos utilización de Fe por bloqueo de los depósitos: Disminuye sideremia Disminuye IST Ferritina y CTST valores normales

7 Determinación de la ferritinemia Ferritina: compuesto hidrosoluble de Fe 3+ unido a una proteína (apoferritina). Fe depósito en hígado, médula ósea, bazo Determinación por radioinmunoanálisis (RIA) o inmunorradiométrica (IRMA) IRMA: Muestra + antiferritina humana fase sólida Incubación, lavado Extracción Ab marcado no unido Radioactividad unida proporcional a la ferritina en la muestra Valores medios normales: 123 µg/l (hombres) / 56 µg/l (mujeres) Anemia ferropénica: Disminuye ferritina Sobrecarga férrica: Aumento ferritina

8 Tinción de P erls del aspirado de médula ósea Hemosiderina: Fe de depósito (insoluble). Fe 2+ + apoferritina. Es el hierro no hemínico de los eritroblastos; abundante en las células macrofágicas (SMF) Fundamento: Eritroblastos con hemosiderina = sideroblastos Fe 2+ apoferritina ClH apoferritina + Fe 2+ Fe 2+ + Ferrocianuro potásico Ferrocianuro férrico (azul verdoso) TP: Presencia de hemosiderina en el citoplasma de cualquier tipo de células, de una extensión de sangre o de médula Método: 1. Fijar con alcohol metílico 2. Introducir la extensión fijada en solución clorhídrica de ferrocianuro a Tª ambiente 3. Lavar 4. Contrateñir con hematoxilina de Harris 5. Lavar con agua y con etanol, lavar, secar y observar gránulos intensos color azulverdoso que se observan en la zona de macrófagos

9 Tinción de P erls del aspirado de médula ósea Utilidad: Estudio del Fe medular para conocer las reservas de Fe Valora el Fe no hemínico del citoplasma de los eritroblastos Determinar el número de precipitados de hemosiderina (sideroblastos): Grado 0: Ausente Grado I: Disminuido Grado II: Normal Grado III: Aumentado Ferropenia: 0 I Sobrecarga: II III Tinción de Perls Detección de anemia sideroblástica trastorno en síntesis de grupos hemo, aparecen sideroblastos en anillos.

10 3. Diagnóstico diferencial anemias microcíticas Anemia ferropénica Sideremia IST CTST Ferritina Sideroblastos Eritropoyesis Ineficaz A. enfermedades = NO crónicas NO A. sideroblásticas SI (en anillos) β Talasemia minor SI

11 Diagnóstico diferencial anemias microcíticas Anemia ferropénica A. sideroblástica ß Talasemia minor Tinción de Perls