HER2 en Cancer Gastrico

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1 HER2 en Cancer Gastrico Dr. Alejandro Corvalan Laboratorio de Patologia Molecular y Epidemiologia Centro de Investigaciones Medicas Departamento de Hematoloiga &Oncologia P.Universidad Catolica de Chile 17 Marzo 2010

2 Introducción El cáncer gástrico (CG) es la neoplasia de mayor mortalidad en Chile. Las bases moleculares del CG han comenzado de identificarse, en particular con el aislamiento de genes asociados a pronóstico de esta enfermedad. El oncogen c-erbb2, localizado en el cromosoma 17q21, codifica para una proteína de transmembrana relacionada con receptor de factor de crecimiento. La activación por amplificación de c-erbb2 ha sido implicada como factor pronóstico en CG Sin embargo existen reportes contradictorios sobre verdadero valor pronóstico de este gen.

3 Official Symbol ERBB2 and Name: v-erb-b2 erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 2, neuro/glioblastoma derived oncogene homolog (avian) [Homo sapiens] Other Aliases: CD340, HER-2, HER-2/neu, HER2, NEU, NGL, TKR1 Other Designations: c-erb B2/neu protein; erbb-2; herstatin; neuroblastoma/glioblastoma derived oncogene homolog; v-erb-b2 avian erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 2 (neuro/glioblastoma derived oncogene homolog) Chromosome: 17; Location: 17q21.1 Annotation: Chromosome 17, NC_ ( ) MIM: GeneID: 2064

4 Determinación inmunohistoquímica de sobreexpresión de c-erbb Negativo Negativo (1+) Positivo (2 +) Positivo (3+) Amplificación génica por FISH INDICADO

5 DETECCIÓN DE AMPLIFICACIÓN DEL ONCOGÉN c- erbb-2 MEDIANTE FISH

6 Doscientos trece casos retrospectivos (tejido incluido en parafina) de CG (138 hombres y 74 mujeres, edad 62 años, rango años) fueron seleccionados de los archivos del ICHJED-HCSBA. De cada caso se seleccionó una inclusión de tumor para estudiar la sobreexpresión de c-erbb2 por Inmunohistoquímica (Ac policlonal A0485 y SA-Px, DAKO). Los criterios de positividad se basaron los criterios Guidelines for scoring HercepTest (GSHT, DAKO). Los resultados fueron correlacionados con variables clínicopatológicas y de sobrevida utilizando los métodos de chi-cuadrado (x2) y Kaplan-Meier (Epiinfo2000, Stata 6.0). La confirmación de sobreexpresión por inmunohistoquímica se realizó por FISH (Fluorescent in situ hybridization) en 10 casos seleccionados (6 casos IHQ-1+, 1 casos IHQ-2+ y 3 casos IHQ-3+) con el sistema PathVysion Her-2 DNA probe kit (Vysis).

7

8 Resultados La tinción Inmunohistoquímica reveló c-erbb2 en membrana plasmática en forma completa o parcial y/o tinción citoplasmática en células tumorales. Basándose en los criterios GSHT identificamos 14 (6.6%) de 213 casos con tinción de membrana completa en más del 10% de células tumorales. El análisis de correlaciones clínico-patológicas no demostró asociaciones específicas entre la sobreexpresión de c-erbb2 y variables específicas (edad, sexo, TNM, histología). Los datos de sobrevida fueron obtenidos en 4 pacientes c-erbb2 positivo y 68 c-erbb2 negativo, no observándose diferencias entre ellos (p=0.68).

9 Overexpresion/Amplification of c-erbb2 in GC c-erbb2 + c-erbb2-14 casos 199 casos N (%) N (%) p sexo hombre 9 (64,3) 127 (63,8) mujer 4 (28,5) 69 (34,6) 0,49 edad promedio 63,2 (26-79) 61,8 (20-79) tamaño tumor < 5cm. 6 (42,8) 51 (25,6) > 5 cm. 3 (21,4) 66 (33,1) 0,12 pared gástrica T0-T1 3 (21,4) 50 (12,9) T2-T4 10 (71,4) 143 (71,8) 0,71 linfonodos negativo 1 (7,1) 46 (37,3) positivo 4 (28,5) 90 (45,2) 0,71 histología intestinal 10 (71,4) 110 (55,2) difuso 3 (21,4) 81 (40,7) 0,26

10 Kaplan-Meier survival estimates, by cerbbpos positive 4 cases negative 63 cases P= analysis time

11 Correlación entre sobreexpresión de c-erbb2 por inmunohistoquímica y amplificación de c-erbb2 por hibridación por fluorescencia in situ (FISH) en 10 casos de cáncer gástrico. ID IHQ FISH CG CG CG CG CG CG CG CG CG CG

12 Vargas et al 2007

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14 Discusión La frecuencia de sobreexpresión de c-erbb2 por inmunohistoquímica en casos retrospectivos de cáncer gástrico operados fue de 6.6%, lo cual es menor a lo reportado en la literatura. La correlación de la sobreexpresión de c-erbb2 con características clínicopatológicas del cáncer gástrico no demostró asociaciones específicas.la sobreexpresión de c-erbb2 no demostró un valor pronóstico en mortalidad global y mortalidad por cáncer gástrico. La correlación de la sobreexpresión de c-erbb2 por inmunohistoquímica con la amplificación de c-erbb2 por hibridación por fluorescencia in situ (FISH) demostró buena correlación en los casos IHQ positiva (2+ y 3+). Sin embargo 3 de 6 casos IHQ negativa (1+) demostraron amplificación por FISH, lo cual indica que sería necesario confirmar todos los casos IQH 1+ (69 casos) para confirmar el significado clínico-patológico y rol pronóstico de c- erbb2 en cáncer gástrico.

15 Evaluar la utilidad de FISH en carcinomas mamarios con inmunohistoquímica grado 2+

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17 Se analizaron 37 casos de carcinoma mamario: Estos casos fueron referidos al servicio de anatomía patológica de la Pontificia Universidad católica de Chile entre el año , para evaluación de sobreexpresión de c-erbb-2 por FISH. Antecedente de tinción inmunohistoquímica grado 2+.

18 FISH c-erbb-2

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22 CONCLUSIÓN Los resultados muestran que la técnica de FISH detecta amplificación génica significativa en un tercio de los casos con inmunohistoquímica grado 2+. Estos resultados demuestran que esta técnica es útil para seleccionar mejor, pacientes para bioterapia de carcinoma mamario. FISH ha demostrado ser la mejor técnica de detección de sobreexpresión del oncogén c-erbb2, por su mayor correlación con pronóstico y tratamiento con bioterapia. Actualmente se están realizando métodos cromogénicos CISH para evaluar la sobreexpresión de c-erbb2 como alternativa complementaria a la inmunohistoquímica, sin embargo éste requiere respaldo de FISH.

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