2ºTaller Mejoramiento de semillas de concha de abanico

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1 PROYECTO DE COOPERACIÓN UE-PERU / PENX 2ºTaller Mejoramiento de semillas de concha de abanico Marzo 2009 Elisabeth von Brand Consorcio Asecal-Mercurio Consultores

2 METODOS DE EVALUACION DE PLOIDIA

3 Número de Cromosomas: Ostión diploide (2n) Ostión triploide (3n)

4 Consecuencias celulares de las poliploidías: -Aumento del volumen celular y nuclear -En células triploides el volumen nuclear aumenta 1,5 veces, por lo que aumenta el diámetro

5 Tipo de evaluación 1.- Destructivo (embriones tempranos y larvas) Número cromosómico

6 Tipo de evaluación 2.- No destructivo (Juveniles / Adultos) Número cromosómico en biopsias branquiales Cantidad de ADN y diámetro de núcleo en hemocitos Inspección visual de gónada MRI (resonancia magnética)**

7 1.- Destructivo (embriones tempranos y larvas) Número cromosómico Ostión diploide (2n) Embriones Larvas Antimitótico Fijación Ostión triploide (3n) Tinción Conteo

8 2.- No Destructivo (Adultos) Número cromosómico Ostión diploide (2n) Biopsia branquial Antimitótico Fijación Ostión triploide (3n) Tinción Conteo

9 Biopsia de tejido branquial en Ostión del Norte

10 2.- No Destructivo (Juveniles / Adultos) Diámetro de núcleo y cantidad de ADN en hemocitos Extracción de hemolinfa en ostión del Norte

11 Diámetro nuclear de hemocitos de Ostión del Norte Diploide Teñidos con Orceína acética. Se observan las medidas del diámetro nuclear mayor

12 Diámetro nuclear de hemocitos de Ostión del Norte Triploide Teñidos con Orceína acética. Se observan las medidas del diámetro nuclear mayor

13

14 Diámetro nuclear hemocitos (µm) Histograma de frecuencia para diámetro nuclear en hemocitos de ostiones diploides y triploides (n=96).

15 Determinación de la cantidad de DNA en unidades arbitrarias Fluorescencia utilizando DAPI Hemocitos de ostión 2n

16

17 Argopecten purpuratus 2n 3n 40% Ostiones diploides Ostiones triploides 35% Porcentaje de observaciones 30% 25% 20% 15% 10% 5% 0% <= 3 (3,3.5] (3.5,4] (4,4.5] (4.5,5] (5,5.5] (5.5,6] (6,6.5] (6.5,7] (7,7.5] > 7.5

18 2.- No Destructivo (Adultos) Inspección Visual

19 2.- Destructivo (Adultos): disección de gónada Inspección Visual

20 GAMETOGÉNESIS DE TRIPLOIDES Gónada de ostión triploide (T) y control (C). Secciones histológicas de gónada de ostión triploide (izquierda) y diploide (derecha). M: Acinos masculinos, F: Acinos femeninos.

21 Ostión triploide (izquierda) y diploide (derecha)

22 Anatomía Interna ostión del Norte MA R HP

23 Genética del ostión Argopecten purpuratus Resonancia Magnética (MRI) Estilete cristalino Músculo Aductor Hepatopáncreas R Gónada HP

24 Análisis con Resonancia Magnética No destructivo No afecta al animal en ningún sentido Podría ser apoyo en programas de selección REQUIERE AUN MÁS INVESTIGACIÓN

25 NON-DESTRUCTIVE METHOD TO STUDY THE INTERNAL ANATOMY OF THE CHILEAN SCALLOP ARGOPECTEN PURPURATUS Journal of Shellfish Research, vol.28 Nº2: 1-3 (2009) Elisabeth von Brand,* Magdalena Cisterna, Germán Merino, Eduardo Uribe, Claudio Palma-Rojas, Matías Rosenblitt & José Luis Albornoz

26 PROYECTO DE COOPERACION UE-PERU / PENX ueperu@mincetur.gob.pe Elisabeth von Brand Consorcio Asecal-Mercurio Consultores

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