Práctica 3: Identificación de Componentes de la Pared Celular Vegetal

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1 Práctica 3: Identificación de Componentes de la Pared Celular Vegetal

2 Práctica 3 Contenidos teóricos La pared celular Modificaciones Desarrollo práctico

3 La Pared Celular Citosol Pared celular Pared celular Lámina media Citosol Membrana plasmática Micrografía electrónica de transmisión de paredes celulares. La pared primaria es construida cuando la célula es joven. Las paredes secundarias, más gruesas, se incorporan cuando las células han dejado de crecer. (x 3000).

4 Interior célula 2 Pared Celular: Pared celular primaria Capas Capas de pared celular secundaria Membrana celular Lamela media Interior célula 1 Micrografía electrónica de transmisión de paredes celulares. Se aprecian las diferentes capas que forman la pared en una célula adulta. La pared secundaria, al ser la última en formarse, aparece pegada a la membrana plasmática. (x 3000).

5 Pared celular primaria Macrofibrillas de celulosa al m.e. (disposición desordenada y entrecruzada)

6 La matriz de celulosa Hemicelulosas Glicoproteínas Microfibrillas de celulosa Moléculas de celulosa Pectinas ácidas Pectinas neutras

7 La Pared Celular: Modificaciones Lignificación. Cutinización. Suberificación. Gelificación. Pigmentación. Mineralización.

8 La Pared Celular: Modificaciones Lignificación. Impregnación de la pared celular con lignina. Se sitúa entre las capas de celulosa por intususcepción. Responsable de la gran dureza de algunas paredes. Aparece en células conductoras, mecánicas y de sostén. Maderas blandas y maderas duras.

9 La Pared Celular: Modificaciones Suberificación: superposición (por aposición) de láminas de suberina (polímero de ácidos grasos saturados e insaturados). Aparece fundamentalmente en tejidos derivados del felógeno. Confiere gran impermeabilidad y defensa contra agentes químicos, microorganismos, etc.

10 La Pared Celular: Modificaciones Cutinización: acumulación de cutina por aposición y por intususcepción. Químicamente muy similar a la suberina. Aparece en células en contacto con el medio externo. Forma la cutícula que recubre las hojas y algunos tallos.

11 La Pared Celular: Modificaciones Gelificación: solubilización de la pectina y acumulación de gomas y mucílagos. Se da en frutos carnosos maduros. Pigmentación: proceso de coloración de las paredes. Debido a sustancias tánicas. Mineralización: impregnación con sales inorgánicas como sílice, carbonato cálcico, oxalato cálcico, etc.

12 Identificación de: Lignina, Suberina y Cutina

13 Detección de la Lignina Hacer cortes finos de tallo de geranio o de hiedra con el micrótomo de congelación. Colocar un corte sobre un portaobjetos. Secar ligeramente con papel de filtro. Añadir una gota de floroglucina alcohólica al 1% y dejar secar al aire. Añadir una gota de ClH concentrado. Colocar un cubreobjetos y observar al microscopio. Los tejidos lignificados adquieren una coloración rojiza.

14 Detección de la Suberina Hacer cortes finos de tallo de geranio con el micrótomo de congelación. Verter los cortes en un cestillo metálico. Sumergir los cortes en alcohol de 70º durante 3 minutos. Sumergir los cortes en Sudan III durante CUT-20 minutos. Sacarlos y lavarlos varias veces con agua destilada. Depositar los cortes ya tratados en una placa Petri con agua. Colocar en un portaobjetos, poner un cubre y observar. La suberina (en súber) se tiñe de color naranja.

15 Detección de la Cutina Hacer cortes finos de tallo de hiedra con el micrótomo de congelación. Verter los cortes en un cestillo metálico. Sumergir los cortes en Sudan III durante CUT- 20 minutos. Sacarlos y lavarlos varias veces con agua destilada. Depositar los cortes ya tratados en una placa Petri con agua. Colocar en un portaobjetos, poner un cubre y observar. La cutina (en cutícula) se tiñe de color naranja.

16 Unidad de control Cuchilla Micrótomo de congelación Platina de congelación Indicación del grosor (en micras) del corte LIG SUB CUT

17 Cortes de tallo de geranio obtenidos con el micrótomo de congelación LIG SUB

18 Colocar uno de los cortes sobre un portaobjetos con ayuda de un pincel LIG SUB

19 Con ayuda de una tira de papel de filtro secar el corte ligeramente LIG SUB CUT

20 Añadir un gota de floroglucina alcohólica al 1% sobre el corte y dejar que se evapore.

21 Añadir un gota de HCl concentrado sobre el corte.

22 Tapar con un cubreobjetos y observar al microscopio. LIG SUB CUT

23 X 400. MÉDULA CAMBIUM VASCULAR XILEMA Paredes secundarias lignificadas teñidas con floroglucina CORTEZA FLOEMA

24 CORTEZA CAMBIUM VASCULAR FLOEMA Paredes secundarias lignificadas teñidas con floroglucina XILEMA MÉDULA X 400.

25 Verter los cortes sobre una cestilla metálica. Cestillos metálicos SUB CUT

26 Colocar el cestillo metálico con los cortes en etanol de 70º durante 3 minutos. Etanol de 70º

27 Colocar el cestillo metálico con los cortes en Sudán III durante CUT-20 minutos. Sudán III SUB CUT

28 Hacer 2 o 3 lavados con agua destilada hasta que esta salga incolora. Agua destilada SUB CUT

29 Verter los cortes ya tratados con Sudán III en una cápsula de Petri con agua. Cestillo invertido Agua destilada SUB CUT

30 Con ayuda de un pincel colocar uno de los cortes tratados encima de un portaobjetos. Cortes tratados con Sudán III SUB CUT

31 CORTEZA SÚBER TRICOMAS X 100.

32 CORTEZA SÚBER Paredes celulares ricas en suberina X 400.

33 Cortes de tallo de hiedra obtenidos con el micrótomo de congelación LIG CUT

34 Verter los cortes de tallo de hiedra sobre un cestillo metálico.

35 X 100. COLÉNQUIMA FLOEMA. EPIDERMIS CON CUTÍCULA. XILEMA. CORTEZA. MÉDULA.

36 CORTEZA. COLÉNQUIMA EPIDERMIS CUTÍCULA (Capa rica en Cutina). X 400.

37 Disposición de las microfibrillas APOSICIÓN INTUSUSCEPCIÓN LIG CUT

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