Grupo Mexicano de Investigación en Células Troncales y Medicina Regenerativa

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1 Grupo Mexicano de Investigación en Células Troncales y Medicina Regenerativa PRIMER CONGRESO NACIONAL CELULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA Auditorio Raoul Fournier Villada Facultad de Medicina. Universidad Nacional Autónoma de México de septiembre de

2 GRUPO MEXICANO DE INVESTIGACION EN CÉLULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA PRIMER CONGRESO NACIONAL CÉLULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA Auditorio Raoul Fournier Villada. Facultad de Medicina. UNAM. México DF Septiembre 18-20, 2013

3 COMITÉ ORGANIZADOR María Antonieta Chávez González Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO Jesús Chimal- Monroy Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México, DF. MÉXICO Héctor Mayani Viveros Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO COMITÉ CIENTÍFICO María Antonieta Chávez González Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO Jesús Chimal- Monroy Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México, DF. MÉXICO Héctor Mayani Viveros Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO Dr. Juan J. Montesinos Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO Dr. Iván Velasco Instituto de Fisiología Celular UNAM. México, DF. MÉXICO FINANCIAMIENTO Programa de Doctorado en Ciencias Biomédicas UNAM Programa de Maestría y Doctorado en Ciencias Bioquímicas UNAM Programa de Maestría y Doctorado en Ciencias Médicas, Odontológicas y de la Salud, UNAM OTROS FINACIAMIENTOS Cordón Vital Abalat, S.A. de C.V. Despegar.com 2

4 Primer Congreso Nacional CÉLULAS TRONCALES Y MEDICINA REGENERATIVA 18 al 20 de septiembre del 2013 Objetivo: Conjuntar a los diferentes grupos nacionales, tanto básicos como clínicos, trabajando en el área de las células troncales y la medicina regenerativa, para dar a conocer su trabajo e impulsar la interacción entre ellos. Tópicos: Células Troncales (CT) Pluripotentes (ESC/iPSC); CT Neurales; CT y Microambiente; CT Hematopoyéticas; CT y Cáncer; Regeneración de Órganos y Tejidos; Ingeniería de Tejidos y Medicina Regenerativa; Bioética y Legislación. Sesiones: Dos Conferencias Magistrales (cada una de 45 minutos); 8 Simposios (cada uno de 120 minutos; 4 o 5 presentaciones de 20 o 25 min c/u y al final 20 min de preguntas); tres sesiones para la presentación de trabajos libres en carteles (cada una de 90 minutos) y 1 mesa redonda. Fechas: 18, 19 y 20 de septiembre de Lugar: Auditorio Raoul Fournier de la Facultad de Medicina, UNAM. 3

5 PROGRAMA MIÉRCOLES 18 DE SEPTIEMBRE 08:30 09:00 Bienvenida e Inauguración 09:00 10:00 Conferencia Magistral. Dr. Mahendra Rao. Director, NIH Center for Regenerative Medicine, National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, USA Células Troncales y su impacto en el campo de la Medicina Regenerativa 10:00 11:30 Simposio 1: Células Troncales Pluripotentes Moderador. Dr. Horacio Merchant. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México, DF. MÉXICO 11:30 12:00 Receso (café) Dr. Luis Covarrubias Instituto de Biotecnología, UNAM. Cuernavaca, Morelos. MÉXICO Lo que sabemos y no sabemos de las células troncales pluripotentes Dra. Diana Escalante Instituto de Fisiología Celular UNAM. México, DF. MÉXICO. Células troncales embrionarias pluripotenciales como modelo de biología del desarrollo Dr. Iván Velasco Instituto de Fisiología Celular UNAM. México, DF. MÉXICO Diferenciación neuronal de células troncales pluripotenciales para diseñar estrategias terapéuticas para afecciones neurológicas 12:00 14:00 Simposio 2: Células Troncales Neurales Moderador: Dr. Fabián Díaz. Instituto Nacional de Perinatología, SS. México, DF. MÉXICO. Dr. Gabriel Gutiérrez Ospina Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México, 4

6 DF. MÉXICO Estudio de algunos elementos citológicos y moleculares, extrínsecos e intrínsecos, que modulan la diferenciación de las células troncales neurales en el sistema nervioso central de roedores Dra. Anayansi Molina Instituto Nacional de Perinatología, SS. México, DF. MÉXICO La Histamina como factor neurogénico de células troncales neurales. Dra. Graciela Gudiño C.U.C.B.A. Universidad de Guadalajara. Guadalajara Jalisco. MÉXICO Diferenciación de células troncales para la reparación de lesiones medulares Dr. Oscar González- Pérez Universidad de Colima. Colima. MÉXICO La zona ventricular- subventricular del cerebro adulto: Una fuente de oligodendrocitos contra enfermedades desmielinizantes? 14:00 15:30 Comida 15:30 18:00 Simposio 3: Células Troncales y Cáncer Moderador: Dr. Jorge Meléndez INMEGEN, México DF. MÉXICO María Antonieta Chávez González Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO Células Troncales en Leucemias Mieloides: Estrategias para su eliminación Dr. Jesús Santa- Olalla Universidad Autónoma del Estado de Morelos- Hospital del Niño y el Adolescente Morelense. Cuernavaca, Morelos. MÉXICO Tumores cerebrales y su relación con células troncales 5

7 Dr. Marco A. Velasco Facultad de Medicina, UNAM. México DF. MÉXICO Identificación de antagonistas para receptores diferenciales de células troncales tumorales mediante cribado virtual Dra. Martha Robles Facultad de Medicina, UNAM. México DF. MÉXICO Caracterización del papel que juega la interacción de la ruta de señalización Wnt con la de factores inducibles por hipoxia en el mantenimiento del fenotipo de célula troncal de cáncer de colon Dr. Alejandro García Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México, DF. MÉXICO El papel de Nanog en la tumorigenicidad de células troncales cancerosas humanas JUEVES 19 DE SEPTIEMBRE 09:00 11:00 Simposio 4: Células Troncales y su nicho Moderador: Dr. Efrén Montaño Centro Nacional de la Transfusión Sanguínea, México DF. México Dr. Antonio Alvarado IMSS, México DF. MÉXICO Caracterización biológica de células progenitoras endoteliales Dra. Eugenia Flores Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO El nicho de las células troncales hematopoyéticas Dra. Lizeth Fuentes UANL, Monterrey, Nuevo León. México Aislamiento y caracterización de dos subpoblaciones de células troncales 6

8 mesenquimales de membrana amniótica humana y su diferenciación osteogénica Dr. Juan J. Montesinos Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO Células Troncales Mesenquimales e Inmunosupresión 11:00 12:30 Sesión de Carteles 1 (café) 12:30 14:30 Simposio 5: Células Troncales Hematopoyéticas Moderador: Dr. Xavier López K. INCMNSZ. México, DF. MÉXICO Dr. Héctor Mayani Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO Células troncales hematopoyéticas humanas: Expansión y plasticidad in vitro Dr. Edelmiro Santiago Facultad de Estudios Superiores Zaragoza, UNAM, México, DF. MÉXICO Evidencia de la movilización de células troncales- progenitoras por caseína Dra. Rosana Pelayo Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO Regulación de la diferenciación linfoide temprana en la infección y la leucemia Julio Cáceres Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN. México, DF. MÉXICO Nuevas rutas en la base molecular de la leucemia linfoblástica aguda T (T- ALL) 7

9 14:30 16:00 Comida 16:00 18:30 Simposio 6: Regeneración de Órganos y Tejidos Moderador: Dr. Jesús Chimal- Monroy Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México, DF. MÉXICO Dr. Edgar Krotzsch Centro Nacional de Investigación y Atención de Quemados, Instituto Nacional de Rehabilitación. MÉXICO, DF. México El papel de las citocinas y sus receptores en la regulación de los procesos de regeneración y sus secuelas: del modelo animal a la terapéutica Dr. Rodrigo Cuervo Facultad de Ciencias Biológicas y Agropecuarias, Universidad Veracruzana, Tuxpan, Veracruz MÉXICO La regeneración de la aleta tribasal del pez Polypterus y la señalización de Shh en su morfogénesis Dra. Marina Macías Instituto de Fisiología Celular UNAM. México, DF. MÉXICO Modulación de los co- reguladores negativos de la vía del TGF- beta durante la regeneración hepática. Dr. Federico Castro CINVESTAV, IPN. México, DF. MÉXICO División celular asimétrica en la superficie ocular: implicaciones en el proceso de diferenciación de las células troncales de la córnea de mamífero Dra. Mónica Lamas CINVESTAV, IPN. México, DF. MÉXICO Epigenética y células troncales: Nuevas perspectivas para la regeneración retinal en mamíferos 8

10 VIERNES 20 DE SEPTIEMBRE 09:00 11:00 Simposio 7: Ingeniería de Tejidos y Medicina Regenerativa Moderador: Dra. Verónica Fernández Sánchez Centro Nacional de la Transfusión Sanguínea, México DF. México Dra. Cristina Velasquillo Biotecnología, UITTC ymrb, Instituto Nacional de Rehabilitación. México, DF. MÉXICO Desarrollo de hueso de novo mediante técnicas de ingeniería de tejidos Dra. Atlántida Raya Hospital Infantil de México, Federico Gómez. México, DF. MÉXICO Ingeniería de tejidos en Urología: De la ciencia básica a la aplicación clínica Dra. Consuelo Mancías UANL, Monterrey, Nuevo León. México Células de la sangre de cordón umbilical para el tratamiento de Parálisis Cerebral Dr. David Gómez Almaguer UANL, Monterrey, Nuevo León. México Células de la sangre de cordón umbilical para el tratamiento de Diabetes 11:00 12:30 Sesión de carteles 2 (café) 12:30 14:30 Simposio 8: Bioética y Legislación Dr. Armando Mansilla Secretaría de Salud, México, DF. MÉXICO Dr. Ricardo Tapia Instituto de Fisiología Celular UNAM. México, DF. MÉXICO. Principio de la vida humana y células troncales Dr. Rubén Lisker INCMNSZ. México, DF. MÉXICO Problemas éticos del uso de las células troncales 9

11 14:30 16:00 Comida Dra. Cristina Islas CUCS, U de G. Guadalajara, Jalisco, México Bioética en la Investigación Clínica y Biomédica: Utilización de Células Troncales Dra. María Medina Universidad Autónoma de Nayarit, Tepic, Nayarit. MÉXICO El turismo asociado a las células troncales 16:00 17:30 Mesa Redonda Mitos y Realidades de la Medicina Regenerativa Moderadores: Dra. Mónica Lamas CINVESTAV, IPN. México, DF. MÉXICO Dr. Jesús Chimal- Monroy Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México, DF. MÉXICO INVITADOS Dr. Horacio Merchant. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México, DF. MÉXICO Dr. Luis Covarrubias Instituto de Biotecnología, UNAM. Cuernavaca, Morelos. MÉXICO Dr. David Gómez Almaguer UANL, Monterrey, Nuevo León. MÉXICO Dra. María Medina Universidad Autónoma de Nayarit, Tepic, Nayarit. MÉXICO Dr. Gonzalo Álvarez Sánchez Comisión Federal para la Protección contra Riesgos Sanitarios. México, DF. MÉXICO 17:30 17:45 Clausura 10

12 RESÚMENES CONFERENCIAS PLENARIAS LO QUE SABEMOS Y NO SABEMOS DE LAS CÉLULAS TRONCALES PLURIPOTENTES Luis Covarrubias (IBT- UNAM, Mexico); Omar Collazo- Navarrete (IFC- UNAM, Mexico); Celina García (IBT- UNAM, Mexico); Magdalena Guerra- Crespo, (IFC- UNAM, Mexico), Gilda Guerrero- Flores (IBT- UNAM, Mexico); Maya- Espinosa, Guadalupe (IFC- UNAM, Mexico); Jorge Landgrave- Gómez, Niurka Trujilloo- Paredes, Concepción Valencia (IBT- UNAM, Mexico) A 30 años del descubrimiento en mamíferos de células troncales capaces de derivar a todos los tipos celulares del organismo adulto (i.e., células troncales pluripotentes; CTP) se han consolidado las condiciones para su derivación y mantenimiento. Actualmente células con estas características se pueden derivar del embrión en diferentes fases de su desarrollo, y también a partir de precursores de células germinales. Mas recientemente, y en un lapso de tiempo muy corto, se han consolidado protocolos de reprogramación que permiten inducir la derivación de CTPs a partir de células somáticas del embrión o del adulto, llamadas ictp (en inglés ipsc). No obstante la multitud de líneas celulares pluripotentes existentes, es evidente que no todas tienen la misma capacidad de diferenciación, en particular cuando se comparan las derivadas del embrión con las ictp. Si bien el estado epigenético es un indicio de lacapacidad de diferenciación, aún es necesario establecer referencias precisas que sean predictivas del grado de pluripotencia de cada línea celular. Por otro lado, se han establecido protocolos para que a partir de CTPs se puedan derivar tipos celulares específicos (e.g., neuronas, células pancreáticas, músculo, hepatocitos) pero, en general, son complicados e ineficientes. Solo una investigación sistemática de los requerimientos durante el desarrollo embrionario dentro de cada linaje ayudará a sobrepasar este enorme reto. En esta presentación se ejemplificará la problemática asociada a las CTPs en estudios dirigidos a entender los mecanismo celulares y moleculares de la diferenciación hacia neuronas dopaminérgicas. (Apoyado por CONACyT ). CÉLULAS TRONCALES EMBRIONARIAS PLURIPOTENCIALES COMO MODELO DE BIOLOGÍA DEL DESARROLLO. Diana Escalante- Alcalde y Roberto Sánchez- Sánchez*. División de Neurociencias, Instituto de Fisiología Celular- UNAM. México. *Dirección actual: Instituto Nacional de Rehabilitación. La característica de pluripotencialidad de las células troncales embrionarias (CTE) se puede explotar no solo para diferenciar células hacia tipos celulares de interés con fines terapéuticos sino que nos permite también estudiar el efecto de mutantes que afectan el desarrollo embrionario en etapas muy tempranas del mismo. Nuestro laboratorio emplea las CTE para abordar los efectos de la inactivación de la fosfatasa de lípidos fosfatados- 3 o LPP3 (del inglés Lipid Phosphate Phosphatase) en el desarrollo neural ya que la mutación en el ratón es letal en etapas tempranas del desarrollo. 11

13 Las CTE deficientes en LPP3, cuando se diferencian in vitro a neuronas espinales, presentan una considerable reducción de la proliferación celular y de progenitores neurales. Esto tiene como consecuencia la reducción de la formación de precursores neurales y de neuronas jóvenes diferenciadas a partir de CTE mutantes. Adicionalmente, durante el proceso de diferenciación las células deficientes en la enzima presentan un incremento considerable en la muerte celular con características apoptóticas. Las neuronas mutantes en LPP3 poseen además un defecto en el crecimiento neurítico parcialmente mediado por la activación de la vía de Rho y PI3K. Algunos de los defectos observados parecen estar causados por un incremento en la producción intracelular de dihidroesfingosina- 1- fostato (DHS1P) la cual es producida por la fosforilación de la dihidroesfingosina por la cinasa de esfingosina 1 (SK1) en retículo endoplásmico. Nuestros datos sugieren que la LPP3 trabaja en conjunto con la SK1 para regular los niveles intracelulares de DHS1P. Este dato es muy relevante ya que la acumulación de DHS1P se ha ligado a la aparición de defectos del cierre del tubo neural, uno de los fenotipos mas consistentes en los embriones deficientes en la LPP3. Nuestro estudio con células troncales nos ha permitido evidenciar funciones relevantes de la LPP3 para la correcta formación del sistema nervioso en etapas tempranas del desarrollo embrionario. DIFERENCIACIÓN NEURONAL DE CÉLULAS TRONCALES PLURIPOTENCIALES PARA DISEÑAR ESTRATEGIAS TERAPÉUTICAS PARA AFECCIONES NEUROLÓGICAS Iván Velasco. Instituto de Fisiología Celular- Neurociencias, Universidad Nacional Autónoma de México, México, D.F , México. Las células troncales pluripotenciales, en particular las embrionarias (ESC) y las pluripotenciales inducidas (ipsc) se han diferenciado a subtipos neuronales relevantes para enfermedades neurológicas, como la Esclerosis Lateral Amiotrófica (ELA) y la Enfermedad de Parkinson. Nuestro grupo ha generado neuronas con características similares a las motoras de la médula espinal, así como neuronas que secretan dopamina de ESC de ratón y de humano, así como de ipsc humanas. Las neuronas motoras murinas fueron trasplantadas en la médula espinal adulta de ratas transgénicas que son un modelo de la ELA de tipo familiar. Observamos una recuperación motora transitoria, pero las motoneuronas trasplantadas degeneraron en los animales transgénicos, aunque sobrevivieron en animales no transgénicos. Por otra parte, uno de los principales problemas de los injertos en el cerebro es la limitada supervivencia de las neuronas. Modificamos genéticamente ESC de ratón para que secreten el Factor de crecimiento derivado de la glía (GDNF) y comparamos su diferenciación dopaminérgica con las células control. Encontramos un aumento significativo de las neuronas dopaminérgicas por la presencia de GDNF. Al retar a estas neuronas con la toxina 6- hidroxidopamina, las células que expresan GDNF fueron más resistentes al daño. Por último, ensayamos estrategias para dirigir el crecimiento axonal de neuronas dopaminérgicas trasplantadas en la substantia nigra de ratas parkinsonianas. Encontramos que la Semaforina 3C es capaz de dirigir los axones hacia el estriado, la región cerebral depletada de dopamina. Ese crecimiento 12

14 axonal, promovido por la Semaforina 3C, tuvo como consecuencia la liberación estimulada de dopamina y la recuperación conductual de los animales. Subvencionado por DGAPA, UNAM (Papiit IN208713) y Conacyt (131281). ESTUDIO SOBRE ALGUNOS ELEMENTOS CITOLÓGICOS Y MOLECULARES, EXTRÍNSECOS E INTRÍNSECOS QUE MODULAN LA DIFERENCIACIÓN DE LAS CÉLULAS TRONCALES NEURALES EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL DE ROEDORES Leonora Olivos- Cisneros*,1, Dannia Colín Castelán*,1, Miguel Tapia Rodríguez* 1,2, Jesús Ramíez- Santos*,1 y Gabriel Gutiérrez Ospina 1, 1 Departamento de Biología Celular y Fisiología y 2 Unidad Institucional de Microscopía, Instituto de Investigaciones Biomédicas, Universidad Nacional Autónoma de México, México D.F., En los pasados años hemos dedicado un gran esfuerzo a la identificación de los factores extrínsecos e intrínsecos que canalizan la diferenciación de las células troncales neurales. Nuestro laboratorio se ha abocado a analizar el papel de las moléculas del ciclo celular y de la duración del mismo sobre la decisión de los precursores neurales para dar origen a células neuronales o gliales. Evaluamos también el papel de los vasos sanguíneos en el acondicionamiento del medio extracelular tanto en los nichos neurogénicos como a lo largo de las vías de migración. Y estudiamos el efecto de la estimulación sensorial sobre la diferenciación terminal de los neuroblastos. Nuestras observaciones sugieren que 1) la duración del ciclo celular es mayor en los progenitores neurales comprometidos a generar células gliales con relación a aquellos que originan neuronas. Esta prolongación de la duración del ciclo parece asociarse con cambios en la disponibilidad de p19 ARF ; 2) las células endoteliales son fenotípicamente heterogéneas y los vasos sanguíneos muestran diferente permeabilidad a lo largo del complejo neurogénico ventricular vasos sanguíneos; y 3) el condicionamiento operante olfativo crónico favorece la diferenciación de neuroblastos hacia interneuronas positivas a glutamato descarboxilasa 65 y 67 kda. LA HISTAMINA COMO FACTOR NEUROGÉNICODE CÉLULAS TRONCALES NEURALES. Dra. Anayansi Molina Hernández. La histamina es un importante neurotransmisor y neuromoduladormonoaminérgico en el sistema nervioso central de adultos. Esta monoamina es sintetizada a partir del aminoácido histidina por acción de la histidina descarboxilasa. Las neuronas del sistema histaminérgicoen el adulto se localizan en el núcleo tuberomamilar del hipotálamo, donde inervan a casi todas las regiones del sistema nervioso central. Su participación está relacionada conla regulación del ciclo sueño- vigilia, control del apetito, aprendizaje y memoria, termorregulación, conducta motora, emoción, entre otras. Durante el desarollo del sitema nervioso central y en específico durante los 13

15 picos de diferenciación neuronal la concentración de histamina se encuentra elevada hasta 8 veces. Durante los días embrionarios en la rata la histamina y la encima descarboxilasa de histidina se encuentra presente en el romboencéfalo, el plexo coroide y adyacente al tercer y cuarto ventrículo. Interesantemente la activación de receptores tipo 1 para histamina promueve la diferenciación neuronal invitro e in vivo y en particular aumenta el fenotipo de neuronas de las capas profundas de la corteza cerebral que expresan FoxP2. Por otro lado la activación del receptor de tipo 2 incrementa la proliferación de celulas troncales neurales in vitro. Los datos generados por nuestro grupo y otros, son relevantes debido a que en particular las neuronas corticales de proyección que expresan FoxP2 estan relacionadas con el lenguaje, por lo que existe la posibilidad de que alteraciones en el sistema histaminergico durante el desarrollo podría tener consecuencias negativas en la formación de la corteza u otras areas del cerebro.además, la histamina podría ser utilizada en protocolos de diferenciación neuronal con el propósito de incrementar esta población e inclusive algun fenotipo específico. DIFERENCIACIÓN DE CÉLULAS TRONCALES PARA LA REPARACIÓN DE LESIONES MEDULARES Graciela Gudiño Cabrera. Laboratorio de Desarrollo y Regeneración Neural, Departamento de Biología Celular y Molecular CUCBA, Universidad de Guadalajara. La utilización terapéutica de células troncales representa innumerables ventajas, son células con capacidad de dividirse y diferenciarse favoreciendo la reparación de tejidos, en caso de daño o lesión. La diferenciación de células troncales, así como su proliferación y migración, depende de una gran variedad de elementos entre los que encontramos moléculas de señalización como factores de crecimiento y proteínas de matriz extracelular. Es importante conocer las señales que determinan las vías de diferenciación de los diversos tipos celulares, a fin de estimular y de expandir in situ sólo aquellos tipos que promueven la reparación del tejido afectado. Por otra parte, existen en el SNC células gliales denominadas Schwann like con un fenotipo muy particular que promueve el crecimiento neuronal y aligual que la células de Schwann, coexpresan GFAP, p75, vimentina y O4. En el SNC este fenotipo incluye principalmente a la glía envolvente (GE) del bulbo olfatorio. La GE produce factores neurotróficos in situ como el NGF, BDNF, PDGF, FGF, EGF, LIF, CNTF, HGF, entre otros, por lo que en parte, es capaz de promover la supervivencia neuronal y guiar el crecimiento axonal, así como, disminuir la formación de astrocitos reactivos que se producen en una lesión. Por sus propiedades promotoras del crecimiento axonal, la GE se ha utilizado experimentalmente en diversos modelos de lesión en el SNC. En nuestro laboratorio, hemos logrado inducir la diferenciación de células troncales neurales, de medula ósea y de tejido adiposo hacia células con fenotipo schwann like utilizando medios condicionados por GE. Las células troncales expuestas a este medio proliferan y se diferencian, predominantemente hacia células que presentan procesos largos y delgados y que co- expresan p75, GFAP, O4, PSA- NCAM, y NG2. En el modelo de lesión de medula espinal por sección completa utilizado, los trasplantes de células 14

16 troncales diferenciadas a este fenotipo, favorecen la reparación funcional de las fibras nerviosas transectadas. LA ZONA VENTRICULAR- SUBVENTRICULAR DEL CEREBRO ADULTO: UNA FUENTE DE OLIGODENDROCITOS CONTRA ENFERMEDADES DESMIELINIZANTES? Oscar Gonzalez- Perez 1 Alma Y. Gálvez- Contreras 1 Alfredo Quinones- Hinojosa 2 Arturo Alvarez- Buylla 3. 1 Laboratorio de Neurociencias, Fac. de Psicología, Universidad de Colima, México. 2 Department of Neurological Surgery, Johns Hopkins University, USA. 3 Department of Neurological Surgery, University of California, San Francisco, USA En el cerebro adultos se han identificado células progenitoras multipotenciales en una región denominada como: zona ventricular- zona subventricular (VZ- SVZ), adyacente a la pared estriatal de los ventrículos laterales. Este nicho germinal está fuertemente regulado por diversas citosinas y sus receptores correspondientes, entre estos destacan los receptores de cinasa de tirosina (RTK) y específicamente: el receptor alfa para el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFRα), el receptor para el factor de crecimiento epidérmico (EGFR) y el receptor para el factor de crecimiento derivado de fibroblastos tipo 2 (FGFR- 2). El ligando más importante del EGFR en la VZ- SVZ es el factor de crecimiento epidérmico (EGF), un potente agente mitótico que favorece la sobrevida, proliferación migración y linaje celular. Estos progenitores neurales activados por el EGF muestran una especificación astrocitaria y oligodendroglial, los cuales migran eficazmente a través de vasos sanguíneos y tractos axónicos colindantes. El cese de la estimulación con EGF induce a estos pro- oligodendrocitos a diferenciarse en oligodendrocitos maduros, mismos que en presencia de lesiones desmielizantes favorecen la recuperación de la lesión. Por otra parte, agonistas farmacológicos del FGFR y EGFR como el anticonvulsivante difenilhidantohina (fenitoina) son capaces de inducir la fosforilación de EGFR y FGFR en la VZ- SVZ, incrementan la proliferación de los progenitores neurales y promueven la expresión de Olig2 en la VZ- SVZ y el cuerpo calloso. En conclusión, el EGFR es un importante inductor de la oligodendrogénesis mediada por células precursoras adultas de la VZ- SVZ, los cuales pueden jugar un papel importante en el desarrollo de terapias celulares contra las enfermedades desmielinizantes. CELULAS TRONCALES EN LEUCEMIAS MIELOIDES. ESTRATEGIAS PARA SU ELIMINACION. Chávez González María Antonieta Las Leucemias Mieloides comprenden un grupo heterogéneo de padecimientos hematológicos que tienen su origen en una población de células primitivas hematopoyéticas mismas que comparten varias características con su contraparte normal. Ambas tienen fenotipo CD34+CD38-, son autorrenovables y poseen alta 15

17 capacidad proliferativa, razón por la cual se han denominado células troncales leucémicas. Investigaciones de los últimos años, han demostrado que las células troncales de Leucemia Mieloide Aguda (LMA), presentan de manera aberrante diferentes antígenos de superficie y algunos de ellos han sido utilizados como blanco terapéutico para eliminar selectivamente a las células troncales leucémicas. Sin embargo, los agentes que ha revolucionado el tratamiento en las leucemias mieloides son sin duda los Inhibidores de la oncoproteína Bcr- Abl, característica de la Leucemia Mieloide Crónica (LMC) y responsable de la presencia y mantenimiento del fenotipo transformante. No obstante y a pesar de las diferentes estrategias terapéuticas en dichas leucemias, no ha sido posible eliminar a las Celulas Troncales Leucémicas (CTL), responsables del mantenimiento y recaídas a la enfermedad, razón por la cual los enfoques de los últimos es utilizar como blancos terapéuticos moléculas involucradas en las diferentes vías de señalización que están constitutivamente activas o incrementadas en las CTL. En este sentido, nuestro grupo de trabajo esta actualmente interesado en evaluar el efecto de diferentes agentes en la eliminación de CTL de LMC. Dentro de estos agentes se encuentran: partenolida, dimetil- amino- partenolida, agentes inhibidores de la actividad de NFkB e inductor de especies reactivas de oxígeno; YK5, molécula capaz de inhibir la actividad de proteínas de choque térmico e inductor de apoptosis y casiopeínas, compuestos de coordinación de cobre, que ha mostrado tener actividad antitumoral e inductora de apoptosis en diferentes tumores sólidos. A la fecha, nuestros resultados son alentadores ya que hemos podido determinar que algunos de estos compuestos son capaces de eliminar células troncales leucémicas, teniendo un efecto mínimo en su contraparte normal. Sin embargo, aún quedan importantes interrogantes sobre los mecanismos de acción de los mismos, así como su funcionamiento en modelos in- vivo, siendo estos últimos la siguiente etapa de nuestras investigaciones. TUMORES CEREBRALES Y SU RELACIÓN CON CÉLULAS TRONCALES. Jesús Santa Olalla Tapia. Laboratorio de Biología de Células Troncales, Unidad de Diagnóstico y Medicina Molecular, Facultad de Medicina/Universidad Autónoma del Estado de Morelos- Hospital del Niño y el Adolescente Morelense. Calle Iztaccíhuatl Esq. Leñeros S/N, Col. Volcanes, Cuernavaca, El meduloblastoma (MB) es el tumor embrionario primario maligno del sistema nervioso central (SNC) más frecuente en niños. Es clasificado por la OMS en cinco variantes: MB clásico, desmoplásico/nodular, de extensa modularidad, de células gigantes y anaplásico.en la actualidad existen dificultades para establecer un diagnóstico preciso de esta neoplasia, debido principalmente a la heterogeneidad morfológica y el patrón histológico en estos tumores.por otra parte, los tratamientos actuales son poco exitosos, lo cual se demuestra por la alta recurrencia de este tumor. Lo anterior debido a que los tratamientos no eliminan a las células infiltrantes o las que se encuentran en estado quiescente. Se han acumulado evidencias que han ayudado a explicar las fallas terapéuticas y/o recidivas de estos tumores, relacionadas con la existencia de células troncales tumorales (CTTs), mismas que se identificaron con marcadores de células troncales neurales (CTNs), CD133 y Nestina. Estas 16

18 poblaciones tienen la capacidad de reproducir la totalidad de la diversidad celular de los tumores primarios al ser trasplantadas en ratones inmunodeprimidos. Así, se ha propuesto que células troncales o precursores neurales (PNs) son blancos potenciales para la transformación requerida en la formación de los meduloblastomas. Debido a que las CTNs o PNs que se encuentran durante el desarrollo embrionario del SNC presentan una alta tasa proliferativa en demanda a la formación, reparación y mantenimiento tisular, se propone que este potencial traería como consecuencia mutaciones en genes reguladores del ciclo celular, lo cual haría que perdieran su capacidad de regulación de su división celular, favoreciendo así su transformación,dando lugar a las diferentes variantes del MB. Nosotros presentaremos la caracterización realizada sobremedulobastomas empleando diferentes receptores de factores de crecimiento, estos factores están relacionados con la inducción de la proliferación de diferentes poblaciones de CTN. Nuestros resultados muestran que existen 5 diferentes poblaciones, cuyo patrón de expresión puede generar una nueva clasificación molecular de las estirpes tumorales del meduloblastoma. CARACTERIZACION DEL PAPEL DE HIF1α Y DE HIF2α EN LA REGULACION DEL FENOTIPO TRONCAL CANCEROSO Y SU RELACION CON LA VIA DE SEÑALIZACION WNT/β- CATENINA. Paula Santoyo- Ramos, M. Cristina Castañeda- Patlán y Martha Robles- Flores. Facultad de Medicina, Universidad Nacional Autónoma de Mëxico. El epitelio intestinal se renueva a partir de células troncales. Su homeostasis requiere el balance entre proliferación, diferenciación y apoptosis. Su desequilibrio se asocia al cáncer. Una pequeña proporción de las células tumorales tienen propiedades troncales, atribuyéndoseles el iniciar tumores, metástasis y resistencia a quimioterapia y radioterapia. La vía Wnt/β- catenina dirige la transcripción mediada por TCF4/β- catenina que es esencial para la autorrenovación de células troncales, en donde también participan los factores transcripcionales inducidos por hipoxia, HIF1α e HIF2α. Existe una conexión entre la actividad de HIFα y β- catenina en el mantenimiento del fenotipo troncal en células embrionarias. Por este motivo, analizamos la relación entre ambas vías y el mantenimiento del fenotipo troncal canceroso. Se generaron células con knockdown estable de HIF1α e HIF2α en líneas celulares cancerosas de colon con diferentes contextos de activación de ruta Wnt. Se observó que las células cancerosas en condiciones de normoxia sobre- expresan a HIF1α e HIF2α. Interesantemente, encontramos que el knockdown de HIF1α disminuye la actividad de TCF4/β- catenina mientras que el de HIF2α la aumenta. Este fenómeno no correlaciona con los niveles de expresión de β- catenina pero sí con cambios en su localización intracelular. Las consecuencias incluyen la disminución en la expresión de marcadores asociados al fenotipo troncal, CD44 y Oct4; incremento en los niveles de apoptosis y la disminución en migración. Estos datos sugieren que aunque la transcripción mediada por β- catenina se active para mantener el fenotipo troncal, los factores HIFα regulan la 17

19 funcionalidad de este mecanismo. Interferir con él permitiría eliminar las células troncales cancerosas e incrementar la eficiencia de los tratamientos anticancerosos. CÉLULAS PROGENITORAS ENDOTELIALES EN LA NORMALIDAD Y LA TROMBOSIS Dr. José Antonio Alvarado Moreno. Unidad de Investigación Médica en Trombosis, Hemostasia y Aterogenesis. Hospital HGR No. 1. Dr. Carlos Macgregor. IMSS, México D.F., México. El término célula progenitora endotelial (CPE) fue acuñado para referirse a células circulantes en sangre periférica y que expresan antígenos de superficie similares a las de las células endoteliales in vitro, circular y alojarse en áreas de isquemia o daño vascular y así, facilitar la reparación de los vasos sanguíneos dañados. Sin embargo ahora se ha demostrado que tales células pertenecen al linaje hematopoyético por la presencia de marcadores de superficie como el CD45 y el CD14, por lo que no son capaces de inducir la formación de un lumen vascular in vivo. No obstante ahora se ha descrito una población rara y pequeña de células formadoras de colonias endoteliales (CFCE), negativas de linaje hematopoyético, que presenta un alto potencial proliferativo y que tiene la capacidad de formar espontáneamente vasos sanguíneos humanos en ratones inmunodeficientes. Asimismo, se ha reportado que el número de CPE se incrementa después de daño vascular pero en el caso particular de los pacientes con trombosis no había estudios enfocados a la presencia de CFCE. Nosotros hemos encontrado diferencias sustanciales en la frecuencia y presencia de las CFCE en pacientes con historia de trombosis, así como de un alto potencial de proliferación, y capacidad formar estructuras vasculares in vitro. No obstante, las CFCE de pacientes con trombosis, presentan alteraciones en las cisternas mitocondriales lo cual sugiere senescencia replicativa in vitro, lo que podría indicar la presencia de especies de oxígeno reactivas. Dicha alteración mitocondrial podría estar relacionada con una deficiencia en la capacidad de formar un lumen vascular funcional in vivo, en ratones. Esta capacidad funcional de las CFCE es una evidencia de vasculogenesis posnatal; un importante aspecto de la capacidad formadora de vasos sanguíneos de las CFCE, es la capacidad de que estos vasos puedan ser conectados a los vasos sanguíneos del ratón hospedero y lograr ser parte de la circulación sistémica del ratón. Dichas deficiencias en la competencia de las CFCE de los pacientes con trombosis podría indicar una disfunción que podría favorecer la predisposición a una trombosis de repetición, Sin embargo estudios adicionales son requeridos para entender mejor este proceso en los pacientes con trombosis. EL NICHO DE LAS CÉLULAS TRONCALES HEMATOPOYÉTICAS Dra. Eugenia Flores. Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas, Hospital de Oncología, Centro Médico Nacional siglo XXI, IMSS. México D.F. MÉXICO La investigación en el campo de las células troncales ha ganado un gran interés para la investigación biomédica básica y la terapia celular. Las células troncales poseen varias características funcionales, dentro de las que destacan su capacidad de auto- renovación y su potencial de proliferación y de diferenciación. Las células troncales se 18

20 localizan en áreas muy específicas dentro de los tejidos, denominadas como nichos. Los nichos proveen a las células troncales las condiciones necesarias para regular su fisiología, preservando su estado de célula troncal, así como participando en la regulación de su proliferación y diferenciación. El conocer la localización de las células troncales y los mecanismos que las regulan en estos sitios, nos permitirá conocer su papel en la fisiopatología de las enfermedades y utilizarlos como posible blanco terapéutico, encontrar mejores mecanismos para movilizarlas y utilizarlas en trasplante, y mejorar las condiciones de cultivo para su uso en protocolos de terapia celular y medicina regenerativa. En esta platica nos enfocaremos a presentar el nicho de las células troncales hematopoyéticas (CTH), los retos que existen para estudiarlo y sus aplicaciones. CÉLULAS TRONCALES MESENQUIMALES E INMUNOSUPRESIÓN Dr. Juan José Montesinos Montesinos Para las neoplasias hematológicas, el tratamiento de elección con fines curativos es el trasplante alogénico de células hematopoyéticas (TCH), el cual ha permitido un incremento muy significativo en la supervivencia de estos pacientes. No obstante lo promisorio del TCH, existen varios problemas asociados al mismo como la enfermedad injerto contra hospedero (EICH), la cual es una de las complicaciones post- transplante más comunes, asociada con un alto grado de mortalidad. De hecho, para el caso de EICH aguda grave refractaria a esteroides, no existe una terapia efectiva. Las células troncales mesenquimales (MSCs, por sus siglas en inglés) son células primitivas con la capacidad de diferenciarse a distintos linajes (ostegénico, condrogénico y adipogénico). Además, se ha descrito que las MSCs poseen un efecto anti- proliferativo, inmunomodulador y anti- inflamatorio. De manera interesante, ya se han realizado estudios de aplicación clínica de las MCSs, en donde se ha observado su capacidad inmunosupresora y la carencia de rechazo al ser transplantadas. La aplicación de MSCs en TCH está bien documentada en la protección de un niño de 9 años con leucemia y presencia de reacción inmunológica, resultado del transplante con células de un donador histocompatible no relacionado y en pacientes con EICH grados III- IV resistentes a terapia convencional, observándose una mejoría significativa en los mismos. La fuente principal de las MSCs es la médula ósea (MO), sin embargo, recientemente nuestro grupo de investigación ha demostrado que es posible obtener MSCs de sangre de cordón umbilical (SCU) y placenta (PL), las cuales presentan similitudes biológicas con aquellas provenientes de MO en relación a su morfología, inmunofenotipo y potencial de diferenciación hacia osteoblastos y condroblastos e incluso detectamos la presencia de células con marcadores neurales en la población de MSCs de SCU y PL, aún sin estimular su diferenciación; sin embargo, si todas ellas tienen la misma capacidad inmunosupresora está por determinarse. En los últimos estudios que hemos realizado en nuestro laboratorio, determinamos la capacidad de inmunosupresión de MSCs de MO, SCU y PL sobre linfocitos T CD3+ y nuestros resultados demuestran que MSCs de MO y SCU tienen propiedades inmunosupresoras similares y superiores a las de PL y que este proceso involucra el 19

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