Clonación. Presente y futuro. Lino Barañao

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1 Clonación. Presente y futuro. Lino Barañao

2 Qué es la clonación?

3 TRANSPLANTE NUCLEAR Célula donante Enucleación Electrofusión Oocito Embrión sintético

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5 En qué afectó la clonación los conceptos básicos de la biología animal?

6 Células embrionarias (totipotenciales) Nuevo individuo X Células diferenciadas La La diferenciación es es un un proceso irreversible asociado a la la pérdida de de totipotencialidad. Sólamente las las células embrionarias tienen la la potencialidad de de generar un un organismo completo. De De ahí ahíel el estatus único del del embrión.

7 Dolly Dolly fue fue clonada a partir partir de de una una célula célulade de glándula mamaria, demostrando que que aún aún las las células somáticas diferenciadas pueden ser ser totipotenciales.

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10 La diferenciación celular sería la consecuencia de la unión reversible de factores de transcripción tejido-específicos que regulan la expresión de un grupo particular de genes. Embrión Célula somática Corolario: La La potencialidad para para dar darun un nuevo nuevoindividuo no no es es privativa del del núcleo núcleo de de las las células embrionarias

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12 Reprogramación: Los factores de transcripción originalmente presentes en la célula donante se diluyen y son reemplazados por aquellos presentes en el oocito

13 Cuáles son las aplicaciones de la clonación animal?

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17 La introducción de genes por transfección y posterior selección de células totipotenciales permite producir animales transgénicos con muy alta eficiencia. Células totipotenciales Transfección Selección Transferencia Transplante nuclear

18 Requerimientos mundiales de proteínas humanas y número de animales transgénicos necesarios para satisfacerlo Factor VIII 120 g 2 vacas ovejas Alfa-1- antitripsina kg ovejas cabras Factor IX 2 kg 13 ovejas 22 cerdos Albúmina sérica 1000 kg 300 vacas cabras Activador tisular del plasminógeno 75 kg 600 cabras

19 Vaca transgénica 1 huevo de oro (1,3 kg) por día 2 g / litro htpa U$S/gramo 30 litros por día U$S / día U$S / día

20 Clonación en la Argentina (De cómo una sucesión de fracasos puede conducir al éxito)

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25 hgh g / day Day of milking after lactogenesis

26 PAMPA August 6, 2002 PAMPA MANSA September 24, 2002 PAMPA MANSA II & III January 5, 2004 PAMPERO December 7, 2004

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29 Cuál es el riesgo de la clonacion reproductiva en seres humanos?

30 La clonación reproductiva carece de justificación médica. Su aplicación masiva es totalmente improbable en las condiciones actuales

31 Células madre de origen embrionario Aspectos científicos

32 Células embrionarias (totipotenciales) Nuevo individuo X Células diferenciadas La La diferenciación es es un un proceso irreversible asociado a la la pérdida de de totipotencialidad. Sólamente las las células embrionarias tienen la la potencialidad de de generar un un organismo completo. De De ahí ahíel el estatus único del del embrión.

33 Embriones humanos Células embrionarias totipotenciales (Stem Cells) Tejidos de reemplazo Tratamiento de: Diabetes, Parkinson, quemaduras, infartos, etc.

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37 Obtención de cardiomiocitos a partir de células embrionarias

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39 IPS (Induced Pluripotent Stem Cell) Célula somática Célula embrionaria inducida Oct-3/4 SOX2 C-Myc Klf4 (Nanog, LIN28) Diferenciación a distintos tejidos

40 Autotransplante Tejido normal (ej. Fibroblastos) Transplante nuclear Factores de crecimiento Matriz extracelular Oocito (donado) Embrión (?) sintético Células embrionarias ( pluri o totipotenciales) Células precursoras del tejido dañado La Clonación Terapéutica permitiría generar tejido de reemplazo a partir de células del paciente

41 Autotransplante Tejido normal (ej. Fibroblastos) Factores de crecimiento Matriz extracelular IPS Células precursoras del tejido dañado

42 Problemas a resolver Cómo obtener cantidades suficientes Cómo orientar en forma efectiva la diferenciación hacia un linaje específico Cómo asegurar la ausencia de transformaciones tumorales Aspectos regulatorios

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