ENFERMEDADES PARASITARIAS TRANSMITIDOS POR ALIMENTOS: (CISTICERCOSIS, HIDATIDOSIS Y FASCIOLOSIS)

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1 ENFERMEDADES PARASITARIAS TRANSMITIDOS POR ALIMENTOS: (CISTICERCOSIS, HIDATIDOSIS Y FASCIOLOSIS) Dr. Hermes Escalante Añorga Profesor Principal de la Universidad Nacional de Trujillo Laboratorio Clínico ESCALABS sac

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3 .

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8 Echinococcus granulosus

9 Ciclo biológico

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12 FORMAS ADULTAS

13 ..

14 Formas evolutivas: metacercaria

15 LA TÉCNICA DE WESTERN BLOT PARA EL DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES PARASITARIAS

16 WESTERN BLOT Es una prueba inmunológica que se usa para detectar Ac Está formada por la unión de 2 técnicas (electroforesis y la prueba de ELISA) PASOS 1. Separación de proteínas por electroforesis SDS-PAGE 2. Transferencia de proteínas a papel de nitrocelulosa 3. Identificación de cada proteína mediante anticuerpos conocidos por la prueba de Elisa.

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18 PRODUCCIÓN DE KITS ETAPAS 1. La investigaciónpara estandarizar la técnica 2. El diseñopara el desarrollo de un prototipo 3. La fabricaciónpara reproducir los prototipos

19 ESTANDARIZACIÓN DE LA TÉCNICA Evaluación de los reactantes: 1. De los antígenos * El tipo de antígenos a utilizar * La concentración de los antígenos * La forma de preparación 2. De los anticuerpos * El líquido biológico a probar * La dilución del suero a utilizar * Las técnicas de conservación

20 LA TÉCNICA DE WESTERN BLOT PARA EL DIAGNÓSTICO DE LA CISTICERCOIS

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23 EFICACIA DEL WESTERN BLOT EN LA DETECCION DE ANTICUERPOS EN PACIENTES CON CISTICERCOSIS EN EL LABORATORIO SENSIBILIDAD : % * ESPECIFICIDAD: % (8 bandas antigénicas específicas)

24 DISEÑO Y DESARROLLO CRITERIOS BÁSICOS NECESIDADES DEL CONSUMIDOR TECNOLOGIA NUEVO REACTIVO DE DIAGNOSTICO COMPETENCIA OBJETIVOS DE LA EMPRESA

25 Etapas del diseño y desarrollo Concepto KIT para el diagnóstico de cisticercosis humana utilizando la técnica de Western Blot, mediante la detección en suero y líquido cefalorraquídeo de anticuerpos de tipo IgG, con alta sensibilidad y especificidad, siendo confiable, fácil de realizar y único en su género dentro del país Prueba de concepto

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27 Etapas del diseño y desarrollo ETIQUETA DEL ENVASE MEDIATO

28 Etapas del diseño y desarrollo ETIQUETAS DE LOS ENVASES INMEDIATOS

29 Etapas del diseño y desarrollo COMPONENTES DEL REACTIVO DE DIAGNOSTICO TIRA INMUNORREACTIVA CONTROL POSITIVO CONTROL NEGATIVO SUSTRATO A SOLUCION DETERGENTE CONJUGADO ENZIMATICO BLOQUEADOR EN POLVO SOLUCION DE LAVADO SUSTRATO B

30 Diseño de caja y base para colocar los componentes del producto

31 Etapas del diseño y desarrollo

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33 Etapas del diseño y desarrollo

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36 CISTIBLOT

37 Etapas del diseño y desarrollo

38 Etapas del diseño y desarrollo Se han realizado trabajos en conjunto con Médicos Neurólogos de la ciudad de Trujillo, para evaluar la eficiencia del reactivo de diagnóstico, obteniendo resultados muy aceptables.

39 EFICACIA DEL CISTIBLOT EN LA DETECCIÓN DE ANTICUERPOS EN PACIENTES CON CISTICERCOSIS (Kit para 20 pruebas) 1. EN EL LABORATORIO * Sensibilidad : 91.4 % * Especificidad : % * Reproducibilidad: : Buena (Igual patrón antigénico) * Estabilidad reactivos : 6 meses en refrigeración. 2. EN CENTROS ACREDITADOS 2.1. En el Instituto Nacional de Salud * Sensibilidad : 92.3 % * Especificidad : 100 % 2.2. En el Laboratorio Hypatia * Sensibilidad : 94.3 % * Especificidad : % * Reproducibilidad : Buena (Igual patrón antigénico) * Estabilidad del kit: 8 meses en refrigeración

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42 CISTIBLOT

43 MEJORAS DEL CISTIBLOT PRESENTACIÓN DEL PRODUCTO Kit para laboratorios de alta rotación. Presentación por 40 pruebas para ser ejecutadas en lotes de 4 a 40 sueros. Kit para laboratorios de poca rotación. Presentación de 20 pruebas para ser ejecutadas individualmente.

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45 Reactivo de diagnóstico por 20 pruebas en conjunto

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50 KITS DESAROLLADOS 1. CISTIBLOT.- (Cisticercosis) 2. HIDATIBLOT.- (Hidatidosis) 3. FASCIOBLOT.-(Fasciolosis) 4. CHAGABLOT.- (Enfermedad de Chagas) (EN ESTUDIO)

51 HIDATIBLOT

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56 FASCIOBLOT

57 Bandas específicas para F. hapatica por WB

58 Bandas específicas de F. hepaticaque no es reconocida por anticuerpos de pacientes con otras parasitosis

59 Información General

60 GRACIAS POR SU ATENCIÓN

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