Caracterización del comportamiento reproductivo de nuevos cultivares cítricos. Proyecto ANII FMV-6997 Facultad de Agronomía-INIA

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2 Caracterización del comportamiento reproductivo de nuevos cultivares cítricos Proyecto ANII FMV-6997 Facultad de Agronomía-INIA

3 Contexto internacional Variedades patentadas Consorcios comercializadores Restricciones de superficie, plantas o exportación Requerimiento específico de calidad: semillas

4 Situación nacional Plan estratégico de la Citricultura Recambio varietal Introducción de variedades Prospección de materiales locales Programa de Mejoramiento genético (INIA-Facultad de Agronomía) Ingreso Mercado Estados Unidos

5 Objetivos Determinar el tipo de compatibilidad de nuevos cultivares de cítricos Analizar características reproductivas: - capacidad germinativa del polen - viabilidad de polen y óvulos - presencia de semillas en condiciones de polinización abierta y dirigida

6 Materiales en estudio Introducido Mandarina Tango Prospección nacional a) Naranjas Valencia Victoria Late Paylate b) Limón INIA-Ana Claudia

7 Programa de Mejoramiento genético a) Híbridos Ellendale x Satsuma M9 (seedling) B30 b) Híbridos Ellendale x Page F2P4 F6P8

8 Métodos Aislamiento de ramas o árboles con mallas antiabejas Ramas similares o árboles en polinización abierta Conteo de flores y frutos cuajados con y sin malla Análisis de germinación de polen in vitro e in vivo Análisis de viabilidad de polen y óvulos Cuantificación de semillas en frutos cosechados

9 Métodos Germinación de polen in vitro: colecta estambres, 24 horas en silica gel, siembra en medio Brewbaker y Kwack, 25 C, 5 repeticiones, horas Viabilidad de polen: test de tetrazolio, 3 repeticiones, promedio de granos contados por cultivar: 3000 Germinación in vivo: marcado y embolsado de flores en estado 59 (Escala BBCH). Cada 3 días, colecta y preparación de flores para análisis de germinación en estigma, en microscopio de fluorescencia

10 Métodos Polinizaciones manuales con variedades comerciales, autopolinización, emasculación Evaluación de presencia de semillas

11 Limón INIA-Ana Claudia, Azucitrus

12 Valencia Paylate, Sandupay

13 Victoria Late, INIA SG

14 F2P4, San Antonio FAGRO

15 Mandarina Tango, INIA SG

16 Resultados

17 Testigo polinización abierta Mandarina Tango Frutos sin semilla (%) Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) 3-5 semillas ( %) ,5 2,2 0,3 Enmallado Semillas/fruto: 0,15 Germinación de polen in vitro: 0,18% Germinación de polen in vivo: 0% Viabilidad de óvulos (9 DPA): 97%

18 Mandarina M9 Frutos sin semilla (%) Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) >3 semillas ( %) Testigo polinización abierta 80,4 19,6 8,9 5,4 5,3 Enmallado Semillas/fruto: 0,57 PA 0,04 Malla Germinación de polen in vitro: 4,2% Germinación de polen in vivo: 5,6% (15 DPA) Viabilidad de óvulos (12 DPA): 23%

19 Viabilidad: 38% Test de viabilidad de polen en M9

20 Frutos de M9 en condiciones de polinización abierta M 9 Testigo

21 Frutos de M9 en condiciones de autopolinización M 9 Malla A1R1

22 Mandarina híbrida B30 Testigo polinización abierta Frutos sin semilla (%) Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) 3-5 semillas ( %) 6 semillas (%) Enmallado Semillas /fruto: 6,4 PA Germinación de polen in vitro: 0,4% Germinación de polen in vivo: 0 Viabilidad de óvulos (12 DPA): 34%

23 Frutos de B30 en condiciones de autopolinización

24 Frutos de B30 en condiciones de polinización abierta

25 Victoria Late Testigo polinización abierta Frutos sin semilla (%) Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) 3-5 semillas ( %) Enmallado Semillas/fruto: 0,04 Germinación de polen in vitro: 0,01% Germinación de polen in vivo: 0 % Viabilidad de óvulos (12 DPA): 77%

26 Test de viabilidad de polen en naranja Victoria % de viabilidad: 0

27

28 Crecimiento del tubo polínico en estigma de flores de M9

29 Valencia Paylate Frutos sin semilla (%) Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) 3-8 semillas ( %) Testigo polinización abierta Enmallado Semillas/fruto: 1 Germinación de polen in vitro: 0,5% Germinación de polen in vivo: 0 % Viabilidad de óvulos (12 DPA): 59%

30 Limón INIA-Ana Claudia Testigo polinización abierta Frutos sin semilla (%) Cosecha Junio Frutos con semilla (%) 1 semilla (%) 2 semillas (%) >3 semillas ( %) ,6 11,3 3,1 Enmallado ,1 2,5 5,4 Semillas/fruto: 0,4 PA - 0,5 Malla Germinación de polen in vitro: 1,9% Germinación de polen in vivo (3 DPA): 23 % Viabilidad de óvulos (12 DPA): 35%

31 Limón INIA-Ana Claudia Germinación de polen in vivo (3 DPA): 23 %

32 Cuajado de frutos en condiciones de autopolinización y polinización abierta Cultivar Cuajado (%) M9 Autopolinización Polinización abierta B30 Autopolinización Polinización abierta Victoria Autopolinización Polinización abierta Paylate Autopolinización Polinización abierta 3,8 3,0 2,7 3,5 3,3 2,8 1,3 1,6

33 Número promedio de frutos por planta en autopolinización y polinización abierta (mandarina Tango y limón Ana Claudia) Cultivar Tango Autopolinización Polinización abierta Ana Claudia Autopolinización Polinización abierta N de frutos por planta

34 Capacidad polinizadora, expresada como porcentaje de frutos cosechados con semillas Variedad/polinizador Afourer Limón Criollo Valencia CV 64 Autopolinizado Tango M B Victoria 62,5-0 0

35 Conclusiones M9, B30, Paylate y Victoria, son autoincompatibles, mientras que Inia-Ana Claudia, es autocompatible Tango es autoincompatible, pero no presenta esterilidad absoluta, alcanzando 12% de frutos con semillas en libre polinización En similares condiciones, M9 y Victoria presentan un muy bajo número de frutos con semillas, similar al de Tango, siendo las más promisorias en ese aspecto Tango, B30, Victoria y Paylate presentaron mínima capacidad de germinación de polen in vitro y nula in vivo

36 Conclusiones Tango, M9 y Victoria, presentan alta habilidad partenocárpica, cuajando en forma similar en condiciones de autopolinización que en polinización abierta B30 resultó la variedad con mayor presencia de semillas en polinización abierta y manual Las tres variedades polinizadoras utilizadas indujeron la formación de semillas en la mayoría de las situaciones estudiadas Tango presentó semillas con los tres polinizadores utilizados

37 Agradecimientos Carlo Roggero (Caputto) Pablo Rodríguez (Azucitrus) Personal de campo INIA-SG

38 Equipo de Trabajo Facultad de Agronomía Ing.Agr. (Dra.) Giuliana Gambetta Ing.Agr. Ana Paula Mautone Ing.Agr. Beatriz Vignale (asesora en selección de materiales a evaluar) Ing.Agr. Florencia Rey Ing.Agr. Carolina Fasiolo Ing.Agr. Virginia Pereira das Neves Bach. Natalia Guimaraes INIA Ing.Agr. (Dr.) Fernando Rivas (asesor en selección de materiales a evaluar)

39

40 Capacidad polinizadora, expresada como porcentaje de frutos cosechados con semillas Viabilidad polen /Polinizador Afourer Limón Valencia Porcentaje Viabilidad polen/polinizador M9 B30 Tango Victoria Porcentaje

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