TERMINOLOGÍA ANALÍTICA - PROCESO ANALÍTICO - TÉCNICA ANALÍTICA - MÉTODO ANALÍTICO - PROCEDIMIENTO ANALÍTICO - PROTOCOLO ANALÍTICO

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1 TERMINOLOGÍA ANALÍTICA - PROCESO ANALÍTICO - TÉCNICA ANALÍTICA - MÉTODO ANALÍTICO - PROCEDIMIENTO ANALÍTICO - PROTOCOLO ANALÍTICO

2 PROCESO ANALÍTICO Conjunto de operaciones analíticas intercaladas que se realizan entre la muestra y el resultado Muestra Operaciones previas Medida de la señal Toma y tratamiento de datos Resultado TÉCNICA ANALÍTICA Principio científico adaptado a uno o varios instrumentos, que nos es útil o necesario para obtener información sobre la composición de la muestra (fluorimetría, potenciometría etc.)

3 MÉTODO ANALÍTICO Adaptación variada de una técnica, para llevar a cabo una medida determinada. (Pueden existir varios métodos analíticos distintos para determinar el mismo analito mediante la misma técnica). PROCEDIMIENTO ANALÍTICO Las instrucciones generales escritas necesarias para utilizar un método. (Normalmente son normas de carácter oficial Ej. ASTM D-2914 análisis de SO 2 en vino). PROTOCOLO ANALÍTICO Las directrices específicas escritas que recogen los pasos necesarios para desarrollar el método analítico sin excepción. (Contiene detalles específicos que no recoge el método).

4 SELECCIÓN DE UN MÉTODO ANALÍTICO DEFINICIÓN DEL PROBLEMA 1.- Qué exactitud se requiere? 2.- De cuánta muestra se dispone? 3.- En qué intervalo de concentraciones está el analito? 4.- Qué componentes de la muestra interfieren? 5.- Cuáles son las propiedades físicas y químicas de la matriz de la muestra? 6.- Cuántas muestras hay que analizar? CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO Criterios de Fiabilidad (criterios numéricos) Criterios de Practicabilidad (otras características a valorar)

5 Características de Funcionamiento del método analítico Criterios de Fiabilidad Precisión Exactitud Sesgo Linealidad Intervalo de Linealidad Límite de Detección Límite de Cuantificación Sensibilidad Selectividad Robustez Criterios de Practicabilidad Velocidad Coste y disponibilidad de equipo Toxicidad de los reactivos Habilidad del operador Facilidad y comodidad Seguridad en el laboratorio Coste por muestra

6 EXACTITUD Grado de coincidencia entre el valor obtenido de la magnitud medida y el valor real de la misma. (medida del error sistemático) PRECISIÓN Grado de concordancia mutua entre los datos que se han obtenido de una misma forma. (medida del error aleatorio)

7 EXACTITUD / PRECISIÓN PRECISO IMPRECISO SESGADO INEXACTO INEXACTO INSESGADO EXACTO INEXACTO

8 (Grado de aproximación entre los resultados) - Repetibilidad PRECISIÓN + Variación de los resultados dentro del curso del mismo análisis - Precisión intermedia + Variación interdía, por instrumentos, por analistas etc. - Reproducibilidad + Ensayos interlaboratorio Se expresará a través de la desviación estándar, coeficiente de variación y el intervalo de confianza para cada caso.

9 LINEALIDAD Es la capacidad del método para establecer una relación directamente (o matemáticamente) proporcional entre el resultado y la concentración del analito en la muestra. y = mx+b. (S = mc + S blanco ) Se expresa en términos de variación de la pendiente de la línea obtenida por regresión INTERVALO DE LINEALIDAD Es el intervalo de concentración entre los niveles de analito extremos (mayor y menor) que puede utilizarse con precisión, exactitud y linealidad Se expresa en unidades de concentración

10 LÍMITE DE DETECCIÓN Es la mínima concentración (o cantidad) de analito en una muestra que puede ser detectada, pero no necesariamente cuantificada, bajo las condiciones experimentales establecidas. a) Evaluación visual (métodos no instrumentales) b) Evaluación basada en la relación Señal/Ruido (3:1) c) Evaluación basada en la desviación estándar de la respuesta instrumental y la pendiente de la curva (m) (DL= 3σ / m) La determinación de σ se corresponde con: La desviación estándar del blanco

11 LÍMITE DE CUANTIFICACIÓN Es la mínima concentración (o cantidad) de analito en una muestra que puede ser determinado con aceptable exactitud y precisión, bajo las condiciones experimentales establecidas. a) Evaluación visual (métodos no instrumentales) b) Evaluación basada en la relación Señal/Ruido (10:1) c) Evaluación basada en la desviación estándar de la respuesta instrumental y la pendiente de la curva (m) (QL= 10 σ / m) La determinación de σ se corresponde con: La desviación estándar del blanco

12 S LINEALIDAD E INTERVALO DE LINEALIDAD S = mc + S Blanco m = m S Blanco C

13 SENSIBILIDAD Capacidad del instrumento para discriminar pequeñas diferencias en la concentración del analito. Dos factores limitan la sensibilidad - La pendiente de la curva de calibrado - La precisión a) Sensibilidad de Calibración (IUPAC) S = mc + S Blanco, S SBlanco m = C b) Sensibilidad analítica γ = σ m Señales

14 SELECTIVIDAD Expresa la capacidad del método analítico para medir con exactitud y de modo específico el analito en presencia de otros componentes que pueden formar parte de la matriz. Se mide comparando los resultados de un análisis de muestras que contienen impurezas, productos de degradación o ingredientes placebo, con los resultados de la misma muestra sin los componentes anteriores ROBUSTEZ Expresa la capacidad del método para permanecer invariable a pequeñas modificaciones ambientales o de procedimiento. Se mide mediante la reproducibilidad

15 ROBUSTEZ (Influencia de las variaciones ambientales o de procedimiento) - Estabilidad de las disoluciones - Tiempos de extracción - En HPLC: + Variaciones de ph de la fase móvil + Variaciones de composición de la fase móvil + Diferentes columnas (lotes y suministradores) + Temperatura y caudal - En GC + Diferentes columnas (lotes y suministradores) + Temperatura y caudal

16 VALIDACIÓN Se define la validación analítica como el trabajo experimental encaminado a obtener pruebas documentadas de que un método analítico proporciona consistentemente la información requerida al uso al que se destina. Los criterios de validación se deben relacionar con las especificaciones a examinar, por lo que el método deberá poseer la característica básica necesaria para discriminar de forma segura la información analítica de interés. La ICH (International Conference on Harmonization (1996) establece las características que deben considerarse en la validación de un método analítico para evaluar la calidad de los medicamentos.

17 Criterios para juzgar la calidad de los medicamentos Pruebas de Identidad -Tienen por objeto demostrar que la muestra examinada se corresponde con la sustancia que debe ser. Pruebas de Pureza -Límite de las concentraciones aceptables de impurezas de los medicamentos. Pruebas de Actividad -Límites admitidos de concentración del ingrediente o ingredientes activos en el medicamento o materia prima. Pruebas de Efecto o Acción -Garantía de que la forma farmacéutica actuará del modo previsto.

18 CALIBRACIÓN La calibración consiste en comparar el valor de la magnitud medida (o representada) por el sistema de medición, con los los valores que, bajo condiciones estrictamente definidas, producen patrones conocidos o materiales de referencia - Calibración directa. La magnitud medida coincide con la del patrón - Calibración indirecta. La respuesta del instrumento no coincide con la magnitud medida - Métodos de calibración + Curva de calibrado + Adición estándar + Patrón interno

19 Contenido: Definiciones Tipos de defectos Crítico Principal Secundario Niveles de Inspección Normal Rigurosa Reducida Clases de Muestreo Simple Doble Múltiple Planes de Muestreo Curvas OC MEDIDA EN EL INSTRUMENTO

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21 Patrón Analito MEDIDA EN EL INSTRUMENTO

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23 Patrón Del Analito Patrón interno!!!!!"!"!"!" MEDIDA EN EL INSTRUMENTO De dos señales diferentes

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25 GRÁFICAS DE CONTROL DE CALIDAD Gráficas de control tipo Shewhart (De valores individuales, Xi) Gráficas de Rango o Recorrido (R) Gráficas de control de datos acumulados (Gráficas de Cusum )

26 GRÁFICAS DE CONTROL Xi SHEWHART +3σ X +2σ X Invalidación (probabilidad de azar = 1%) Alarma (probabilidad de azar = 5%) VALOR DIANA -2σ X -3σ X Alarma (probabilidad de azar = 5%) Invalidación (probabilidad de azar = 1%) CONTROLES

27 Indicadores para interpretar graficas X El procedimiento de medida estará fuera de control cuando: 1) Uno o más puntos superen los niveles de invalidación (>3σ de X) 2) Dos o más puntos consecutivos por encima del límite de alarma (>2σ de X) 3) Una serie de 7 o más puntos por arriba o por abajo de la media X 4) Una tendencia de incremento o disminución

28 GRÁFICAS DE R (RECORRIDO) +3,3σ R +2,5σ R Invalidación (probabilidad de azar = 1%) Alarma (probabilidad de azar = 5%) VALOR RECORRIDO MEDIO CONTROLES

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30 GRÁFICAS DE CUSUM CUSUM INVALIDACIÓN ALARMA CUSUM SHEWHART ALARMA INVALIDACIÓN

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