MATERIAL PARA LA TOMA DE MUESTRAS EN PAPEL FILTRO PARA ENFERMEDADES LISOSOMALES

Transcripción

1 MATERIAL PARA LA TOMA DE MUESTRAS EN PAPEL FILTRO PARA ENFERMEDADES LISOSOMALES La toma de muestras de sangre en papel filtro es una técnica útil para el tamizaje de enfermedades lisosomales como: Enfermedad de Fabry, Enfermedad de Gaucher y Síndrome de Hunter. No es adecuada para mujeres con sospecha con enfermedad de Fabry, ya que en este caso se debe hacer directamente en leucocitos pues hay un alto índice de falsos negativos. Cuando a un paciente le sale positiva la muestra en papel filtro se debe hacer una prueba confirmatoria en leucocitos. La ventaja del papel filtro está dada por la facilidad de la toma de la muestra, alta resistencia a cambios climáticos y la facilidad en el transporte de la misma. Papel filtro estandarizado La toma de muestra en papel filtro debe hacerse en un papel que reúna ciertas características que garanticen la homogeneidad, absorción y el volumen de retención. El adecuado para las enfermedades lisosomales es Whatman 903. El papel debe estar marcado con el nombre del paciente y la fecha de toma. Hay que tener en cuenta que las áreas dentro de los círculos del papel filtro no se deben tocar, ya que cualquier sustancia como grasa, talco pueden alterar los resultados. Consentimiento informado Este documento es importante para tener el asentimiento del paciente para la toma de la muestra. Se le debe explicar al paciente el procedimiento y posibles complicaciones del mismo. Este documento debe tener en el encabezado los siguientes datos: Nombre y apellido del paciente Edad Sexo

2 Estado civil Nombres y apellidos de/los Representante(s) o Tutor(es) según sea el caso Dirección del paciente Ciudad País Teléfono Teléfono celular Correo electrónico El consentimiento informado debe llenarse a mano antes de hacer la toma de muestra, con letra legible. Las muestras se pueden tomar por sangre venosa, punción por lanceta en dedos de la mano o talón del pie. Esta última se usa principalmente en recién nacidos o pacientes pediátricos. Muestra de Sangre Venosa Material y equipo Nombre y apellido del paciente Bandeja Algodón Alcohol Jeringa 5cc Aguja I.V Torniquete Esparadrapo Guantes Guardián

3 Procedimiento - Marcar el papel filtro con el nombre del paciente y la fecha de toma de muestra - Explicar el procedimiento al paciente. - Sentar cómodamente al paciente. - Reunir todo el material necesario en la bandeja y llevarlo al lado del paciente. - Lavado de manos. - Colocación de los guantes. - Colocar el torniquete entre 7,5 cm o 10 cm por encima del punto de punción. - El torniquete debe asegurarse con la tensión suficiente para que ponga las venas prominentes pero que no comprometa la circulación. - El torniquete no debe ponerse más de 1 minuto y si en ese tiempo no se localiza la vena, suéltelo y póngalo de nuevo pasados 3 minutos. - Colocar el brazo hiper extendido, de manera que la mano esté más baja que el codo - Seleccionar la vena por palpación cuidadosamente. - Recordar que las venas más utilizadas para la venopunción se localizan en el área ante cubital: a) vena cubital: es la más larga y gruesa de todas y es la preferida por bordear la musculatura del brazo. b) vena cefálica: tiene iguales características que la anterior, pero es un poco menos gruesa. c) Vena basílica: es más pequeña que las anteriores. Esta vena está cerca de la arteria braquial, por lo que su punción supone más riesgo y su área es más sensible y dolorosa para el paciente. La palpación se hará con el dedo índice, palpando con suavidad y firmeza. - Desinfectar la zona elegida: Limpieza con alcohol para evitar la contaminación bacteriana o química. Debe hacerse con una torunda en forma circular, desde dentro hacia fuera.

4 Dejar secar el alcohol; ya que si se deja húmeda la zona el paciente sentirá más dolor durante la punción y si el alcohol penetra en el sistema de extracción de sangre se producirá una hemólisis que puede llegar a alter los resultados. - Inmovilice la vena seleccionada colocando el pulgar debajo de la zona de punción y tense la piel; el resto de los dedos se ponen detrás del codo para evitar que éste se doble o prevenir cualquier movimiento. - Coja la jeringa y con el bisel hacia arriba puncione la piel con un suave y rápido movimiento. La pared superior de la vena debe ser puncionada y el bisel debe quedar en el interior de la vena; se aspira para que la sangre fluya; una vez que empiece a salir sangre, se debe soltar el torniquete y tomar 1cc de sangre. - Retirar la aguja, con un movimiento rápido y suave hacia atrás y se aprieta la zona con el fin de evitar la formación de un hematoma. - Se retira todo el material, colocando cada uno en el contenedor correspondiente. Adaptado de: Toma de muestra de sangre mediante punción venosa. Hospital Regional Universitario Carlos Haya. Servicio Andaluz de Salud. Consejería de Salud. Muestra con lanceta de alto flujo Materiales y equipo Nombre y apellido del paciente Bandeja Lanceta estéril Guantes estériles Alcohol al 70 % Gasa o algodón Guardián Procedimiento El sitio ideal es la punta de los dedos de la mano. El más usado es el índice, idealmente de la mano no dominante.

5 Frotar vigorosamente el sitio de punción con gasa o algodón y alcohol. Dejar secar el alcohol, ya que pueden contaminar la muestra y alterar los resultados por hemólisis o dilución de la misma. Realizar la punción con un solo movimiento continuo con lanceta estéril de 2 a 2.4mm de profundidad. Dejar formar una gota de sangre grande presionando y soltando suavemente el sitio de punción. Nunca exprima esta área, para no causar hemólisis o contaminar con secreciones tisulares. Luego de formada la gota grande, deje caer en el papel filtro, lo más cerca posible del centro del círculo, hasta que absorba y cubra el área. No presionar el papel filtro contra el sitio de punción. La gota debe ser lo suficientemente grande para llenar el círculo en un solo paso. No se debe aplicar más de una gota en el mismo círculo porque puede saturarse o producir concentraciones de sangre no uniformes. La sangre debe aplicarse en un solo lado del papel y examinarse por ambos lados para verificar que la sangre penetró y saturó el papel. Si el flujo de sangre disminuyó o aparecen pequeños coágulos y los círculos no pueden llenarse, repetir el procedimiento utilizando un sitio de punción diferente. Asegúrese de utilizar, lanceta, gasa y alcohol nuevo. Durante el procedimiento de toma de muestra deben seguirse las precauciones universales para manipulación de material de riesgo biológico. Luego de tomar la muestra con una gasa presionar el sitio de punción hasta que deje de sangrar. La aguja y elementos utilizados se desechan en los recipientes de seguridad. Luego de haber retirado la aguja de la jeringa debe agregar una sola gota sobre cada círculo de impregnación. Déjela caer suavemente. No coloque la punta de la jeringa NO toque el papel. Adaptado de: Tamizaje neonatal para Hipotiroidismo Congénito. Gobernación del Tolima Secretaria de Salud Departamental. Dirección de Salud Pública.

6 Muestra de sangre de Talón Esta técnica es frecuentemente usada en neonatos o pacientes pediátricos Material y equipo Nombre y apellido del paciente Bandeja Lanceta estéril Guantes estériles Alcohol al 70 % Gasa o algodón Guardián Procedimiento Los sitios ideales y recomendados internacionalmente son las áreas laterales mediales de la superficie plantar del talón del neonato. La punción no se debe realizar en sitios previamente puncionados, áreas edematosas o inflamadas ni el área central del arco del pie, porque podrían verse afectados nervios, tendones o cartílagos. Los dedos de las manos son demasiado pequeños y la cercanía al hueso hace peligrosa la punción. El niño estará cargado por el acompañante con las piernas más bajas que el corazón. Esta maniobra aumentará la presión venosa y mejorará el flujo sanguíneo. Frotar vigorosamente el sitio de punción con gasa o algodón y alcohol. Dejar secar el pie al aire, ya que el alcohol puede contaminar la muestra y alterar los resultados por hemólisis o dilución de la misma. Realizar la punción con un solo movimiento continuo con lanceta estéril de 2 a 2.4mm de profundidad para no lastimar el hueso del bebe. Eliminar la primera gota de sangre limpiando con una gasa o algodón seco, pues usualmente ésta contiene líquido de los tejidos que invalidan la muestra. Dejar formar la segunda gota de sangre grande presionando y soltando suavemente el sitio de punción. Nunca exprima esta área, para no causar hemólisis o contaminar con secreciones tisulares. Luego de formada la gota grande, tocar por capilaridad el papel filtro, lo más cerca posible del centro del círculo, hasta que absorba y cubra el área. No presionar el papel filtro contra el sitio de punción. Sea Paciente, en algunos bebes el proceso es lento. La gota debe ser lo suficientemente grande para llenar el círculo en un solo paso.

7 No se debe aplicar más de una gota en el mismo círculo porque puede saturarse o producir concentraciones de sangre no uniformes. La sangre debe aplicarse en un solo lado del papel y examinarse por ambos lados para verificar que la sangre penetró y saturó el papel. Si el flujo de sangre disminuyó o aparecen pequeños coágulos y los círculos no pueden llenarse, repetir el procedimiento utilizando un sitio de punción diferente. Asegúrese de utilizar, lanceta, gasa y alcohol nuevo. Durante el procedimiento de toma de muestra deben seguirse las precauciones universales para manipulación de material de riesgo biológico. Luego de tomar la muestra el pie del bebe debe elevarse sobre el cuerpo y con una gasa presionar el sitio de punción hasta que deje de sangrar. No se recomienda vendar la piel puncionada del recién nacido. Las lancetas y elementos utilizados se desechan en los recipientes de seguridad. Adaptado de: Tamizaje neonatal para Hipotiroidismo Congénito. Gobernación del Tolima Secretaria de Salud Departamental. Dirección de Salud Pública.

8 Tomado de: Queiruga G, Lemes A, Ferolla C. Pesquisa Neonatal: lo que puede prevenir una gota de sangre p 30 31

9 Muestras no Validas y sus causas TIPO DE MUESTRA Cantidad insuficiente CAUSA Se quito el papel filtro antes que la sangre llenara por completo el círculo o antes que se absorbiera hasta el lado posterior. Antes o después de la obtención de la muestra se tocó el papel filtro con las manos. Muestra rayada o desgastada Muestra no había secado antes del empaque Muestra sobresaturada Acción mecánica sobre la misma Se empaco antes de secar completamente, el tiempo varía de acuerdo a las condiciones climáticas. Se aplicó exceso de sangre al papel filtro Muestra desteñida contaminada. diluida, o Se aplicó sangre a ambos lados del papel Se apretó o exprimió la zona del área de punción. Antes o después de la obtención de la muestra el papel filtro se puso en contacto con la mano, sustancias como alcohol, soluciones antisépticas, agua, etc. Las manchas de sangre se expusieron a calor directo. Muestras con anillo de suero No se secó el alcohol del área antes de la punción El papel filtro entró en contacto con alcohol La muestra no se seco correctamente Presencia de coágulos o capas sucesivas El círculo entró en contacto con gotas de sangre más de una vez Se aplico sangre a ambos lados del papel Tomado de: Tamizaje neonatal para Hipotiroidismo Congénito. Gobernación del Tolima Secretaria de Salud Departamental. Dirección de Salud Pública.

10 Tomado de: Queiruga G, Lemes A, Ferolla C. Pesquisa Neonatal: lo que puede prevenir una gota de sangre p 32 CONDICIONES DE SECADO Aunque una buena toma de muestra e impregnación de las tarjetas, es muy importante para los resultados obtenidos posteriormente en los estudios enzimáticos, el secado posterior es fundamental, para mantener la estabilidad de las muestras durante el envío por correo. Se recomienda dejar secar las tarjetas a temperatura ambiente, sobre una superficie limpia, lisa (no absorbente) y plana, durante 10 a 14 horas, como mínimo. Una vez cumplido este tiempo se pueden colocar dentro de una bolsa ziploc y enviar por correo, sin refrigeración, en tales condiciones, pueden mantener su viabilidad aproximadamente de 10 a 15 días.

11 Si no son enviadas inmediatamente, una vez cumplen el tiempo de secado, se pueden guardar a 4º C (Temperatura de la puerta de la nevera), en cuyo caso son estables hasta seis meses. El papel filtro utilizado para la impregnación es el presentado en materiales y muestra, otro tipo de papeles no pueden ser utilizados. COMENTARIOS GENERALES No sobrecargar el círculo de impregnación con más de una gota de sangre. Controlar la correcta impregnación del papel observando el reverso que debe mostrar una gota uniforme, igual a la superficie donde se hizo el goteo. No llevar a refrigeración sin haber cumplido mínimo 10 horas de secado, las muestras pueden quedar inservibles. Bajo ninguna circunstancia permita que le entre humedad a las tarjetas, estas deben estar almacenadas en las neveras, dentro de bolsas plásticas de cierre hermético. Es de vital importancia que se sigan las instrucciones de toma de muestra, impregnación, secado y envío, dado que todos estos aspectos influirán en la calidad de la muestra, por lo tanto en los resultados. Antes de analizar el empaque verifique los siguientes puntos: Consentimiento informado firmado Calidad de las gotas de sangre (Muestras no validas y sus causas) Papel filtro completamente diligenciado