TÉCNICAS DE CONTROL PARASITOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS

Transcripción

1 TÉCNICAS DE CONTROL PARASITOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS Parásitos en Frutas y Vegetales Dr. Jose E. Piñero Barroso

2 Existencia de parásitos intestinales en hortalizas que se comercializan en la ciudad de Corrientes, Argentina. Material y Métodos: Se tomaron muestras de 5 locales. Las verduras procedían de huertas ubicadas en la periferia de la ciudad o de poblaciones cercanas. Los vendedores no conocían si el riego era natural o artificial, ni el abono e insecticidas que se utilizaban. Las hortalizas eran lavadas con agua para eliminar restos de tierra, pero, ignoraban si el agua era potable. Las plantas eran mantenidas húmedas para retardar el secado de las hojas y para incrementar el peso en las que se vendían por kilo. Transporte en cajones descubiertos en vehículos sin refrigeración. Se tomaron muestras de: achicoria (94); escarolas (18); lechuga variedad crespa (26); lechuga variedad lisa (21).

3 Material y Métodos: Lavado y limpieza Las hojas fueron sumergidas y remojadas en 300 ml de solución fisiológica contenida en una bandeja de plástico. Se frotaban ambas superficies de las hojas con un pincel y se dejaron en el líquido de lavado algunos segundos en reposo. Con este líquido se realizó el examen parasitológico. Concentración del líquido de lavado Se filtró a través de una gasa doblada en cuatro en un embudo. La bandeja fue lavada dos veces con 10 ml de solución fisiológica. El filtrado se colocó en un frasco cónico de 360 ml, dejándolo 24hs en reposo. Se desechó el sobrenadante y el sedimento, de aproximadamente 30 ml, fue transferido a un tubo de 50ml. El frasco se lavó dos veces con 10 ml de solución fisiológica y se centrifugó durante un minuto a 2600 rpm. El sedimento resultante fue dividido en dos fracciones, a y b, de 0,5 ml.

4 Material y Métodos: Estudio Parasitológico: a) Directo: Se tomó 0,05 ml de la fracción a y se colocó sobre un portaobjetos. Se agregó Lugol y se examino con microscopio. b) Flotación: La fracción b fue resuspendida en 50 ml de una solución de sulfato de zinc (densidad=1,18) y se centrifugó un minuto a 2000 rpm. De la superficie del líquido sobrenadante se retiró la capa superficial que se había formado, transfiriéndola a otro tubo de centrífuga. Se agregó agua destilada hasta 0,5 cm del borde del tubo y se volvió a centrifugar a 2600 rpm durante dos minutos. Después se desechó el sobrenadante. Se retiró con una pipeta 0,05 ml que fue examinado entre porta y cubreobjetos al microscopio. En ambos exámenes se utilizó el objetivo 10x para tener una visión panorámica del campo y el objetivo 40x para la estructura morfológica de los estadios parasitarios.

5 Resultados: Estudio Parasitológico: Hortalizas (n) Positivas (n/%) Negativas (n/%) Achicoria (29) 9/31 20/69 Escarola (18) 9/50 9/50 Lechuga crespa (26) 6/23 20/67 Lechuga lisa (21) 4/19 17/81

6 Resultados: Estudio Parasitológico: Parásitos Achicoria (n/%) Escarola (n/%) Lechuga crespa (n/%) Lechuga lisa (n/%) Strongyloides sp. 1/3 0 1/4 0 Uncinarias 2/ Ascaris sp. 1/ Oxiuros 0 0 1/4 0 Trematodes 1/ Trichostrongylus sp. 2/7 6/33 2/8 3/14 Metastrongylus sp /4 0 Giardia sp 0 0 1/4 0 Blastocystis hominis 2/7 2/11 1/4 1/5 Amebas 1/3 2/11 1/4 1/5

7 Occurrence of parasites on fruits and vegetables in Norway. Robertson LJ, Gjerde B. (2001). Journal of Food Protection 64 (11), Entre agosto de 1999 y enero de 2001 se estudiaron frutas y vegetales en Noruega. No se detectaron ooquistes de Cyclospora ni huevos de Ascaris Giardia Cryptosporidium Positivas 29 Numero muestra Positivas Negativas

8 Occurrence of parasites on fruits and vegetables in Norway. Robertson LJ, Gjerde B. (2001). Journal of Food Protection 64 (11), Cryptosporidium Total Lechugas Brotes Habas de Mung

9 Occurrence of parasites on fruits and vegetables in Norway. Robertson LJ, Gjerde B. (2001). Journal of Food Protection 64 (11), Giardia Total 10 2 Eneldo 20 2 Lechuga Brotes Habas de Mung 1 Brotes de Rábano Fresas

10 Occurrence of parasites on fruits and vegetables in Norway. Robertson LJ, Gjerde B. (2001). Journal of Food Protection 64 (11), El producto más contaminado eran las habas de mung. Las concentraciones de Cryptosporidium y de Giardia detectados eran generalmente bajas 3 ooquistes o quistes/100 g. No había asociación entre la importación de estos productos y la detección de parásitos. Los ooquiste y quistes de Cryptosporidium ydegiardia también fueron detectados en muestras de agua con las que se irrigaban los campos, en Noruega, donde se obtenían los brotes de haba. Era la primera vez que estos parásitos se han detectado en vegetales y frutas obtenidos en un país altamente desarrollado (país rico), sin existir un brote epidémico asociado. Estos resultados pueden tener implicaciones importantes para la seguridad global de los alimentos.

11 Legislación relativa a frutas y verduras y contaminación microbiológica/parasitológica

12 RD 1940/2004 ( ): Laboratorio Nacional de Referencia para Zoonosis de origen alimentario. Centro Nacional de Alimentación (CNA) adscrito a la Agencia Española de Seguridad Alimentaria (AESA). Función: Investiga agentes zoonóticos bacterianos transmitidos por alimentos, así como la resistencia a los antimicrobianos a ellos asociada. No existe metodología de análisis, de frutas o verduras, para la búsqueda de contaminación parasitaria.

13 La CEE hace hincapié en control de alimentos mediante una aproximación de tipo preventivo: Producto y diseño de proceso. Uso de buenas prácticas en la higiene y la fabricación (GHP, GMP). Determinación de los principios críticos del punto de control para el análisis de peligro (HACCP). Legislación europea y directivas comunitarias sobre zoonosis transmitidas por alimentos:

14 Reglamento (CE) 2073/2005: Criterios microbiológicos para comestibles: Indica criterios de seguridad del alimento para ciertas bacterias y las toxinas y metabolitos producidas por ellas. Reglamento (CE) 2160/2003: Control de la salmonela y otros agentes zoonóticos específicos transmitidos por alimentos. Directiva 2003/99/CE del Parlamento Europeo y del Consejo (RD 1940/2004, de 27 de septiembre) sobre la vigilancia de las zoonosis y los agentes zoonóticos: Asegurar la adecuada vigilancia de las zoonosis, los agentes zoonóticos, y la resistencia a los antimicrobianos asociada, así como la debida investigación epidemiológica de los brotes de enfermedades transmitidas por los alimentos.