UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA. FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS. ESCUELA PARA GRADUADOS. INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN ANIMAL CÓRDOBA (IRAC)

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1 UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA. FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS. ESCUELA PARA GRADUADOS. INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN ANIMAL CÓRDOBA (IRAC) EFECTO DEL MOMENTO DE LA IATF (48 VS. 54h) EN VACAS CRUZA CEBÚ CON CRÍA AL PIE TRATADAS CON DISPOSITIVOS CON 0,5 g DE PROGESTERONA Y CIPIONATO DE ESTRADIOL SOBRE LOS PORCENTAJES DE PREÑEZ M.V. Nicolás A. Zabala Méndez Trabajo de Tesis Final Para Optar al Grado de Especialización en Reproducción Bovina Córdoba 2012

2 AGRADECIMIENTOS: A Ignacio Videla Dorna y Lucas Cutaia, por alentar y promover constantemente en mi crecimiento profesional y personal, por la confianza y la dedicación a mi trabajo que a su vez ellos lo muestran día a día con el ejemplo. A mis compañeros de trabajo en Syntex, donde comparto gran parte de mi vida y donde aprendí a ser compañero en las buenas y en las malas. A Guido Repiso, médico veterinario del Establecimiento La Judith y a Ricardo Krongold propietario del mismo, por la colaboración con el trabajo a campo. A mi familia y novia por enseñarme el significado de la palabra sacrificio y humildad.

3 INTRODUCCIÓN Las principales limitaciones para el empleo de la IA en el ganado manejado en condiciones pastoriles son fallas en la detección de celos, anestro posparto y pubertad tardía. Este problema es mayor en ganado Bos indicus o cruza Bos indicus debido a las particularidades en el comportamiento reproductivo y la dificultad de la observación de celos. ( Barros et al., 1995)- (Bó y Baruselli, 2002)- (Bó et al., 2002). Para evitar los problemas de la detección de celos en rodeos de cría se han desarrollado protocolos de sincronización de la ovulación que permiten además inseminar un gran número de animales en un período de tiempo establecido. Estos tratamientos se conocen con el nombre de protocolos de Inseminación Artificial a Tiempo Fijo (IATF). Existen actualmente en el mercado dispositivos eficientes que liberan P4 y que son mantenidos en la vagina por un período de 7 u 8 días (Bó et al., 2001a). El tratamiento comúnmente que se utilizaba consistía en administrar 2 mg de benzoato de estradiol (EB) por vía intramuscular (im) junto con la inserción del dispositivo en lo que nosotros denominamos el Día 0 del tratamiento; en el Día 7 u 8, se extrae el implante se aplica PGF im y 24 h después se administra 1 mg de EB im. Se realiza IATF entre las 52 y 56h de la remoción del dispositivo (Cutaia et al., 2001a). La función fundamental de la aplicación de estrógenos en el inicio del tratamiento es provocar la atresia de los folículos existentes e impedir de esta manera la formación de folículos persistentes que interfieren negativamente en la fertilidad (Bó et al., 2002c ;Bó et al., 2002d;Martínez et al., 2000). Como la atresia es seguida por el comienzo de una nueva onda folicular a los 4 días (Moreno et al., 2001) se asegura de esta manera la presencia de un folículo nuevo y un ovocito viable en el momento de retirar el dispositivo (Bó et al., 1995ª;Bó et al., 2002c). Según datos de experimentos realizados con exámenes frecuentes con ecografía las vacas tratadas con el tratamiento convencional con dispositivo con P4 por 7 días y EB ovulan en promedio a las 66 h de retirado el implante (Cutaia et al., 2001a). Teniendo en cuenta que los espermatozoides tardan entre 8 a 12 h en llegar al sitio de fertilización (Wilmut et al., 1984) se aconseja IATF entre las 52 y 56 h. Sin embargo, hay divergencia en la literatura en cuanto al momento que se recomienda realizar la IATF, que varía entre las 48 h de la remoción del dispositivo hasta la 60 h. Cutaia et al.,( 2003b) diseñaron dos experimentos para determinar el efecto del momento de la IATF sobre los índices de preñez en vacas tratadas con dispositivos DIB y EB (48 hs vs 54). En el primer experimento se utilizaron vacas Herefordy en el segundo vacas con cría cruza cebú. Todos los animales recibieron los mismos tratamientos. Si bien no se encontraron diferencias significativas en los porcentajes de preñez en vacas IATF a las 48 ó 54 h de retirado el DIB en los dos experimentos, las diferencias numéricas siempre favorecieron al grupo IATF a las 54 hs.

4 La tendencia a una mayor preñez de las vacas IATF a las 54 h concuerda con otro trabajo realizado en Canadá, en el que utilizaron vacas con cría tratadas con el mismo protocolo y tuvieron una tendencia numérica a una mayor preñez entre las 53,5 y 57,5 hs. ( Whittaker et al., 2002) Para que un tratamiento sea de uso masivo debe ser fácil y simple. Si bien los protocolos utilizados son relativamente sencillos, es necesario pasar las vacas por la manga por lo menos cuatro veces en un protocolo de IATF. Esto ha llevado a que muchos grupos de investigadores busquen alternativas en los tratamientos que permitan reducir el número de encierres. La alternativa que revolucionó la simplificación de los protocolos es el uso de cipionato de estradiol (ECP) como inductor de la ovulación. El ECP es una sal de estradiol con mayor vida media que el EB y se adapta a un esquema de aplicación de estradiol como inductor de la ovulación en el momento de retirar el dispositivo con P4 (Macmilan et al., 1993ª; Macmilan et al., 1996b). Trabajos realizados en Argentina en las categorías de vaquillonas y vacas cruzas cebú, donde se comprobó que el uso de Ecp al retiro del dispositivo con progesterona en un protocolo de IATF no tuvo diferencias significativas con el uso de BE 24 hs al retiro del dispositivo. (Cutaia et al., 2005c; Giacusa et al., 2005) Trabajos publicados indican que con el uso de ECP y dispositivo liberador de progesterona en Vaquillonas Angus, se podría ampliar el horario de inseminación en la IATF desde las 48 a 58 hs; (Callejas et al., 2007). Otro trabajo realizado con el mismo material en Vacas Nelore mostró que no hubo diferencia significativa en los resultados; (Grepaldi et al., 2009). También se han realizado trabajos con el uso de dispositivos nuevos que contienen 1 gramo de progesterona y como inductor de ovulación ECP en Vaquillonas decarne cruza Cebú, donde se muestra un menor porcentaje de preñez a la IATF a las hs que a las hs. Sin embargo utilizando el DIB de segundo uso, no se encontró diferencias significativas. (Cutaia et al., 2009d).

5 HIPÓTESIS Mediante la utilización de dispositivo que contiene 0,5 g de progesterona y la combinación de ECP como inductor de la ovulación en un programa de IATF, la ventana de inseminación podría extenderse de las 48 h hasta las 54 h. OBJETIVO El objetivo de este experimento fue evaluar la utilización de diferentes horarios de inseminación (48 hs vs. 54 hs en promedio del retiro del dispositivo) sobre la tasa de preñez en protocolos de IATF. MATERIALES Y MÉTODOS El experimento se realizó en el establecimiento LA JUDITH ubicado a 40 km de la localidad de Goya, provincia de Corrientes. Se utilizaron 200 vacas de la raza Braford con cría al pié de 3 y 4 partos (entre 60 y 90 días de nacidos los terneros), con una condición corporal al inicio del tratamiento en promedio 2,64±0,3 (escala 1 al 5) en plano de aumento de peso, con un 23 % de ciclicidad. Todas las vacas recibieron en el Día 0, un dispositivo liberador de progesterona (DIB 0,5; 0,5 g de P4; Syntex S.A., Argentina) y 2 mg de benzoato de estradiol (EB; Syntex S.A.). En el Día 8 se retiraron los DIB y se les aplicaron 500 µg de Cloprostenol (Ciclase DL, Syntex) junto a 400 U.I. de ecg (Novormon, Syntex) más 0,5 mg de cipionato de estradiol (CE; Cipiosyn, Syntex). A partir de este momento los animales fueron divididos al azar para ser IATF en promedio a las 48±1 o 54±1 h pos retiro de los DIBs. La preñez se diagnosticó a los 32 días de la IATF por medio de ultrasonografía (Chison 500 Vet, 5.0 Mhz). 1 ml de Cipiosyn 2 ml Cilcase 2 ml de Novormon 2 ml BE DIB 05 día 0 día 8 IATF 50% - 48 hs 50% - 54 hs

6 Las proporciones fueron comparadas por medios del test de Chi-cuadrado. RESULTADOS Como se puede ver en la Tabla 1 no se encontraron diferencias significativas entre los porcentajes de preñez logrados en ambos grupos de tratamiento (P=0,9). Tabla 1. Porcentaje de preñez de vacas Braford con cría al píe inseminadas a tiempo fijo en promedio a las 48 h o 54 h del retiro del dispositivo. Grupo n % Preñez IATF 48 h % IATF 54 h % Gráfico 1 100% 80% 60% IATF 48 hs. IATF 54 hs. 40% 20% 43% 44% 0%

7 CONCLUSIÓN En resumen se puede concluir que el momento de la IATF (48 vs 54 h) en vacas cruza cebú con cría al pie, tratadas con dispositivos que contienen 0,5 g de P4 y combinado con cipionato de estradiol como inductor de la ovulación no afecta el porcentaje de preñez logrado. Por lo que sería factible ampliar el tiempo en horas destinado a la IATF.

8 BIBLIOGRAFIA Barros, C.M., Figueiredo, R.A, Pinheiro, O.L Estro, ovulacao e dinámica folicular em Cebuinos. Rev Bras Reprod Anim; 19:9-22 Bó, G.A., Adams, G.P., Pierson, R.A., Mapletoft, R.J Exogenous control of follicular wave emergence in cattle. Theriogenology; 43: Bó, G.A., Cutaia, L., Brogliatti, G.M., Medina, M., Tríbulo, R., Tríbulo, H Programas de inseminación artificial a tiempo fijo en ganado bovino utilizando progestágenos y estradiol. Resúmenes Cuarto Simposio Internacional de Reproducción Animal, Huerta Grande, Córdoba; Bó, G.A. y Baruselli, P.S Programas de Inseminación Artificial a Tiempo Fijo en el Ganado Bovino en Regiones Subtropicales y Tropicales. Capítulo XXXI. En: Avances en la Ganadería doble propósito, C. Gonzalez- Stagnaro, Eleazar Soto Belloso y Lílido Ramírez Iglesia (Editores); Fundación Girarz, Maracaibo, Venezuela; Bó, G.A., Baruselli, P.S., Moreno, D., Cutaia, L., Caccia, M., Tríbulo, R., Tríbulo, H.,Mapletoft, R.J The control of follicular wave development for self-appointed embryo transfer programs in cattle. Theriogenology; 57: Bó, G.A., Cutaia, L., Tribulo, R Tratamientos hormonales para inseminación artificial a tiempo fijo en bovinos para carne: algunas experiencias realizadas en Argentina. Primera Parte. Taurus; 14: Bó, G.A, Baruselli, P.S., Martinez, M.F Pattern and manipulation of follicular development in bos indicus cattle. Anim Reprod Sci (en prensa). Callejas, S., Cabodevila, J Diferentes horarios de IATF con la utilización de DIB 05 gramos en Vaquillonas Angus. VII Simposio Internacional de Reproducción Animal. IRAC Cutaia, L., Moreno, D., Villata, M.L., Bó, G.A Synchrony of ovulation in beef cows treated with progesterone vaginal devices and estradiol benzoate administered at device removal or 24 hours later. Theriogenology; 55:408 abstr.

9 Cutaia, L., Brogliatti, G., Chesta, P., Moreno, D. G Bó, G.A. Efecto del momento de la IATF sobre los porcentajes de preñez en vacas de carne sincronizadas con dispositivos con progesterona y benzoato de estradiol. Vº SimposioInternacional de Reproducción Animal. Huerta Grande, Córdoba. 27 al 29 de junio Abstr Cutaia, L. Balla, E., Bó, G.A Efecto del momento del momento de la administración de benzoato o cipionato de estradiol para inducir ovulación en vaquillonas tratadas con un dispositivos con progesterona e inseminadas a tiempo fijo. VI Simposio Internacional de Reproducción Animal. IRAC Cutaia, L., Ramos, M., Bo, G.A Efecto del momento de la IATF en vaquillonas de carne cruzas cebú tratadas con dispositivos con progesterona y cipionato de estradiol como inductor de la ovulación. VIII Simposio Internacional de Reproducción Animal. IRAC Crepaldi, G.A., Sales, J.N.S., Teixeira, A.A., Baruselli, P.S Momento de la tasa de ovulación de vacas nelore tratadas con cipionato o benzoato de estradiol para inducir ovulación en protocolos de IATF. XVII Congreso Brasilero de Reproducción Animal, Belo Horizonte, Brasil Giacusa, N., Cutaia, L., Bó, G.A Efecto de la utilización de cipionato de estradiol como inductor de la ovulación aplicando al momento del retiro de un dispositivo con progesterona o 24 h más tarde sobre los porcentajes de preñez en vacas con cría. VI Simposio Internacional de Reproducción Animal. IRAC Macmillan, K.L., Peterson, A.J A new intravaginal progesterone releasing device for cattle (CIDR-B) for estrus synchronization, increasing pregnancy rates and the treatment of post-partum anestrus. Anim Reprod Sci; 33:1-25. Macmillan KL, Burke CR Effects of oestrus cycle control on reproductive efficiency. Anim Reprod Sci; 42: Martínez MF, Kastelic JP, Adams GP, Janzen E, McCartney D, Mapletoft RJ Estrus synchronization and fertility in beef cattle given a CIDR and estradiol or GnRH. Can. Vet. J. 41, Moreno, D., Cutaia, L., Villata, M.L., Ortisi, F., Bó, G.A Follicle wave emergence in beef cows treated with progesterone releasing devices, estradiol benzoate and progesterone. Theriogenology 55, 408 abstr.

10 Wilmut, I., Moller, A.N Sperm transport into the oviducts of heifers mated early in estrus. Reprod Nutr Dev; 24:261. Whittaker, P.R., Colazo, M.G., Martínez, M.F., Kastelic, J.P., Mapletoft, R.J New or used CIDR-B devices and estradiol benzoate, with or without progesterone, for fixes-time AI in beef cattle. Theriogenology; 57:391 Abstr.