PRACTICA # 1 DETERMINACION DE FOSFORO OLSEL Y BRAY P-1
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- Lourdes María Luz Díaz Zúñiga
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1 PRACTICA # 1 DETERMINACION DE FOSFORO OLSEL Y BRAY P-1 INTRODUCCIÓN El fósforo es un elemento esencial para la vida. Las plantas lo necesitan para crecer y desarrollar su potencial genético. Lamentablemente, el fósforo no es abundante en el suelo. Y lo que es peor, mucho del fósforo presente en el suelo no está en formas disponibles para la planta. La disponibilidad de este elemento depende del tipo de suelo, según este, una pequeña o gran parte del fósforo total puede estar fijado (no disponible) en los minerales del suelo. Esto significa que la planta no puede absorberlo. En la naturaleza, el fósforo forma parte de las rocas y los minerales del suelo. Las fuentes de fósforo como nutrimento para las plantas son los fertilizantes minerales y los fertilizantes orgánicos. Los fertilizantes minerales son compuestos inorgánicos de fósforo que se extraen de los grandes yacimientos de roca fosfórica. Estos compuestos minerales, son tratados para hacerlos más solubles para que así, sean disponibles para las plantas y puedan ser utilizados por estas en la formación de tejidos y órganos vegetales. OBJETIVOS El alumno comprenderá los siguientes conceptos: Extracción de fosforo en matrices sólidas. Curva de calibración. Espectrofotometría en la determinación de concentración de fosforo. FOSFORO OLSEN PARA SUELOS DE ph ALCALINOS EQUIPAMIENTO Espectrofotómetro Balanza técnica de g de sensibilidad. Zaranda Cronometro CRISTALERÍA Y ÚTILES Probeta graduada de 25 ml Matraz volumétrico de 50 ml Pipeta de 10 ml Celda para espectrofotómetro. Embudo
2 Perrilla Papel filtro Whatman # 40. REACTIVOS Hidróxido sodio 5N (pesar 200 g y aforrar en matraz volumétrico de 1000mL con agua destilada). Bicarbonato de sodio 0.5M a ph 8.5 (disolver 42 g y disolver en 800 ml de agua destilada, ajustar el ph con NaOH 5N aforrar a 1000 ml con agua destilada). Acido sulfúrico 5N (medir 148 ml del acido concentrado en 700 ml de agua destilada, dejar enfriar y aforrar a 1000mL con agua destilada)* tener cuidado ya que se calienta y provoca salpicaduras. Solución patrón de dihidrogenofosfato de potasio (KH 2 Po 4 ) 500ppm, secar 2.5 g a 105 C por 1 hora. De este se pesa g y aforrar a 1000ml con agua destilada. Solución patrón de 100 ppm diluir 50 ml de la solución de 500 ppm a 250 ml Solución patrón de 10 ppm diluir 10 ml de la solución de 100 ppm a 100 ml Realizar una curva de calibración para fosforo olsen y fosforo Bray P-1(suelos ácidos) en matraces volumétricos de 50 ml ml de patrón de 10 ppm Concentración ml de patrón de 100 ppm Concentración Medir 10 ml de los patrones y depositar en matraz volumétrico de 50 ml, añada 10 ml de la solución extractora y ajustar el ph 5 con H 2 SO 4 5N.
3 Adicionar aproximadamente15 ml de agua destilada a los matraces y 10 ml de la solución B, aforar y deje en reposo por 30 minutos una vez pasado el tiempo medir la absorbancia a 820 nm. Reactivo A Pesar 6 g de heptamolibdato de amonio ((NH 4 ) 6 Mo 7 O 24 4H 2 O en 125 ml de agua destilada Disolver g de tartrato de antimonio y potasio (C 8 H4K 2 O 12 Sb 2.3H2O) en 50 ml de agua destilada Mezclar ambas soluciones en matraz volumétrico de 1000 ml y a esta adicionarle 500 ml de H 2 SO 4 5N, mezclar y aforar con agua destilada. Guardar en frasco ámbar. Reactivo B Pesar g de acido ascórbico en 200 ml del reactivo A. este se prepara al momento de utilizarse es estable por 24 horas en refrigeración. PROCEDIMIENTO Preparación de la muestra 1. Las muestras recibidas en el laboratorio son identificadas y registradas en la bitácora con un número de control, mismas que son almacenadas hasta pasar por el proceso de secado. 2. Las muestras se secan al aire y a la sombra, en bandejas adecuadas, y en un área adecuada para garantizar la contaminación aeración y protección contra las inclemencias del tiempo. 3. La muestra es desprovista de toda materia extraña que pueda contener, desmenuzándola y distribuyéndola por toda la superficie de la bandeja, debiendo permanecer en este proceso como mínimo dos días hasta que el técnico determine que ya está seca. 4. Una vez que ya este seca la muestra es molida, teniendo mucho cuidado de no destruir aquellos pequeños nódulos imposibles de eliminar con la mano. Se tamiza por una malla de 1 mm y el volumen total se homogeniza. Si la cantidad de nódulos es considerable, se empleara un rodillo en vez del molino. 5. De las muestras preparadas y homogeneizadas se separan 100 g que se envasan junto con una etiqueta de identificación en el recipiente adecuado. Extracción Pese g de suelo en frasco plástico de 100 ml con tapa. Añadir 25 ml del extrayente de bicarbonato de sodio ph 8.5, agitar por 30 minutos a 200 revoluciones por minuto.
4 Filtrar y tomar una alícuota de 10 ml de la muestra, depositarla en matraz volumétrico de 50 ml. Ajustar el ph a 5 con H 2 SO 4 5N con 1 ml es suficiente. No mezclar. Añada agua destilada aproximadamente 25 ml y mezcle. Adicione 10 ml del reactivo B, afore con agua destilada y mezcle, deje reposar por 30 minutos. Pasado el tiempo leer en el Espectrofotómetro a 820 nm. Se realiza un blanco utilizando la solución extractora y se le agrega lo mismo que la muestra. CALCULOS Abs = absorbancia de la muestra V = volumen de la solución extraída en ml 100 = para llevar la expresión a 100 g de suelo 2.29 = Factor gravimétrico para expresar los resultados como P 2 O 5 M = pendiente de la recta (absorbancia/ concentración) P = peso de la muestra en gramos A = alícuota tomada para desarrollar el color FOSFORO BRAY P-1 PARA SUELOS DE ph ACIDOS REACTIVOS Floruro de amonio 1N (NH 4 F) (pesar 37 g de NH 4 F y aforar a 1000mL con agua destilada. Acido clorhídrico 0.5 N (diluir ml de HCl concentrado y aforar a 500 ml con agua destilada. Hidróxido de amonio 0. 5N (diluir 38 ml de Hidróxido de amonio y aforrar a 1000mL) Solución extractora para fosforo Bray P-1 ( mezclar 30 ml de Floruro de amonio 1N y 50 ml de Acido clorhídrico 0.5 N en matraz volumétrico de 1000mL aforar con agua destilada. PROCEDIMIENTO Pese g de suelo en frasco plástico de 100 ml con tapa. Añadir 20 ml de la solución extractora para fosforo Bray P-1 de agitar por 30 minutos a 200 revoluciones por minuto.
5 Filtrar y tomar una alícuota de 10 ml de la muestra, depositarla en matraz volumétrico de 50 ml. Ajustar el ph a 5 con Hidróxido de amonio 0. 5N con 0.5 ml es suficiente. No mezclar. Añada agua destilada aproximadamente 25 ml y mezcle. Adicione 10 ml del reactivo B, afore con agua destilada y mezcle, deje reposar por 30 minutos. Pasado el tiempo leer en el Espectrofotómetro a 820 nm. Se realiza un blanco utilizando la solución extractora y se le agrega lo mismo que la muestra CALCULOS Donde Abs= absorbancia de la muestra V= volumen de la solución extraída en ml 100= para llevar la expresión a 100g de suelo 2.29= Factor gravimétrico para expresar los resultados como P 2 O 5 M= pendiente de la recta (absorbancia/ concentración) P= peso de la muestra en gramos A= alícuota tomada para desarrollar el color Reporte de resultados Reportar la concentración de fósforo en suelo en mg100g -1 de suelo y comparar los resultados con los reportados por otros autores que reporten este parámetro en diversos tipos de suelo.
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